调心安神针法对缺血再灌注心律失常大鼠心肌组织微小RNA的影响

目的观察调心安神针法对缺血再灌注心律失常(RA)大鼠心肌组织微小RNA(miRNA1、miRNA133a)表达的影响以了解调心安神针法治疗缺血再灌注心律失常的作用机制。方法40只大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组及胺碘酮组,针刺组施以调心安神针刺法预处理7 d(取穴:灵台、神道、双侧内关、百会)。采用结扎/松解左冠状动脉前降支的方法制作RA模型大鼠。造模完毕后,酶联免疫法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,苏木精-伊红染色观察心肌组织,RT-PCR法检测缺血区中央部位心内膜心肌miRNA1、miRNA133a的表达水平。结果针刺组、胺碘酮组CK-MB和LDH的含量较模型组明显降低(P<0.01)。针刺组、胺碘酮组miRNA1表达均较模型组明显降低(P<0.01),且胺碘酮组低于针刺组(P<0.01);针刺组和胺碘酮组miRNA133a表达均较模型组明显增加(P<0.05),针刺组与胺磺酮组差异无统计学意义(P>0.05)。结论调心安神针法预处理和注射胺碘酮均能改善心肌损伤,减少心律失常的发生,其机制可能与通过下调缺血再灌注心律失常大鼠心肌组织miRNA1表达,上调miRNA133a的表达有关。

微小RNA:一种全新的转录后基因调控小RNA--解读2024年诺贝尔生理学或医学奖

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA),它以比较稳定和独特的形式存在于哺乳动物、昆虫和植物体内,是参与各种病理生理过程的基因表达的重要调控因子。miRNA的发现对于人类的生命健康,具有深远意义。本文主要从miRNA的生物合成、作用机制、功能、应用前景、临床进展与挑战等方面对miRNA作一概述。同时,探讨miRNA与内源性小分子干扰RNA的异同以及miRNA疗法的优势。随着科学技术的进步,基于miRNA疗法的应用和创新药物开发将继续为人类健康和福祉作出贡献。

