四种不同的同种异基因移植法治疗第一慢性期慢性粒细胞白血病患者嵌合现象和微小白血病残留的比较研究

最近,陆续出现了代替传统骨髓移植(BMT)和外周血千细胞移植(PBSCT)的新的治疗血液系统恶性肿瘤的异基因移植方法,其中之一是Slavin等报道的减量预处理后PBSCT,此种移植的特征为预处理过程对相关器官的毒性降低,从而使患者对移植的耐受性增强,同时亦为老年及有严重并发症的患者提供了异基因移植的机会。

运用数据挖掘总结胡晓梅教授治疗微小残留白血病的用药规律

目的:通过中医传承辅助平台(V3.0)挖掘胡晓梅教授治疗微小残留白血病(Minimal Residual Leukemia,MRL)的用药规律,总结MRL的辨治方法。方法:收集胡晓梅教授门诊治疗MRL的有效处方133首,录入中医传承辅助平台,建立胡晓梅教授治疗MRL的方药数据库。结果:分析数据库中患者的症状及所用药物的四气、五味、归经、使用频次和组方规律,得出常用药物有茯苓、山药、山茱萸、白术、炙甘草、牡丹皮、陈皮等共14味,核心药物组合中多见茯苓、山茱萸、熟地黄等药物与山药关联,通过聚类分析得到8首治疗MRL的新处方。结论:文本挖掘、关联规则等数据挖掘方法可以有效总结用药规律,胡晓梅辨治MRL的思路是从正虚邪恋的病理状态入手,以健脾益肾、扶正祛邪为治法,主要使用六味地黄丸合六君子汤加减以滋补肝肾、健脾益气。

小鼠微小残留白血病模型的建立

目的 研究小鼠微小残留白血病模型的建立方法。方法 采用P388白血病细胞系和DBA小鼠建立P388/DBA小鼠微小残留白血病模型。结果 P388细胞腹腔接种DBA小鼠 ,白血病的发病率为 10 0 % ,无自发缓解。P388白血病模型对环磷酰胺 (Cy)敏感 ,有较好的药物剂量 生存时间关系 ,接种细胞数量与Cy剂量间有良好回归关系 ,是研究微小残留白血病的理想模型。移植生物试验提示 ,当微小残留白血病细胞数量在 10 1左右时 ,其分布可能局限于肝、脾及股骨骨髓以外的器官和组织中。

微小残留白血病的病因病机及治疗探讨

温热毒邪是白血病的重要致病因素,正虚毒伏是微量残留白血病重要病理,伏毒积蓄是白血病复发的根本原因。骨髓、血液、脑脊液、睾丸等至阴之分为余毒伏藏之处。微小残留白血病以扶正祛毒为治疗原则,以祛除余毒为目标,扶正培本有助于祛毒,祛毒采取入阴搜剔,逐毒出阳的方法。

扶正抗白冲剂对微小残留白血病模型小鼠免疫功能及生存期的影响

目的 :研究扶正抗白冲剂 (FZKBG)对实验小鼠免疫功能及生存期的影响 ,探讨FZKBG治疗微小残留白血病 (MRL)的机理。方法 :接种L72 12 细胞 1× 10 6/只 ,接种后第 3天腹腔注射环磷酰胺 2 50mg/kg ,造成MRL模型小鼠 ,分成模型对照组、模型给药组 ,另设正常对照组、正常给药组 ,分别观察各组小鼠淋巴细胞亚群 (CD3+、CD4 +、CD8+)改变 ,免疫器官病理变化和生存期。结果 :与模型组比较 ,FZKBG能明显提高正常小鼠和MRL模型小鼠CD3+、CD4 +、CD8+的百分比和绝对值 (P <0 0 5,P <0 0 1)。且明显延长MRL模型小鼠存活期 ,延长生命率 2 9 6%～ 60 4 %。结论 :FZKBG能明显延长MRL模型小鼠存活期 ,其机理可能是通过提高MRL模型小鼠的免疫功能 。

