流式细胞术外周血细胞检测对急性白血病微小残留病变的诊断价值

目的探讨流式细胞术(FCM)外周血细胞检测对急性白血病(AL)微小残留病变(MRD)的诊断价值。方法选择2020年5月至2022年5月柘城县人民医院收治的AL患者160例,采用相同的治疗方案,治疗结束后72 h内进行FCM外周血细胞检测。以骨髓细胞形态学检查作为金标准,分析FCM外周血细胞检测对AL MRD的诊断价值,并计算FCM外周血细胞检测结果与金标准的一致性。随访1年,比较MRD阳性、阴性患者复发情况。结果160例AL患者经骨髓细胞形态学检查发现105例MRD阳性,55例阴性。FCM外周血细胞检测诊断AL MRD的敏感度[95.2%(100/105)]、特异度[94.6%(52/55)]、准确度[95.0%(152/160)]、阳性预测值[97.1%(100/103)]、阴性预测值[91.2%(52/57)]。FCM外周血细胞检测结果与骨髓细胞形态学检查结果一致性极好(Kappa=0.890)。MRD阳性患者复发率为72.4%(76/105)高于阴性患者的30.9%(17/55),差异有统计学意义(P<0.05)。结论AL MRD诊断中应用FCM外周血细胞检测准确度、敏感度较高,对复发有一定预测价值,值得临床广泛应用。

多参数流式细胞术对急性髓系白血病微小残留病变与疾病复发的监测

本研究探讨微小残留病变(MRD)检测对急性髓系白血病(AML)治疗后疾病复发的预测作用。采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MPFC)分析AML治疗前白血病相关免疫表型(leukemia associated immunphenotypes,LAIP),检测诱导和巩固治疗后MRD(Post-Ind MRD,Post-Cons MRD)的水平。结果表明:122例初发AML患者中(AML-M3除外),有115例(94.3%)存在明确的LAIP,其中存在单一LAIP类型的患者15例(13.0%),存在2个或2个以上LAIP类型的患者100例(87.0%)。抗原跨系列表达者占40.9%,抗原跨阶段表达者、抗原过度表达者和抗原表达减弱或缺失者分别占20.9%、27.0%和34.8%。对41例诱导化疗后达完全缓解并进行2个疗程以上巩固治疗的AML患者MRD监测显示,Post-Ind MRD+的24例中,巩固治疗后18例复发;Post-Ind MRD-者17例中,巩固治疗后5例复发;Post-Ind MRD-患者和Post-Ind MRD+患者的平均无病生存时间(RFS)分别为43.05±6.25个月和12.48±1.69月(p<0.0001)。Post-Cons MRD+者18例均复发;Post-Cons MRD-者23例中仅5例复发。Post-Cons MRD-患者和Post-Cons MRD+患者的平均RFS分别为39.32±5.44月,9.72±1.51个月(p<0.0001)。结论:Post-Ind MRD水平和Post-Cons MRD水平均与AML患者的RFS密切相关,可作为AML治疗依赖的预后因素。

STR-PCR联合RT-PCR技术在慢性髓细胞白血病患者异基因造血干细胞移植后微小残留病变检测中的应用

为了探究STR PCR联合bcr/abl融合基因转录本RT PCR定性检测技术对慢性髓细胞白血病 (CML)异基因造血干细胞移植 (allo HSCT)后复发的预测价值 ,对接受allo HSCT的 2 4例CML患者进行微小残留病变(MRD)的动态检测 ,对供体细胞嵌合率 (DC)采用复合扩增荧光标记STR PCR结合毛细管电泳方法进行定量检测 ,对bcr/abl融合基因转录本采用巢式RT PCR方法检测。结果显示 :移植后长期处于完全供体细胞嵌合状态(FDC)即DC≥ 95 %的患者bcr/abl均转为阴性 ,MRD消失 ;稳定混合嵌合状态 (MC)即 90 %≤DC <95 % ,并且bcr/abl阴性的患者 ,也可达到分子水平的缓解并长期生存 ;但是bcr/abl的阳性结果并不总是与复发相关 ,只有当DC进行性下降 (DC <90 % ) ,而同时bcr/abl阳性时 ,才有复发或植入失败的可能 ,对该类患者应尽早实施临床干预性治疗。本研究中有 5例患者出现DC下降和MRD阳性 ,其中 3例为分子水平复发 ,1例为细胞遗传学水平复发 ,1例为植入失败。结论 :STR PCR在敏感范围内 ,其结果与RT PCR的结果符合率高 ,两种技术的结合是一种检测MRD高度敏感的手段 ,可检出allo HSCT后发生分子生物学或细胞遗传学复发的高危患者。

