乳腺癌患者血清微小RNA-135b、微小RNA-148a-3p、微小RNA-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果相关性研究

目的:探讨乳腺癌患者血清微小RNA-135b(miR-135b)、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果的相关性。方法:选取116例乳腺癌患者为病例组,均接受新辅助化疗,以21 d为1个周期,共化疗8个周期,根据化疗反应将患者分为耐药组(32例)和敏感组(84例),另选128例体检健康女性为对照组。比较病例组和对照组,耐药组和敏感组血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平。采用Pearson相关性分析血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p水平间的相关性。乳腺癌患者化疗效果的影响因素采用Logistic回归分析。血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p对乳腺癌患者化疗耐药的预测价值通过受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果:与对照组比较,病例组miR-135b、miR-148a-3p水平升高,血清miR-186-5p水平降低(均P<0.05)。耐药组血清miR-135b、miR-148a-3p水平高于敏感组,血清miR-186-5p水平低于敏感组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清miR-135b与miR-148a-3p呈正相关,与miR-186-5p呈负相关,血清miR-148a-3p与miR-186-5p呈负相关(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p是乳腺癌患者化疗效果的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p联合预测化疗耐药的曲线下面积(AUC)高于三者单独预测AUC(均P<0.05)。结论:乳腺癌患者血清miR-135b、miR-148a-3p水平呈高表达,血清miR-186-5p水平呈低表达,三者水平变化与新辅助化疗效果有关,且三者联合检测对患者新辅助化疗耐药的预测价值更高。

微小RNA-186在非小细胞肺癌中的表达及与临床特征的相关性分析

目的检测微小RNA-186(miR-186)对非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)细胞的影响,组织中的表达及其与临床特征的相关性分析。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NSCLC组织、NSCLC旁组织、NSCLC细胞和人正常肺上皮细胞中miR-186的表达水平;miR-186高表达组NSCLC患者与低表达组患者的5年生存率,采用Log-rank分析;MTT实验检测细胞的增殖;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;卡方检验分析miR-186与NSCLC患者临床特征的相关性。结果NSCLC组织中miR-186的表达水平低于NSCLC旁组织;NSCLC细胞系中miR-186的表达水平低于人正常肺上皮细胞;miR-186低表达的NSCLC患者5年生存率低于miR-186高表达组;miR-186抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭;miR-186的表达水平与NSCLC患者的TNM分期、病理分级和淋巴结转移相关。结论miR-186可抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭,在NSCLC组织中低表达与患者的TNM分期、病理分级和淋巴结转移相关,并影响患者的生存率。

长链非编码RNA SNHG7靶向微小RNA-186-5p及对肝癌细胞迁移侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(SNHG7)靶向微小RNA-186-5p(miR-186-5p)对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在机制。方法基于UALCAN网站分析TCGA数据库中肝癌组织的SNHG7水平,应用Kaplan-Meier Plotter数据库分析SNHG7水平与肝癌预后的关系;采用实时荧光定量PCR检测人正常肝上皮细胞HL-7702和肝癌细胞(HCCLM3、Hep3b、HepG2、HuH-7)的SNHG7水平。选择HuH-7细胞并转染靶向SNHG7的小干扰RNA(si-SNHG7组)或阴性对照序列(si-NC组)并以未转染的细胞为对照组,MTT、划痕实验和Transwell小室实验分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭情况。双荧光素酶报告基因实验验证SNHG7与miR-186-5p及miR-186-5p与AKT3间的靶向关系,Western blotting检测磷酸化PI3K调节亚基p85α(p-PI3K p85α)和磷酸化AKT(p-AKT)的水平。结果肝癌组织的SNHG7水平较正常组织升高且与肿瘤分期和分级有关(P<0.05);肝癌组织的SNHG7水平与无进展生存期(PFS)有关,其中SNHG7低水平者的中位PFS为25.13个月,优于高水平者的15.07个月(P<0.05)。肝癌细胞的SNHG7水平高于HL-7702细胞(P<0.05);与对照组和si-NC组相比,si-SNHG7组的细胞活力降低,划痕愈合率和穿膜细胞数减少,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-186-5p是SNHG7的作用靶点,且miR-186-5p表达受SNHG7负调控;miR-186-5p能够靶向负调控AKT3表达。与对照组和si-NC组相比,si-SNHG7组HuH-7细胞的p-PI3K p85α和p-AKT水平降低(P<0.05)。结论SNHG7可能通过调控miR-186-5p/PI3K/AKT3轴来促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。本研究结果为探究肝癌转移提供一种新机制。

