甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白信使核糖核酸用于诊断肝细胞癌

目的:探讨联合检测血清肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)异质体(AFP-L3)和甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)诊断肝细胞癌及评估肝癌预后的价值。方法:对2005年4月—2005年7月收治的82例肝细胞癌(HCC)、11例慢性乙型肝炎肝硬化合并门脉高压和19例肝脏良性肿瘤患者,应用酶联吸附法及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)联合检测AFP-L3和AFPmRNA水平,对比其阳性率。结果:AFP-L3和AFPmRNA联合检测阳性率可达87.6%,较单独检测AFP、AFP-L3、AFP-mRNA的阳性率(分别为69.5%、81.7%、36.6%)高,差异有统计学意义;术前、术后联合检测AFP-L3和AFPmRNA均阳性患者的术后3年生存率较低。结论:术前联合检测APF-L3和AFPmRNA可提高HCC,尤其是AFP阴性HCC的诊断率,而术后联合检测对评估HCC的预后有一定的指导意义。

甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白信使核糖核酸用于诊断肝细胞癌

目的:探讨联合检测2种血清肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)异质体(AFP-L3)和甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)诊断肝细胞癌价值及评估肝癌预后的意义。方法:对2005年4-7月收治的82例肝细胞癌(HCC)、11例慢性乙型肝炎肝硬化合并门脉高压和19例肝脏良性肿瘤患者应用酶联吸附法及荧光定量PCR联合检测AFP-L3和AFPmRNA水平,对比其阳性率;并对术后1个月的肝癌患者检测AFP-L3和AFPmRNA水平,统计作出生存曲线。结果:术前不同肿瘤指标的检测结果:AFP-L3联合AFPmRNA检测阳性率为64.3%,明显高于AFP、AFP-mRNA单独检测的阳性率(50.9%、40.2%),差异均有统计学意义(P<0.05);术前、术后AFP-L3联合AFPmRNA检测均阳性的患者术后3年生存率较低。结论:术前联合检测APF-L3和AFPmRNA两项指标可提高HCC、尤其是AFP阴性HCC的诊断率,而术后联合检测又对评估HCC的预后有一定的指导意义。

甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)的检测方法及其临床意义

目的 探讨AFPmRNA对诊断原发性肝癌的意义 ,并评估原发性肝癌的临床分期 ,预测转移倾向、预后和复发以及治疗。方法 建立并改进巢式逆转录多聚酶链反应 (nestedRT -PCR)检测外周静脉血肝癌细胞。结果 nestedRT -PCR在 1ml血中含有≥ 5个肝癌细胞时即可检测到AFPmRNA。 2 2例原发性肝癌中 18例血液标本检测到AFPmRNA ,而对照组中均未检测到AFPmRNA。AFPmRNA的检出率与肝癌分期 (TNM )、血清AFP浓度、肝内转移、门静脉癌栓、肿瘤大小及远处转移有明显联系 (P <0 .0 1)。结论 nestedRT -PCR是一个稳定而又敏感的检测方法 ,AFPmRNA可作为定性诊断原发性肝癌的血液学指标 ,也可作为肝癌细胞转移的标志 ,并可判断肝癌临床分期、转移倾向。

甲胎蛋白信使核糖核酸与原发性肝癌(文献综述)

如何预测或预防肝癌的复发转移是当前的研究热点。目前应用 RT- PCR技术来检测肝癌患者特异性的甲胎蛋白信使核糖核酸 (AFP m RNA) ,该技术对肝细胞癌微小转移、复发的早期发现。

外周血甲胎蛋白mRNA和白蛋白mRNA在评估肝癌微小转移中的比较研究

目的 探讨肝病患者外周血甲胎蛋白mRNA(AFPmRNA)和白蛋白mRNA(ALBmRNA) ,作为肝癌微小转移标志物的特异性。方法 提取患者和健康志愿者的外周血单个核细胞总RNA ,进行RT PCR ,扩增产物再进行Southern杂交。结果 原发性肝癌 (HCC)组外周血AFPmRNA的检出率为 4 1.4 % ,对照组为 0 % ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ;HCC组外周血ALBmRNA的检出率为4 4 .8% ,对照组为 2 9.2 % ,二者差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 作为肝癌微小转移的标志物 。

