微小核糖核酸-208与心血管疾病关系研究进展

微小核糖核酸是一类长21~25个核苷酸的高保守性的非编码小分子RNA,主要通过与靶基因真核mRNA的3’非翻译区结合而调控基因的表达。近年来研究发现循环血微小核糖核酸在心血管疾病中的含量会发生变化,现就心肌特异性的微小核糖核酸-208在心血管疾病的研究进展做一综述。

老年急性心肌梗死患者血清微小核糖核酸-133a、微小核糖核酸-208a表达水平与冠状动脉病变程度相关性研究

目的探讨老年急性心肌梗死(AMI)患者血清微小核糖核酸(miR)-133a、miR-208a表达水平,分析其对冠状动脉病变程度的影响。方法选取自2017年2月至2019年2月收治的120例AMI患者为AMI组,患者均存在不同程度的冠状动脉病变;选取同期收治的80例稳定型心绞痛(SAP)患者为SAP组;选取同期体检的72例健康者为健康组。采用实时荧光定量法检测3组血清miR-133a、miR-208a表达水平,并进行比较。对AMI患者行冠状动脉造影,根据Gensini评分明确AMI患者冠状动脉病变程度,并分为轻度、中度、重度,比较不同冠状动脉病变程度的AMI患者血清miR-133a、miR-208a表达水平,采用Pearson线性相关分析对AMI患者血清miR-133a、miR-208a表达水平与冠状动脉病变程度的相关性进行分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-133a、miR-208a对冠状动脉病变加重的评估价值。采用Logistic回归分析对AMI患者冠脉病变加重的危险因素进行分析。结果AMI组、SAP组的血清miR-133a、miR-208a相对表达量高于健康组,且AMI组高于SAP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度、中度病变患者血清miR-133a、miR-208a相对表达量均高于轻度病变患者,且重度病变患者高于中度病变患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson线性相关分析显示,血清miR-133a、miR-208a与AMI冠状动脉病变程度呈正相关(r=0.729、r=0.680,P<0.05)。以中度、重度患者为冠状动脉病变加重,ROC曲线显示,血清miR-133a、miR-208a及二者联合评估冠脉病变加重的ROC曲线下面积分别为0.751、0.774、0.854。Logistic回归分析结果显示,糖尿病、高血压以及血清miR-133a、miR-208a表达水平增高是AMI冠脉病变加重的危险因素(P<0.05)。结论血清miR-133a、miR-208a在AMI患者中表达明显增高,且与冠状动脉病变密切相关,二者联合检测对冠状动脉病变程度具有一定预测价值。

急性ST段抬高型心肌梗死患者血浆微小核糖核酸-208a水平对并发急性心力衰竭的预测价值

目的:探讨血清微小核糖核酸-208a(miR-208a)表达水平对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者并发急性心力衰竭的预测关系。方法:连续性收集2018年1月至2019年6月,就诊于我科的152例急性STEMI患者纳入病例组,并随机选择同期在我院行健康体检的志愿者60例为对照组。根据发病48 h内是否发生急性心力衰竭(AHF)将病例组分为AHF亚组和非AHF亚组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血浆miR-208a的相对表达水平。结果:病例组血浆miR-208a相对表达水平显著高于对照组(Z=10.919,P=0.000)。AHF亚组血浆miR-208a相对表达水平显著高于非AHF亚组(Z=9.573,P=0.000)。Pearson相关性分析结果显示,病例组患者血浆miR-208a相对表达水平与BNP、hsCRP和cTnI均呈正相关关系(r=0.612,P=0.000;r=0.447,P=0.000;r=0.378,P=0.000)。二分类Logistic回归分析结果显示血浆miR-208a相对表达水平是急性STEMI患者并发AHF的危险因素(OR=2.118,95%CI 1.127~3.982,P=0.007)。血浆miR-208a预测AHF的AUC为0.896(0.844,0.948),cut-off值为32.00,对应的敏感性和特异性分别为88.4%和83.3%。结论:急性STEMI患者血浆miR-208a表达水平显著升高,且可能是并发AHF的危险因素。

