左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p、潜在转化生长因子结合蛋白2水平与射血分数保留的心力衰竭患者左心室重构的相关性

目的探讨左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p(miR-152-5p)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)水平与射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左心室重构的相关性。方法选取2019年8月至2020年8月在唐山中心医院进行治疗的HFpEF患者48例为HFpEF组,同期健康体检者52例为对照组。以实时荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验法分别检测血清miR-152-5p、LTBP-2水平。研究对象均进行超声心动图检查,收集二尖瓣环舒张早期峰值速度(E')、晚期峰值充盈速度(A)、二尖瓣口舒张早期峰值充盈速度(E)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、舒张末期后壁厚度(PWTd)、舒张末期室间隔厚度(IVSTd),并计算E/A、E/E'及左心室质量(LVM)值。使用Pearson法分析血清miR-152-5p、LTBP-2、E/A、E/E'与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM之间的相关性。结果HFpEF组患者E/A值低于对照组,血清miR-152-5p、LTBP-2水平及E/E'值高于对照组,差异有统计学意义(t=12.722、21.830、9.882、15.979,P<0.05)。HFpEF组患者的LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM水平高于对照组,差异有统计学意义(t=2.044、2.894、5.733、3.973,P<0.05)。HFpEF组患者血清miR-152-5p、LTBP-2、E/E'表达水平均与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈正相关(r=0.447、0.425、0.437、0.473、0.414、0.338、0.422、0.347、0.492、0.412、0.385、0.367,P<0.05);E/A与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈负相关(r=-0.441、-0.374、-0.369、-0.438,P<0.05)。结论血清miR-152-5p、LTBP-2水平以及E/E'值、E/A水平与HFpEF患者左心室重构有关。

子宫内膜息肉组织中miR-152和miR-146b-5p的表达及意义

目的探讨微小RNA(miR)-152和miR-146b-5p在子宫内膜息肉中的表达,及其对术后复发的预测价值。方法收集2021年1月至2022年10月在石家庄市第六医院接受宫腔镜息肉切除术的196例子宫内膜息肉患者作为子宫内膜息肉组,根据患者术后6个月的复发情况分为复发组(53例)和未复发组(143例),另选取同期因不孕症进行宫腔镜检查的196例患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测子宫内膜息肉组织和正常子宫内膜组织中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平,并进行组间比较;采用多因素Logistic回归分析子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析子宫内膜息肉中miR-152、miR-146b-5p相对表达水平对子宫内膜息肉患者术后复发的预测价值。结果复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、孕激素受体(PR)水平明显低于未复发组和对照组(P<0.05),血管内皮生长因子(VEGF)、雌激素受体(ER)水平明显高于未复发组和对照组(P<0.05);未复发组miR-152、miR-146b-5p相对表达水平、PR水平明显低于对照组(P<0.05),VEGF、ER水平明显高于对照组(P<0.05)。进一步研究显示,miR-152、miR-146b-5p、VEGF、ER、PR是子宫内膜息肉患者术后复发的影响因素(P<0.05)。miR-152、miR-146b-5p二者联合预测子宫内膜息肉患者术后复发的曲线下面积(AUC)为0.949,灵敏度为96.23%,特异度为74.02%,优于二者各自单独预测(Z联合检测-miR-152=4.854、Z联合检测-miR-146b-5p=3.431,P<0.001)。结论子宫内膜息肉组织中miR-152、miR-146b-5p表达明显下调,二者联合对预测子宫内膜息肉患者术后复发有较好的参考价值。

血清miR-200a、miR-152水平与妊娠滋养细胞肿瘤化疗患者预后的关系

目的探讨血清微小RNA-200a(miR-200a)、微小RNA-152(miR-152)在妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)预后中的作用。方法选取100例GTN化疗患者为观察组,根据化疗疗效将患者分为预后良好组80例和预后不良组20例;选取同期体检健康女性103例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-200a、miR-152表达水平。结果观察组血清miR-200a表达水平高于对照组,miR-152表达水平低于对照组(P<0.05)。随化疗时间延长,预后良好组与预后不良组血清miR-200a表达水平依次降低,miR-152表达水平依次升高(P<0.05)。预后不良组化疗前后血清miR-200a表达水平高于预后良好组,miR-152表达水平低于预后良好组(P<0.05)。预后良好组与预后不良组国际妇产科联盟(FIGO)预后评分、化疗前血HCG水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗前血清miR-200a、miR-152表达水平单独及联合预测GTN化疗患者预后不良的AUC分别为0.793、0.844、0.887。miR-200a、miR-152、FIGO预后评分≥7分与GTN化疗患者预后不良有关(P<0.05)。结论化疗前高表达miR-200a,低表达miR-152可能与GTN化疗患者预后不良有关,可为化疗预后评估提供参考。