微小残留白血病患者细胞免疫功能与中医分型关系的研究

目的 :分析微小残留白血病 (MRL)患者细胞免疫功能与中医辨证分型的相关性。方法 :用三标记荧光抗体和流式细胞仪测定MRL患者 30例、健康人 5 5名及急性白血病患者 36例的细胞免疫功能 ,比较分析其细胞免疫功能和中医辨证分型相关关系。结果 :MRL患者与健康人比较 ,各项指标普遍降低 ,包括WBC总数、总T淋巴细胞绝对值、辅助T淋巴细胞绝对值 (P <0 0 5 )、淋巴细胞总数、自然杀伤 (NK)细胞百分率和绝对值 (P <0 0 1) ;总T淋巴细胞百分率、CD4 + CD2 9+ 细胞百分率、抑制T淋巴细胞百分率、记忆T淋巴细胞百分率增高 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,但绝对值不升高。MRL患者与急性白血病患者比较差异无显著性。MRL患者气血不足型免疫功能紊乱严重 ,包括辅助T淋巴细胞和抑制T淋巴细胞比值较正常降低等。气血不足型免疫功能紊乱最明显 ,气阴两虚型患者紊乱相对较轻 ,阴虚火旺者介于二者之间。结论 :MRL患者免疫功能低下 ,属中医正虚邪恋。不同中医证型细胞免疫紊乱程度不同 ,对不同证型采用不同药物与剂量是有必要的。

益气养阴法对微小残留白血病多药耐药相关因子的影响

[目的]观察微小残留白血病病患者的气阴两虚证候,并评估益气养阴法辨病及辨证论治微小残留白血病的临床疗效、探讨其多药耐药作用机制。[方法]将68例微小残留白血病病患者随机分为治疗组(34例)和对照组(34例)。治疗组使用联合化疗配合口服益气养阴中药治疗,对照组单独使用联合化疗方法。两组治疗前、后用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测拓扑酶(TopoⅡ)表达,用化学间接免疫荧光法(碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标法,APAAP)法检测P170的表达,探讨益气养阴法对微小残留白血病多药耐药因子的影响。[结果]益气养阴法可以改善微小残留白血病患者气阴两虚证候。治疗组气阴两虚证与对照组气阴两虚证候有显著性差异(P<0.05)。还能够上调TopoⅡ含量,增加白血病细胞DNA的断裂,从而使白血病细胞死亡。其作用机制可能是通过降低P-gp的表达率,减少化疗药物外排,增加细胞内化疗药物的浓度。联合化疗配合益气养阴法治疗后能够降低气阴两虚白血病患者P170阳性表达例数。[结论]益气养阴法对逆转微小残留白血病多药耐药有一定的疗效。

应用RT-PCR和荧光原位杂交监测急性早幼粒细胞白血病微小残留白血病

目的应用RT-PCR和荧光原位杂交技术(FISH)检测急性早幼粒细胞白血病(APL)患者体内PML-RARα融合基因的表达,监测患者体内微小残留白血病的情况。方法采用全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3)联合治疗APL,运用RT-PCR和FISH技术检测和分析APL患者体内诱导缓解后及巩固维持治疗后PML-RARα融合基因。结果 46例APL患者PML-RARα融合基因均为阳性,其中34例患者在诱导化疗结束达完全缓解后检测,25例(73.5%)患者基因检测呈阴性,9例(26.5%)患者RT-PCR和/或FISH检测阳性,融合基因阳性和阴性复发APL的预测值分别为44.4%和4.3%;31例再经ATRA及As2O3巩固及维持治疗后,27例患者达到分子生物学缓解,无复发病例,4例融合基因阳性患者,3例复发APL,其复发APL的阳性预测值为75%。结论 RT-PCR和FISH技术是非常有效的监测APL患者体内微小残留白血病的实验方法,其对疾病的诊断、治疗及预后评估具有重要临床价值。