子宫颈鳞状细胞癌中超保守核糖核酸339的表达及其临床病理意义

目的分析子宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中超保守核糖核酸339(uc.339)的表达水平及其临床病理意义,探讨uc.339对宫颈癌细胞增殖的影响和相关机制。方法收集102例CSCC标本的临床特征。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测uc.339在CSCC组织中的表达水平,分析uc.339与临床病理特征的关系。通过MTT实验和克隆形成实验分析uc.339对细胞增殖的影响。采用生物信息学预测uc.339下游靶基因;采用qRT-PCR验证uc.339对靶基因微小RNA-339-5P(miR-339-5P)的影响;采用双荧光素酶报告实验验证uc.339对miR-339-5P的调控作用;采用回复实验证实uc.339对miR-339-5P调控及对宫颈癌细胞增殖的影响。结果qRT-PCR实验结果表明,CSCC组织中uc.339的表达水平高于癌旁正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05)。uc.339的表达与肿瘤大小(Pearson′s R=7.909)和病理分级(Pearson′s R=-4.859)显著相关(P<0.05),与患者年龄、人乳头瘤病毒(HPV)感染、淋巴结转移和TNM分期无相关性(P>0.05)。MTT实验提示过表达uc.339可促进宫颈癌细胞增殖,而降低uc.339表达则抑制了细胞的增殖,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞克隆形成实验表明,过表达uc.339宫颈癌细胞克隆形成数目多于Scramble对照,降低uc.339表达宫颈癌细胞克隆形成数目低于si-对照,差异均有统计学意义(P<0.05)。生物信息学预测显示miR-339-5P是uc.339的靶基因;在宫颈癌细胞中过表达uc.339后,miR-339-5P表达水平下降,而降低uc.339表达后,miR-339-5P表达水平则升高,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实uc.339与miR-339-5P特异性结合,并可负性调控miR-339-5P的表达。回复实验提示过表达miR-339-5P能消除uc.339对宫颈癌增殖的促进作用,而降低miR-339-5P的表达则能进一步激发宫颈癌细胞的增殖活性。结论CSCC中uc.339表达水平上调,可能是一个新的致癌基因。uc.339通过抑制miR-339-5P表达促进CSCC细胞的增殖。

胃癌根治性切除患者术前血清外泌体miR-193a和miR-208b水平表达及其对预后预测价值研究

目的探究胃癌(gastric cancer,GC)患者在根治性手术前血清外泌体微小核糖核酸(micro RNA,miR)-193a和微小核糖核酸(microRNA,miR)-208b水平表达及其预后预测价值。方法以新疆医科大学第一附属医院2018年3月~2020年3月收治的132例GC根治性切除术前患者为GC组,同期132例体检健康者为对照组。收集对比患者临床病理资料。血清外泌体miR-193a和miR-208b相对表达水平的检测采用实时荧光定量PCR(quantitative realtime polymerase chain reaction,qRT-PCR)法,Pearson法分析miR-193a和miR-208b的相关性。GC患者术前血清外泌体miR-193a,miR-208b表达与术后患者预后相关性采用Kaplan-Meier法分析;单因素及多因素COX回归分析患者预后的影响因素。结果GC组外泌体miR-208b表达水平较对照组明显升高(1.77±0.14 vs 1.02±0.01),miR-193a表达水平明显降低(0.52±0.06 vs 1.01±0.01),差异具有统计学意义(t=92.551,61.392,均P<0.05)。GC患者术前miR-193a与miR-208b的表达水平呈负相关(r=-0.409,P<0.05)。患者中TNM分期为I+II期、无淋巴结转移、无远处转移的miR-193a低表达比例和miR-208b高表达比例明显低于TNM分期为III+IV、有淋巴结转移、有远处转移患者,差异具有统计学意义(χ^(2)=5.008,4.397;7.142,4.688;4.407,5.189,均P<0.05)。miR-193a低表达患者三年累积生存率(30.43%)显著低于高表达(60.32%)患者(χ^(2)=17.861,P<0.001),miR-208b高表达患者三年累积生存率(27.14%)低于低表达(64.52%)患者(χ^(2)=16.340,P<0.001)。血清外泌体miR-193a(HR=0.493,95%CI:0.323~0.753)和miR-208b水平(HR=2.697,95%CI:1.382~5.262)是患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论术前血清外泌体miR-193a水平降低,miR-208b水平升高,两者表达水平与GC根治性切除术患者的预后有关。