高剂量核糖核酸治疗原发性肝癌的临床观察

目的探讨核糖核酸对原发性肝癌的临床治疗效果，改善患者的生存质量。方法选取2014年8月～2015年6月我院原发性肝癌患者30例，将其随机分为治疗组和对照组，治疗组15例给予高剂量核糖核酸并配合保肝对症治疗．对照组15例单用保肝对症治疗。分别在治疗前和治疗后10d检测丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清白蛋白、甲胎蛋白、总胆红素等指标；并统计有无肝区痛、腹胀、乏力、消瘦、发热、腹泻等临床表现。结果治疗后，治疗组ALT、AST、TBiL、ALB等肝功能生化指标、AFP值较对照组明显改善（P〈0．05），临床症状也有不同程度的缓解（P〈0．05）。结论高剂量核糖核酸经静脉给药可显著改善原发性肝癌患者的生存质量，临床效果显著，值得借鉴。

肝癌组织中环氧化酶-2表达与微小转移的关系研究

目的探讨肝癌组织中环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,Cox-2)的表达与肝癌微小转移之间的关系。方法应用免疫组织化学生物素化过氧化物酶复合物(SABC)法,检测44例原发性肝癌手术切除肝癌组织中Cox-2表达;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测原发性肝癌患者外周血中AFP-mRNA。结果肝癌组织中Cox-2表达阳性率为41.6%(18/44),外周血甲胎蛋白信使核糖核酸(AFP-mRNA)阳性率25%(11/44),其中Cox-2表达阳性者中,AFP-mRNA阳性者为9例,占50%(9/18),而Cox-2表达阴性者中,AFP-mRNA阳性者为2例,占7.7%(2/26),两者有显著性差异。结论肝癌组织中Cox-2表达与肝癌微小转移有相关性。

原发性肝细胞癌微小转移研究近况

原发性肝癌预后恶劣，与其容易全身转移及术后复发率高有关。早期寻找肝癌患者周围血是否有肝癌细胞、发现肝外微小转移对指导治疗、判断预后非常重要。本文综述细胞学、免疫组织化学和分子生物学在寻找肝癌患者外周血癌细胞方面的进展，特别是用PCR检测外周血甲胎蛋白mRNA和白蛋白mRNA对发现肝癌细胞的微小转移有着重要的作用。

血液甲胎蛋白mRNA对肝癌术后复发转移的影响：3年回顾性研究

目的 探讨血液肝癌细胞相关甲胎蛋白（AFP） mRNA阳性与肝癌患者术后肿瘤复发或转移的关系.方法 应用巢式RT-PCR检测62例原发性肝癌患者术前1天周围静脉血液中AFPmRNA,术后随访3年.结果 24例术前血液检测AFPmRNA阳性,38例患者术前AFPmRNA呈阴性.术前血AFPmRNA阳性的患者术后1、2、3年肿瘤复发率分别为58.3％ （14/24）、75.0％（18/24）、100.0％ （24/24）;而术前血AFPmRNA阴性的患者术后1、2、3年肿瘤复发率则分别为23.6％ （10/38）、42.1％（16/38）、68.4％（26/38）,两者比较复发率差异具有统计学意义（P＜0.01）.术前血AFPmRNA阳性的患者术后3年有8.3％ （2/24）发生肺转移;而阴性患者术后3年内无一发生肺或其他远处转移（0.0％,0/38;P＜0.01）.结论 术前血液AFPmRNA阳性的肝癌患者较AFPmRNA阴性的肝癌患者术后更容易产生复发或远处转移.