血清微小RNA-152检测在非肌层浸润性膀胱癌诊断和复发预测中的价值分析

目的分析血清微小RNA-152(miR-152)检测在非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)诊断和复发预测中的价值。方法前瞻性选取2016年6月至2017年6月航天中心医院收治的80例NMIBC患者作为病例组,选取同期80名接受体检者作为对照组,对2组研究对象的血清miR-152相对表达量进行检测,分析其对NMIBC的诊断价值;对病例组患者进行36个月的术后随访,对其术后复发情况进行随访,分析血清miR-152相对表达量与NMIBC术后复发的相关性及对复发的预测价值。结果在随访期内有9例患者失访,病例组最终纳入71例。病例组患者的血清miR-152相对表达量低于对照组(0.50±0.36 vs.1.15±0.65),差异有统计学意义(P<0.05)。在随访期内,有18例患者发生复发,复发率为24.32%。复发组患者的肿瘤分期为T1期、多发性肿瘤、肿瘤低分化的比例高于未复发组,血清miR-152相对表达量低于未复发组(0.24±0.22 vs.0.59±0.35),差异均有统计学意义(P<0.05)。NMIBC术后复发与血清miR-152相对表达量、肿瘤数目、分化程度具有相关性(P<0.05)。血清miR-152相对表达量诊断NMIBC和预测NMBIC术后复发的受试者工作特征曲线下面积(AUC ROC)均具有统计学意义(P<0.05),在Cut off值下,其敏感度和特异度分别为0.688、0.873和0.755、0.833。结论在NMIBC患者可观察到血清miR-152表达下调,且其相对表达量的下降与患者的术后复发风险有关,可作为辅助NMIBC诊断和复发预测的血清标志物。

结直肠癌组织和血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p的表达及其临床意义

目的:研究结直肠癌组织和血清外泌体长链非编码核糖核酸前列腺癌基因表达标记物1(lncRNA PCGEM1)、微小RNA-152-3p(miR-152-3p)的表达及其临床意义。方法:选取2020年1月至2021年10月南京医科大学附属无锡人民医院收治的138例结直肠癌患者作为结直肠癌组,另选取同期体检健康的90例健康人群作为健康组。检测血清外泌体、结直肠癌组织与癌旁组织中lncRNA PCGEM1、miR-152-3p相对表达量。分析结直肠癌组织、血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p表达与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。Cox模型分析结直肠癌患者预后的影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA PCGEM1、miR-152-3p对结直肠癌的诊断价值。结果:结直肠癌组织、血清外泌体lncRNA PCGEM1相对表达量分别高于癌旁组织和健康组,miR-152-3p相对表达量均低于癌旁组织和健康组(P<0.05)。血清外泌体与癌组织中lncRNA PCGEM1、miR-152-3p表达与TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05)。LncRNA PCGEM1高表达组的生存率低于lncRNA PCGEM1低表达组,miR-152-3p低表达组生存率低于miR-152-3p高表达组(P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p及分化程度、淋巴结转移、浸润深度是影响患者预后的因素(P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p联合应用的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度均较各指标单独应用明显提升(P<0.05)。结论:结直肠癌患者癌组织和血清外泌体中lncRNA PCGEM1表达上调、miR-152-3p表达下调,血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-152-3p联合诊断结直肠癌的效能更高。

可溶性CD40配体通过miR-152/SOX11信号轴调节非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的增殖和凋亡