急性冠状动脉综合征患者血清微小RNA-133a和微小RNA-208a的表达及与冠状动脉病变程度的关系

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清微小RNA(miR)-133a、miR-208a的表达水平及与冠状动脉病变程度的关系。方法选取2017年2月至2019年2月青海大学附属医院收治的ACS患者120例,冠状动脉轻度病变(SYNTAX评分≤22分)34例、中度病变(SYNTAX评分23~31分)51例、重度病变(SYNTAX评分≥32分)35例,冠状动脉造影为单支病变29例、双支病变35例、3支病变32例、多支病变24例。选取本院同期收治的稳定型心绞痛(SAP)患者60例(SAP组)和体检健康者60名(健康对照组)。比较3组研究对象的基线资料,血清miR-133a和miR-208a水平,不同冠状动脉病变严重程度和病变支数组ACS患者血清miR-133a和miR-208a水平,分析ACS患者血清miR-133a和miR-208a水平与SYNTAX评分、冠状动脉病变支数的相关性,以及血清miR-133a和miR-208a对ACS患者冠状动脉中重度病变的诊断价值。结果ACS组和SAP组血清miR-133a和miR-208a水平均高于健康对照组[(2.49±0.72)、(1.50±0.61)比(1.06±0.58),(0.64±0.15)、(0.32±0.11)比(0.21±0.16)],且ACS组均高于SAP组(均P<0.05)。随着冠状动脉病变程度的加重和冠状动脉病变支数的增加,ACS患者血清miR-133a和miR-208a水平呈逐渐升高趋势(均P<0.05)。ACS患者血清miR-133a和miR-208a与SYNTAX评分均呈正相关(r=0.637、0.702,均P<0.05),与冠状动脉病变支数均呈正相关(rs=0.653、0.691,均P<0.05)。血清miR-133a与miR-208a联合诊断ACS患者冠状动脉中重度病变的曲线下面积高于血清miR-133a和miR-208a单独检测(0.872比0.816、0.805)。结论血清miR-133a和miR-208a在ACS患者中表达上调,并与冠状动脉病变程度密切相关,早期联合检测可作为临床辅助评估ACS病情严重性的生化指标。

人类微小RNA-208a的靶基因预测及生物学过程和信号通路的生物信息学分析

目的采用生物信息学技术预测人类微小RNA-208a(hsa-miRNA-208a)靶基因及分析其可能参与的生物学过程及信号通路。方法应用miRbase数据库和UCSC Genome Browser分析工具获取hsa-miRNA-208a的染色体定位、碱基序列和物种保守性等基本信息,利用miRanda、miRDB、Target Scan和miRwalk进行靶基因预测,采用miRwalk网站对靶基因取交集,合并有文献支持和经实验证实的靶基因作为基因集,对基因集进行功能富集分析(GO分析)和信号通路分析。结果hsa-miRNA-208a序列在各物种间高度保守。对Target Scan、miRDB、miRanda和miRwalk预测的靶基因进行交集后共得到16个靶基因(CPEB2、CSNK2A2、DLD、MTF2、FBXO28、LEP、SMAD4、NLK、GPR88、VPS13D、ZNF215、CHD9、SLC7A5、C19orf44、SLC45A3、MAP4K4),miRwalk、DIANA Lab Tar Base检索到已验证的靶基因分别为12个(CASP3、MRGPRX3、FPRL1、MED13、IL10、GATA4、HSH2D、MYH6、MYH7、TNNI3、CDKN1A、PAK3)和3个(SOX6、MTM1、TAB3)。GO分析结果显示靶基因富集于心室肌组织发育、心室形态发育、心腔发育、心肌发育、心脏发育以及细胞发育等生物学过程(P<0.05);信号通路分析结果显示靶基因富集于黏附连接、紧密连接、心肌收缩、Wnt信号通路以及病毒性心肌炎、肥厚型心肌病和扩张型心肌病的相关信号通路中(P<0.05)。结论 hsa-miRNA-208a参与心脏生长发育的生物学过程,与心肌疾病的发生密切相关。

微小RNA-208a/208b在急性心肌梗死患者外周血中的变化趋势研究

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者循环血清中微小RNA-208a/208b(miR-208a/208b)在发病后7 d内的变化趋势,以及早期诊断价值。方法选择2017年7月至2018年6月期间并于发病后4 h内在河南科技大学第三附属医院(洛阳东方医院)心内科就诊的AMI患者69例,另外选取同时期在我院进行冠状动脉(冠脉)造影检查、排除冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)诊断的30例志愿者为对照组。分别于发病后4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、7 d时采集肘静脉血,采用qR T-PCR法检测血清miR-208a/208b表达水平,并检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线确定不同时间点miR-208a/208b对AMI的诊断价值。结果 AMI患者发病后4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、7 d时血清miR-208a/208b以及cTnI的水平均较对照组受试者明显升高(P<0.05),且miR-208a/208b随时间变化曲线与cTnI基本一致,具有先升高后下降的变化趋势;miR 208a/208b在发病后8h时达到高峰,而cTnI在发病后12 h时达到峰值。经ROC曲线分析,在发病后8h时,miR 208a/208b联合诊断AMI的ROC曲线下面积为0.892(95%CI:0.802~0.978),约登指数为0.65,其诊断效能高于其他时间点。结论 AMI患者血清miR-208a和miR-208b水平明显高于非冠心病对照组受试者,且在发病后8 h时达到峰值,可作为AMI的早期诊断指标。