两种方法动态监测急性早幼粒细胞白血病微小残留病变的前瞻性比较研究

本研究对比聚合酶链式反应(PCR)和多参数流式细胞术(FCM)在急性早幼粒细胞白血病(APL)患者微小残留病变(MRD)动态监测中的价值。2011年1月至2012年12月,在我院接受巩固治疗的APL患者,均于化疗前行骨髓穿刺,每例留取3份标本,同时行骨髓细胞形态学检查、融合基因PCR和FCM检查,并对结果进行统计分析。对48例入选患者共检查159例次,留取标本477份。结果表明:骨髓细胞形态学检查发现3份复发,余均为完全缓解;PCR检查中阳性7份,FCM检查中阳性19份(kappa检测,P>0.05)。结论:FCM与PCR检查对APL治疗效果的评估价值相似。

Ph^+/bcr-abl^+急性淋巴细胞白血病微小残留病变的细胞遗传学分析、巢式RT-PCR及流式细胞术检测

为了探索检测Ph+ /bcr abl+ 急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者的微小残留病变 (MRD)的简便而灵敏的方法 ,对 84例初治ALL患者和其中的缓解期患者的骨髓分别用细胞遗传学、流式细胞术和巢式RT PCR检测。结果表明 ,缓解期患者骨髓中不存在Ph′染色体 ,巢式RT PCR方法检测到 11/ 14例缓解期患者存在MRD(bcr abl融合基因 ) (阳性率 78 5 7% ) ,而流式细胞术检测到 5 / 14的缓解期患者阳性 (阳性率 35 71% )。巢式PCR的灵敏度达到 10 -6- 10 -7水平 ,流式细胞检测的灵敏度达到 10 -4- 10 -5水平。结论 :Ph染色体核型分析技术检测MRD不够灵敏 ,而巢式RT PCR检测MRD较流式细胞技术检测灵敏度更高 ,且更易于开展应用。

非霍奇金淋巴瘤bcl-2/IgH基因重排及在微小残留病变检测中的应用

目的：探索ｂｃ１ － ２ 基因重排在非霍奇金淋巴瘤（ Ｎ Ｈ Ｌ） 的发生及演变中的作用，以ｂｃ１ － ２／ Ｉｇ Ｈ 重排为克隆标志，建立敏感的检测淋巴瘤微小残留病变的方法。方法：多聚酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测ｂｃｌ－ ２／ Ｉｇ Ｈ 基因重排，系列稀释试验检测该方法的灵敏度。结果：９ 种恶性淋巴瘤细胞系中， Ｓｕ － Ｄ Ｈ Ｌ－ ４， Ｓｕ － Ｄ Ｈ Ｌ－ ６ 有ｂｃ１ － ２／ Ｉｇ Ｈ 基因重排，系列稀释试验检测该方法的灵敏度为１ ∶１０５ 。２９ 例 Ｎ Ｈ Ｌ 石蜡包埋的组织标本中，共检出６ 例有ｂｃ１－ ２ 基因重排，其中滤泡型 Ｎ Ｈ Ｌ（ Ｆ－ Ｎ Ｈ Ｌ） ４ 例（３６ ．４ ％ ） ， 弥漫型 Ｎ Ｈ Ｌ（ Ｄ－ Ｎ Ｈ Ｌ） ２ 例（１８．２ ％ ） ，全部在 Ｂ 细胞性 Ｎ Ｈ Ｌ 中检出。１６ 例 Ｆ－ Ｎ Ｈ Ｌ 患者中，４ 例外周血和骨髓中同时检出ｂｃ１ － ２／ Ｉｇ Ｈ 基因重排，化疗达 Ｃ Ｒ 后依然存在。结论：ｂｃ１－２ 基因重排主要与低度恶性的 Ｂ 细胞性淋巴瘤有关，重排方式以ｂｃ１ － ２（ Ｍ Ｂ Ｒ）／ Ｉｇ Ｈ 为主。ｂｃ１ － ２ 基因重排的检测为滤泡性淋巴瘤微小残留病变的检测提供了一个快速、敏感、特异的方法，对疾病的分期、疗效和预后的评估有一定的临?