益气补肾颗粒治疗对微小残留白血病患者CD4^+CD8^(high) T淋巴细胞和自然杀伤细胞的影响

目的探讨益气补肾颗粒治疗后CD4+CD8highT淋巴细胞的变化及其对微小残留白血病(mini-mal residual leukemia,MRL)预后的意义。方法用多参数流式细胞技术比较分析36例MRL患者应用益气补肾颗粒治疗前后CD4+CD8 highT淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞(NK细胞)改变。结果 (1)MRL患者3年持续完全缓解率、生存率分别为75.0%、80.5%,5年持续完全缓解率、生存率分别为63.9%、72.2%。(2)与治疗前比较,治疗后的MRL的CD4+CD8highT淋巴细胞百分率(%)和绝对值显著上升(P<0.01);(3)与治疗前比较,治疗后MRL的NK细胞百分率(%)和绝对值均显著上升(P<0.05,P<0.01)。结论益气补肾颗粒可能通过调节机体自身免疫功能,提高CD4+CD8highT和NK细胞的绝对数量,杀伤或抑制体内残存白血病细胞,延长MRL患者的无病生存期。

表达绿荧光蛋白的多药耐药微小残留白血病细胞的小鼠模型

为了方便研究多药耐药微小残留白血病的病理生理和治疗,采用携带绿荧光蛋白(EGFP)基因标记的小鼠多药耐药白血病细胞系P388/VCRG和DBA小鼠建立一个检测多药耐药微小残留白血病的动物模型。结果显示,P388/VCRG细胞腹腔接种DBA小鼠,白血病的发病率为100%,无自发缓解。P388/VCRG白血病模型小鼠对环磷酰胺(Cy)敏感,有较好的药物剂量生存时间关系,接种细胞的对数与Cy剂量间有良好回归相关关系。白血病诱导缓解后残留白血病细胞在肝、脾、胸腺及骨髓等脏器呈不均匀分布。冰冻切片荧光显微镜下观察EGFP+细胞是检测小鼠体内微小残留白血病细胞最敏感的方法。结论:采用P388/VCRG细胞和DBA小鼠可建立表达EGFP的多药耐药小鼠微小残留白血病模型。

扶正祛邪法治疗微小残留白血病探析

微小残留白血病是急性白血病经治疗获全缓解后体内残留微量白血病细胞的状态,其中医病机是气阴两虚而余毒伏留。以扶正祛邪之品,不仅缓解气阴两虚之证,增强机体的免疫功能,而且对残留白血病细胞也具有杀伤作用。

扶正解毒方治疗微小残留白血病的疗效及其免疫机制的研究

以可移植性L7212白血病小鼠腹腔一次注射环磷酰胺250mg/kg,建立微小残留白血病模型,观察扶正解毒方治疗该模型鼠的疗效,并进行免疫学机制探讨。结果表明,扶正解毒方可延长微小残留白血病小鼠的平均生存期,改善外周血象,调整紊乱的T细胞亚群,促进IL-2、IL-6、IFNγ等多种细胞因子的分泌水平,提高NK细胞的杀伤活性,有较显著的免疫增强和免疫调节作用。

益气解毒活血法联合化疗治疗成人AML微小残留白血病疗效观察

目的采用益气解毒活血法加化疗治疗急性髓细胞白血病并院外随访随访,观察其对成人AML微小残留白血病的影响。方法按数字表法随机分为治疗组和对照组各60例,完全缓解后对照组以DA、HA、HD-AraC、MA交替序贯治疗,治疗组在常规化疗基础上,间歇期加用益气解毒活血中药治疗。结果2组患者组内比较MRD检出率均与CR维持时间呈负相关,随CR维持时间延长而降低,2组患者组间比较MRD检出率,治疗组明显低于对照组,差异有显著性。(P<0.05)。结论益气解毒活血法联合化疗对成人AML微小残留白血病细胞具有良好的抑制其增殖的作用。