微小RNA-23靶向线粒体分裂蛋白1调控炎症反应和氧化应激保护脓毒症肾小管上皮细胞损伤

目的探讨微小RNA-23(microRNA-23,miR-23)和线粒体分裂蛋白1(fission protein 1,FIS1)在脓毒症肾小管上皮细胞中的作用关系以及miR-23靶向FIS1对细胞炎症反应和氧化应激的调控。方法体外培养人肾小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2),用脂多糖(lipopolysaccha-ride,LPS)诱导建立脓毒症模型;利用双荧光素酶报告基因验证miR-23和FIS1的相互作用。将HK-2细胞采用随机数字表法随机分组,用miR-23的模拟物/抑制物和FIS1的真核表达载体/小干扰RNA单独或联合处理,细胞计数试剂检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒检测细胞MDA水平,酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)1β、IL-6和IL-10水平。结果LPS诱导的HK-2细胞miR-23 mRNA表达量为对照组的(0.60±0.12)倍(P<0.05),FIS1 mRNA表达量为对照组的(2.16±0.21)倍(P<0.05),FISI蛋白表达水平是对照组的(2.69±0.28)倍(P<0.05)。miR-23可以与FIS1的3'-UTR区形成互补结合,负向调控FIS1。miR-23 mimic组的TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.021±0.003)、(0.0310±0.007)和(0.017±0.006)ng/ml,FIS1 siRNA组的TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.015±0.004)、(0.043±0.007)和(0.020±0.008)ng/ml,均低于空白对照组(P<0.05),两组的IL-10分别为(0.325±0.011)和(0.376±0.018)ng/ml,高于空白对照组(P<0.05)。miR-23 inhibitor组的TNF-α和IL-6分别为(0.117±0.015)和(0.096±0.007)ng/ml,pcD-NA3.1-FIS1组TNF-α和IL-6分别为(0.168±0.024)和(0.147±0.030)ng/ml,均高于空白对照组(P均<0.05),miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组的IL-10分别为(0.149±0.012)和(0.121±0.024)ng/ml,均低于空白对照组(P<0.05)。miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.060±0.010)、(0.084±0.009)和(0.048±0.008)ng/ml,均高于miR-23 mimic组的(0.021±0.003)、(0.0310±0.007)和(0.017±0.006)ng/ml(P<0.05),IL-10为(0.149±0.025)ng/ml,低于miR-23 mimic组的(0.325±0.011)ng/ml(P<0.05)。miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组TNF-α、IL-1、IL-6分别为(0.049±0.007)、(0.056±0.008)和(0.037±0.006)ng/ml,均低于miR-23 inhibitor组的(0.117±0.015)、(0.085±0.015)和(0.096±0.007)ng/ml(P<0.05),IL-10为(0.325±0.027)ng/ml,高于miR-23 inhibitor组的(0.149±0.012)ng/ml(P<0.05)。MiR-23 mimic组和FIS1 siRNA组ROS分别为(1328±84)和(1300±70),均低于空白对照组(P<0.05),miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组ROS分别为(1825±80)和(1930±105),均高于空白对照组(P<0.05)。miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组ROS为(1538±96),高于miR-23 mimic组的(1328±84)(P<0.05);miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组ROS为(1490±70),低于miR-23 inhibitor组的(1825±80)(P<0.05)。MiR-23 mimic组和FIS1 siRNA组MDA分别为(17.34±2.18)μmol/L和(12.05±2.47)μmol/L,均低于空白对照组(P<0.05);miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组MDA分别为(52.20±7.48)μmol/L和(46.25±6.50)μmol/L,均高于空白对照组(P<0.05);miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组MDA为(35.44±3.03)μmol/L,高于miR-23 mimic组的(17.34±2.18)μmol/L(P<0.05);miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组MDA为(40.26±4.87)μmol/L,低于miR-23 inhibitor组的(52.20±7.48)μmol/L(P<0.05)。miR-23 mimic组和FIS1 siRNA组细胞增殖率分别为(183±14)%和(171±11)%,均高于空白对照组(P<0.05),两组凋亡率分别为(7.89±1.21)%和(11.22±2.98)%,均低于空白对照组(P<0.05);miR-23 inhibitor组和pcDNA3.1-FIS1组细胞增殖率分别为(134±10)%和(127±9)%,均低于空白对照组(P<0.05),凋亡率分别为(23.22±2.54)%和(28.15±3.12)%,均高于空白对照组(P<0.05);miR-23 mimic+pcDNA3.1-FIS1组细胞增殖率为(148±12)%,低于miR-23 mimic组的(183±14)%(P<0.05),凋亡率为(17.02±2.29)%,高于miR-23 mimic组的(7.89±1.21)%(P<0.05);miR-23 inhibitor+FIS1 siRNA组细胞增殖率为(160±8)%,高于miR-23 inhibitor组的(134±10)%(P<0.05),凋亡率为(14.27±2.00)%,低于miR-23 inhibitor组的(23.22±2.54)%(P<0.05)。结论LPS诱导的肾小管上皮细胞miR-23和FIS1异常表达与细胞的炎症反应和氧化应激过程有关。miR-23通过靶向负调控FIS1,减轻HK-2细胞的炎症反应和氧化应激水平,对脓毒症肾小管上皮细胞损伤起保护作用。