微小RNA-186上调Dicer1抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移的机制研究

目的探讨微小RNA-186(miR-186)通过调控Dicer1对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移的影响及其作用机制。方法收集2018年1月至2019年2月于山东省威海市中心医院经手术切除后病理证实为乳腺癌的组织标本及其对应的癌旁正常组织标本各40份,实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-186在乳腺癌组织及对应的癌旁正常组织标本、人乳腺癌细胞株MCF-7以及正常人乳腺上皮细胞MCF10A的表达情况;Transwell法检测miR-186对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-186对乳腺癌细胞株MCF-7迁移能力的影响;生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验验证miR-186和Dicer1的靶向关系;蛋白质印迹法检测Dicer1在各细胞株中的表达。结果乳腺癌组织中miR-186的表达水平显著低于癌旁正常组织[(0. 38±0. 11)比(0. 98±0. 24)](P <0. 05);miR-186在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达水平显著低于正常人乳腺上皮细胞MCF10A[(0. 14±0. 05)比(1. 04±0. 27)](P <0. 05)。过表达miR-186后,MCF-7-mimic-miR-186细胞穿过Matrigel基质胶的数量及覆盖划痕区域少于MCF-7和MCF-7-mimic-NC(均P <0. 05)。经www. microRNA. org网站预测发现miR-186和Dicer1有互补结合序列,双荧光素酶报告实验证实二者的靶向结合关系。人乳腺癌细胞株MCF-7中Dicer1表达水平显著低于正常人乳腺上皮细胞MCF10A,MCF-7-mimic-miR-186中Dicer1表达水平明显高于MCF-7和MCF-7-mimic-NC(均P <0. 05)。结论 miR-186通过靶向正调控Dicer1的表达,抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭迁移能力。

微小RNA-186在原发性无精子症病人外周血中的表达及诊断价值

目的:检测微小RNA-186(miR-186)在原发性无精子症(IA)病人外周血中的表达量,并探讨其对IA的诊断价值。方法:收集2015-2017年在泌尿外科就诊的IA病人(IA组)140例和正常生育的男性(对照组)140名的外周血标本。常规提取外周血DNA和RNA,采用多重PCR试验检测无精子症因子(AZF)在2组间的微缺失情况。采用实时荧光定量PCR试验检测miR-186在2组间的表达差异。分析外周血中miR-186的表达与AZF微缺失的相关性。采用ROC分析评价外周血中miR-186表达对IA的诊断价值。结果:2组年龄、体质量指数、睾酮水平及吸烟情况差异均无统计学意义(P>0.05)。IA组中8例病人存在AZF微缺失(P<0.05),微缺失率为5.71%(8/140),而对照组中未检测出AZF微缺失(P<0.05)。miR-186在IA组外周血中的表达量较对照组明显升高(P<0.01)。外周血中miR-186的表达与AZF微缺失无相关性(P>0.05)。miR-186对IA具有较高的诊断价值,ROC曲线下面积为0.84(95%CI:0.794~0.886),当miR-186表达量为0.52时为最佳诊断分界点,敏感度为71.86%,特异度为80.39%。结论:miR-186在IA病人外周血中高表达,但与AZF微缺失无相关性。外周血中高表达的miR-186可能作为IA的一种新的诊断标志物。

微小RNA-186-5p(miR-186-5p)下调TLR3表达抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡

目的研究高糖处理AC16心肌细胞微小RNA-186-5p(miR-186-5p)、Toll样受体3(TLR3)表达水平的变化及其与心肌细胞凋亡的关系。方法靶基因预测数据库Target Scan7.1预测miR-186-5p可直接作用于TLR3,采用高糖诱导培养的人AC16心肌细胞,建立糖尿病心肌病模型。采用实时定量PCR检测心肌细胞miR-186-5p水平,Western blot法检测心肌细胞TLR3表达水平。采用细胞转染过表达或降低miR-186-5p或TLR3水平,通过流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,Western blot法检测心肌细胞裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白表达,荧光素酶报告基因检测miR-186-5p与TLR3的相互作用。结果生物信息学分析和荧光素酶活性测定证实TLR3为miR-186-5p直接作用的靶基因,高糖处理的心肌细胞miR-186-5p表达下调,过表达miR-186-5p可逆转高糖诱导的细胞凋亡,并降低c-caspase-3蛋白水平。下调TLR3水平抑制高糖诱导的细胞凋亡并降低c-caspase-3蛋白水平。过表达TLR3可以上调miR-186-5p抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡水平。TLR3表达水平升高可逆转miR-186-5p抑制HG诱导心肌细胞凋亡的作用。结论miR-186-5p通过下调TLR3表达抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡。