流式细胞术检测53例急性髓细胞性白血病微小残留病变

目的 探讨流式细胞术检测急性髓细胞性白血病 (AML)微小残留病变 (MRD)的临床意义。方法 以正常人和 5 3例AML完全缓解 (CR)的患者为对象 ,采用双色直接免疫荧光标记及多参数流式细胞术检测外周血中MRD ,并与传统的骨髓形态学结果进行比较。结果 预测各组患者发生复发的敏感性和特异性分别为 :CR≤ 1年组为 10 0 %(8/ 8)和 4 2 .9% (3/ 7) ,1年 <CR≤ 3年组为 10 0 % (5 / 5 )和 75 % (6 / 8) ,CR >3年组为 5 0 % (1/ 2 )和 95 .6 % (2 2 / 2 3) ,对所有第 1次受检MRD为阳性随后确认为复发的患者 ,比骨髓象诊断复发平均提前 7个月。结论 该方法快速、简单 ,对患者创伤小 ,可比传统骨髓形态学更早提示复发 ,尤其是采取连续性定期监测、动态观察的方式 ,会进一步增加检测结果的准确性 ,为临床防止复发、选用个体化治疗方案提供有效的实验依据。

流式细胞术检测急性白血病微小残留病变68例临床分析

目的研究流式细胞术检测急性白血病微小残留病变的临床应用价值。方法应用四色流式细胞术对2017年2月至2018年11月在我院血液科确诊后的68例急性白血病患者骨髓标本进行微小残留病变检测。结果急性髓细胞白血病50例,急性淋巴细胞白血病18例。白血病相关免疫表型髓系异常以跨期表达多见,淋系异常以表达过量多见。对诱导化疗后患者,长期化疗并定期监测白血病微小残留病变原始细胞比例<0.1%的患者病情控制相对稳定,生存时间更长。结论运用流式细胞术检测急性白血病微小残留病变对监测评估病情、评价疗效、提早预防复发和调整治疗方案有临床指导意义。

多参数流式细胞术对急性白血病微小残留病变的研究

目的 探讨多参数流式细胞术检测外周血造血前体细胞的方法及其在急性白血病微小残留病变中的应用价值。方法 单克隆抗体直接免疫荧光标记法和流式细胞仪多参数分析技术。结累 淋巴细胞设门内各种造血前体细胞的参考值：（１）ＣＤ３４＋总干祖细胞占０．１６％±０．１４％，（２）髓系前体细胞ＣＤ３４＋／ＣＤ３３＋ ０．０８％±０．０６％、ＣＤ３３＋ １．３２％±１．２８％、ＭＰＯ＋ ０．６７％±０．８８％，（３）淋巴系前体细胞ＣＤ４５ｄｉｍ／ＣＤ１９＋０．７５％±０．６２％，ＣＤ４５ｄｉｍ／ＣＤ１０＋ ０．４５％±０．１１％；ＣＤ４５ｄｉｍ／ＣＤ７＋０．２４％±０．１４％，ＣＤ４５ｄｉｍ／ＣＤ２＋０．２２％±０．１３％。鉴别异常细胞的敏感度可达 １０－３，发现１例完全缓解期髓细胞性白血病患者外周血中髓系前体细胞有异常，３个月后临床证实复发。结论 流式细胞术对正常人外周血中各系造血前体细胞的定性定量检测有可能用于急性白血病微小残留病变的检出和早期诊断复发。