目的探讨可溶性CD40配体(soluble CD40 ligand,sCD40L)基于性别决定区Y框蛋白11(SRY-related HMG box 11,SOX11)信号轴影响非霍奇金淋巴瘤Raji细胞增殖和凋亡的机制。方法对Raji细胞用sCD40L处理,或转染miR-152 mimics过表达miR-152,转染miR-152 inhibitor抑制miR-152的表达,转染SOX11 siRNA沉默SOX11的表达;用CCK-8实验检测细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot检测SOX11水平,EdU染色检测细胞增殖水平,免疫组织化学染色检测Cleaved Caspase-3水平,qRT-PCR检测miR-152表达水平;应用生物信息学软件预测miR-152的靶基因,双荧光素酶报告系统鉴定miR-152与靶基因的靶向关系。结果sCD40L处理Raji细胞使其miR-152表达增多,SOX11水平降低,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高。过表达miR-152和沉默SOX11均使Raji细胞存活率降低,细胞凋亡率升高。sCD40L处理联合抑制miR-152表达使Raji细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,而sCD40L处理、抑制miR-152表达的同时沉默SOX11表达使则使Raji细胞存活率降低,细胞凋亡率升高。miR-152能靶向负调控SOX11。结论sCD40L通过miR-152/SOX11信号轴发挥抗非霍奇金淋巴瘤Raji细胞增殖并促进细胞凋亡的作用。

基因间长链非编码RNA 152靶向微小RNA-103a-3p对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭迁移的影响

目的探讨基因间长链非编码RNA 152(LINC00152)靶向调控微小RNA-103a-3p(miR-103a-3p)表达及对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测正常肺上皮细胞BEAS-2B及NSCLC细胞(ANIP-973、NCI-H157、A549和NCI-H1975)的LINC00152水平。选取LINC00152水平最高的细胞分别转染LINC00152特异性小干扰RNA(si-LINC00152组)或无关序列(si-NC组),另设未转染细胞为对照组。QPCR检测LINC00152水平,活细胞计数CCK-8法、Transwell小室和划痕实验测定细胞增殖、侵袭和迁移能力,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的水平;荧光素酶报告实验验证LINC00152靶向结合miR-103a-3p的能力。结果NSCLC细胞的LINC00152水平均高于BEAS-2B细胞(P<0.05),尤其是NCI-H1975细胞的最高。si-LINC00152组的LINC00152水平为0.352±0.087,低于对照组的1.058±0.219和si-NC组的1.126±0.139(P<0.05)。与si-NC组和对照组相比,si-LINC00152组NCI-H1975细胞转染48、72 h的增殖活力下降(P<0.05);si-LINC00152组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(27.386±2.428)%和(78.840±5.031)个,低于si-NC组的(77.675±4.803)%和(179.208±13.264)个及对照组的(76.371±5.385)%和(174.003±15.678)个(P<0.05);与si-NC组和对照组相比,si-LINC00152组的MMP-2和MMP-9水平均降低,而PTEN水平升高(P<0.05)。对照组和si-NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告分析证实,miR-103a-3p模拟物降低了野生型LINC00152的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。结论LINC00152在NSCLC细胞中高表达并发挥促癌作用,与NSCLC的迁移侵袭密切相关,LINC00152与miR-103a-3p间的相互作用在NSCLC靶向治疗中有一定潜能。

微小RNA-152对乳腺癌细胞增殖及阿霉素敏感性影响的实验研究

目的探讨微小RNA-152(miR-152)对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响及其作用机制。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100、人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平,分别向MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞转染miR-152模拟物mimics(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以未行转染为空白对照组。采用QPCR检测转染后MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中miR-152的表达情况,采用MTT法检测不同浓度阿霉素(10、50、100、200和500 ng/ml)处理后各组的增殖情况,流式细胞术检测转染后各组的凋亡率,Western blotting检测磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)的蛋白水平,双荧光素酶报告实验评价miR-152对PIK3CA的靶向调控作用。结果QPCR实验结果表明MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平均低于HBL-100细胞,且MCF-7/ADR细胞的miR-152水平均低于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P<0.05);过表达组转染后的miR-152水平均高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。与其余两组比较,过表达组的存活率降低而凋亡率升高,且PIK3CA蛋白水平也降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-152可抑制野生型PIK3CA 3'UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型PIK3CA 3'UTR的荧光素酶活性无影响。结论 miR-152表达在乳腺癌细胞中降低,且与阿霉素耐药有关,参与乳腺癌细胞的增殖和凋亡过程,在逆转乳腺癌耐药中发挥重要作用,具有一定价值。

微小RNA-152对肝癌细胞HepB3与SNU449生物学功能的影响

目的:研究微小RNA-152(miR-152)对肝癌细胞生物学功能的影响。方法:将miR-152阻遏物及模拟物转染至HCC细胞系HepB3及SNU449中,检测HCC细胞生长、凋亡及Caspase3/7活性的变化。结果:miR-152阻遏物可抑制HCC细胞生长、诱发凋亡及促进Caspase3/7活性的增加。结论:miR-152在肝癌的发展中发挥重要作用,并有望成为HCC的新的治疗靶标。