微小RNA-186靶向调控ARAP2表达及对口腔鳞癌细胞侵袭迁移的影响

目的探讨微小RNA-186(miR-186)靶向调控A型激酶锚定蛋白2(ARAP2)表达及对口腔鳞癌(OSCC)细胞侵袭迁移的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测OSCC细胞HN13和人口腔黏膜正常上皮细胞HOK的miR-186水平;脂质体法向HN13细胞分别转染miR-186模拟物(Mimics组)、抑制物(Inhibitor组)和对照随机序列(对照组),QPCR检测miR-186水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖能力,Transwell侵袭和迁移实验检测穿膜细胞数,双荧光素酶报告基因实验验证miR-186与ARAP2的靶向关系,Western blotting检测ARAP2的蛋白水平。结果HN13细胞的miR-186水平高于HOK细胞(3.945±0.712 vs.1.049±0.268,P<0.05);与对照组(1.074±0.192)相比,Mimics组的miR-186水平(4.142±0.348)升高,而Inhibitor组(0.124±0.039)降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,Mimics组在24、48 h的细胞增殖活力升高,而Inhibitor组24、48 h的细胞增殖活力降低(P<0.05)。Transwell侵袭实验中对照组、Mimics组和Inhibitor组的穿膜细胞数依次为(22.9±3.1)、(71.5±9.6)和(15.4±2.4)个,迁移实验中依次为(51.2±6.1)、(106.7±12.5)和(36.8±5.6)个,与对照组相比,Mimics组的穿膜细胞数增多,而Inhibitor组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-186可抑制ARAP2野生型3′端非翻译区的相对荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。与对照组(0.436±0.026)相比,Mimics组的ARAP2水平(0.024±0.013)降低,而Inhibitor组(0.657±0.019)升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-186在OSCC细胞中表达上调,对OSCC细胞的侵袭与迁移起促进作用,可能通过靶向ARAP2来发挥促癌基因,有可能成为OSCC诊断标记物和新型生物治疗的靶点。

微小RNA-186在泌尿生殖系统肿瘤中的研究进展

微小RNA(miR)参与了癌变和人类癌症的发展,关于miR-186在各种癌症包括泌尿生殖系统肿瘤中的表达已经进行了大量研究,结果均表明miR-186影响着肿瘤中的各种生物过程,可作为泌尿生殖系统肿瘤诊断和预后评估的标志物。本文就miR-186在泌尿生殖系统肿瘤中的研究进展予以综述。

微小RNA-186调控E-钙黏蛋白对肾癌细胞增殖和转移的影响

目的探讨微小RNA-186(miR-186)在肾癌中的作用及其靶向调控E-钙黏蛋白影响肾癌细胞增殖和转移的分子机制。方法收集2015年1月至2019年1月山西省人民医院肾癌组织标本40例,采用实时定量PCR检测miR-186在40例肾癌组织及4种肾癌细胞系中的表达。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成、细胞划痕、Transwell实验和流式细胞学等方法检测miR-186过表达对肾癌786-O细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的影响,裸鼠成瘤实验分析miR-186对肾肿瘤生长的影响。采用Western印迹分析miR-186对上皮-间充质转化(EMT)相关标记物如E-钙黏蛋白表达的影响,双荧光素酶报告基因验证miR-186与E-钙黏蛋白的靶向关系。结果40例患者中,男26例、女14例;年龄(58.4±9.2)岁。miR-186在肾癌组织和细胞中表达下调(组织:0.0052±0.0004比0.0155±0.0015,P<0.001;细胞:0.3343±0.0251、0.4570±0.0266、0.2298±0.0110、0.7411±0.0910比1.0000±0.0852,均P<0.001),miR-186在肿瘤直径大小(≥4 cm比<4 cm为0.0032±0.0034比0.0084±0.0072,P<0.001)、临床分期(≤Ⅱ期比>Ⅱ期为0.0078±0.0058比0.0027±0.0023,P=0.021)及组织学分级(<Ⅱ级比≥Ⅱ级为0.0088±0.0063比0.0046±0.0030,P<0.001)的组间差异有统计学意义。miR-186过表达可抑制肾癌786-O细胞增殖和侵袭迁移,诱导细胞凋亡,并抑制肿瘤生长。miR-186可以直接靶向调控E-钙黏蛋白并促进其表达。结论miR-186可能通过直接调控E-钙黏蛋白影响EMT并抑制肾癌细胞增殖和转移。

