探讨微小病变型肾病机制及治疗

MCD是儿童及青少年原发肾病综合征中最常见病例类型,临床主要以大量蛋白尿、低蛋白血症、水肿及高脂血症为主,目前该疾病常规治疗或加用激素疗效及预后均良好,但仍存在复发及激素抵抗,为治疗创造了难题,随着人们对微小病变肾病的深入研究,对该疾病的发生、发展机制有了一定的认识,在临床上为药物治疗提供了相关的依据,该文就MCD发病机制研究进展及miR-499与微小病变型肾病的联系进行相关阐述。

微小病变型肾病患者血尿酸/血肌酐比值与临床指标及肾脏病理的相关性

目的探讨微小病变型肾病(MCD)患者的血尿酸(UA)/血肌酐(Cr)比值与其临床指标、肾脏病理的相关性。方法选取肾穿刺活检确诊为MCD的患者109例,按照UA/Cr大小分为低UA/Cr组(n=54)和高UA/Cr组(n=55),收集2组患者的临床资料,采用酶法、Jaffe法检测患者住院首日静脉血生化指标及24 h尿蛋白定量(24 h-UP)、浆膜腔积液情况以及肾脏病理特征,采用多重线性回归分析MCD患者UA/Cr水平的影响因素。结果高UA/Cr组MCD患者的纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)、UA、肾小球滤过率(eGFR)水平高于低UA/Cr组,Cr水平低于低UA/Cr组,差异有统计学意义(P<0.05);高UA/Cr组MCD患者肾小球肥大比例高于低UA/Cr组,差异有统计学意义(P<0.05);多重线性回归模型结果示,MCD患者肾小管萎缩/间质纤维化与UA/Cr呈负相关(β=-0.332,95%CI为-1.798~-0.515,P=0.001),FIB与UA/Cr呈正相关(β=0.263,95%CI为0.067~0.379,P=0.006)。结论UA/Cr水平可反映MCD患者高凝状态、血栓形成及肾小管间质损害风险。

阿柔比星建立肾病模型的评价

目的从生化、光镜及电镜水平对阿柔比星建立肾病模型进行评价。方法将30只SPF级纯系SD大鼠随机分为3组,正常组尾静脉注射生理盐水,多柔比星组和阿柔比星组尾静脉分别注射多柔比星和阿柔比星。结果阿柔比星模型血浆白蛋白降低,胆固醇升高,尿蛋白升高至(80.15±6.87)mg/24h,与多柔比星模型类似,该模型典型而稳定,成活率可达100%。电镜观察结果显示其符合微小病变型肾病的病理变化。结论阿柔比星建立肾病模型有效且稳定可靠。

sPLA2-ⅠB、PLA2R及PLA2R-AB在鉴别微小病变型肾病及特发性膜性肾病中的意义

目的检测分泌型磷脂酶A2-ⅠB(sPLA2-ⅠB)、M型磷脂酶A2受体(PLA2R)及抗M型磷脂酶A2受体抗体(PLA2R-AB)在微小病变型肾病(MCD)及特发性膜性肾病(IMN)中的表达,为临床上鉴别两类疾病寻找新的生物学检测指标。方法收集临床表现为肾病综合征并经肾穿刺病理检查证实为MCD(16例)及IMN(29例)患者的血清、尿液及肾脏病理标本。检测血清各项生化指标及尿蛋白定量,间接免疫荧光检测血清PLA2R-AB表达水平,免疫荧光检测肾小球PLA2R表达水平,ELISA检测血清sPLA2-ⅠB表达水平,免疫组化检测肾小球sPLA2-ⅠB表达水平。分析sPLA2-ⅠB、PLA2R及PLA2R-AB水平在MCD组及IMN组中的表达情况。结果 IMN组患者血清PLA2R-AB阳性率为69.0%,MCD组患者血清PLA2R-AB均为阴性(P<0.01)。IMN组肾小球足细胞PLA2R阳性率为86.2%,MCD组肾小球足细胞PLA2R阳性率为18.8%(P<0.01)。IMN组及MCD组血清sPLA2-ⅠB平均水平分别为(211.04±69.47)、(184.52±33.29)pg/mL(P>0.05)。IMN组和MCD组肾小球sPLA2-ⅠB的平均积分吸光度值分别为(1 849.90±506.07)、(1 143.63±323.68)(P<0.01)。结论 sPLA2-ⅠB、PLA2R及PLA2R-AB在MCD及IMN中表达有明显差异。联合检测sPLA2-ⅠB、PLA2R及PLA2R-AB有助于提高MCD及IMN的鉴别诊断水平。

