miR-223对银屑病细胞增殖、周期、凋亡和炎症反应的影响及机制

目的探讨微小RNA-223(miR-223)表达对银屑病细胞增殖、周期、凋亡和炎症反应的影响及机制。方法体外培养人永生化角质形成细胞HaCaT,将细胞分为对照组、模型组、模型+miR-NC组、模型+miR-223 inhibitor组,除对照组外,其余各组均采用M5法诱导HaCaT细胞建立银屑病细胞模型。采用RT-qPCR法检测各组细胞miR-223表达,CCK-8法、流式细胞术分别检测各组细胞增殖活性、细胞周期及凋亡情况,ELISA法检测上清液中IL-6、IL-1β和TGF-β1,Western blotting法检测第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组细胞miR-223表达升高(P<0.05),48、72、96 h时OD值、细胞周期S期占比增高(P均<0.05),细胞周期G0/G1占比和凋亡率降低(P均<0.05),IL-6、IL-1β和TGF-β1水平明显增高(P均<0.05),PTEN蛋白表达降低(P<0.05)。与模型+miR-NC组比较,模型+miR-223 inhibitor组miR-223表达明显下降(P<0.05),48、72、96 h时OD值、细胞周期S期占比明显降低(P均<0.05),细胞周期G0/G1占比和凋亡率明显升高(P均<0.05),IL-6、IL-1β和TGF-β1水平明显降低(P均<0.05),PTEN蛋白表达升高(P<0.05)。模型组与模型+miR-NC组比较,上述各指标差异无统计学意义(P均>0.05)。结论miR-223在银屑病细胞中表达增高,下调miR-223水平能抑制银屑病细胞增殖及炎症反应,将细胞周期阻滞于G0/G1期,促进细胞凋亡;其机制可能与其调控PTEN有关。

miR-223促进小鼠胚胎成纤维细胞复制性衰老

微小RNA(miRNAs)作为强大的基因表达调控子,广泛参与多种生命过程,在细胞衰老进程中的作用也日益受到关注。miR-223是一个典型的抑癌基因,可显著抑制细胞增殖能力。miR-223与阿尔茨海默症、心血管疾病以及类风湿性关节炎等衰老相关疾病的发生发展密切相关。尽管如此,miR-223在细胞衰老进程中的作用及其分子机制尚未见报道。本研究通过连续传代建立了小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的复制性衰老模型,并利用荧光定量qRT-PCR检测发现,miR-223在衰老MEF细胞中的表达水平显著上调。随后,通过转染miR-223模拟物Agomir-223在MEF细胞中过表达miR-223。结果显示,过表达miR-223可显著促进MEF细胞的衰老表型并抑制其增殖能力,而抑制miR-223的表达可延缓MEF细胞的复制性衰老进程。进一步利用生物信息学方法预测,获得多个miR-223的候选衰老相关靶基因,包括Rasa1、Ddit4和Smad1等。然而,双萤光素酶报告系统结果显示,miR-223并不显著影响其萤光强度,表明它们很可能并不是miR-223的下游靶基因。综上所述,miR-223可显著促进MEF细胞复制性衰老,然而其调节细胞衰老进程的分子机制依然有待深入研究。