miR-186对HL-60细胞增殖、迁移的调控及机制研究

目的 探讨过表达微小RNA-186(miR-186)对人原髓细胞白血病HL-60细胞上皮间质转化(EMT)、增殖、迁移及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路的调控作用。方法 选取体外培养HL-60细胞,按照不同的转染方式分为对照组、mimic NC组、miR-186组、miR-186+抑制剂组、miR-186+激活剂组。采用实时荧光定量聚合酶链反应、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Transwell小室法及蛋白免疫印迹法检测miR-186相对表达水平、增殖率、迁移率、EMT相关因子及其信使RNA(mRNA)相对表达水平并进行比较、分析。结果 与mimic NC组相比,miR-186组HL-60细胞miR-186相对表达水平、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及其mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05),而增殖率、迁移率、磷酸化(p)-PI3K、p-AKT、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)及其mRNA表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-186组相比,miR-186+抑制剂组HL-60细胞E-cadherin及其mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05),而增殖率、迁移率、p-PI3K、p-AKT、N-cadherin、Vimentin、FN及其mRNA表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与miR-186组相比,miR-186+激活剂组HL-60细胞E-cadherin及其mRNA表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05),而增殖率、迁移率、p-PI3K、p-AKT、N-cadherin、Vimentin、FN及其mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 过表达miR-186通过阻遏PI3K/AKT信号通路抑制HL-60细胞EMT,进而抑制HL-60细胞增殖和迁移。

急性胰腺炎患者血清TFF2、miR-186-5p表达水平与疾病严重程度的关系

目的 探究急性胰腺炎(AP)患者血清中三叶因子2(TFF2)、微小RNA-186-5p(miR-186-5p)表达水平与疾病严重程度的关系。方法 选取2021年3月—2022年3月沧州市中心医院收治的AP患者110例作为研究对象,根据病情严重程度分为轻症组60例和重症组50例,同时选取55名在本院体检健康人员作为对照组,比较三组血清TFF2、miR-186-5p水平。采用Pearson相关性分析血清TFF2、miR-186-5p水平与hs-CRP、IL-18、TNF-α水平和APACHEⅡ评分的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析血清TFF2、miR-186-5p水平对重症SAP的诊断价值。采用Logistic回归分析影响重症AP的因素。结果 重症组TFF2、hs-CRP、IL-18、TNF-α水平和APACHEⅡ评分均高于轻症组,miR-186-5p水平低于轻症组(P<0.05)。相关性分析显示,miR-186-5p与TFF2有靶向结合位点且miR-186-5p与TFF2表达呈负相关(r=-0.479,P<0.05),AP患者血清TFF2与hs-CRP、TNF-α、IL-18、APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.496、0.541、0.474、0.418,P<0.05);miR-186-5p与hs-CRP、TNF-α、IL-18、APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.421、-0.561、-0.443、-0.425,P<0.05)。ROC分析显示,TFF2、miR-186-5p辅助评估是否发生重症AP的曲线下面积(AUC)分别是0.800(95%CI:0.717~0.882)、0.824(95%CI:0.747~0.900),二者联合检测的灵敏度为80.00%,特异度为83.30%,AUC为0.888(95%CI:0.826~0.950)。多因素Logistic回归分析显示,TFF2是影响重症AP的危险因素,miR-186-5p是保护因素(P<0.05)。结论 AP患者血清TFF2水平升高,miR-186-5p表达水平降低,并且二者与AP患者病情的严重程度密切相关,可作为评估AP患者病情的分子标志物。

miR-186在宫颈癌中的研究进展

宫颈癌(CC)作为女性生殖系统中最常见的恶性肿瘤之一,其发生和发展涉及着多种调控机制。微小RNA(miRNA)作为一种非编码RNA,在转录后水平上调节基因的表达并起着重要作用。miRNA-186(miR-186)作为一种重要的miRNA,在CC中的异常表达与细胞的增殖、凋亡、侵袭等过程密切相关,并且在CC细胞对化疗的敏感性中起着调节作用。该文将对miR-186在CC发生和发展中的调控机制研究进展进行综述。

