急性缺血性卒中患者静脉溶栓后血清微小RNA-874-3p、微小RNA-181a-5p及Wnt/β-catenin信号通路与神经功能预后的关系

目的探讨急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者静脉溶栓后血清微小RNA(microRNA,miRNA)-874-3p(miR-874-3p)、miRNA-181a-5p(miR-181a-5p)与Wnt/β-catenin信号通路和神经功能预后的关系。方法前瞻性连续纳入2021年3月—2022年12月深圳市龙华区中心医院接受静脉溶栓治疗的AIS患者进入AIS组,选取同期体检健康者进入对照组。检测并比较两组血清miR-874-3p、miR-181a-5p及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中Wnt/β-catenin相对表达水平,采用Pearson相关性分析AIS患者血清miR-874-3p、miR-181a-5p表达与Wnt/β-catenin信号通路的相关性。所有AIS患者出院后均随访3个月,根据mRS评分将完成随访的患者分为神经功能预后良好组和神经功能预后不良组,比较两组患者血清miR-874-3p、miR-181a-5p相对表达水平。采用多因素logistic回归方程分析AIS患者神经功能预后的影响因素。结果本研究中,AI S组纳入185例患者,平均(62.8±7.3)岁;对照组纳入65例体检健康者,平均(63.4±6.9)岁。与对照组相比,AIS组血清miR-874-3p(1.02±0.21 vs.1.46±0.23,P<0.001)相对表达水平及PBMC中Wnt mRNA(2.41±0.64 vs.4.59±1.13,P<0.001)、β-catenin mRNA(1.19±0.18 vs.2.34±0.73,P<0.001)相对表达水平均低于对照组,血清miR-181a-5p(1.95±0.32 vs.1.27±0.27,P<0.001)相对表达水平高于对照组;Pearson相关性分析显示,AIS患者血清miR-874-3p表达与PBMC中Wnt mRNA(r=0.562,P<0.001)、β-catenin mRNA(r=0.611,P<0.001)表达呈正相关,miR-181a-5p表达与PBMC中Wnt mRNA(r=-0.586,P<0.001)、β-catenin mRNA(r=-0.595,P<0.001)表达呈负相关。AIS组中,神经功能预后良好104例,预后不良81例,预后不良率为43.78%;神经功能预后不良组血清miR-874-3p相对表达水平显著低于神经功能预后良好组(0.79±0.20 vs.1.20±0.22,P<0.001),miR-181a-5p相对表达水平显著高于神经功能预后良好组(2.26±0.31 vs.1.71±0.24,P<0.001);神经功能预后不良组年龄([65.48±7.45)岁vs.(62.29±7.21)岁,P=0.004]、发病至入院时间([4.36±1.03)h vs.(3.79±1.15)h,P=0.001]、入院时NIHSS评分([6.81±2.45)分vs.(4.67±1.76)分,P<0.001]及Hcy水平([13.34±4.12)μmol/L vs.(11.75±3.46)μmol/L,P=0.005]均高于神经功能预后良好组;多因素logistic回归结果显示,年龄偏高(OR 1.056,95%CI 1.005~1.108,P=0.029)、发病至入院时间延长(OR 1.125,95%CI 1.008~1.256,P=0.035)、入院时NIHSS评分高(OR 1.220,95%CI 1.093~1.362,P<0.001)、miR-874-3p低表达(OR 0.632,95%CI 0.498~0.803,P<0.001)及miR-181a-5p高表达(OR 1.506,95%CI 1.209~1.875,P<0.001)是导致AIS神经功能预后不良的危险因素。结论AIS组患者血清miR-874-3p表达下降,miR-181a-5p表达升高,均与Wnt/β-catenin信号通路相关,血清miR-874-3p、miR-181a-5p水平是患者神经功能预后的影响因素。

妊娠期糖尿病患者血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p水平表达对妊娠结局预测价值研究

目的 探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清长链非编码核糖核酸分化拮抗非蛋白编码RNA (long noncoding RNA differentiation antagonizing nonprotein coding RNA,LncRNA DANCR)、微小RNA-33a-5p (miR-33a-5p)水平表达对妊娠结局的预测价值。方法 选取2021年8月~2023年2月于衡水市第四人民医院产检和分娩的154例GDM患者为GDM组,并根据妊娠结局分为良好结局组(n=115)和不良结局组(n=39);同期收集24周葡萄糖耐量试验正常的149例健康孕产妇作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p水平;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p预测GDM患者不良妊娠结局的价值;采用Pearson相关性分析GDM不良妊娠结局患者血清LncRNA DANCR,miR-33a-5p与空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、稳态模式评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性;Logistic回归分析GDM患者不良妊娠结局的影响因素。结果 GDM组血清LncRNA DANCR水平(0.69±0.15)显著低于对照组(1.01±0.22),miR-33a-5p (1.59±0.40)及不良妊娠结局总发生率(25.34%)显著高于对照组(1.02±0.23,5.36%),差异具有统计学意义(t/χ^(2)=14.835,15.140,23.011,均P<0.05)。不良妊娠结局组血清LncRNADANCR水平(0.50±0.14)显著低于良好结局组(0.75±0.18),miR-33a-5p (2.00±0.58),FBG (8.97±0.66mmol/L),FINS (18.63±1.31pmol/ml)和HOMAIR (7.42±0.98)显著高于良好结局组(1.45±0.26,8.01±0.59mmol/L,14.32±1.29pmol/ml,5.10±0.86),差异具有统计学意义(t=7.895~17.961,均P<0.05)。LncRNA DANCR,miR-33a-5p单独及二者联合预测GDM患者不良妊娠结局的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.820,0.819和0.897。GDM不良妊娠结局患者血清LncRNA DANCR与FBG,FINS,HOMA-IR呈负相关(r=-0.498,-0.513,-0.509,均P<0.05),miR-33a-5p与FBG,FINS,HOMA-IR呈正相关(r=0.517,0.494,0.507,均P<0.05)。LncRNA DANCR是影响GDM患者不良妊娠结局的保护因素(OR=0.804,95%CI:0.693~0.933,P=0.004),miR-33a-5p是影响GDM患者不良妊娠结局的危险因素(OR=2.747,95%CI:1.444~5.225,P=0.002)。结论 GDM不良妊娠结局患者LncRNADANCR降低,miR-33a-5p升高,二者均是不良妊娠结局的影响因素。