微小RNA-122在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌诊断及预后中的意义

目的探讨血清微小RNA(microRNA,miR)-122在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(hepatitis B virus associated hepatocellular carcinoma,HBV-HCC)诊断和预后中的意义。方法以2019年3月至2020年9月在汉中市中心医院就诊的126慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者、128例HBV-HCC患者作为研究对象,以128例健康人作为健康对照组。实时荧光定量-PCR法测定血清miR-122水平,评价miR-122联合甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、维生素K缺乏/拮抗剂II诱导的蛋白质(protein induced by vitamin K absence/antagonist II,PIVKA-II)诊断HBV-HCC的临床价值及miR-122在HBV-HCC预后中的意义。结果相较于健康对照组,CHB组和HBV-HCC组丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、PIVKA-II水平显著升高(P均<0.05),且HBV-HCC组较CHB组升高更明显(P<0.05)。另外,HBV-HCC组AFP水平高于其余2组(P均<0.05)。MiR-122在健康对照组、CHB组和HBV-HCC组的相对表达水平逐渐降低(P均<0.05)。经受试者工作特征曲线分析,miR122对HBV-HCC具有较高的诊断价值,尤其是联合AFP、PIVKA-II时诊断价值最高。以miR-122中位值分层,miR-122低表达组患者中肝纤维化患者比例明显更高,并且HBV DNA水平更高(P均<0.05)。此外,存在肝纤维化的HBV-HCC患者miR122水平显著低于未存在肝纤维化的HBV-HCC患者(P<0.05)。随访期间,33例HBV-HCC患者死亡,3例失访。肝癌巴塞罗那分期B期、不完整肿瘤包膜、手术切缘>1 cm、miR-122低表达是影响HCC患者死亡的独立性因素(P均<0.05)。HCC患者中miR-122高表达组(≥0.521)总生存时间[33.3(17.5,46.8)个月]显著长于miR-122低表达组[15.0(6.5,32.4)个月](χ^(2)=49.349,P=0.001)。结论MiR-122可能参与HBV相关肝炎向HCC的进展,并可能作为HBV-HCC和预后的生物标志物。

长链非编码RNA GC1靶向微小RNA-551b-3p抑制食管癌的作用及分子机制研究

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)鸟苷酸环化酶1(GC1)对食管癌的影响,并探讨其靶向微小RNA-551b-3p(miR-551b-3p)的分子机制。方法建立食管癌荷瘤裸小鼠模型,随机分为GC1、miR-551b-3p上、下调组及其对应对照组与模型组共9组,每组8只。末次给药次日处死裸小鼠,称取瘤体质量,计算抑瘤率;取肿瘤组织检测LncRNA GC1、miR-551b-3p基因表达水平和细胞周期因子(CyclinD1)、p21、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x(Bax)基因与蛋白表达水平;观察肿瘤组织病理改变;采用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率;采用双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA GC1与miR-551b-3p的调控关系。另取人食管癌细胞株Eca109分为9组,每组3个复孔,其中基因干扰组命名同上,另设置空白组,培养48h后观察细胞LncRNA GC1、miR-551b-3p基因表达水平、形态学改变、凋亡率、CyclinD1、p21、Bcl-2、Bax基因与蛋白表达水平。结果动物实验:与模型组和相应对照组比较,GC1上调组与miR-551b-3p下调组瘤体质量、CyclinD1和Bcl-2基因与蛋白表达水平均上升,抑瘤率、细胞凋亡率、miR-551b-3p基因、p21和Bax基因与蛋白表达水平均下降;GC1下调组与miR-551b-3p上调组瘤体质量、CyclinD1和Bcl-2基因与蛋白表达水平均下降,抑瘤率和细胞凋亡率、miR-551b-3p基因、p21和Bax基因与蛋白表达水平均上升;GC1上调组LncRNA GC1基因表达水平上升,GC1下调组LncRNA GC1基因表达水平下降(P<0.05)。与转染野生型GC1的腺病毒载体相比,转染突变型GC1的腺病毒载体的miR-551b-3p荧光素酶相对活性上升(P<0.05)。细胞实验:LncRNA GC1和miR-551b-3p基因表达水平、细胞形态学改变与凋亡率、CyclinD1、p21、Bcl-2、Bax基因与蛋白表达水平变化趋势均与动物实验相同。结论下调LncRNA GC1、上调miR-551b-3p表达水平均可抑制食管癌进展,且下调LncRNA GC1可靶向上调miR-551b-3p,并降低CyclinD1和Bcl-2活性、上升p21和Bax活性。