外周血甲胎蛋白mRNA定量与裸鼠肝癌术后复发转移的关系

目的 研究外周血中胎蛋白信使核糖核酸(AFP mRNA)水平与原发性肝癌根治性切除术后复发转移的关系。方法 裸鼠肝内原位接种裸鼠人肝癌转移模型LCI-D20肿瘤组织,接种后第10天切除移植瘤,切除后第2天用不同剂量干扰素α-1b(IFNα-1b )治疗,治疗35 d后取外周血1 ml,用TaqMan实时定量逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测AFP mRNA水平,同时观察肿瘤复发转移情况。结果 对照组裸鼠术后肝内复发率和肺转移率均为100%(12/12),外周血AFP mRNA阳性率为100%。小剂量IFNα-1b治疗组肝内复发率62.5%(5/8),复发瘤体积小于对照组(25 mm^3±2mm^3对1143mm^3±3mm^3,t=9.27,P＜0.01),无肺转移,外周血AFP mRNA阳性率87.5%(7/8),水平低于对照组[(85±6)copies/μg对(955±2)copies/μg,t＝4.33,P＜0.01)。大剂量IFNα-1b治疗组肝内复发率为12.5%(1/8),体积仅0.5mm~,无肺转移,外周血AFP mRNA均阴性(x^2=11.67,P＜0.01)。结论 外周血AFP mRNA可作反映肝癌复发转移的敏感指标,TaqMan实时定量RT-PCR技术检测循环血肝癌细胞灵敏、简便、精确度高。

外周血AFP mRNA表达与大鼠肝细胞癌微转移的关系

【目的】探讨肝细胞癌外周血AFP mRNA表达水平与早期微转移的关系。【方法】用0．2％二己基亚硝胺（DEN）诱导Wistar大鼠建立肝癌模型，提取外周血总RNA，经转录后，采用巢式反转录聚合酶链反应（巢氏RT-PCR）技术检测大鼠AFP mRNA水平。【结果】20只对照组大鼠外周血标本中未检测到AFP mRNA，而在79只存活的实验组大鼠中，肝硬化组AFP mRNA检出率为6．3％（1／16），未转移肝癌组AFP mRNA检出率为42．3％（22／52），伴转移肝癌组AFP mRNA检出率为81.8％（9／11）。【结论】以AFP mRNA为标志物，通过巢氏RT—PCR来检测肝细胞癌外周血微转移是可行的，有助于提高肝细胞癌外周血微转移检测的敏感性和特异性。早期检测外周血微转移可以提高预测肝细胞癌复发、转移的能力。

微小RNA与肝癌肝移植术后肿瘤复发的研究进展

肝细胞癌(肝癌)是全球最常见的恶性肿瘤之一,肝移植是失去根治性切除机会或伴有失代偿性肝硬化肝癌患者唯一有效的治疗方法。然而肝癌肝移植术后肿瘤复发依然严重影响了患者的预后,这也是近年来肝移植领域的研究热点。微小核糖核酸(miRNA)是一类真核细胞中广泛存在长度约21~23 nt的非编码RNA,目前的研究认为miRNA与肝癌肝移植术后肿瘤复发密切相关。联合应用检测miRNA与米兰标准有可能进一步提高肝移植受者的无瘤生存期。miRNA具有调节肿瘤细胞生物学行为的功能,可能成为肝移植术后肿瘤复发的潜在治疗靶点。本文总结了近年来miRNA与肝癌肝移植术后肿瘤复发的相关研究,为肝移植临床医师及科研工作者提供了新的思路。

7种miRNAs联合检测用于原发性肝癌的诊断价值

目的:分析7种微小核糖核酸(miRNAs)联合检测用于原发性肝癌诊断的临床应用价值。方法:采用荧光PCR技术检测原发性肝癌组、转移性肝癌组、肝硬化组共131例患者的7种miRNAs的表达水平,比较7种miRNAs在3组患者中的阳性率;分析7种miRNAs在不同病理类型肝癌中的诊断价值;比较7种miRNAs在甲胎蛋白(AFP)阴性以及AFP和异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)均阴性的肝细胞癌(HCC)患者中的阳性率;分析AFP、7种miRNA以及AFP+7种miRNAs用于HCC诊断的敏感度、特异度,并运用ROC曲线评价三者的诊断效能。结果:原发性肝癌组患者7种miRNAs阳性率显著高于转移性肝癌组(χ2=13.388,P<0.01)和肝硬化组(χ2=30.827,P<0.01);在不同细胞类型的肝癌中,HCC组患者7种miRNAs的阳性率显著高于胆管细胞癌(ICC)组(χ2=6.805,P<0.01);AFP、PIVKA-Ⅱ以及7种miRNAs在HCC组患者中阳性率分别为60.71%、64.28%和75.00%;AFP阴性以及AFP和PIVKA-Ⅱ均阴性的HCC患者中,7种miRNAs联合检测阳性率分别为81.8%和80.0%;AFP、7种miRNAs以及AFP+7种miRNAs联合检测对于HCC患者诊断灵敏度分别为60.71%、75.00%和89.29%,特异度分别为81.33%、85.33%和78.67%;AFP、7种miRNAs以及AFP+7种miRNAs联合用于HCC诊断的AUC(ROC曲线下面积)分别为0.708、0.839和0.864。结论:7种miRNAs在HCC患者中具有较高的阳性率,在AFP阴性的肝癌中也具有较高的阳性率;AFP+7种miRNAs联合检测可以显著提高HCC诊断的阳性率。