长链非编码RNA DLEU2通过miR-30a-5p/CD61对人结肠癌SW1116细胞生长和增殖的影响

目的探讨长链非编码核糖核酸淋巴细胞白血病缺失基因2(LncRNA DLEU2)通过靶向微小核糖核酸(miR)-30a-5p/整合素β3(CD61)对人结肠癌SW1116细胞生长和增殖的影响。方法取人结肠癌细胞株SW1116培养并随机分为si-NC组、si-LncRNA DLEU2组、模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-30a-5p mimics组、miR-30a-5p抑制剂阴性对照(NC inhibitor)+si-LncRNA DLEU2组及miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组,同时设置未转染细胞为空白组;转染48 h后,采用荧光显微镜检测细胞转染效率,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测细胞LncRNA DLEU2和miR-30a-5p表达、CD61、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、c-Myc mRNA和蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR检测LncRNA DLEU2与miR-30a-5p的靶向关系、miR-30a-5p与CD61的靶向关系;制作雄性胸腺BALB/c裸鼠异种移植瘤模型评估LncRNA DLEU2对肿瘤生长的影响。结果si-NC组、si-LncRNA DLEU2组、miR-NC组、miR-30a-5p mimics组、NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组、miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组转染效率均>85%;与空白组及si-NC组比较,si-LncRNA DLEU2组、NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组增殖抑制率上升(P<0.05),DLEU2表达下降(P<0.05),miR-30a-5p表达增加(P<0.05),CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达减少(P<0.05);与NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组比较,miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组细胞增殖抑制率下降(P<0.05),miR-30a-5p表达下降,CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达上升(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-30a-5p mimics组miR-30a-5p表达、增殖抑制率增加(P<0.05),CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达下降(P<0.05);LncRNA DLEU2可直接靶向调控miR-30a-5p、miR-30a-5p可直接靶向调控CD61,抑制LncRNA DLEU2表达可降低BALB/c裸鼠移植瘤生长(P<0.05)。结论沉默LncRNA DLEU2可抑制人结肠癌细胞株SW1116生长和增殖,其机制可能与靶向miR-30a-5p抑制CD61表达,抑制CyclinD1、c-Myc表达相关。

miR-203a-3p对食管癌细胞侵袭迁移能力的影响及其与Survivin的靶向调控关系

目的观察微小RNA(miR)-203a-3p对食管癌细胞侵袭、迁移能力的影响并分析其与Survivin的靶向调控关系。方法收集对数生长期的食管癌细胞TE-1及正常食管黏膜上皮细胞HEEC,RT-qPCR法检测细胞miR-203a-3p、Survivin mRNA。双荧光素酶报告基因检测法分析miR-203a-3p与Survivin的靶向调控关系。将TE-1细胞分为对照组、miR-203a-3p模拟组、miR-203a-3p抑制组及阴性对照组。miR-203a-3p模拟组转染miR-203a-3p mimic,miR-203a-3p抑制组转染miR-203a-3p inhibitor,阴性对照组转染miR-203a-3p NC,对照组不进行转染,RT-qPCR法验证转染效率。采用MTT法检测转染后2、12、24、36、48 h的细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果食管癌细胞中miR-203a-3p mRNA表达低于正常食管黏膜上皮细胞,Survivin mRNA表达高于正常食管黏膜上皮细胞(P均<0.05)。TargetScan数据库分析显示,Survivin基因在3′UTR端存在7个连续的可以与miR-203a-3p互补的核苷酸序列;双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染Survivin-WT和miR-203a-3p mimic质粒的TE-1细胞荧光素酶活性低于其他细胞(P<0.05)。培养12、24、36、48 h时细胞活力miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05);细胞迁移距离及侵袭细胞数miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05)。结论miR-203a-3p高表达可抑制食管癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与靶向负调控Survivin有关。