基于GEO数据库分析脓毒症相关性死亡的潜在差异表达基因和微小RNAs

目的基于基因表达数据库(GEO)运用生物信息学筛选与脓毒症相关性死亡相关的潜在差异表达基因和微小RNAs(miRNAs)。方法从GEO数据库下载人类血液样本基因表达谱芯片数据集GSE48080和GSE54514,选择两个时点(诊断脓毒症时、脓毒症病程中),使用GEO2R在线工具对脓毒症存活患者和非存活患者进行差异表达基因(DEGs)筛选。通过基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,研究脓毒症相关性死亡DEGs涉及的病理生理过程和潜在信号通路。使用STRING在线工具构建DEGs蛋白-蛋白相互作用(PPI),使用Cytoscape软件构建PPI网络拓扑,使用CytoHubba工具筛选枢纽(Hub)基因。使用NetworkAnalyst构建Hub基因的目标miRNAs,使用RT-qPCR验证本院脓毒症存活患者和非存活患者相关基因表达变化。结果在脓毒症病程中,脓毒症存活患者和非存活患者基因表达呈现异质性,共筛选出15个DEGs。KEGG通路富集分析显示,金黄色葡萄球菌感染、NOD样受体信号通路、硫代谢和集管酸分泌四个途径存在显著富集。PPI和CytoHubba分析筛选出10个Hub基因(SLC4A1、EPB42、LTF、LCN2、DEFA4、HBM、HBG1、GMPR、CAMP、OLFM4)。NetworkAnalyst分析预测了10个关键miRNAs。RT-qPCR验证结果显示,5个Hub基因(SLC4A1、EPB42、LCN2、DEFA4、OLFM4)与上述分析中的趋势一致。结论基于GEO数据库的生物信息学分析,脓毒症存活患者和非存活患者在脓毒症病程中存在差异表达基因,为探索脓毒症相关性死亡的生物标志物提供了数据支持。

微小RNA在肾组织纤维化中作用的研究进展

糖尿病、高血压、肾小球肾炎以及其它肾脏疾病常常发展为慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)。预计到2030年,慢性肾病引发肾脏功能衰竭和心脏并发症将成为全球第13大死因,而到2040年将上升到第5位死因[1]。CKD的组织病理学特点,一个是持续性肾组织炎症反应,另一个是以过多细胞外基质沉积为特征的肾小管间质和肾小球纤维化[2]。

左西孟旦治疗慢性心力衰竭的临床疗效及对神经激素、左室重构、微小RNA的影响

目的:探讨左西孟旦治疗慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效及对患者神经激素、左室重构、微小RNA的影响。方法:选取2022年1~12月期间于某院治疗的120例CHF患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组60例。对照组患者给予常规治疗,观察组患者在对照组治疗基础上加用左西孟旦注射液,共治疗2周。比较两组患者神经激素[醛固酮(ALD)、去甲肾上腺素(NE)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)]、左室重构指标[平均室壁应力(MWS)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室质量指数(LVMI)、左房容积指数(LAVI)]、微小RNA[微小RNA-19b-3p(miR-19b-3p)、微小RNA-497(miR-497)和微小RNA-30a(miR-30a)]、临床疗效及不良反应发生情况。结果:治疗后,两组患者血清ALD、NE、AngⅡ水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);MWS、LVEDD、LVMI、LAVI均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);血清miR-19b-3p、miR-497均升高(P<0.05),且观察组高于对照组(P<0.05);血清miR-30a均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组患者临床治疗总有效率(90.00%)高于对照组(68.33%,P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:在常规治疗基础上联合左西孟旦治疗CHF临床疗效较好,可有效改善患者血清神经激素、微小RNA水平,抑制左室重构,且不会增加不良反应的发生风险。

基于公共数据库筛选淋巴特异性解旋酶过表达肺腺癌细胞的差异微小RNA及其关键基因对预后的影响

目的 分析淋巴特异性解旋酶(LSH)在肺腺癌PC9细胞过表达后微小RNA(miRNA)的表达差异,并预测其潜在调控基因。方法 采用高通量测序技术检测LSH过表达的PC9细胞系中的总miRNA,并筛选核质比有差异的候选miRNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对候选miRNA的核质比进行验证,应用生物信息学方法对调控基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及基因本位(GO)功能富集分析,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络对miRNA核靶点进行筛选,利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库探究候选靶基因对肺腺癌患者预后的影响。结果 通过对LSH过表达PC9细胞进行测序及基因差异分析,共筛选出5个核质比差异的miRNA:hsa-miRNA-30e-5p、hsa-miRNA-378i、hsa-miRNA-378f、hsa-miRNA-423-5p、hsa-miRNA-4284,其中核内miRNA-4284增加最为显著。经KEGG与GO富集分析发现这些miRNA可能通过结合靶基因参与了RAS信号通路的调控。通过PPI网络及肺癌预后预测发现,差异miRNA可下调CXC趋化因子受体4(CXCR4)表达,增加肺腺癌患者的死亡风险。结论 LSH过表达的肺腺癌PC9细胞核和细胞质中出现多个显著差异表达的miRNA,以核内miRNA-4248变化最为明显,生物信息学分析发现差异miRNA可能通过下调CXCR4的表达增加肺腺癌患者的死亡风险。