肝细胞癌在血中微小转移的检测

目的 肝细胞癌患者术后复发常是术前不能检出微转移灶或术中瘤细胞释放入血之故。建立早期检出肝细胞癌 (HCC)血中微小转移的方法并评价其临床意义。方法 采用巢式RT PCR检测肝细胞特异白蛋白 (ALB)mRNA和甲胎蛋白 (AFP)mRNA在HCC患者外周血有核细胞成分及组织标本中的表达情况。并以肝癌细胞系HepG2 、SMMC772 1,乳腺癌细胞MCF 7作为阳性、阴性对照。结果 在肝组织 ,无论是癌、癌旁还是正常组织 ,ALBmRNA的表达均为阳性 (8/8) ;而AFPmRNA在癌组织7/8例表达 ,癌旁 5 /8例表达。外周血表达的情况为 :同一组标本ALBmRNA的阳性率为 75 .6 % (34 /4 5 ,P <0 .0 1) ,AFPmRNA的阳性率为 5 7.8% (2 6 /4 5 ,P <0 .0 1)。在有肝外转移和无肝外转移分组中 ,ALBmRNA和AFPmRNA的表达分别为 10 0 .0 % ,5 4.2 %和 90 .5 % ,2 9.2 %。结论 在HCC患者外周血有核细胞成分中检测ALBmRNA和AFPmRNA的表达 ,是预测转移、复发的简捷手段 ,若ALB与AFP二者联合使用 。

外周血AFPmRNA、h-TERTmRNA检测对肝细胞肝癌患者预后的意义

目的检测肝细胞肝癌(HCC)患者外周血甲胎蛋白信使核糖核酸(AFPmRNA)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探索其在HCC预后中的应用价值。方法FQ-PCR检测60例HCC患者外周血中AFPmR-NA、hTERTmRNA的表达量,并与对照组进行比较。结果HCC患者AFPmRNA、hTERTmRNA的表达量及阳性率均高于对照组(P<0.01)。术后随着时间的推移,其表达数量相应减少,阳性率也明显降低,以1周后下降最为显著(P<0.05)。在肿瘤标志物持续表达阳性的患者中,其术后复发率也明显高于阴性者(P<0.01)。结论外周血中定量检测AFPmRNA、hTERTmRNA的表达可以及时发现患者术后HCC的微转移,预测肿瘤的复发倾向,为术后的合理治疗提供依据。

AFP-mRNA在原发性肝癌患者外周血的检测及其意义

目的 探讨原发性肝癌患者外周血中甲胎蛋白信使核糖核酸 (AFP mRNA)的表达情况及其与肝癌血行播散的关系和临床应用价值。方法 采用巢式逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法 ,对肝癌细胞株HepG2细胞样本 ,4 0例原发性肝癌 ,1 2例慢性肝病 ,5例继发性肝癌患者和 7例健康人各 5ml外周血样本检测AFP mRNA。结果 AFP mRNA在 0 .5× 1 0 1 mlHepG2细胞可检出 ,在肝癌组阳性率为 5 2 .5 % ,其他各组均为阴性。肝癌患者的AFP mR NA表达与肝内播散情况、临床分期、远处转移情况具有相关性 (P <0 .0 5 )。结论 采用巢式RT PCR技术检测肝癌患者外周血AFP mRNA的表达 ,具有一定的特异性和灵敏性 。