外周血miR-27a、miR-146a-5p水平与妊娠期糖尿病患者妊娠结局的关系

目的探究外周血微小核糖核酸-27a(miR-27a)、微小核糖核酸-146a-5p(miR-146a-5p)水平与妊娠期糖尿病(GDM)患者妊娠结局的相关性。方法回顾性选取2020年1月至2022年12月郑州大学第二附属医院妇产科接收的60例GDM患者当作研究对象,依照妊娠结局划分成不良组(n=29)、良好组(n=31),对两组临床资料行单因素分析与logistics多因素回归分析,采用Spearman相关性分析法分析外周血miR-27a、miR-146a-5p水平与妊娠结局的相关性,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-27a、miR-146a-5p对GDM患者妊娠结局的预测价值。结果两组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、miR-27a、miR-146a-5p比较差异有统计学意义(P<0.05);logistics多因素回归分析结果显示,miR-27a、miR-146a-5p为GDM患者发生不良妊娠结局的危险因素(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,外周血miR-27a水平与不良妊娠结局发生呈正相关,外周血miR-146a-5p水平与不良妊娠结局发生呈负相关(P<0.05);ROC曲线显示,miR-27a、miR-146a-5p预测GDM患者妊娠结局的曲线下面积(AUC)为0.915、0.902,联合预测的AUC最大,为0.979。结论外周血miR-27a、miR-146a-5p水平与不良妊娠结局发生有关,且联合检测对妊娠结局具有较高预测价值,有助于GDM患者妊娠结局的早期判断。

血清miR-33a-5p、SMAD7水平与视网膜静脉阻塞患者视力预后的关系

目的观察视网膜静脉阻塞患者血清微小核糖核酸-33a-5p(miR-33a-5p)、SMAD同源物7(SMAD7)水平变化,并探讨二者与视力预后的关系。方法选择视网膜静脉阻塞患者108例(观察组),同期体检健康的志愿者108例(对照组),采集所有研究对象清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-33a-5p,采用ELISA法检测血清SMAD7。比较两组血清miR-33a-5p、SMAD7水平,分析视网膜静脉阻塞患者血清miR-33a-5p、SMAD7水平的关系。所有视网膜静脉阻塞患者予雷珠单抗玻璃体腔内注射治疗。治疗3个月,评估视力,其中预后不良57例、预后良好51例。采用多因素Logistic回归模型分析视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-33a-5p、SMAD7水平对视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的预测价值。结果观察组血清miR-33a-5p水平低于对照组,血清SMAD7水平高于对照组(t分别为13.362、38.657,P均<0.01)。Pearson相关分析显示,视网膜静脉阻塞患者血清miR-33a-5p水平与血清SMAD7水平呈负相关(r=-0.649,P<0.05)。单因素分析显示,视网膜静脉阻塞患者视力预后不良者合并高血压、高血脂比例和有并发症比例以及血清SMAD7水平均高于其预后良好者(χ^(2)/t分别为13.412、7.342、10.095、6.394,P均<0.05),血清miR-33a-5p水平低于其预后良好者(t=7.373,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-33a-5p水平降低、血清SMAD7水平升高和合并高血压、高血脂以及有并发症是视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的独立危险因素(OR分别为0.683、3.843、2.146、1.463、2.773,P均<0.05)。血清miR-33a-5p、SMAD7水平预测视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.870、0.869,二者联合预测视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的AUC为0.938。血清miR-33a-5p、SMAD7水平联合预测视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的AUC高于二者单独(Z分别为2.419、2.422,P均<0.05)。结论视网膜静脉阻塞患者血清miR-33a-5p水平降低、血清SMAD7水平升高;血清miR-33a-5p水平降低、血清SMAD7水平升高是视网膜静脉阻塞患者视力预后不良的独立危险因素;血清miR-33a-5p、SMAD7水平对视网膜静脉阻塞患者视力预后不良均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。

结直肠癌组织中METTL3、miR-23a-3p表达与病理参数及术后肝转移的关系

目的探讨结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中甲基转移样酶3(Methyltransferase-like protein 3,METTL3)、微小核糖核酸-23a-3p(miRNA-23a-3p,miR-23a-3p)表达与病理参数及CRC术后肝转移的关系。方法选取2018年3月至2021年6月中国医科大学附属盛京医院收治的145例CRC患者,患者均进行CRC根治术,术中取患者CRC组织及癌旁组织样本,采用荧光定量聚合酶链反应法检测METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平,分析不同病理参数的CRC组织METTL3 mRNA、miR-23a-3p表达情况。收集患者临床病理资料,采用Cox比例风险模型对预后因素进行单变量和多变量分析。术后随访2年,统计患者术后肝转移发生情况,并采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p对CRC术后肝转移的预测价值。结果CRC组织中METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平均高于癌旁组织(P<0.05);国际抗癌联盟肿瘤通用分期(Tumor node metastasis,TNM)Ⅲ期CRC患者METTL3 mRNA水平高于Ⅱ期,低分化CRC患者METTL3 mRNA水平高于中-高分化(P<0.05);TNMⅢ期CRC患者miR-23a-3p水平高于Ⅱ期,发生淋巴转移CRC患者METTL3 mRNA水平高于未发生淋巴转移CRC患者(P<0.05);单因素及多因素Cox分析显示,TNM分期Ⅲ期、低分化、淋巴转移、METTL3 mRNA及miR-23a-3p高水平是CRC术后肝转移的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p单独及联合预测CRC术后肝转移的曲线下面积(Area under the curve,AUC)分别为0.748(0.669~0.816)、0.778(0.701~0.842)、0.882(0.818~0.930),二者联合检测预测CRC术后肝转移的效能高于单独检测(Z=2.387、2.027,P均<0.05)。结论CRC组织中METTL3、miR-23a-3p表达均异常升高,METTL3与TNM分期、分化程度相关,miR-23a-3p与TNM分期、淋巴转移相关,METTL3、miR-23a-3p联合对预测CRC术后肝转移具有更高价值。

慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p、THBS2水平与心肺功能的相关性研究

目的探讨慢性肺源性心脏病患儿血清微小核糖核酸-29a-3p(miR-29a-3p)、血小板反应蛋白2(THBS2)水平与心肺功能的关系。方法纳入2019年7月至2023年9月期间石家庄市中医院收治的136例慢性肺源性心脏病患儿作为研究对象,依据患儿临床体征、心肺功能、症状等分为代偿期组(74例)和失代偿期组(62例)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清miR-29a-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清THBS2水平,采用超声诊断仪检测心功能指标左心室射血分数(LVEF)、心排血量(CO),采用电化学发光分析法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI),采用肺功能仪检测肺功能指标肺动脉收缩压(PASP)、平均肺动脉压(MPAP)、肺动脉舒张压(PADP)。采用Pearson相关性分析慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p、THBS2水平与心肺功能指标的相关性,多因素Logistic回归分析筛选慢性肺源性心脏病患儿病情的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-29a-3p、THBS2水平对慢性肺源性心脏病患儿病情的评估价值。结果失代偿期组患儿THBS2、CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP高于代偿期组(P<0.05),miR-29a-3p、LVEF、CO低于代偿期组(P<0.05)。慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p与LVEF、CO呈正相关(P<0.05),与CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP呈负相关(P<0.05);THBS2与LVEF、CO呈负相关(P<0.05),与CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP呈正相关(P<0.05)。miR-29a-3p是慢性肺源性心脏病患儿病情加重的保护因素(P<0.05),THBS2是慢性肺源性心脏病患儿病情加重的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-29a-3p、THBS2水平单独及联合评估慢性肺源性心脏病患儿病情程度的曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.817、0.915。结论血清miR-29a-3p、THBS2水平均是慢性肺源性心脏病患儿病情的影响因素,与慢性肺源性心脏病患儿病情和心肺功能密切相关。

乙型肝炎病毒相关性肝细胞肝癌患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达及临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞肝癌(HCC)患者血清微小核糖核酸(miR)-125a-5p、miR-127-3p表达及临床意义。方法选取2018年1月至2020年10月该院收治的90例HBV相关性HCC患者作为HBV相关性HCC组。另选取同期该院的90例体检健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达。分析miR-125a-5p、miR-127-3p表达与HBV相关性HCC患者病理特征的关系。根据HBV相关性HCC患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达的平均值分为高、低表达组,通过Kaplan-Meier法绘制各组不同的生存曲线。通过Cox回归分析影响HBV相关性HCC患者预后的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达对HBV相关性HCC患者死亡的预测价值。结果HBV相关性HCC组血清miR-125a-5p、miR-127-3p相对表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤最大径、分化程度、脉管侵犯、TNM分期、淋巴结转移的HBV相关性HCC患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-125a-5p高表达组3年总生存率(64.58%)高于miR-125a-5p低表达组(38.10%),miR-127-3p高表达组3年总生存率(66.00%)高于miR-127-3p低表达组(35.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.770、9.507,P=0.005、0.002)。HBV相关性HCC患者死亡的独立危险因素为肿瘤最大径≥5 cm、低分化、有脉管侵犯、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移,其独立保护因素为miR-125a-5p、miR-127-3p升高。ROC曲线分析结果显示,血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达联合预测的曲线下面积(AUC)为0.907,高于血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达单独预测的AUC(0.790、0.787),差异有统计学意义(Z=2.691、3.152,P=0.007、0.002)。结论HBV相关性HCC患者血清miR-125a-5p、miR-127-3p低表达,与肿瘤最大径、分化程度、脉管侵犯、TNM分期和预后有关,血清miR-125a-5p、miR-127-3p表达联合对HBV相关性HCC患者预后有较高的预测价值。