微小RNA-208a及微小RNA-483联合NT-proBNP对维持性血液透析患者心血管事件发生的预测价值

目的探讨血清微小核糖核酸(microRNA,miR)-208a、miR-483联合氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)预测维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者心血管事件发生的价值。方法选取2016年1月至2019年12月海南西部中心医院收治的MHD患者163例,根据随访6个月期间是否发生心血管事件,分为65例心血管事件组和98例无心血管事件组。采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测两组患者血清miR-208a及miR-483浓度,采用酶联免疫吸附法测定NT-proBNP浓度。应用多因素Logistic回归分析对MHD患者心血管事件发生的危险因素进行分析。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析miR-208a、miR-483及NT-proBNP预测MHD患者心血管事件发生的价值。结果心血管事件组患者血清miR-208a(3.28±1.50 vs.1.15±0.46,P<0.001)、miR-483(2.26±1.06 vs.0.73±0.24,P<0.001)及NT-proBNP[(5682.73±290.50)pg/mL vs.(1835.40±174.36)pg/mL,P<0.001]浓度均明显高于无心血管事件组,差异有统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示,血清miR-208a(OR=2.473,95%CI:1.752~5.490)、miR-483(OR=1.962,95%CI:1.358~3.704)及NT-proBNP(OR=2.750,95%CI:1.926~6.483)浓度升高是MHD患者心血管事件发生的危险因素(P<0.05)。ROC分析结果显示,miR-208a、miR-483联合NT-proBNP预测MHD患者心血管事件发生的曲线下面积(area under the curve,AUC)最大(0.942,95%CI:0.882~0.995),其敏感度和特异度分别为97.3%和85.0%。相关分析显示,心血管事件患者血清miR-208a、miR-483浓度与NT-proBNP均呈正相关(P<0.001)。结论心血管事件患者血清miR 208a、miR-483及NT-proBNP浓度明显升高,是MHD患者心血管事件发生的危险因素,3项联合预测心血管事件发生的敏感度较高。

下调miR-208a通过靶向SFRP1介导Wnt信号通路对结直肠癌细胞5-FU耐药的改善作用

目的:探讨下调微小RNA-208a(miR-208a)对结直肠癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响,阐明其相关分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测结直肠癌5-FU耐药细胞株HT-29/5-FU及其亲本HT-29细胞中miR-208a和分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)mRNA表达水平。以HT-29/5-FU细胞为研究对象,将miR-208a抑制物(miR-208a inhibitor)质粒及其阴性对照质粒(inbibitor-NC)和SFRP1小干扰质粒(si-SFRP1)及其阴性对照质粒(si-NC)分别或同时转染至HT-29/5-FU细胞中,联合5-FU处理,将细胞分为空白组、inhibitor-NC组、miR-208a inhibitor组、miR-208a inhibitor+si-NC组和miR-208a inhibitor+si-SFRP1组。MTT法检测各组细胞增殖活性并计算耐药指数,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法结合流式细胞术检测不同浓度5-FU作用后各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中SFRP1、β-连环蛋白(β-catenin)、P-糖蛋白(P-gp)和ATP结合盒B亚家族成员1转运蛋白(ABCB1)蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-208a与SFRP1的靶向关系。结果:与HT-29细胞比较,HT-29/5-FU细胞中miR-208a表达水平升高(P<0.05),SFRP1 mRNA表达水平降低(P<0.05)。与inhibitor-NC组比较,miR-208a inhibitor组细胞增殖活性降低(P<0.05),耐药指数降低,细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中β-catenin、P-gp和ABCB1蛋白表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验提示SFRP1是miR-208a靶基因,且miR-208a可负向调控SFRP1的表达。与miR-208a inhibitor+si-NC组比较,miR-208a inhibitor+si-SFRP1组细胞增殖活性升高(P<0.05),耐药指数升高,细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞中β-catenin、P-gp和ABCB1蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:下调miR-208a可通过靶向上调SFRP1表达抑制Wnt信号通路的转导,进而改善HT-29/5-FU细胞对5-FU的耐药。