联合检测外周血中AFPmRNA和AFP在原发性肝癌诊断中的临床意义

目的采用巢式RT-PCR法检测外周血中AFPmRNA情况。探讨外周血中AFPmRNA和AFP在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)联合诊断及在高危人群普查中的作用,为HCC诊断及普查提供一种新的敏感、特异、简单快捷的方法。方法采用巢式RT-PCR法对25例HCC患者,慢性肝炎、急性肝炎、肝硬化、健康人各30例以及肝外恶性肿瘤10例的外周血AFPmRNA情况进行检测。同时检测各组相应的AFP浓度和HCC患者血清HBsAg表达情况。结果(1)外周血AFPmRNA检查:25例HCC患者中19例存在AFPmRNA,阳性率为76%,其余各组均未检出AFPmRNA,特异性100%;(2)血清AFP水平检测:25例HCC患者中有16例存在AFP阳性,阳性率64%,其余各组有5例检出AFP阳性。(3)HCC血清HBsAg检测:HBsAg阳性的16例HCC患者中15例检出AFPmRNA,而9例HBsAg阴性的HCC患者中仅4例检测出AFPmRNA。HBsAg与外周血中AFPmRNA阳性检出率有相关性。结论外周血AFPmR-NA联合血清AFP检测,可以有效提高HCC诊断,为联合检测诊断HCC提供了有效的途径;可以用于HCC高危人群的普查及筛选。

肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA定量检测的临床意义

目的:研究肝细胞肝癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量的变化,分析其作为微转移标记物的可行性及与复发转移的关系.方法:使用实时荧光定量RT-PCR检测64例肝细胞癌患者手术前后外周血AFP mRNA表达量,并进行平均6mo以上的随访;同时以8例肝硬化患者、4例肝增生患者、8例肝血管瘤患者和10例健康志愿者作为对照组,对比检测其外周血单核细胞AFP mRNA的表达量.结果:复发34例.HCC组的术前AFP mRNA表达量明显高于对照组.术前外周血AFP mRNA相对HCC的灵敏度为85.9%,特异性为90.3%,准确率为87.4%.HCC患者术后外周血AFP mRNA表达量明显高于术前.HCC组外周血术前、术后AFP mRNA水平表达量与术后复发转移有明显相关性,与TNM分期、血管癌栓或侵犯有相关性,但与术时肿瘤数目、癌细胞分化程度、包膜完整性均与血清AFP浓度无相关.术后HCC组外周血AFP mRNA表达量与肿瘤大小有相关性.结论:实时荧光定量RT-PCR法检测HCC患者外周血AFP mRNA表达量有很高的敏感性和特异性,可以反映HCC患者血中是否存在肝癌细胞.手术可促进部分HCC细胞脱落入血.监测外周血AFP mRNA水平对术后早期复发转移有预测价值.

联合检测血AFPmRNA及AFP判断肝癌切除术后预后的意义

目的探讨联合检测血液AFPmRNA及AFP对判断肝癌（HCC）术后复发或转移的临床意义．方法应用巢式RT-PCA检测34例HCC患者术后2，4，6wk时周围静脉血中AFPmRNA及AFP的变化，并随访1a结果在34例手术切除的HCC患者中，13例术后6wk时周围静脉血中AFPmRNA仍呈阳性，21例患者在术后6wk内血液AFP仍持续阳性共有13例在术后1a内产生了复发或转移性病灶（38．2％），其中7例为血AFPmRNA及AFP均为（＋）的HCC患者。

围手术期检测肝细胞癌病人外周血AFP mRNA的临床意义

目的 检测围手术期肝细胞癌病人外周血AFPmRNA ,通过随访评估其预后价值。方法 通过巢式RT PCR的方法 ,在围手术期检测了 4 5例肝细胞癌病人外周血中AFPmRNA的表达 ,并进行了 1～ 2 0个月不等的随访。结果 在 4 5例肝细胞癌病人外周血中 ,AFPmRNA的检出率分别是术前 5 1.1% ,术后 7d 2 4 .4 % ,术后 2 8d 2 2 .2 %。多因素统计分析提示 ,术后 2 8d外周血检出AFPmRNA是提示病人复发的独立预后因素。结论 采用巢式RT PCR的方法检测肝细胞癌病人术后 2