口腔鳞状细胞癌组织中LncRNA CASC9、miR-125a-3p表达变化及临床意义

目的探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中长链非编码核糖核酸(LncRNA)癌症易感性候选基因9(CASC9)、微小核糖核酸-125a-3p(miR-125a-3p)的表达变化及临床意义。方法选取OSCC患者80例,术中收集OSCC组织及对应癌旁组织,实时荧光定量PCR法检测组织中LncRNA CASC9、miR-125a-3p。用Pearson相关法分析OSCC组织中LncRNA CASC9与miR-125a-3p表达的相关性,并分析LncRNA CASC9、miR-125a-3p表达与OSCC患者临床病理参数的关系。术后随访3年,比较LncRNA CASC9、miR-125a-3p高/低表达者总生存率;Cox回归模型分析LncRNA CASC9、miR-125a-3p对OSCC患者预后的影响。结果与癌旁组织比较,OSCC组织中LncRNA CASC9表达高,miR-125a-3p表达低(P均<0.05)。Pearson相关法分析显示,OSCC组织中LncRNA CASC9与miR-125a-3p表达呈负相关(r=-0.754,P<0.05)。不同分化程度、TNM分期及是否有淋巴结转移的OSCC组织中LncRNA CASC9、miR-125a-3p表达比较差异有统计学意义(P均<0.05)。随访3年,患者死亡24例,总生存率为70.00%(56/80)。LncRNA CASC9高表达者(≥1.20,42例)3年总生存率59.52%(25/42)低于LncRNA CASC9低表达者(<1.20,38例)81.58%(31/38),miR-125a-3p高表达者(≥1.04,39例)3年总生存率79.49%(31/39)高于miR-125a-3p低表达者(<1.04,41例)60.98%(25/41),比较差异有统计学意义(P均<0.05)。低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移和LncRNA CASC9≥1.20为OSCC患者预后的独立危险因素(P均<0.05),miR-125a-3p≥1.04为OSCC患者预后的独立保护因素(P<0.05)。结论LncRNA CASC9高表达、miR-125a-3p低表达与OSCC患者组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关。

血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量对癫痫持续状态患者预后不良的预测效能

目的观察癫痫持续状态(SE)患者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p表达变化,分析血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量对SE患者预后不良的预测效能。方法SE患者100例(SE组)、同期体检健康者68例(对照组),采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测受检者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p,通过starBase数据库预测LncRNA-ZFAS1与miR-15a-5p的结合位点。收集SE患者性别、年龄、病程、发作类型、基础疾病、院内并发症、脑组织异常、脑脊液异常、脑电图异常、伴发热、既往癫痫发作史≥2次、癫痫持续时间、机械通气、癫痫持续状态严重程度评分(STESS)、重症监护室时间、住院时间和治疗药物种类等一般资料,并根据格拉斯哥预后量表将SE患者分为不良预后组31例和良好预后组69例,比较不良预后组、良好预后组患者的一般资料及血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量。以SE患者预后不良为因变量,以单因素分析中有统计学差异的变量为自变量,采用多因素Logistic回归分析法分析SE患者预后不良的危险因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量及二者联合对SE患者预后不良的预测效能。结果SE组受检者血清LncRNA-ZFAS1相对表达量高于对照组,miR-15a-5p相对表达量低于对照组(P均<0.05)。SE患者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量呈负相关关系(r=-0.742,P<0.001)。LncRNA-ZFAS1与miR-15a-5p的3'非翻译端存在互补序列。不良预后组惊厥性、癫痫持续时间≥1 h、机械通气比例、STESS评分、血清LncRNA-ZFAS1相对表达量高于良好预后组,血清miR-15a-5p相对表达量低于良好预后组(P均<0.05)。惊厥性SE、癫痫持续时间≥1 h、机械通气、STESS评分增加和血清LncRNA-ZFAS1相对表达量升高为SE患者不良预后的独立危险因素,血清miR-15a-5p相对表达量升高为独立保护因素(P均<0.05)。血清LncRNA-ZFAS1预测SE患者不良预后的AUC为0.786,敏感度为67.74%、特异度为75.36%;血清miR-15a-5p预测SE患者不良预后的AUC为0.781,敏感度为90.32%、特异度为53.62%;血清LncRNA-ZFAS1联合miR-15a-5p预测SE患者不良预后的AUC为0.879,敏感度为87.10%、特异度为73.91%。结论SE患者血清LncRNA-ZFAS1高表达、miR-15a-5p低表达,呈负相关关系。血清LncRNA-ZFAS1相对表达量升高为SE患者不良预后的独立危险因素,血清miR-15a-5p相对表达量升高为独立保护因素。检测血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p可用于SE患者预后不良的预测,且二者联合预测效能更高。

胃癌组织miR-23a-3p、miR-361-5p表达与PI3K/AKT/mTOR信号通路和预后的关系研究

目的探讨胃癌组织微小核糖核酸(miR)-23a-3p、miR-361-5p表达与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测120例胃癌患者胃癌组织与癌旁组织中miR-23a-3p、miR-361-5p、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达。Pearson相关分析胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达与PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达的相关性,以及分析miR-23a-3p、miR-361-5p表达与胃癌患者临床病理特征的关系。Kaplan-Meier生存分析胃癌组织中不同miR-23a-3p、miR-361-5p表达与胃癌患者生存预后的关系。单因素及多因素COX回归分析影响胃癌患者生存预后因素。结果相比于癌旁组织,胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达明显较低,而PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达明显较高,差异有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达与PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达呈负相关(均P<0.05)。不同肿瘤TNM分期、肿瘤分化程度、术后辅助化疗及淋巴结转移的胃癌患者胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。miR-23a-3p低表达胃癌患者3年总体生存率为46.77%(29/62),低于miR-23a-3p高表达胃癌患者3年总体生存率[81.03%(47/58)],差异有统计学意义(Log-Rankχ^(2)=30.243,P<0.001)。miR-361-5p低表达胃癌患者3年总体生存率为50.79%(32/63),低于miR-361-5p高表达胃癌患者3年总体生存率[77.19%(44/57)],差异有统计学意义(Log-Rankχ^(2)=24.932,P<0.001)。单因素及多因素Cox回归分析结果显示,TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、无术后辅助化疗、miR-23a-3p低表达、miR-361-5p低表达是影响胃癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论胃癌患者胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达降低,二者表达与PI3K/AKT/mTOR信号通路有关,是潜在的胃癌预后相关的肿瘤标志物。