血清miR-208a、miR-17-5p表达与急性心肌梗死患者左心室重构和预后的关系

目的 分析血清微小RNA-208a(miR-208a)、miR-17-5p表达与急性心肌梗死(AMI)患者左心室重构(LVR)和预后的关系。方法 选取2021年1—8月首都医科大学附属北京安贞医院心脏内科冠心病中心收治AMI患者133例,根据随访6个月时左心室收缩末期容积(LVESV)分为LVR组51例和非LVR组82例,并根据6个月时是否发生主要不良心血管事件分为预后不良组44例和预后良好组89例。采用qPCR检测患者血清miR-208a、miR-17-5p的表达水平,超声心动图检查左心室舒张末期内径(LVEDD)、舒张末期室间隔厚度(IVST)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室质量指数(LVMI)、LVESV。Spearman相关性分析LVR组患者血清miR-208a、miR-17-5p表达与确诊时LVESV的相关性,多因素Logistic回归分析AMI患者预后不良的影响因素,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-208a、miR-17-5p表达对AMI患者预后不良的预测价值。结果 LVR组血清miR-208a、miR-17-5p表达水平高于非LVR组(t/Z=7.432、10.964,P均<0.001);LVR组LVEDD、IVST、LVPWT、LVMI、LVESV高于非LVR组(t/Z=11.774、8.611、6.416、9.676、5.336,P均<0.001)。预后不良组血清miR-208a、miR-17-5p表达高于预后良好组(t/Z=5.270、5.376,P均<0.001)。Spearman相关性分析显示,LVR组血清miR-208a、miR-17-5p表达与确诊时LVESV呈正相关(r_(s)=0.868、0.735,P均<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,年龄大、Killip分级≥Ⅲ级和血清miR-208a、miR-17-5p升高为AMI患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.058(1.005~1.114)、4.984(1.564~15.880)、1.051(1.007~1.097)、1.098(1.027~1.175)],LVEF升高为其独立保护因素[OR(95%CI)=0.932(0.892~0.975)]。ROC曲线分析显示,血清miR-208a、miR-17-5p及二者联合预测AMI患者预后不良的曲线下面积分别为0.781、0.795、0.866,二者联合预测的价值高于单项指标(Z/P=2.102/0.025、2.511/0.014)。结论 AMI患者血清miR-208a、miR-17-5p表达升高与LVR和预后不良相关,可作为AMI患者预后不良的辅助预测指标。

骨髓增生异常综合征患者骨髓微小RNA-340-3p的表达情况及生物信息学分析

目的探讨微小RNA(miR)-340-3p在骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓中的表达情况,并应用生物信息学技术分析其靶基因及功能。方法利用基因表达谱芯片结合分层聚类在9例MDS患者和6例健康正常人骨髓中筛选出差异表达的miR-340-3p,并利用miRBase和Miranda软件预测其靶基因,并对预测的靶基因进行功能富集和信号通路分析。结果与健康正常人比较,miR-340-3p在MDS患者骨髓中表达下调(P<0.05)。获得共同76个潜在靶基因,包括BANP、KIF2C、DIDO1、GRM1等。基因本体(GO)分析显示靶基因主要富集于细胞生物学、分子功能、细胞组分,信号通路分析显示其主要富集于FoxO信号通路、NOD样受体信号通路、造血细胞系、Gap连接等信号转导通路等。结论 miR-340-3p在MDS患者骨髓中表达下调,其可能通过靶向负向调控下游的靶基因而参与MDS的发生发展。