回顾性分析ACEI／ARB联用激素对微小病变型肾病综合征的影响

目的研究血管紧张素转换酶抑制剂/血管紧张素受体拮抗剂(ACEI/ARB)联合激素治疗微小病型肾病综合征(MCD)的疗效。方法回顾性分析1998年11月至2006年10月肾活检确诊为MCD的患者,分为激素单联用ACEI或ARB组、激素联用ACEI及ARB组,及单用激素组作为对照。结果符合入组94例,激素单联用ACEI或ARB组(36例),复发率52.78%;激素联用ACEI及ARB组(30例),复发率56.67%;单用激素组(28例),复发率46.43%,其复发率及尿蛋白转阴时间均无统计学差异(P>0.05)。结论激素联用ACEI及或ARB不能降低MCD患者的复发率及缩短尿蛋白转阴时间。

儿童微小病变型肾病综合征致病相关基因筛查

目的比较微小病变型肾病综合征(MCNS)患儿与正常健康儿童外周血单个核细胞(PBMC)的基因表达谱变化,筛查MCNS相关致病基因,为揭示MCNS的发病分子机制和临床治疗提供线索。方法原发性MCNS患儿7例,正常同年龄对照组7例,Trizol法抽提PBMC总RNA;采用人类基因组表达谱芯片检测MCNS及正常健康儿童PBMC基因mRNA水平;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光定量PCR检测部分基因转录水平,鉴定芯片相关检测结果。结果在33 000个基因转录本中,有969个转录本在MCNS患儿PBMC中存在表达差异,其中表达上调552个,表达下调417个。RT-PCR和荧光定量PCR检测结果与基因芯片较为一致。结论采用人类基因组表达谱芯片可快速有效地检测MCNS患儿PBMC中基因表达谱的变化,进而证实MCNS的发生、发展是涉及多基因改变的复杂过程。

胡枝子总黄酮治疗大鼠微小病变型肾病综合征的实验研究

目的:探讨胡枝子对微小病变型肾病的治疗作用,为其开发利用提供实验基础。方法:利用尾静脉注射阿霉素复制大鼠微小病变型肾病模型,观察胡枝子总黄酮对模型2 4h尿蛋白、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(ATCO) ,丙二醛(MDA) ,IL -8,TNF -α含量的影响及对肾组织的病理改变。结果:胡枝子总黄酮能降低尿蛋白含量,提高SOD活力及ATCO能力而降低血中MDA ,并抑制IL -8,TNF -α的分泌。结论:胡枝子总黄酮对大鼠微小病变型肾病综合征有一定治疗作用。

微小病变型肾病综合征患儿胆红素与尿蛋白水平的关系

目的探讨微小病变型肾病综合征(MCNS)患儿应用糖皮质激素治疗后其胆红素与尿蛋白水平的关系。方法选取2012年2月至2014年2月该院MCNS患儿作为研究对象。单纯应用泼尼松药物短期治疗14d,再经24h尿蛋白(24hUpr)定量和晨尿蛋白定性试验,选取65例尿蛋白完全缓解患儿,观察治疗前、治疗7d、治疗14d的血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、清蛋白(ALB)和24hUpr指标水平变化,比较其差异并对患儿胆红素与尿蛋白水平进行相关性分析。结果 65例患儿TC、TG和ALB水平在治疗7d和14d后与治疗前比较,差异均无统计学意义(P>0.05),而24hUpr、TBIL和DBIL水平在治疗7d和14d后与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,治疗前24hUpr与TBIL、DBIL呈负相关(r=-0.413,P=0.001;r=-0.293,P=0.023);治疗后14d的24hUpr与TBIL、DBIL呈负相关(r=-0.301,P=0.018;r=-0.285,P=0.029)。结论糖皮质激素治疗对MCNS患儿尿蛋白和血清胆红素影响较大,且24hUpr与胆红素水平呈负相关,提示MCNS患儿尿蛋白丢失可能是导致机体血清胆红素水平降低的主要原因之一。