急性脑梗死患者血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平及其临床意义

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小核糖核酸-106a-5p(miR-106a-5p)、神经损伤诱导蛋白1(NINJ1)、冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的水平及其临床意义。方法选择2022年1月至2023年6月该院神经内科收治的151例ACI患者作为ACI组,另选择同期65例体检健康者作为对照组,根据静脉溶栓后90 d预后情况将ACI患者分为预后不良组和预后良好组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-106a-5p水平,通过酶联免疫吸附试验检测NINJ1、CIRP水平。采用多因素Logistic回归分析影响ACI患者预后的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平对ACI患者预后的预测价值。结果与对照组比较,ACI组血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访90 d,151例ACI患者预后不良发生率为35.10%。与预后良好组比较,预后不良组年龄明显增大,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。年龄增加、NIHSS评分升高和血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平升高均为ACI患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平联合检测预测ACI患者预后不良的曲线下面积为0.937,大于血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平单独检测预测的0.777、0.773、0.778(P<0.05)。结论ACI患者血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平升高是预后不良的独立危险因素,血清miR-106a-5p、NINJ1、CIRP水平联合检测对ACI患者预后不良有较高的预测价值。

高血压并发冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清miR-27a-3p和HOXC6水平表达与冠状动脉病变的相关性研究

目的探讨高血压并发冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清微小核糖核酸-27a-3p(miR-27a-3p)和同源异型盒C6(homeobox C6,HOXC6)水平表达与冠状动脉病变的相关性,为高血压并发冠心病的防治提供一定参考。方法选取北大荒集团总医院2021年6月~2023年6月接诊的246例高血压患者为研究对象,其中129例高血压并发冠心病患者作为并发组,117例单纯高血压患者作为未并发组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real timePCR,qRT-PCR)检测血清miR-27a-3p和HOXC6表达水平;运用Spearman法分析高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p和HOXC6水平与冠状动脉病变的相关性;多因素Logistic回归分析高血压并发冠心病的影响因素;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-27a-3p,HOXC6水平对高血压并发冠心病的预测价值。结果并发组高血压病程(6.69±1.35年)、总胆固醇(total cholesterol,TC)(5.96±0.86mmol/L)、低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)(3.36±0.51mmol/L)均显著高于未并发组(5.87±1.32年,5.42±0.67mmol/L,2.98±0.48mmol/L),并发组血清miR-27a-3p(1.35±0.34),HOXC6(1.29±0.33)水平均显著高于未并发组(1.06±0.23,1.03±0.25),差异具有统计学意义(t=4.808,5.454,6.001,7.755,6.911,均P<0.05);轻度组、中度组、重度组患者血清miR-27a-3p(0.54±0.13,1.19±0.31,2.18±0.55)和HOXC6(0.47±0.12,1.12±0.31,2.13±0.52)表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=191.026,191.026,均P<0.05)。高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p,HOXC6与SYNTAX评分具呈正相关性(r=0.563,0.517,均P<0.05);血清miR-27a-3p[OR(95%CI:1.627(1.177~2.248)]、HOXC6[OR(95%CI):1.715(1.069~2.750)]是影响高血压并发冠心病的独立危险因素(P<0.05);血清miR-27a-3p和HOXC6联合预测高血压并发冠心病的AUC为0.896(95%CI:0.851~0.931),优于各自单独诊断(Z=2.133,2.815,均P<0.05)。结论高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p,HOXC6水平均显著升高,且与冠状动脉病变密切相关,二者联合对高血压并发冠心病具有较高的预测价值。

微小核糖核酸-371a-5p靶向调控X相关凋亡抑制蛋白在滋养层细胞凋亡和复发性流产中的作用分析

目的探讨微小核糖核酸-371a-5p(miR-371a-5p)靶向调控X相关凋亡抑制蛋白(XIAP)在滋养层细胞凋亡、复发性流产中的作用。方法滋养层JEG-3细胞经过细胞培养、转染后,分为空白组(Control)、阴性对照组(ND)、miR-371a-5p mimics组及miR-371a-5p inhibitor组。实时荧光定量PCR检测miR-371a-5的表达观察滋养层细胞凋亡能力,免疫印迹(Western blot)检测XIAP、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-3)表达,采用实时荧定量PCR检测XIAP、caspase-3基因。结果Control组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.50±0.09),NC组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.44±0.05),miR-371a-5p mimics组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.23±0.08),miR-371a-5p inhibitor组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.86±0.05),miR-371a-5p mimics组表达低于Control、NC、miR-371a-5pinhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组表达高于Control、NC、miR-371a-5p mimics组(F=31.759,P<0.05)。Control组转染48 h后细胞凋亡率为(1.74±0.04)%,NC组转染48 h后细胞凋亡率为(1.76±0.06)%,miR-371a-5p mimics组转染48 h后细胞凋亡率为(3.51±0.09)%,miR-371a-5p inhibitor组转染48 h后细胞凋亡率为(1.33±0.16)%,滋养层细胞转染48 h后miR-371a-5p mimics组细胞凋亡率高于NC、Control及miR-371a-5p inhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组低于NC、Control及miR-371a-5p mimics组(F=47.027,P<0.05)。miR-371a-5p mimics组XIAP相对表达量低于NC、Control及miR-371a-5p inhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组XIAP相对表达量高于miR-371a-5p mimics、NC及Control组(F=33.541,P<0.05)。miR-371a-5p mimics组caspase-3相对表达量低于NC、Control及miR-371a-5p inhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组caspase-3相对表达量高于miR-371a-5p mimics、NC及Control组(F=43.728,P<0.05)。结论miR-371a-5p靶向调控XIAP参与滋养层细胞凋亡的过程,在复发性流产起到重要作用。