微小RNA-152-3p对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-152-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法2019年2月至2020年4月,将结肠癌SW480细胞分为miR-152-3p模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-152-3p模拟物(miR-152-3p)组、抑制物(anti-miRNC)组、miR-152-3p抑制物(anti-miR-152-3p)组、阴性对照(si-NC)组、沉默转移相关蛋白2(si-MTA2)组、miR-152-3p模拟物+空载体(miR-152-3p+pcDNA3.1)组、miR-152-3p模拟物+过表达MTA2(miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2)组,均用脂质体法转染至结直肠癌SW480细胞中,另取未转染结直肠癌SW480细胞记为Control组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-152-3p和MTA2 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法测定蛋白的表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果结肠癌HCT116、SW480及LoVo细胞中miR-152-3p表达分别为0.72±0.04、0.29±0.02、0.49±0.01,人正常结肠上皮细胞NCM460中miR-152-3p表达为1.06±0.12,与正常结肠上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞HCT116、LoVo、SW480中MTA2 mRNA和蛋白较高,miR-152-3p较低(P<0.05);Control组、miR-NC组、miR-152-3p组、si-NC组及si-MTA2组结肠癌SW480细胞吸光度分别为0.92±0.22、0.96±0.17、0.31±0.07、0.99±0.17及0.32±0.09,细胞迁移数分别为(172.00±23.52)个、(169.00±20.66)个、(53.67±12.22)个、(155.67±16.8)个及(54.33±8.74)个,细胞侵袭数分别为(124.67±10.02)个、(122.33±9.45)个、(26.00±5.00)个、(108.33±10.02)个及(42.00±4.00)个,与miR-NC组相比,miR-152-3p组SW480细胞中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)及上皮钙黏素(E-cadherin)较高(P<0.05);与si-NC组相比,si-MTA2组SW480细胞中cyclinD1、MMP-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,P21及E-cadherin较高(P<0.05)。转染miR-152-3p和MTA2野生型表达载体的结肠癌SW480细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。相比miR-152-3p+pcDNA3.1组,miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2组SW480细胞中P21、E-cadherin的表达较低,MTA2、cyclinD1、MMP-2蛋白的表达较高,SW480细胞活性、迁移、侵袭数量较高(P<0.05)。结论miR-152-3p可能通过下调MTA2抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

miR-152通过靶向下调AGTR1抑制人肝癌细胞上皮间质转化及肾素-血管紧张素系统

目的探讨微小RNA-152(miR-152)靶向血管紧张素Ⅱ1型受体(AGTR1)对肝癌HCCLM3细胞上皮间质转化(EMT)及肾素-血管紧张素系统(RAS)的影响。方法将培养的HCCLM3细胞分为未转染组(未处理)、阴性对照组(转染阴性对照序列)和miR-152组(转染miR-152模拟物)。采用实时荧光定量PCR检测miR-152和血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、AGTR1 mRNA表达,Transwell^(TM)小室检测细胞侵袭和迁移,Western blot法检测细胞波形蛋白(vimentin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和AGTR1蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-152和AGTR1的靶向关系。结果与未转染组或阴性对照组相比,miR-152组细胞miR-152表达水平和E-cadherin蛋白表达水平明显升高,而ACE、AngⅡ、AGTR1 mRNA表达水平和侵袭细胞数、迁移细胞数以及vimentin、N-cadherin、AGTR1蛋白表达水平均明显降低;双荧光素酶报告基因实验检测结果证实miR-152可与AGTR1靶向结合。结论miR-152可能通过靶向下调AGTR1表达抑制肝癌HCCLM3细胞的EMT及RAS。

miR-152调控Wnt通路对CRC细胞生物学行为和免疫功能的影响

目的:探究微小RNA(miR)-152调控Wnt通路对大肠癌(CRC)细胞生物学行为和免疫功能的影响。方法:将人CRC细胞系SW116分为3组:NC组、mimic组和inhibitor组。通过转染miR-152 mimic或inhibitor上调或抑制miR-152水平,NC组转染等量的NC空载质粒作为对照组。检测各组细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡能力。Western blot检测免疫抑制蛋白TNF-α、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)和Wnt通路中蛋白水平。结果:与NC组比较,mimic组细胞增殖、迁移、侵袭能力被显著抑制,凋亡率显著升高(P<0.05)。Inhibitor组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著高于NC组,凋亡率显著低于对照组(P<0.05)。此外,mimic组TNF-α、sIL-2R、Wnt1、β-catenin、c-myc水平显著低于NC组(P<0.05),inhibitor组上述蛋白水平显著高于NC组(P<0.05)。结论:miR-152缓解CRC细胞的免疫抑制状态,抑制增殖、转移并促进凋亡,其作用机制可能与Wnt通路有关。