微小RNA-133a-5p在丙泊酚防治大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用及作用机制

目的观察微小RNA-133a-5p(miR-133a-5p)在丙泊酚防治大鼠肝脏缺血再灌注(I/R)损伤中的作用,并探讨其可能作用机制。方法①丙泊酚对I/R大鼠肝功能及肝组织miR-133a-5p、有丝分裂原激活蛋白激酶6(mitogen-activated protein kinase 6,MAPK6)mRNA表达的影响观察:取18只大鼠分为丙泊酚组、模型组及对照组,每组6只。丙泊酚组及模型组对肝脏组织进行缺血再灌注操作,丙泊酚组在缺血再灌注操作的同时注射丙泊酚0.6 mg/(kg·min)。再灌注结束时采集各组大鼠下腔静脉血4 mL,采用全自动生化分析仪检测大鼠血清肝功能指标天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT),采血后处死各组大鼠分离肝脏组织,采用qRT-PCR法检测大鼠肝组织miR-133a-5p、MAPK6 mRNA。②miR-133a-5p抑制剂联合丙泊酚对I/R大鼠肝功能及肝组织miR-133a-5p、MAPK6mRNA表达的影响观察:另取24只大鼠分为甲、乙、丙、丁组,每组6只。四组均对肝脏组织进行缺血再灌注操作,甲组在缺血再灌注操作的同时注射丙泊酚0.6 mg/(kg·min)及miR-133a-5p抑制剂,乙组、丙组在缺血再灌注操作的同时分别注射丙泊酚0.6 mg/(kg·min)、丙泊酚+等量生理盐水,丁组不做任何处理。再灌注结束时采集各组大鼠下腔静脉血4 mL,采用全自动生化分析仪检测血清ALT、AST,采血后处死各组大鼠分离肝脏组织,采用qRT-PCR法检测四组大鼠肝组织miR-133a-5p、MAPK6mRNA。结果与对照组相比,模型组大鼠血清AST、ALT活性升高,肝脏组织miR-133a-5p相对表达量降低、MAPK6mRNA相对表达量升高(P均<0.01);与模型组相比,丙泊酚组大鼠血清AST、ALT水平降低,肝组织miR-133a-5p相对表达量升高、MAPK6mRNA相对表达量降低(P均<0.05)。与乙组相比,甲组大鼠血清ALT和AST水平高,肝组织MAPK6mRNA相对表达量高(P均<0.01);与乙和丙组相比,丁组大鼠血清ALT和AST水平升高,肝组织MAPK6mRNA相对表达量高(P均<0.01)。结论注射丙泊酚后肝脏I/R大鼠的肝损伤程度减轻,肝脏组织miR-133a-5p表达升高、MAPK6 mRNA表达降低。抑制miR-133a-5p表达可逆转丙泊酚对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的防治作用。丙泊酚可能通过促进肝脏组织miR-133a-5p表达,抑制肝组织MAPK6 mRNA表达,减轻大鼠的肝脏I/R损伤。

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞微小RNA的差异表达及其与免疫炎症反应的相关性

目的检测强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miRNA)的表达及其与免疫炎症反应的关系。方法选取AS患者(AS组)及健康志愿者(对照组),每组15例。利用高通量测序技术筛选PBMC中miRNA表达,利用实时定量PCR检测6个差异表达miRNA水平,ELISA检测外周血细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-17、IL-23表达,Spearman法分析差异miRNA与疾病活动、免疫炎症指标的相关性。结果与对照组相比,AS患者组共有44个miRNA差异表达,其中有22个上调,22个下调(差异倍数≥1);其中miR-1-3p、miR-133a-5p表达明显上调,miR-127-5p、miR-345-3p、miR-136-3p表达明显下调;且AS患者TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-23表达明显升高,miR-1-3p与TNF-α、C反应蛋白(CRP)、Bath强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)呈正相关,miR-133a-5p与TNF-α呈正相关,miR-127-5p与红细胞沉降率(ESR)、脊柱疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分呈负相关,miR-345-3p与IL-17呈负相关,miR-136-3p与IL-17、BASDAI呈负相关。结论AS患者PBMC中miRNA异常表达,差异表达miRNA与患者疾病活动及免疫炎症指标存在相关性。

