分光光度法与显微计数法测定微小绿藻生物量的比较研究

使用紫外-可见分光光度计对6株绿藻的培养液进行600-800nm的波长扫描,在685nm处获得一个单纯显著的特征吸收峰.将6株微小绿藻藻液分别稀释成5个梯度,同步进行血球计数板显微计数和紫外-可见分光光度计OD685值测定.稀释藻液的分光光度法拟合曲线R2≥0.990,显微计数法拟合曲线R2≥0.940,OD685计数R2在0.914与0.989之间;同步培养6株绿藻25d,从第6d开始,每天650-700nm扫描藻液测量OD,确认吸收峰是否会发生偏移,并同步测定藻液细胞浓度和藻液OD685值,比较拟合结果.纯种验证试验中,单纯特征吸收峰均在685nm处再现.OD685显微计数散点拟合R2在0.780与0.970之间,误差较大的2个藻株是蹄形藻和针形纤维藻;将6株藻培养20d的藻液混合,并稀释成浓度梯度,测量OD685与显微计数,混合藻液OD685计数R2=0.972.混合藻种验证试验显示出OD685计数对纯种和混合藻种都有着良好的精确度.试验证明,微小绿藻在600-800nm波段的最大特征吸收峰稳定地发生在685nm处.OD685值能够准确反映藻液中纯种或混合微小绿藻的生物量或生物量的变化,精确度和稳定性高于血球计数板显微计数.