循环miR-152在多发性骨髓瘤中的表达与临床意义

目的检测mi R-152在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的表达水平,探讨其作为MM肿瘤标志物的潜在价值。方法以30例缺铁性贫血患者为相关疾病对照组,30例体检健康者为健康人对照组,40例初诊MM患者为MM组,提取各组血清RNA样本;实时荧光定量PCR检测各组血清mi R-152的表达水平;PCR扩增产物进行基因测序;ROC曲线分析其诊断MM的临床效能;Beckman Immage特种蛋白分析仪检测MM组血清Ig A、Ig G和Ig M浓度;采用Kaplan-Meier法分析mi R-152的表达水平与MM患者预后的关系。结果 MM组血清mi R-152的表达水平[1.40(0.90,2.24)]高于相关疾病对照组[1.07(0.60,1.63)]和健康人对照组[0.20(0.07,0.54)],差异有统计学意义(U分别为424.50和85.50,P均<0.05);而MM患者治疗后[0.97(0.41,1.88)]较治疗前[1.66(1.15,2.42)]血清mi R-152表达水平明显降低(U=63.00,P=0.027);基因测序结果证实其为成熟mi R-152序列;血清mi R-152诊断MM的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.79(95%CI:0.70~0.87,P<0.05),当cut-off值为0.62时,其敏感性和特异性分别为90.00%、56.67%;血清mi R-152的表达与MM患者总体生存率有关(HR=4.36,95%CI:1.23~15.43,P=0.022);mi R-152的相对表达量与Ig A、Ig G和Ig M浓度总和呈正相关(r=0.39,P=0.012),而与Ig A、Ig G或Ig M浓度无明显相关性(r分别为0.30,-0.005和-0.18,P均>0.05)。结论血清mi R-152在MM患者血清中的表达水平升高,可能会作为MM的鉴别诊断和预后的标志物。

miRNA-152在肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨微小RNA(miR)-152在肝癌组织中的表达及临床意义。方法收集56例肝癌患者癌及癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(Real-time PCR)检测肝癌及癌旁组织标本中miR-152的表达水平,分析其与肝癌患者临床病理特征及预后的相关性。结果miR-152在肝癌及癌旁组织中相对表达水平分别为0.616±0.041及0.768±0.042,两者差异有统计学意义(P=0.011);其与患者的TNM分期(P=0.042)、病理分化(P=0.035)、肿瘤转移(P=0.048)及血管侵犯(P=0.042)明显相关,而与性别、年龄、AFP水平、肿瘤个数、肿瘤直径等无明显相关;miR-152低表达组患者总生存时间(P=0.035)和无进展生存时间(P=0.012)明显低于miR-152高表达组,多因素Cox回归分析的结果显示,miR-152低表达、肿瘤复发和病理分化是影响肝癌患者预后的独立危险因素。结论miR-152在肝癌组织中表达下调,且与肝癌患者的病理分化程度、TNM分期、有无转移、有无血管侵犯及预后密切相关。

miR-218和miR-152在浆液性卵巢癌的表达及临床意义

目的检测miR-218和miR-152在浆液性卵巢癌中的表达情况,并探讨其临床意义。方法取正常输卵管伞端上皮组织、良性病变卵巢组织以及浆液性卵巢癌组织,应用Real-time PCR技术检测miR-218和miR-152在上述组织中的表达情况,分析其表达与卵巢癌临床病理特征之间的关系。结果 Real-time PCR检测显示,卵巢癌组织中miR-218和miR-152的表达(分别为404.5和382.9)显著低于正常输卵管伞端上皮组织(分别为598.7和678.4)和良性病变组织(分别为523.3和587.3)(P<0.05);miR-218的低表达与卵巢癌恶性程度、肿瘤分化程度以及肿瘤转移情况相关(P<0.05),而miR-152的表达与浆液性卵巢癌各临床病理特征无显著相关性(P>0.05)。结论 miR-218和miR-152在浆液性卵巢癌组织中低表达,miR-218有可能成为浆液性卵巢癌诊断和预后的标志物。