慢性心力衰竭患者血清miR-208a和miR-302b表达与心室重构及预后的关系

目的分析慢性心力衰竭(CHF)患者血清微小RNA(miR)-208a,miR-302b表达与心室重构及预后的关系。方法选取2019年6月至2020年12月于华西医院健康管理中心收治CHF患者153例为CHF组,另选取同期体检健康者72例为对照组。使用qPCR检测血清miR-208a、miR-302b水平,Pearson相关性分析血清miR-208a、miR-302b水平与心室重构相关指标的相关性。多因素Logistics回归分析血清miR-208a、miR-302b水平与CHF患者预后不良的关系,ROC曲线分析血清miR-208a、miR-302b水平对CHF患者预后不良的预测价值。结果与对照组比较,CHF组血清miR-208a、miR-302b,N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平和左心室质量指数(LVMI)、右心室内径(RVD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)升高,左心室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF)降低(t=25.646、35.611、28.040、36.482、38.098、26.651、-24.933、-45.351,P均<0.001)。CHF患者血清miR-208a、miR-302b水平与NT-proBNP,LVMI、RVD、LVEDD呈正相关(r=0.604、0.544、0.488、0.517,0.586、0.594、0.546、0.572;P均<0.001),与LVFS、LVEF呈负相关(r=-0.483、-0.536,-0.487、-0.550;P均<0.001)。血清miR-208a(OR=1.600,95%CI:1.188~2.154)、miR-302b(OR=1.428,95%CI:1.044~1.952)水平是CHF患者预后不良的独立危险因素。miR-208a+miR-302b预测CHF患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.876大于miR-208a(AUC=0.801)、miR-302b(AUC=0.792)单独预测(Z/P=2.577/0.010、2.712/0.007)。结论CHF患者血清miR-208a,miR-302b水平升高,与心室重构和预后不良密切相关,两者联合能提升预后不良预测价值。

急性心肌梗死患者miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1表达及临床意义

目的探讨微小核糖核酸RNA-208a(miR-208a)、超敏肌钙蛋白Ⅰ(hs-cTnⅠ)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在急性心肌梗死(AMI)患者中的表达及临床意义。方法选取2017年3月~2019年2月在台州市第一人民医院住院的96例AMI患者为AMI组,另选取同期来院体检的健康者45例为对照组,检测其外周血中的miR-208a、hs-cTnI和MCP-1,miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1对AMI的诊断效能采用受试者工作特征(ROC)曲线进行评价。结果 AMI组miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1表达水平显著高于对照组(P<0.05);AMI患者经有效治疗后,miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1表达水平显著降低(P<0.05);miR-208a的表达水平与高血压、高血脂有关,hs-cTnI的表达水平与糖尿病、高血压有关,MCP-1的表达水平与糖尿病有关(P<0.05);miR-208a、hs-cTnⅠ和MCP-1对AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.912、0.904和0.831。结论 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1在AMI组患者显著升高,其动态变化对AMI的诊断有重要的临床意义。

妊娠期糖尿病患者血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p水平表达对妊娠结局预测价值研究

目的 探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清长链非编码核糖核酸分化拮抗非蛋白编码RNA (long noncoding RNA differentiation antagonizing nonprotein coding RNA,LncRNA DANCR)、微小RNA-33a-5p (miR-33a-5p)水平表达对妊娠结局的预测价值。方法 选取2021年8月~2023年2月于衡水市第四人民医院产检和分娩的154例GDM患者为GDM组,并根据妊娠结局分为良好结局组(n=115)和不良结局组(n=39);同期收集24周葡萄糖耐量试验正常的149例健康孕产妇作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p水平;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清LncRNA DANCR和miR-33a-5p预测GDM患者不良妊娠结局的价值;采用Pearson相关性分析GDM不良妊娠结局患者血清LncRNA DANCR,miR-33a-5p与空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、稳态模式评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性;Logistic回归分析GDM患者不良妊娠结局的影响因素。结果 GDM组血清LncRNA DANCR水平(0.69±0.15)显著低于对照组(1.01±0.22),miR-33a-5p (1.59±0.40)及不良妊娠结局总发生率(25.34%)显著高于对照组(1.02±0.23,5.36%),差异具有统计学意义(t/χ^(2)=14.835,15.140,23.011,均P<0.05)。不良妊娠结局组血清LncRNADANCR水平(0.50±0.14)显著低于良好结局组(0.75±0.18),miR-33a-5p (2.00±0.58),FBG (8.97±0.66mmol/L),FINS (18.63±1.31pmol/ml)和HOMAIR (7.42±0.98)显著高于良好结局组(1.45±0.26,8.01±0.59mmol/L,14.32±1.29pmol/ml,5.10±0.86),差异具有统计学意义(t=7.895~17.961,均P<0.05)。LncRNA DANCR,miR-33a-5p单独及二者联合预测GDM患者不良妊娠结局的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.820,0.819和0.897。GDM不良妊娠结局患者血清LncRNA DANCR与FBG,FINS,HOMA-IR呈负相关(r=-0.498,-0.513,-0.509,均P<0.05),miR-33a-5p与FBG,FINS,HOMA-IR呈正相关(r=0.517,0.494,0.507,均P<0.05)。LncRNA DANCR是影响GDM患者不良妊娠结局的保护因素(OR=0.804,95%CI:0.693~0.933,P=0.004),miR-33a-5p是影响GDM患者不良妊娠结局的危险因素(OR=2.747,95%CI:1.444~5.225,P=0.002)。结论 GDM不良妊娠结局患者LncRNADANCR降低,miR-33a-5p升高,二者均是不良妊娠结局的影响因素。