NF-κB、TNF-α及NO在微小病变型肾病综合征发病机制中的作用

目的通过研究核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及一氧化氮(NO)在微小病变型肾病综合征(MCNS)肾损伤中的作用,探讨MCNS形成的可能机制。方法雄性SD大鼠36只随机分为2组,模型组尾静脉一次性注射阿霉素5.5 mg/kg,对照组注射等量生理盐水。研究单个核细胞中NF-κB活化情况,动态观察外周血中TNF-α、NO的变化,研究其与尿蛋白、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素(Urea)及肌酐(Cr)等浓度变化的关系,并观察肾脏病理学改变。结果造模后14天模型组与对照组比较,NF-κBp65活性、TNF-α、NO、尿蛋白、TC及TG明显升高(P<0.01);ALB降低(P<0.01);电镜下见足突融合。随着造模时间的延长,模型组NF-κBp65活性、TNF-α、NO、尿蛋白、TC及TG持续增高,在造模后35天达峰值;而ALB持续降低(P<0.01);电镜检查见弥漫性足突融合。模型组Urea仅在造模后35天较对照组增高(P<0.01),2组Cr在整个实验过程中差异均无统计学意义(P>0.05)。结论NF-κB的异常活化在MCNS肾损伤中起着重要的作用,其作用机制可能是通过诱导TNF-α、NO产生增多,损害肾脏细胞,导致蛋白尿的发生。

TLR-2、ED-1和IL-1β在儿童微小病变型肾病肾组织中的表达

目的:微小病变型肾病综合征(MCNS)是儿童原发性肾病综合征(INS)最为常见的病理类型。对于MCNS的发病机制目前仍不是很清楚。本文观察Toll样受体-2(TLR-2)、单核巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)和白介素-1β(IL-1β)在儿童微小病变型肾病(MCNS)肾组织中的表达情况,探讨TLR-2、ED-1、IL-1β在MCNS发病过程中的作用。方法:遴选2013.01~2015.12间2岁~14岁新乡医学院第一附属医院临床表现原发性肾病综合征(INS)且病理确诊为MCNS病例20例,10例儿童肾肿瘤切除术后远离肾肿瘤边缘正常肾组织作为对照组。应用免疫组织化学染色GTVision Ⅲ二步法,对MCNS患儿肾活检肾组织切片行TLR-2、ED-1和IL-1β免疫组织化学染色。结果:正常对照组肾小球及肾小管内TLR-2、ED-1、IL-1β无或有极微量表达。与对照组比较,MCNS组TLR-2、ED-1、IL-1β在肾小球(0.47±0.17vs5.15±0.21,0.55±0.14vs22.06±0.32,0.29±0.12vs17.43±0.34;P均<0.05)和肾小管上皮(0.31±0.20vs79.45±3.65,0.84±0.39vs82.56±5.3,0.47±0.25vs63.34±4.36;P均<0.01)表达均显著增高。结论:TLR-2在肾组织高表达可能诱导肾脏固有巨噬细胞释放炎症细胞因子IL-1β的过度释放,介导MCNS的局部损伤和炎症反应,促进MCNS的进展。