多参数流式细胞术对急性髓系白血病微小残留病变的监测及对患者复发率的影响

目的探究多参数流式细胞术对急性髓系白血病微小残留病变的监测及对患者复发率的影响。方法回顾性分析我院在2015年6月-2017年7月期间采用多参数流式细胞术监测白血病微小残留(MRD)治疗急性髓系白血病患者作为本次的研究对象,观察比较患者治疗前后生活质量水平,并且分析治疗前急性髓系白血病患者的相关免疫的表型(LAIP),同时对治疗后的微小残留病变的水平进行检测。结果治疗后急性髓系白血病患者在认知功能、躯体功能以及角色功能和社会功能等方面的生活质量水平明显优于治疗前(P<0.05);130例初发的急性髓系白血病患者的免疫表型分析,有120例具有明确的LAIP,有18例具有单一的LAIP类型,有112例具有2个或者2个以上的LAIP类型;50例进行诱导化疗并且达到完全缓解且2个疗程的巩固治疗的急性髓系白血病患者的MBD检测结果为,27例检测诱导MRD(Post-IndMRD+)中,有20例患者复发,23例Post-IndMRD-中,有8例复发,Post-IndMRD+和Post-IndMRD-患者的平均无病生存时间差异具有统计学意义(P<0.05),22例巩固治疗后MRD(Post-ConsMRD+全部复发,28例Post-ConsMRD-有6例复发,Post-ConsMRD+和Post-ConsMRD-患者的平均无病生存时间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Post-IndMRD和Post-ConsMRD与患者的平均无病生存时间有关,且多参数流式细胞术监测患者MRD并干预治疗,可以有效的降低急性髓系白血病微小残留病变的复发率。

胞浆轻链测定在多发性骨髓瘤的微小残留病变检测中的价值

目的 探讨胞浆轻链检测在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）微小残留病变（minimal residual disease,MRD）检测的价值.方法 采用四色流式细胞术,用CD45-APC/SSC及CD38/CD56/CD19及CD138联合设门,通过检测胞浆内轻链（cκ链、cλ链）对45 例经治疗后已完全缓解MM患者（治疗前已经过上述免疫分型检测）的骨髓标本进行微小残留病变的检测,同时进行跟踪随访,分析MRD对MM患者的复发率和无病生存时间是否存在影响.结果 45例骨髓瘤患者中分泌型为37例（其中IgG型为27例,IgA型为10例）,轻链型为5例（λ链型4例,κ链型1例）,不分泌型3例.表型为CD38＋CD56＋CD19-CD45-出现的频率为,分泌型中100% （37/37）,轻链型20%（1/5）,不分泌型0%（0/3）;表型为CD38＋CD56-CD19-CD45-为,轻链型80%（4/5）,不分泌型100%（3/3）.CD138＋,100%（45/45）;胞浆轻链（cκ链、cλ链）,100%（45/45）,其中分泌型：cκ链27%（10/37）;cλ链：73%（27/37）;轻链型：cκ链20%（1/5）,cλ链：80%（4/5）;不分泌型：cκ链33%（1/3）,cλ链：67%（2/3）,经治疗缓解后进行MRD检测,免疫表型为CD38＋CD56＋CD138＋CD19-CD45-MRD阳性率为18%（7/38）,免疫表型为CD38＋CD56-CD138＋CD19-CD45-MRD阳性率为100%（7/7）,两组比较有统计学意义（P〈0.05）,cκ链组MRD阳性率为25%（3/12）,cλ链组33%（11/33）,两组比较差别无统计学意义.随访24个月后,MRD阴性组复发率13%（4/31）,MDR阳性组复发率为71%（10/14）,两组复发率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.MRD阴性组累积无病生存时间中位数15.53（9.35-21.62）个月,明显长于MRD阳性组的9.75（3.69-14.24）个月,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 胞浆轻链测定在多发性骨髓瘤的微小残留病变检测中可以作为临床判断预后的重要指标,并对临床开展相关治疗有指导意义.

