目的·研究微小RNA-143(miR-143)在人结肠癌及癌周正常组织中的表达,探索其对结肠癌HCT116、RKO细胞功能的影响及下游靶基因的预测。方法·设计合成并构建miR-143慢病毒表达载体,稳定转染人结肠癌HCT116、RKO细胞。实时荧光定量...目的·研究微小RNA-143(miR-143)在人结肠癌及癌周正常组织中的表达,探索其对结肠癌HCT116、RKO细胞功能的影响及下游靶基因的预测。方法·设计合成并构建miR-143慢病毒表达载体,稳定转染人结肠癌HCT116、RKO细胞。实时荧光定量PCR检测人结肠癌、癌周正常组织、慢病毒感染后HCT116和RKO细胞中miR-143的表达。Annexin V-APC单染法及流式细胞仪检测感染前后细胞凋亡能力。Transwell法检测感染前后HCT116、RKO细胞迁移能力的改变。Western blotting方法检测FOSL2蛋白的表达。结果·miR-143在结肠癌组织中的表达量显著低于癌周正常组织(0.339±0.454 vs 1.003±0.003)(U=16.000,Z=-4.231,P=0.000)。上调miR-143后,HCT116细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000),RKO细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000)。上调miR-143后,HCT116迁移细胞数显著低于阴性对照组(P=0.000)。miR-143下调后,RKO迁移细胞数显著高于阴性对照组(P=0.003)。miR-143下调后,FOSL2蛋白表达量升高。结论·miR-143在结肠癌组织中表达量显著下降。上调miR-143可促进结肠癌细胞凋亡,并抑制HCT116细胞迁移;下调miR-143可促进RKO细胞迁移;抑制miR-143功能可上调FOSL2蛋白表达。展开更多
文摘目的·研究微小RNA-143(miR-143)在人结肠癌及癌周正常组织中的表达,探索其对结肠癌HCT116、RKO细胞功能的影响及下游靶基因的预测。方法·设计合成并构建miR-143慢病毒表达载体,稳定转染人结肠癌HCT116、RKO细胞。实时荧光定量PCR检测人结肠癌、癌周正常组织、慢病毒感染后HCT116和RKO细胞中miR-143的表达。Annexin V-APC单染法及流式细胞仪检测感染前后细胞凋亡能力。Transwell法检测感染前后HCT116、RKO细胞迁移能力的改变。Western blotting方法检测FOSL2蛋白的表达。结果·miR-143在结肠癌组织中的表达量显著低于癌周正常组织(0.339±0.454 vs 1.003±0.003)(U=16.000,Z=-4.231,P=0.000)。上调miR-143后,HCT116细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000),RKO细胞凋亡率显著高于阴性对照组(P=0.000)。上调miR-143后,HCT116迁移细胞数显著低于阴性对照组(P=0.000)。miR-143下调后,RKO迁移细胞数显著高于阴性对照组(P=0.003)。miR-143下调后,FOSL2蛋白表达量升高。结论·miR-143在结肠癌组织中表达量显著下降。上调miR-143可促进结肠癌细胞凋亡,并抑制HCT116细胞迁移;下调miR-143可促进RKO细胞迁移;抑制miR-143功能可上调FOSL2蛋白表达。