益肾康治疗微小病变型肾病综合征的实验研究

目的:研究益肾康对微小病变型肾病的治疗作用。方法:采用尾静脉注射多柔比星复制肾病大鼠模型,以雷公藤多苷片为对照,同时设立正常对照组。观察益肾康对大鼠24h尿蛋白定量、血清Alb、TP、TC、TG、BUN、Scr、MDA、SOD、T-AOC含量变化的影响;并切取肾脏组织做光镜和电镜检查,观察其对肾脏组织形态学改变的影响。结果:益肾康中药可减少多柔比星所致肾病大鼠模型尿蛋白的排泄量,改善血清生化指标,降低MDA活力,升高SOD活力,提高机体总抗氧化能力,修复肾小球上皮细胞足突的结构。结论:益肾康中药对多柔比星肾病大鼠有明显疗效,并能抑制其亢进的脂质过氧化反应,从而减轻肾脏病理损害,缓解病情。

IL-18抗体对小鼠微小病变型阿霉素肾病的治疗作用

目的探讨应用抗白细胞介素18抗体(IL-18Ab)中和内源性IL-18活性对阿霉素(ADR)小鼠微小病变型肾病综合征(MCNS)的治疗作用。方法雄性昆明种小鼠,一次性尾静脉注射ADR7.5mg/kg建立MCNS模型,对照组注射同等容量的生理盐水。给予ADR后第5、7、12及21天模型组小鼠分别注射IL-18Ab(10μg/只,IL-18Ab组)或等容量PBS(非治疗组)。于实验第1、14、28及42天检测尿蛋白水平,第42天处死小鼠,常规方法测血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及IL-4、IL-18、IFN-γ和TNF-α水平,电镜观察肾脏组织病理改变。结果注射阿霉素后,小鼠均出现肾病综合征表现,以大量蛋白尿、低蛋白血症、高胆固醇血症为特征。大量蛋白尿于实验第2周出现,第4周达到高峰。对照组、非治疗组及IL-18Ab组分别为(3.13±0.82)mg/24h、(34.27±5.16)mg/24h及(27.51±3.34)mg/24h(P<0.01),第7周非治疗组尿蛋白水平为(30.45±2.13)mg/24h,IL-18Ab治疗组尿蛋白水平明显降低为(21.83±2.67)mg/24h(P<0.01)。非治疗组及IL-18Ab组TC分别为(6.51±0.23)mmol/L及(5.15±0.9)mmol/L(P<0.01),TG为(3.31±0.32)mmol/L及(1.67±0.17)mmol/L(P<0.01),Alb分别为(15.99±0.89)g/L及(19.23±1.53)g/L(P<0.05)。电镜显示:非治疗组肾脏上皮细胞足突广泛融合,而IL-18Ab组肾脏组织学改变显著减轻,仅有部分足突融合。与正常对照组相比,非治疗组血清IL-18、IFN-γ和TNF-α显著增高。而IL-18Ab治疗后上述细胞因子均明显降低(P<0.01)。结论IL-18Ab对ADR诱导的MCNS的治疗作用可能与中和内源性IL-18活性、抑制Th1细胞介导的免疫反应有关,抑制或中和内源性IL-18的释放及活性,有可能成为MCNS治疗的新途径。

人脐带间充质干细胞干预微小病变型肾病大鼠的实验研究

目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对微小病变型肾病(MCN)大鼠蛋白尿及足细胞的作用,并探讨其可能的机制。方法 60只雄性SD大鼠随机分为3组,每组20只。空白对照组经尾静脉注射1 mL生理盐水;模型组注射阿霉素(5 mg.kg-1,用1 mL生理盐水溶解);hUCMSCs干预组注射阿霉素[5 mg.kg-1,用1 mL hUCMSCs悬液(约1×107个细胞)溶解]。每组于造模后第10、28天各选择10只大鼠留取血、尿、肾脏标本,检测24 h尿蛋白量、血浆白蛋白和胆固醇、血清肌酐和尿素氮,光镜及电镜观察肾小球病理形态,反转录聚合酶链反应检测肾组织nephrin mRNA表达。结果造模后第10天,模型组24 h尿蛋白、血胆固醇高于空白对照组,血浆白蛋白、nephrin mRNA表达量低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,干预组24 h尿蛋白、血脂相对降低,血浆白蛋白、nephrin mR-NA表达量相对增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。造模后第28天,与模型组比较,干预组24 h尿蛋白、血胆固醇降低,血浆白蛋白及nephrin mRNA表达量增加,其差异有统计学意义(P<0.05);电镜下模型组肾小球出现足突广泛融合,hUCMSCs干预组病变较模型组减轻,足突部分融合。结论 hUCMSCs可修复足突病变,减少MCN大鼠的尿蛋白量,上调nephrin mRNA表达,可能机制为hUCMSCs的旁分泌作用、直接分化或改善肾血管管周微环境等。