外泌体微小RNA与骨关节疾病:作用与机制

背景:外泌体是一种细胞以胞吐形式分泌到胞外的囊泡状结构,其中包含了大量的微小RNA,具有重要的细胞间通讯作用。外泌体中的微小RNA依靠外泌体运输,能够进入靶细胞发挥重要的生物学调控效应。在常见的骨关节疾病中,由于骨骼代谢异常或受损会释放大量的外泌体,其中一些外泌体微小RNA促进骨关节疾病的进展。因此,外泌体微小RNA与骨骼系统关系密切,对许多骨关节疾病的发生发展以及诊疗都具有重要意义。目的:综述外泌体微小RNA在骨代谢和骨关节疾病中的研究进展。方法:以“外泌体,细胞外囊泡,微小RNA,miRNA,骨,骨疾病,骨形成,骨再生,骨吸收,骨破坏”为中文检索词,“exosomes,extracellular vesicle,microRNA,miRNA,bone,bone diseases,bone formation,bone regeneration,bone resorption,bone destruction”为英文检索词,在中国知网、迈特思创和PubMed数据库进行检索,最终纳入86篇文献进行归纳总结。结果与结论:外泌体中的微小RNA可以通过影响骨形成和骨吸收调控骨代谢,并且与骨折愈合、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿性关节炎、股骨头坏死和骨肉瘤等骨关节疾病的发生发展关系密切,外泌体微小RNA将是未来诊治某些骨关节疾病的有效手段。但目前关于外泌体微小RNA在骨关节疾病中的研究有限,想要利用外泌体微小RNA诊断治疗骨关节疾病仍然需要更多的探索和研究。

部分微小RNA在宫颈癌患者血清中的表达及早期筛查的意义研究

目的探讨微小RNA(miR)-126-3p、miR-199a-3p、miR-150-5p、miR-221-3p在宫颈癌患者血清中的表达及早期筛查的意义。方法选取2020年12月至2022年12月河北省邯郸市中心医院住院治疗患者及同期于该院行体检的、宫颈癌前筛查未见明显异常的健康女性作为研究对象。根据健康状况不同分为宫颈癌组(61例)、宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组(40例)和对照组(健康女性,40例)。比较组间以上4种miR的相对表达情况差异,分析miR相对表达水平与宫颈癌患者临床及病理指标的相关性及对宫颈癌的预测价值。结果宫颈癌组患者血清中miR-126-3p、miR-199a-3p的相对表达水平低于对照组和HSIL组,miR-150-5p、miR-221-3p的相对表达水平高于对照组和HSIL组,差异均有统计学意义[(0.31±0.06)比(0.50±0.08)、(0.38±0.08),(2.56±0.36)比(3.38±0.51)、(3.25±0.60),(2.91±0.49)比(1.42±0.49)、(2.20±0.53),(3.24±0.96)比(1.83±0.63)、(2.02±0.62)](均P<0.05)。宫颈癌组患者国际妇产科联盟分期Ⅰ期+Ⅱ期和Ⅲ期者血清miR-126-3p、miR-221-3p相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。miR-126-3p联合miR-199a-3p检测预测宫颈癌的敏感度为95.0%、特异度为76.3%,miR-150-5p联合miR-221-3p检测的敏感度为91.7%、特异度为85.0%。结论miR-126-3p、miR-199a-3p、miR-150-5p、miR-221-3p在宫颈癌和癌前病变患者血清中异常表达,与宫颈癌的发生发展密切相关,对于宫颈癌诊治可能提供新的靶点。miR-150-5p联合miR-221-3p检测预测宫颈癌的敏感度及特异度均较高,可以考虑作为宫颈癌早期筛查的标志物。