sPE患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达变化及与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系

目的观察重度子痫前期(sPE)患者血清微小核糖核酸-199a-5p(miR-199a-5p)、微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)表达变化,并分析其与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系,为围产儿结局的改善提供参考。方法选取sPE患者200例(观察组)和产检健康孕妇200例(对照组),采用RT-PCR法测算两组血清miR-199a-5p、miR-142-3p,酶联免疫吸附试验检测两组血清可溶性细胞内皮因子(sEng)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF),Pearson相关分析法分析观察组血清miR-199a-5p、miR-142-3p与血管内皮功能相关指标的相关性。根据围产儿结局将观察组分为结局不良组(29例)和结局良好组(171例),采用单因素分析法及多因素Logistic回归分析法分析患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达与围产儿结局的关系。结果与对照组比较,观察组血清miR-199a-5p表达及VEGF水平降低,血清miR-142-3p表达及sEng、sFlt-1、ET-1水平升高(P均<0.05)。观察组血清miR-199a-5p表达与sEng、sFlt-1、ET-1水平呈负相关,与VEGF水平呈正相关(P均<0.05);血清miR-142-3p表达与sEng、sFlt-1、ET-1水平呈正相关,与VEGF水平呈负相关(P均<0.05)。结局不良组和结局良好组年龄、早发型sPE比例、并发水肿比例、并发子痫比例、并发胎盘早剥比例、并发产后出血比例、血清miR-142-3p表达变化、血清miR-199a-5p表达变化比较,P均<0.05;多因素Logistic回归分析显示,早发型sPE、胎盘早剥、miR-142-3p高表达是sPE围产儿结局不良的危险因素(P均<0.05),miR-199a-5p高表达是sPE围产儿结局不良的保护因素(P<0.05)。结论sPE患者血清miR-199a-5p表达降低、miR-142-3p表达升高,与血管内皮损伤有关,miR-142-3p高表达是sPE围产儿结局不良的危险因素,miR-199a-5p高表达是sPE围产儿结局不良的保护因素。

孕妇早期血清miR-29a-3p和VEGFA表达水平及其对子痫前期预测价值研究

目的研究微小核糖核酸(micro RNA,miR)-29a-3p和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在子痫前期患者血清中的表达及意义。方法前瞻性选取2018年1月~2021年1月在石家庄市妇幼保健院行产检的600例孕妇为研究对象,对孕妇随访至分娩结束,根据孕妇是否患子痫前期,分为子痫前期组(n=60)和非子痫前期组(n=540)。实时荧光定量PCR法检测在孕10~14周入院产检时血清中miR-29a-3p的水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清VEGFA水平;采用Pearson法分析miR-29a-3p水平与VEGFA的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-29a-3p和VEGFA以及二者联合检测预测子痫前期的价值。结果子痫前期组miR-29a-3p(2.05±0.54)水平高于非子痫前期组(1.04±0.29),VEGFA水平(34.38±9.25 ng/L)低于非子痫前期组(69.49±19.57 ng/L),差异具有统计学意义(t=22.951,13.824,均P<0.05)。重度组血清中VEGFA水平(24.05±6.41 ng/L)显著低于轻度组(38.81±10.47 ng/L),miR-29a-3p(2.45±0.61)水平显著高于轻度组(1.88±0.51),差异均有统计学意义(t=5.537,3.738,均P<0.05)。Pearson分析显示,子痫前期患者血清中miR-29a-3p与VEGFA呈负相关(r=-0.601,P<0.05)。ROC曲线显示,血清中miR-29a-3p和VEGFA水平预测子痫前期的曲线下面积(AUC)分别为0.904,0.882;两者联合预测子痫前期的AUC为0.937,其灵敏度和特异度分别为80.00%,95.20%。结论子痫前期患者血清中miR-29a-3p表达上升,而VEGFA表达下降,血清miR-29a-3p和VEGFA对子痫前期具有一定的预测价值。

基于NIHSS评分分析ACI患者YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p表达意义及与预后关系