儿童微小病变型肾病综合征中医证型与年龄、性别的关系

目的探讨儿童微小病变型肾病综合征的中医证型与年龄、性别的关系。方法在肾穿刺活检前24 h内对133例原发性微小病变型肾病综合征住院患儿进行中医辨证分型,分析中医证型与年龄、性别的关系。结果患儿年龄2.0～16.0(7.01±3.63)岁;男101例,女32例,男女之比为3.2∶1。年龄分期分布以学龄前期最多,共50例占37.6%,其次为学龄期和青春期,分别是38例和35例,分别占28.6%和26.0%,婴幼儿期最少,共10例占7.6%。中医辨证分5型:肺脾气虚型38例占28.6%;脾虚湿困型17例占12.8%;脾肾阳虚型44例占33.1%;肝肾阴虚型13例占9.8%,气阴两虚型21例占15.8%,其中以肺脾气虚型和脾肾阳虚型为主要表现类型。结论微小病变型肾病综合征的中医证型与年龄、性别之间存在相关性,探讨其关系可以促进对本病的认识,有利于及时对此类疾病的诊断、治疗进行中医干预。

SELDI-TOF-MS筛选微小病变型肾病综合征尿液生物标志物

目的探讨应用优化的表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)进行微小病变型肾病综合征(minimal-changed nephrotic syndrome,MCNS)大鼠尿液生物标志物筛选的意义。方法 SD大鼠30只随机分为正常对照组(n=10)、模型对照组(n=10)和强的松治疗组(n=10)。除正常对照组外,其余大鼠经尾静脉一次性注射阿霉素5.5mg/kg复制MCNS模型,造模10d后分别予以强的松和蒸馏水灌胃治疗。21d后收集大鼠尿液,经弱阳离子交换芯片CM10捕获蛋白质,应用SELDI-TOF-MS获取3组大鼠的尿液蛋白质指纹图谱,采用Biomarker wizard软件比对分析差异蛋白。结果优化实验条件后获得较理想的尿液蛋白质指纹图谱,质控峰强度的平均CV值为18.0%(7.50%～35.89%)。在模型对照组与正常对照组之间检测到不同质荷比处有33个具统计学意义的差异蛋白峰(P<0.05),其中21个蛋白表达上调,12个蛋白表达下调。在正常对照组、模型对照组与强的松治疗组之间有6个蛋白质表达存在差异(P<0.05),这些差异蛋白峰在模型对照组中高表达,而在强的松治疗组中蛋白表达下调,峰强度接近正常对照组。结论通过优化实验条件并实行质量控制,SELDI-TOF-MS可为MCNS大鼠尿液生物标志物的筛选提供一个可行的检测途径。所获得的差异性蛋白峰对MCNS的早期诊断、治疗监测和寻找药物治疗的靶目标具有重要的意义。

祛风通络方对微小病变型肾病大鼠P-selectin的作用

目的:探讨P-selectin在微小病变型肾病大鼠中的表达及祛风通络方对其的干预作用。方法:56只雄性清洁级SD健康大鼠随机分为空白对照组(A组)和AN模型组,采用一次性尾静脉注射阿霉素(ADR)的方法,建立大鼠AN模型,造模成功后再将模型组分为病理组(B组)、祛风通络方组(C组)、泼尼松组(D组)和贝那普利组(E组),邻苯三酚红/钼酸盐法测定24h尿蛋白量;电子显微镜观察肾小球超微结构;自动生化分析仪测定血生化指标;ELISA法测定P-selectin浓度。结果:模型组大鼠于实验第21天时尿蛋白排泄较正常对照组明显增高(P<0.01);药物干预后,各药物组大鼠尿蛋白排泄均显著下降,与病理组比较(P<0.01);祛风通络方组比模型组大鼠肾小球基底膜足突数目增多、且排列较整齐;与A组比较,血清Alb明显下降(P<0.01),血清TG、TC、Scr及P-selectin均显著升高(P<0.01);与病理组比较,祛风通络方组血生化指标及P-selectin均有一定程度的改善(P<0.05或P<0.01)。结论:P-selectin可能参与了微小病变型肾病的发病过程,祛风通络方可能通过降低P-selectin的表达从而对肾脏起到保护作用。