桃红四物汤对缺血性脑卒中损伤后微小RNA的影响

目的研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)对缺血性脑卒中的微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱的影响,探讨THSWD治疗缺血性脑卒中的分子机制。方法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)诱导的局灶性脑缺血大鼠模型,采用单细胞RNA测序技术检测THSWD治疗后MCAO大鼠miRNA表达谱。采用GO和KEGG富集分析方法分析miRNA作用于靶基因的功能。对表达差异显著的miRNA进行RT-qPCR实验验证。结果THSWD干预后,MCAO大鼠脑梗死区有13个miRNA表达发生变化,其中6个miRNA表达上调,7个miRNA表达下调。利用miRanda进行预测,确定了这13个miRNA的靶基因,构建了miRNA-mRNA网络,通过RT-qPCR验证了其中6个差异表达的miRNA(rno-miR-653-5p、rno-miR-216b-5p、rno-miR-3547、rno-miR-217-5p、rno-miR-758-3p和rno-miR-223-3p)。结论THSWD可以通过逆转某些miRNA的异常表达来治疗缺血性脑卒中。

动脉粥样硬化胞葬作用和相关微小RNA研究进展

动脉粥样硬化是心脑血管疾病发生、发展的主要病理基础。动脉粥样硬化形成中存在巨噬细胞胞葬缺陷。有缺陷的胞葬导致未清除的凋亡细胞堆积,继发性坏死,从而导致动脉粥样硬化特征性的坏死核心形成和斑块不稳定。完整的胞葬过程包括识别(“找我”)阶段、吞噬(“吃我”)阶段和后处理反应(吞噬后)阶段。已有报道miRNA在动脉粥样硬化胞葬中参与调节关键信号传导和脂质稳态。文章讨论了动脉粥样硬化过程中胞葬的重要作用及胞葬缺陷对动脉粥样硬化的影响,尤其针对胞葬吞噬阶段“吃我”和“不吃我”信号在动脉粥样硬化全程炎症参与下胞葬缺陷的调节影响、miRNA在动脉粥样硬化中调节脂质代谢及炎症消退、动脉粥样硬化过程中miRNA靶向巨噬细胞的胞葬的微调节作用等方面的研究文献进行综述。

肠道菌群与微小RNA在炎症性肠病中相互作用关系研究进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种慢性肠道疾病,其特征是对肠道环境因素的免疫反应失调。肠道菌群(gut microflora,GM)的失调可能导致炎症过程的发展。已有大量研究表明粪菌移植、益生菌、益生元和膳食干预等可能发挥着重塑GM及治疗疾病的潜力。微小RNA(microRNA,miRNA)参与细胞发育、增殖、凋亡等生理过程。此外,他们在炎症过程中发挥重要作用,参与促炎和抗炎途径的调节。miRNA谱的差异可能是IBD诊断工具,并作为疾病的预后标志物。miRNA与GM的关系尚未完全阐明,近期研究表明miRNA在GM的调节和诱导生态失调中的作用;反过来,菌群可以调节miRNA的表达,改善肠道稳态。因此,本综述旨在描述GM与miRNA在IBD中的相互作用,寻找潜在IBD精准靶向治疗方法。