流式细胞术监测白血病微小残留病变的应用

临床用于检测白血病微小残留病变的方法中,以流式细胞术最为方便、快速、精确且特异性高。该文对其在监测白血病治疗后的微小残留病变中的应用作一简要介绍。

单克隆抗体检测急性白血病微小残留病变研究进展

本文对单克隆抗体检测急性白血病微小残留病变的基本原理和发展过程作了简单介绍 ,并对其主要方法、尚存在的问题以及近年最新研究进展加以综述。

应用RT-nest-PCR法检测慢性髓细胞白血病非亲缘异基因骨髓移植后微小残留病变

目的:应用筑巢式RT—PCR(RT—nest—PCR)法检测慢性髓细胞性白血病(CML)患者非亲缘异基因骨髓移植(URD)后微小残留病变(MRD),并探讨它与复发的相关性。方法:分别采用RT-nest-PCR法和常规细胞遗传学方法检测bcr／abl融合基因和Ph染色体。结果:20例CML行URD患者术前Ph染色体和bcr／abl融合基因检测均为阳性,移植术后30 d Ph染色体皆转为阴性,bcr／abl融合基因完全转阴时间为1～3个月,中位时间2个月;在随防的18例CML患者中,有16例患者bcr／abl融合基因完全转阴后没再转为阳性。在1例复发的CML患者中可见到血型、Ph染色体和bcr／abl融合基因动态变化,另1例CML患者在移植成功后的21个月和36个月检测到bcr／abl融合基因,经随访未见临床和血液学复发征象。结论:检测ber／abl融合基因是目前观察CML患者非亲缘异基因骨髓移植后微小残留病变最敏感的方法之一,非亲缘异基因骨髓移植能最大限度地消除CML患者体内残留病变,患者能长期无病生存。

不同大剂量甲氨蝶呤对儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病变的影响

目的探讨不同大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病变(MRD)的影响。方法选取我院2014年1月~2016年5月接受HD-MTX治疗的110例巩固期ALL住院患儿作为研究对象,共进行HD-MTX治疗459例次,根据不同HD-MTX将入选患儿分为A组(283例次)和B组(176例次)。比较两组给药后44 h MTX的血药浓度以及化疗前后的MRD值。结果 A组的HD-MTX 44 h MTX血药浓度为(0.23±0.25)μmol/L,显著低于B组的(0.30±0.36)μmol/L,差异有统计学意义(P=0.016)。化疗前后的MRD值比较,差异有统计学意义(P=0.009)。结论随着HD-MTX剂量的增加,其44 h MTX血药浓度的平均值也在增大;不同大剂量甲氨蝶呤对ALL患儿微小残留病变有影响。

慢性髓细胞白血病造血干细胞移植术后微小残留病变监测的进展

慢性髓细胞白血病是一种发生在多能造血干细胞水平的获得性遗传异常。Ph染色体是慢性髓细胞白血病的细胞遗传学标记,而bcr-ab1基因重排则为CML的分子基础。造血干细胞移植是目前治愈慢粒的唯一手段。微小残留病变是移植后复发的根源。本文综述慢性髓细胞白血病造血干细胞移植术后微小残留病变监测的进展,以及微小残留病变的监测对于判断疾病预后和进行复发后治疗干预的临床意义。

CD81联合CD10及CD34在流式细胞术监测儿童B-ALL微小残留病变中的应用价值

目的探讨CD81联合CD10和CD34在儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留病变(MRD)监测中的应用价值。方法采用多参数流式细胞术检测27例MRD阳性B-ALL患儿骨髓细胞中CD81、CD10和CD34表达。取10例患有血液系统疾病但已达到完全缓解患儿的骨髓细胞作为对照,建立B细胞各发育阶段的CD81、CD10和CD34正常表达模式。结果在27例MRD阳性病例中,单独CD34/CD81的检出率为55.6%,单独CD10/CD81检出率为48.2%,而CD81联合CD10和CD34的检出率高达81.5%。此外,在2例MRD持续阳性患儿中,CD81显示出稳定的异常弱表达。结论CD81联合CD10和CD34在儿童B-ALLMRD监测中检出率较高,是有效的抗体组合,应用价值较高。