微小病变型肾病综合征发病机制的免疫研究进展

1 引言 微小病变型肾病综合征(minimal change nephrotic syndrome,MCNS)是特发性肾病综合征的主要病理类型.临床根据患者对肾上腺皮质激素(激素)治疗的反应又将其分为激素敏感型和激素抵抗型两类.

老年特发性膜性肾病与微小病变型肾病的临床特点比较

随着人口的老龄化,我国老年肾脏病患者逐年增多。据国内外研究报道,老年原发性肾小球疾病中以特发性膜性肾病和微小病变型肾病最常见,两种疾病共占46.59%,故对于老年肾脏病患者,应高度关注特发性膜性肾病和微小病变型肾病两种疾病类型。

CD80对微小病变型肾病综合征的临床价值研究

原发性肾病综合征(NS)是肾小球疾病最常见的病因之一,是由各种原因引起肾小球滤过膜损伤,通透性增大,导致血浆蛋白漏出,进而产生大量尿蛋白的病理生理改变的临床综合征。目前临床主要采用肾穿刺组织病理检查进行分型鉴别诊断,其主要病理型包括:微小病变型肾病(MCD)、膜性肾病(MN)、局灶节段性肾小球硬化(FSGS)、系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)及膜增生性肾小球肾炎(MPGN)。其中MCD是NS常见类型之一,好发于儿童和老年人。而这两个群体因为肾穿刺检查的创伤性,往往不易被患者及家属接受,医生也会顾虑创伤、出血或出现合并症,因此寻找替代肾穿刺又能明确该疾病诊断的方法有着十分重要的临床意义。近年国内外大量研究表明部分生物因子可特异性鉴别原发性肾病综合征的病理类型及评估病情进展,并有逐渐取代肾穿刺趋势。比如抗磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体对膜性肾病的诊断有着较好的敏感性和特异性,并且可辅助评判治疗效果及预后[1,2]。近年也已有大量的研究表明:作为足细胞表达的分子CD80在MCD的发病过程中有着举足轻重的作用,为诊断和指导治疗提供了一些新的线索[3~5]。

27例成人微小病变型肾病综合征患者高IgE血症的临床意义探讨

目的探讨微小病变型肾病综合征患者中合并高IgE血症的临床意义。方法 回顾性分析2014年1月-2016年4月衢州市人民医院收治的27例经肾活检病理明确诊断为微小病变型肾病综合征（MCNS）患者,归纳其血IgE血症水平、临床特征及预后情况,同时比较同期收治的成人肾病综合征其他常见病理类型（IgA肾病97例,膜性肾病45例）,综合以上数据进行相关研究。结果 不同病理类型的肾病综合征患者起病时IgE水平有较大差异,其中微小病变组的血IgE平均水平明显增高,而且IgE升高患者所占比例亦明显增高,微小病变组与IgA组或膜性肾病组组间比较差异显著（P均〈0.05）。随后根据起病时血IgE水平的高低,对27例MCNS患者进行临床特点的比较,发现IgE水平升高者对激素治疗反应时间亦有所延长,且激素减量过程中出现疾病反复的可能性增大。此外,没有一例MCNS患者临床中观察到过敏现象。结论 MCNS中合并高IgE血症较为突出,且IgE水平的高低可能成为预测疾病预后的一个指标。MCNS患者中高IgE血症的形成机制并不与过敏等原因直接相关,很可能是某种潜在的免疫系统紊乱同时促使肾病、过敏症及高IgE血症的发生。