基于芯片和生物信息学分析结直肠癌肝转移中差异表达的微小RNA及其意义

目的分析有肝转移与无肝转移的结直肠癌微小RNA(microRNA,miRNA)表达的差异及其与结直肠癌肝转移(colorectal liver metastases,CRLM)发生的关系。方法收集2011年2月1日至2018年9月10日浙江大学医学院附属第二医院60例有肝转移(n=29)和无肝转移(n=31)的结直肠癌新鲜标本,采用Agilent芯片检测miRNA表达,利用Gene Spring GX v11.5.1软件筛选出差异表达的miRNA。进一步收集2003年3月1日至2012年12月31日浙江大学医学院附属第二医院62例有肝转移(n=31)和无肝转移(n=31)的结直肠癌4%甲醛固定的石蜡包埋(formalin-fixed and paraffinembedded,FFPE)标本,对差异miRNA表达进行验证。利用Gene Ontology(GO)功能数据库及Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)数据库进行靶基因的信号通路的富集,推测CRLM相关通路。TCGA数据库分析CRLM组织与正常肝脏组织中miR494、miR19a、miR223和miR20a的表达。通过反向传播(back propagation,BP)神经网络模型构建CRLM的预测模型。结果对新鲜结直肠癌样本肝转移组和无肝转移组进行miRNA芯片分析,筛选出差异表达的miRNA,包括miR19a、miR20a、miR223和miR494。实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证显示,FFPE肝转移组和无肝转移组miR19a、miR20a、miR223和miR494的表达水平比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。Kaplan-Meier法分析显示,FFPE肝转移组miR494、miR19a和miR223高表达和低表达患者总生存期比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。TCGA数据库分析显示,miR494、miR19a、miR223和miR20a在正常肝脏组织和CRLM组织中的表达比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。通过BP神经网络模型构建miR494、miR19a、miR223和miR20a联合预测CRLM发生的准确度高,曲线下面积(area under the curve,AUC)为1.000。结论miR494、miR19a、miR223和miR20a在CRLM患者原发灶中差异表达,与患者生存相关。miR494、miR19a、miR223和miR20a共同预测CRLM发生的准确度高。

血清微小RNA-21、微小RNA-210与非小细胞肺癌患者术后复发的相关性

目的分析血清微小RNA(miR)-21、miR-210与非小细胞肺癌(NSCLC)根治性切除术后复发的关系。方法纳入2019年1月至2021年12月收治入新疆医科大学第一附属医院的NSCLC患者为研究对象,所有患者拟行肺癌根治术,以随访2年为终点,观察随访期间复发事件。根据是否复发将本研究患者分为复发组和未复发组。术前行肿瘤标志物检查、血清miR-21、miR-210检查,并分析患者基线资料,采用Cox回归分析血清miR-21、miR-210与NSCLC根治性切除术后复发的关系,并绘制决策曲线检验血清miR-21、miR-210对NSCLC根治性切除术后复发的预测效能。结果本研究共收录NSCLC患者165例,158例患者完成随访,随访成功率95.76%,其中53例患者随访期间复发,复发时间18.00(13.00,21.00)个月,复发率为33.54%。复发组高级别肿瘤占比、TNMⅢ期占比高于未复发组,血清细胞角蛋白片段19(CYFRA21-1)、miR-21、miR-210表达高于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,在排除了其他外界因素的影响后,血清miR-21、miR-210表达升高仍然与NSCLC根治性切除术后2年内复发有关(P<0.05)。绘制决策曲线,血清miR-21、miR-210预测NSCLC根治性切除术后复发有良好受益率,联合预测受益率最大。结论NSCLC根治性切除术后复发与血清miR-21、miR-210过表达有关,联合检测血清miR-21、miR-210能早期预测复发风险。

结直肠锯齿状息肉发病机制及微小RNA作用的研究进展

锯齿状息肉(SP)具有一定的恶变潜能,通过独特的锯齿状癌变途径,导致了15%~30%结直肠癌的发生。微小RNA(microRNA或miRNA)是一类小的非编码RNA,与肿瘤的发生发展有关。有研究发现,miRNA在锯齿状息肉(尤其是无蒂锯齿状病变)中存在异常表达,可能参与了结直肠癌的进展。文章对锯齿状息肉的发病机制及miRNA在不同类型锯齿状息肉中的表达差异进行综述。

微小RNA与心力衰竭诊断治疗及预后评价关系的研究进展

心力衰竭是多种心血管疾病的复杂而共同的终点,由各种类型的心脏病引起。微小RNA(miR)是一类22个核苷酸左右长度的内源性非编码性的小分子RNA,可对细胞的生长、分化、增殖、凋亡等生命活动起调控作用。大量研究表明miR参与多种心力衰竭发生发展的过程,如心肌细胞肥大、心肌纤维化、心脏能量代谢异常等,且miR在各种心血管疾病中有特定的表达谱,预示着miR有望成为心血管疾病的新型生物学标志物。除此之外,目前有60余种基于miR的治疗药物处于不同的开发阶段,例如通过靶miR模拟物或拮抗物、miR抑制剂等方式靶向调节内源性miR水平来治疗,miR可能是新治疗策略的潜在靶标。本综述总结了miR与心力衰竭诊断、治疗及预后评价之间的关系。