加味玉屏风散在微小残留白血病中的临床应用

目的研究微小残留白血病(MRL)患者应用加味玉屏风散的临床治疗效果。方法临床纳入80例微小残留白血病患者,随机分为2组各40例。其中40例患者采用单纯化疗进行治疗作为对照组,另40例患者在上述化疗基础上给予玉屏风散治疗作为观察组。观察2组治疗效果、中医证候积分、免疫功能情况、生活质量情况以及不良反应和复发率等。结果观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗后观察组中医证候积分、NK、Th、Ts、Tc以及Th/Ts均显著优于对照组(P均<0.05),生活质量评估中生理状况、心理状况、环境状况、社会关系以及总体感觉评分均显著高于对照组(P均<0.05)。观察组不良反应发生率及复发率均明显低于对照组(P均<0.05)。结论加味玉屏风散对MRL患者效果显著,可显著增强免疫功能,提高患者生活质量,降低不良反应及复发率。

微小残留白血病检测在AML治疗及预后判断中的意义

急性髓细胞白血病（AML）是较为常见的造血系统恶性克隆性疾病,尤其是成人急性白血病。据国外文献报道,大剂量化疗后完全缓解率约为50%-80%,但由于缓解后复发,仅30%-40%的年轻患者,不及20%的老年患者能达到长期无病生存。

中医药对微小残留白血病的研究进展

近三十年来,随着化疗、特异靶向治疗、造血干细胞技术的不断提高,白血病的治疗效果日益改善,成为国内外研究的热点,然而复发仍是困扰白血病治愈的一个难题。作为微小残留白血病（MRL）是指白血病患者经过治疗达到完全缓解[包括骨髓移植（BMT）治疗]后体内残存少量的白血病细胞的状态（10^3～10^6白血病细胞）。

PCR检测儿童微小残留白血病的研究进展

微小残留白血病(MRD)是指白血病经化疗缓解后在骨髓中仍存在形态上不能检测到的白血病细胞,是白血病复发的主要原因。儿童MRD的检测对判断儿童白血病的预后、制定白血病的治疗方案有重要意义。PCR方法在MRD检测中具有快速、特异、简便、经济和样本量少等特点。本文综述近年以多重PCR初筛白血病靶基因,以荧光定量PCR(FQ-PCR)追踪MRD方面所取得的进展。

六神丸治疗微小残留白血病凋亡机制的实验研究

本研究以可移植性小鼠白血病模型 (L72 12 )为对象 ,腹腔注射环磷酰胺建立微小残留白血病模型 ,观察六神丸对模型鼠的疗效 ,并应用流式细胞仪观察各组动物脾细胞的凋亡情况。结果表明 ,大剂量的六神丸可使模型鼠平均生存期明显延长 ,外周血象改善 ,凋亡细胞明显增多。

微小残留白血病患者免疫功能及益气补肾颗粒对其影响的临床研究

目的:分析微小残留白血病患者细胞免疫功能状态及益气补肾颗粒对细胞免疫功能的影响。方法:采用流式细胞仪分别测定应用益气补肾颗粒治疗前后32例微小残留白血病患者细胞免疫功能状态并分析统计。结果:与对照组相比,微小残留白血病患者淋巴细胞、T细胞、B细胞、NK细胞、Th细胞、非HLA依赖的细胞毒T细胞、γδT及NKT细胞、CD8+CD28-T细胞、CD8-CD28+T细胞、CD45RA细胞、淋巴细胞和CD4+细胞中CD45RO表达均降低,CD8+细胞中CD45RO百分数升高,CD8+细胞和CD56+细胞分泌的颗粒酶增加,穿孔素降低,树突细胞正常。经益气补肾颗粒治疗后NK细胞、CD8+细胞中CD45RA升高,Th1/Th2、Tc1/Tc2平衡有所恢复,γδT、NKT细胞、CD28+细胞、颗粒酶及穿孔素水平无明显改善。结论:微小残留白血病患者免疫功能低下及紊乱,应用益气补肾颗粒治疗后有所恢复。