胶质瘤组织lncRNA SNHG25、miR-497-5p表达与临床特征及预后的关系研究

目的探讨胶质瘤组织长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)25、微小RNA(miR)-497-5p表达与临床特征及预后的关系。方法选择2019年1月至2020年1月该院收治的157例胶质瘤患者为胶质瘤组,同期该院100例因颅脑损伤接受手术治疗的患者为对照组。分别取术中切除的胶质瘤组织和正常脑组织检测lncRNA SNHG25、miR-497-5p表达水平,术后随访3年。分析lncRNA SNHG25表达水平与miR-497-5p的相关性,lncRNA SNHG25、miR-497-5p表达水平与患者临床特征和预后的关系。结果与对照组比较,胶质瘤组lncRNA SNHG25表达水平升高(P<0.05),miR-497-5p表达水平降低(P<0.05)。与肿瘤最大径<4 cm、世界卫生组织(WHO)中枢神经系统肿瘤分级Ⅰ~Ⅱ级比较,肿瘤最大径≥4 cm、WHO中枢神经系统肿瘤分级Ⅲ~Ⅳ级的胶质瘤组织中lncRNA SNHG25表达水平升高,miR-497-5p表达水平降低(P<0.05)。胶质瘤患者的lncRNA SNHG25表达水平与miR-497-5p呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。lncRNA SNHG25高表达组累积生存率低于lncRNA SNHG25低表达组(P<0.05),miR-497-5p低表达组累积生存率低于miR-497-5p高表达组(P<0.05)。WHO中枢神经系统肿瘤分级Ⅲ~Ⅳ级、lncRNA SNHG25高表达是胶质瘤患者预后不良的危险因素(P<0.05),miR-497-5p高表达则是保护因素(P<0.05)。结论胶质瘤组织中lncRNA SNHG25表达水平升高,miR-497-5p表达水平降低,且与肿瘤最大径增大、WHO中枢神经系统肿瘤分级高有关,可导致胶质瘤患者不良预后。

miR-208a通过调控QKI5表达对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的研究miR-208a调控QKI5表达对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及作用机制。方法将雄性SD大鼠32只随机选择分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、I/R+antagomir阴性对照组(I/R+antamiR-NC组)和I/R+miR-208a antagomir组(I/R+anta-miR-208a组),构建大鼠心肌I/R模型后检测各组大鼠心脏左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)和左室每搏量(SV);ELISA法检测血清肌酐激酶同工酶(CKMB)和心肌肌钙蛋白(cTnI)以及IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;采用HE染色观察各组心肌组织病理变化,采用TUNEL染色检测心肌组织细胞凋亡;RT-PCR检测心肌组织miR-208a和QKI5 mRNA表达,Western blot检测心肌组织QKI5蛋白和凋亡蛋白Caspase-3的相对表达水平。结果与Sham组比较,I/R组中LVEF、LVFS、SV值降低,心肌细胞凋亡率升高,血清中CK-MB、cTnI和IL-1β、IL-6、TNF-α水平及心肌组织中miR-208a和Caspase-3表达升高,而QKI5表达水平降低(P<0.05);与I/R+anta-miR-NC组比较,I/R+anta-miR-208a组中LVEF、LVFS、SV值升高,心肌细胞凋亡率降低,血清中CK-MB、cTnI和IL-1β、IL-6、TNF-α及心肌组织中miR-208a和Caspase-3表达水平降低,而QKI5表达升高(P<0.05)。相关性分析发现miR-208a与QKI5表达呈负相关。结论抑制miR-208a可能通过调控QKI5表达减轻心肌缺血再灌注损伤中炎症反应,发挥心肌保护作用。