miR-152降低低密度脂蛋白受体表达对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭的抑制作用

目的:探讨微小RNA-152(miR-152)在子宫内膜癌(EC)组织中的表达和作用,为研究EC的发病机制和靶向治疗方案提供依据。方法:选取21例EC患者癌组织(肿瘤组)和39例非EC患者内膜组织(对照组)及人EC RL95-2细胞和293T细胞为研究对象。收集肿瘤组和对照组患者的年龄、身高、体质量(BM)、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、腰围(WC)和腹围(AC)等临床资料,检测2组患者甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、Ki-67和低密度脂蛋白受体(LDLR)水平,生物信息学方法预测miR-152下游与增殖和侵袭相关的靶基因LDLR表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测肿瘤组和对照组患者子宫内膜组织中miR-152表达水平,Western blotting法和免疫组织化学检测法检测肿瘤组和对照组患者子宫内膜组织中LDLR蛋白表达水平,Person相关分析法分析LDLR mRNA表达与患者一般资料、生化指标及miR-152表达的相关性。将RL95-2细胞分为空质粒组(转染miR-NC空质粒)、miR-152组(转染miR-152-mimics)、miR-152-mimics+pcDNA3.1-vector组(同时转染miR-152-mimics和pcDNA3.1-vector)和miR-152-mimics+pcDNA3.1-LDLR组(同时转染miR-152-mimics和pcDNA3.1-LDLR)。CCK-8法检测各组细胞增殖率,Transwell法检测各组细胞的侵袭细胞数,双荧光素酶报告基因实验检测各组293T细胞中荧光素酶活性。结果:肿瘤组患者子宫内膜组织中miR-152表达水平明显低于对照组(P<0.05),LDLR mRNA和蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测,LDLR为miR-152的靶基因。Person相关分析,肿瘤组患者子宫内膜组织中LDLR mRNA表达与Ki-67、BMI、TC、TG、BM和WC呈正相关关系(r=0.4490,r=0.4377,r=0.4472,r=0.4706,r=0.5882,r=0.5130,P<0.05),与miR-152的表达呈负相关关系(r=-0.4378,P<0.05)。与空质粒组比较,miR-152组RL95-2细胞增殖率降低(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-152组RL95-2细胞增殖率降低(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05);与miR-152-mimics+pcDNA3.1-vector组比较,miR-152-mimics+pcDNA3.1-LDLR组细胞增殖率升高(P<0.01),侵袭细胞数增多(P<0.01)。结论:miR-152通过降低LDLR的表达抑制EC细胞增殖和侵袭。

miR-152基于Hedgehog信号通路对骨质疏松大鼠骨生物力学、骨重建平衡的影响

目的分析调控微小RNA-152(miR-152)对骨质疏松大鼠模型骨生物力学、骨重建平衡及骨组织Hedgehog信号通路的影响。方法40例SPF级SD大鼠,10只作为正常组,其余大鼠行维甲酸灌胃建立骨质疏松大鼠模型,分为模型组、过表达组、沉默组各10只。做miR-152慢病毒载体构建,行miR-152转染。观察大鼠病理组织学、股骨骨密度值、骨矿物质含量、骨生物力学、骨重建平衡指标水平、骨组织Hedgehog信号通路蛋白及骨重建平衡相关蛋白BMP-2、RUNX2、OPG、RANKL表达情况。结果与正常组比较,模型组、过表达组、沉默组股骨骨密度值、骨矿物质含量、股骨最大荷载、刚度、CBF-α1、PINP、CTX-Ⅰ、OC表达、BMP-2、RUNX2、OPG、SHH、GLI1蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,过表达组股骨骨密度值、骨矿物质含量、股骨最大荷载、刚度、CBF-α1、PINP、CTX-Ⅰ、OC表达、BMP-2、RUNX2、OPG、SHH、GLI1蛋白表达量均显著降低,沉默组股骨骨密度值、骨矿物质含量、股骨最大荷载、刚度、CBF-α1、PINP、CTX-Ⅰ、OC表达、BMP-2、RUNX2、OPG、SHH、GLI1蛋白表达量均显著升高(P<0.05)。与过表达组比较,沉默组股骨骨密度值、骨矿物质含量、股骨最大荷载、刚度、CBF-α1、PINP、CTX-Ⅰ、OC表达、BMP-2、RUNX2、OPG、SHH、GLI1蛋白表达量均显著升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组、过表达组、沉默组RANKL蛋白表达量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,过表达组RANKL蛋白表达量显著升高,沉默组RANKL蛋白表达量显著降低(P<0.05)。与过表达组比较,沉默组RANKL蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论骨质疏松经沉默miR-152处理后骨代谢明显改善,其可能经作用于Hedgehog信号通路发挥其增强骨生物力学,促进骨重建平衡的作用。