目的 探讨基于NIHSS评分分析急性脑梗死(ACI)患者几丁质酶样蛋白-40(YKL-40)、脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)和微小核糖核酸-151a-3p(miR-151a-3p)表达意义及与预后关系。方法 选取2020年12月至2021年12月我院收治的102例ACI患者为研究组,另选同期50例健康体检者为对照组,分别对2组进行YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p检测。分析2组YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p表达水平;研究组患者根据NIHSS评分分为轻度、中度、重度3组并对比3组YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p表达水平;分析ACI患者YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p与NIHSS评分相关性及影响预后因素。结果 与对照组比较,研究组患者YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p表达水平较高(P<0.001);随着NIHSS评分增高,ACI患者YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p表达水平逐渐升高(P<0.001);经过6个月随访,失访8例,剩余94例,预后良好74例(78.72%),预后不良20例(21.28%),与预后良好组比较,预后不良组患者的YKL-40、Lp-PLA2、miR-151a-3p表达水平较高(P<0.001);YKL-40、Lp-PLA2、miR-151a-3p是ACI患者预后不良的独立危险因素(P<0.001)。结论 YKL-40、Lp-PLA2和miR-151a-3p在ACI预后不良患者中呈高表达水平,并随NIHSS评分增高而升高,均与NIHSS评分呈正相关。

腰痛患者血清miR-133a-5p,SIRT1水平表达与功能障碍指数及疼痛评分的相关性研究

目的 探究血清微小核糖核酸(microRNA,miR)-133a-5p和沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)水平变化与腰痛(low back pain,LBP)患者疼痛和功能障碍的相关性。方法 选取2019年5月~2022年4月在上海市长宁区天山中医医院骨伤科就诊治疗的89例LBP患者为研究组,另选取同期90例体检健康志愿者为对照组。采用Oswestry腰痛功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)评估LBP患者腰痛功能障碍;采用视觉模拟疼痛评分(visual anallogue scale,VAS)评估LBP患者疼痛程度;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测血清miR-133a-5p和SIRT1表达水平;Pearson相关性检验分析血清miR-133a-5p和SIRT1表达水平与ODI指数和VAS评分的相关性;多因素Logistic回归分析LBP发生的影响因素。结果 研究组、对照组在饮酒史、体力活动强度、抑郁和焦虑方面比较差异具有统计学意义(χ^(2)=5.372,9.391,10.087,12.576,均P <0.05);与对照组比较,研究组血清miR-133a-5p(0.66±0.12 vs 1.01±0.15)和SIRT1(0.84±0.14 vs 1.12±0.18)表达水平明显降低,差异具有统计学意义(t=17.226,11.214,均P=0.000);与对照组比较,研究组ODI指数(28.86%±4.39%vs 9.86%±1.91%)和VAS评分(5.26±1.47分vs 1.34±0.21分)明显升高,差异具有统计学意义(t=37.617,25.042,均P=0.000);LBP患者血清miR-133a-5p表达水平与ODI指数和VAS评分呈显著负相关(r=-0.520,-0.416,均P <0.05);血清SIRT1表达水平与ODI指数和VAS评分呈显著负相关(r=-0.661,-0.588,均P <0.05)。Logistic回归分析结果显示,miR-133a-5p(OR=0.602,95%CI:0.464~0.788)和SIRT1(OR=0.569,95%CI:0.481~0.816)是LBP发生的保护因素(均P <0.05),饮酒(OR=1.104,95%CI:1.102~1.719)、抑郁(OR=1.328,95%CI:1.116~1.894)和高强度体力活动(OR=1.224,95%CI:1.097~1.862)是LBP发生的独立危险因素(均P <0.05)。结论 miR-133a-5p和SIRT1在LBP患者血清中表达降低,且与LBP患者疼痛程度和功能障碍具有相关性。

小儿原发性肾病综合征患者血清和尿液miR-30a-5p水平增加及临床意义

目的 检测分析原发性肾病综合征（NS）患儿血清全基因组微小核糖核酸（miRNA）表达谱,验证其中表达上调的miR-30a-5p,探讨其作为NS分子诊断指标的可能性.方法 收集南京军区南京总医院2010～2011年期间33例住院NS患儿未经治疗前血清和尿液样本,同时以30例年龄、性别匹配的健康儿童作对照.用高通量的TaqMan低密度芯片技术分别检测NS患儿和健康儿童的混合血清全基因组miRNA的表达量,再用TaqMan实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法对在患儿血清中表达上调的miR-30a-5p进行验证,同时测定miR-30a-5p在尿液中的含量.结果 低密度芯片结果显示,30种miRNA在患儿血清中的表达量是健康儿童的2倍以上,其中miR-30a-5p为正常对照的104倍.qRT-PCR检测证实,miR-30a-5p在患儿血清中的含量4.34±0.08,显著高于对照组1.00±0.02（Z=5.916,P〈0.000 1）,在患儿尿液中的水平也明显升高（3.44±0.05 vs 1.00±0.04）（Z=3.312,P=0.001）.用于诊断NS的血清miR-30a-5p ROC曲线下面积（AUCROC）为0.960（95% CI,0.915～1.000）,敏感度和特异度均为98.3%.相关性分析显示,血清或尿液中的miR-30a-5p含量与患儿年龄、性别、肾功能及血脂水平均无明显关联（P〉0.05）.结论 NS患儿血清miRNA表达谱与健康儿童有明显差异,miR-30a-5p在患儿血清及尿液中水平显著升高,与NS密切相关,是NS潜在的分子诊断指标.