AMI患者血清miR-208、VEGF-B与左室重构及炎症反应的关系

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清微小RNA-208(miR-208)、血管内皮生长因子-B(VEGF-B)的变化与患者左室重构及炎症反应的关系。方法选取遂宁市中心医院2017年1月至2018年8月收治的90例AMI患者(AMI组)、健康对象90例作为对照组,检测对比两组的血清miR-208、VEGF-B、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)水平,采用超声心动图检测左室舒张末期容积(LVEDV)、左室舒张末期内经(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)。结果 AMI组患者的血清miR-208水平显著的高于对照组,差异具有统计学意义(t=16.445,P <0.05),AMI组患者的血清VEGF-B水平显著的低于对照组,差异具有统计学意义(t=-11.625,P <0.05);AMI组患者的血清IL-10、TNF-α、sICAM-1水平显著的高于对照组,差异具有统计学意义(t=19.236、17.910、36.624,P <0.05);治疗12个月后,AMI组患者的LVEDV、LVEDD均显著的高于入院时(t=-7.697、-9.602,P <0.05),治疗12个月后的LVEF与入院时比较差异无统计学意义(t=1.911,P> 0.05);AMI患者的血清miR-208水平与LVEDV、LVEDD均呈显著的正相关关系(r=0.594、0.621,P <0.05),AMI患者的血清VEGF-B水平与LVEDV、LVEDD均呈显著的负相关关系(r=-0.552、-0.497,P <0.05);AMI患者的血清miR-208水平与血清IL-10、TNF-α、sICAM-1水平均呈显著的正相关关系(r=0.591、0.642、0.618,P <0.05),AMI患者的血清VEGF-B水平与血清IL-10、TNF-α、sICAM-1水平无明显的相关关系(r=-0.095、-0.117、0.153,P> 0.05)。结论 AMI患者早期出现血清miR-208表达升高、VEGF-B水平降低,可能与AMI患者炎症反应程度、远期心室重构形成有关。

血清lncRNA CASC2、miR-590-5p与支气管哮喘患者气道炎症、气流受限的关系及其预测效能分析

目的探讨血清长链非编码核糖核酸(lncRNA)-癌易感性候选基因2(CASC2)、微小核糖核酸-590-5p(miR-590-5p)与支气管哮喘(BA)患者气道炎症、气流受限的关系及其预测效能分析。方法选择2021年12月至2022年12月我院收治的BA患者145例,将其分为急性发作期组(50例)、慢性持续期组(50例)和临床控制期组(45例),另选取50例同期健康体检者为对照组。检测各组的血清lncRNA CASC2、miR-590-5p表达及气道炎症、气道重塑和肺功能指标水平,并分析其相关性。分析血清lncRNA CASC2与miR-590-5p对BA患者气流受限的预测价值。结果对照组、临床控制期组、慢性持续期组、急性发作期组的lncRNA CASC2与miR-590-5p表达水平和肺功能指标水平依次降低,气道炎症、气道重塑指标水平依次升高(P<0.05)。Pearson分析显示,BA患者的lncRNA CASC2、miR-590-5p表达水平与气道炎症、气道重塑指标呈负相关,与肺功能指标呈正相关(P<0.05)。轻、中、重度气流受限患者的血清lncRNA CASC2与miR-590-5p表达水平依次降低(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清lncRNA CASC2与miR-590-5p表达水平联合预测气流受限的曲线下面积(AUC)高于两指标单独预测。结论血清lncRNA CASC2、miR-590-5p在BA患者中低表达可导致气道炎症、气道重塑及气流受限,联合检测血清lncRNA CASC2、miR-590-5p对气流受限程度有较高的预测价值。

冠心病患者血清同型半胱氨酸、miR-1、miR-126和miR-208的相关性分析

目的结合冠状动脉狭窄程度,探讨冠心病患者血清同型半胱氨酸(Hcy)与微小RNA(miR-1、miR-126及miR-208)之间的相互关系。方法选取行冠脉造影术的患者共102名,根据造影结果分为对照组和观察组,检测Hcy、miR-1、miR-126及miR-208水平,同时对冠脉造影结果进行评价并计算Gensini积分,应用相关及线性回归分析Hcy、miRNA(miR-1、miR-126、miR-208)以及Gensini积分的相互关系。结果观察组血清Hcy、miRNA(miR-1、miR-126、miR-208)水平均高于对照组,血清Hcy、miR-1和miR-126水平分别与Gensini积分呈正相关[相关系数(r)分别为0.575、0.649、0.499,P均<0.01],偏相关分析校正后它们之间仍然呈正相关(r’分别为0.693、0.621、0.532,P均<0.05);而血清Hcy与miR-1、miR-126水平亦呈正相关(r分别为0.513、0.56,P均<0.01),偏相关分析校正后排除年龄,体重指数,高血压和高脂血症病史的影响,其间仍然呈正相关(r’分别为0.599、0.614,P均<0.05),而与miR-208无显著相关性。结论血清Hcy、miRNA(miR-1、miR-126、miR-208)均是评价冠心病的独立危险因素,其水平均随着冠脉病变严重程度的加重而增加。