miR-152靶向IRS-1对结肠癌细胞增殖、迁徙及侵袭的影响

目的探讨微小RNA-152(miR-152)靶向胰岛素受体底物1(IRS-1)对结肠癌细胞增殖、迁徙及侵袭的影响。方法体外培养人结肠癌SW480细胞,设置对照组(不转染任何载体)、无义转染组(转染nonsense siRNA载体)和miR-152 siRNA组(转染miR-152 siRNA载体)。qRT-PCR法检测SW480细胞中miR-152、IRS-1表达水平;CCK-8法检测SW480细胞增殖;Transwell法检测SW480细胞迁徙、侵袭情况;蛋白印迹(WB)法检测SW480细胞中IRS-1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达水平。结果对照组和无义转染组SW480细胞中miR-152、IRS-1 mRNA表达水平、OD值、迁徙细胞数、侵袭细胞数、IRS-1、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组和无义转染组相比,miR-152 siRNA组SW480细胞中miR-152表达水平显著降低(P<0.05),IRS-1表达水平、OD值、迁徙细胞数、侵袭细胞数及IRS-1、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 miR-152抑制结肠癌细胞增殖、迁徙与侵袭,其作用机制可能与靶向调控IRS-1有关。

微小RNA-148b/微小RNA-152对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-148b和miR-152在胆管癌中的表达及其生物学功能。 方法用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测miR-148b和miR-152在胆管癌与正常胆管组织、胆管癌细胞株QBC939和良性胆管细胞株H-69中的表达；分别用Real-time PCR、噻唑蓝（MTT）检测法、克隆形成实验和流式细胞术检测miR-148b和miR-152的表达及其对细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。 结果与正常胆管组织比较，miR-148b和miR-152在胆管癌组织中分别下调（2.75±0.16）倍和（3.05±0.18）倍，差异均有统计学意义（P＝0.013、0.019）；与良性胆管细胞比较，miR-148b和miR-152在胆管癌细胞中分别下调（2.52±0.03）倍和（3.96±0.02）倍，差异均有统计学意义（P＝0.018、0.012）；miR-148b和miR-152过表达显著抑制胆管癌细胞的增殖速率，分别为（38.49±0.31）%和（52.69±1.01）%，同时也能显著抑制克隆形成率（P＝0.031、0.023），miR-148b和miR-152均可使细胞周期阻滞于S期（P＝0.027、0.017），并且miR-148b和miR-152过表达均可诱导细胞凋亡。 结论胆管癌组织中miR-148b和miR-152表达均下调，过表达miR-148b和miR-152后可抑制胆管癌细胞增殖及诱导胆管癌细胞凋亡。

循环miR-152与miR-221在前列腺癌患者血清中的表达水平及临床意义

目的分析循环miR-152与miR-221在前列腺癌患者血清中的表达水平及临床意义。方法收集2009年1月-2013年4月本院泌尿外科收治的前列腺癌患者48例,前列腺良性增生患者32例,并招募同期健康体检者24例作为对照组,分析各组血清中miR-152与miR-221的表达水平及与PSA、Gleason的相关性关系。结果前列腺癌患者中miR-152的表达量显著低于正常人群和前列腺良性增生患者(P<0.05),前列腺良性增生和正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);miR-221在前列腺癌患者中的表达量显著低于正常人群和前列腺良性增生患者,且前列腺良性增生患者中的表达量也较正常人群低,差异均有统计学意义(P<0.05);前列腺癌患者miR-152血清表达水平与Gleason评分之间存在显著负相关性(P<0.05),与血清PSA水平无相关性(P>0.05),miR-221血清表达水平与血清PSA及Gleason评分之间存在显著负相关性(P<0.05)。结论 miR-152及miR-221可能通过复杂的调控过程参与前列腺癌的发生、侵袭与转归,为前列腺癌的早期诊断及病程的判断提供了实验依据。