微小RNA差异表达谱在原发性干燥综合征的应用

目的探索原发性干燥综合征(primary Sjgren’s syndrome,p SS)患者血清中相关的差异表达微小RNA(microRNA,miRNA)。方法健康对照组和pSS组各选1例进行芯片分析,筛选出p SS患者与健康对照组表达差异有统计学意义的miRNA;选取6例健康对照和6例pSS患者治疗前后的血清,采用荧光定量法对差异表达的miRNA进行验证;通过Target Scan、miRanda以PicTar预测miRNA作用的靶基因并分析相关信号通路的生物学信息。结果共发现53条miRNA表达差异有统计学意义,选取22条差异倍数>1.5倍的miRNA,p SS治疗前组与对照组比较miR-146a-5p、miR-4484和miR-4687-5p表达均上调(P<0.05),miR-146a-5p和miR-4687-5p验证结果与芯片一致。治疗前组和治疗后组比较,miR-146a-5p和miR-4484表达均下调(P<0.05),而miR-4687-5p表达依然上调。靶基因预测结果显示p SS中miRNA可能通过Notch信号通路和花生四烯酸以及溶酶体等代谢发挥信号转导作用。结论 pSS患者与健康人群存在差异表达的miRNA,这些miRNA表达可能参与pSS疾病的发生和发展,对p SS诊断有一定价值。

微小RNA的差异表达与胚胎质量的相关性

目的探讨微小RNA(micro RNA,miRNA)差异表达与胚胎质量的相关性,为胚胎的植入前选择提供新的依据。方法用TaqMan微小RNA阵列(MicroRNA Array)对8个囊胚样本进行miRNA表达谱检测,筛选稳定高表达且有价值的miRNA。扩大样本量后选择囊胚,针对筛选的miRNA进行逆转录PCR检测,同时采用二代测序平台检测胚胎的染色体异常,对结果进行分析比较。结果MicroRNA Array检测发现mir-720、mir-372、mir-886-3p和mir-512-3p表达量较高,而mir-145表达量较低,推测与早期胚胎发育相关。选择56个废弃囊胚,对上述5种miRNA进行检测,结果显示mir-145和mir-886-3p在染色体正常组中显著低表达。mir-145以相对表达量9作为阈值,mir-886-3p以相对表达量3作为阈值,其以上均未见胚胎染色体检测为正常者。结论特定的miRNA表达差异与胚胎染色体异常存在相关性,有可能作为一种新的胚胎选择的生物标记。