MiRNA-186在非小细胞肺癌中的研究进展

微小RNA(microRNAs, miRNAs)是一类内源性非编码,长度在12~15个核苷酸的单链小分子RNA。MiRNA-186在多种肿瘤中特别是非小细胞肺癌中表达异常,大多通过作用于靶基因的3′非翻译区(3′-untranslated region,3′UTR)影响肿瘤细胞的生长、增殖、侵袭和凋亡等生物学行为。与癌症相关的miRNAs不仅可以作为可靠的诊断标志物,而且还可作为潜在的治疗靶点。MiRNA-186与其上下游因子之间的相互作用构成了复杂的调控网络,有望成为非小细胞肺癌诊疗及预测预后的重要手段。本文就近年来miRNA-186在非小细胞肺癌中的研究进展进行综述。

恶性黑色素瘤组织中miRNA-186和miRNA-146a表达及与病理特征和预后的关系研究

目的探讨恶性黑色素瘤组织中微小RNA(miRNA)-186和miRNA-146a表达水平及与病理特征和预后的关系。方法收集2017年1月—2021年1月浙江金华广福肿瘤医院行手术切除的93例恶性黑色素瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定miRNA-186和miRNA-146a表达。所有患者均随访至2022年1月,评估患者预后情况。比较肿瘤组织与瘤旁组织中miRNA-186和miRNA-146a相对表达量;比较不同病理特征肿瘤组织中miRNA-186和miRNA-146a相对表达量;分析miRNA-186和miRNA-146a表达水平与预后的关系;采用多因素logistic回归分析影响恶性黑色素瘤患者预后的危险因素。结果肿瘤组织中miRNA-186相对表达量高于瘤旁组织,miRNA-146a低于瘤旁组织(均P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤部位和Clark分级患者miRNA-186和miRNA-146a相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);IV期患者miRNA-186相对表达量高于II期和III期患者,淋巴结转移患者miRNA-186相对表达量高于无淋巴结转移患者(均P<0.05);IV期患者miRNA-146a相对表达量低于II期和III期患者,淋巴结转移患者miRNA-146a相对表达量低于无淋巴结转移患者(均P<0.05)。随访至2022年1月,93例患者中,生存74例,死亡19例。死亡组患者肿瘤组织miRNA-186相对表达量高于生存组,miRNA-146a相对表达量低于生存组(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,临床分期、淋巴结转移、miRNA-186表达和miRNA-146a表达是影响恶性黑色素瘤患者预后的危险因素。结论恶性黑色素瘤组织中miRNA-186高表达、miRNA-146a低表达,miRNA-186和miRNA-146a表达水平与临床分期、淋巴结转移和患者预后密切相关。

miR-186-5p基于JAK/STAT3通路对三叉神经痛模型大鼠胶质细胞活化的影响

目的 基于酪氨酸蛋白激酶/信号传导与转录激活因子(JAK/STAT)3通路探讨微小RNA-186-5p(miR-186-5p)对三叉神经痛模型大鼠胶质细胞活化的影响。方法 选取50只健康雄性大鼠,随机选取10只为正常组,剩余40只建立三叉神经痛模型,最终39只建模成功,随机分为三叉神经痛组、上调组、下调组各13只。建模完成后上调组注射10μl miR-186-5p过表达慢病毒悬液,下调组注射10μl miR-186-5p沉默慢病毒悬液,正常组、三叉神经痛组不做处理。对比各组体质量、机械痛阈,酶标分析仪检测白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平,Western印迹法检测非受体型JAK2、STAT3表达。结果 与正常组比较,其他3组GDNF、GFAP、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平显著较高(P<0.05)。与三叉神经痛组比较,上调组GDNF、GFAP表达水平较低,TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平较高,下调组GDNF、GFAP表达水平较高,TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与上调组比较,下调组GDNF、GFAP表达水平较高,TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。下调组JAK2、STAT3表达显著低于三叉神经痛组、上调组(P<0.05)。结论 下调三叉神经痛大鼠miR-186-5p表达能有效改善机械痛阈,减轻炎症反应,改善胶质细胞GDNF、GFAP表达,其机制可能是JAK/STAT3信号通路达得调控效果的。

术前血清miR-186-5p对急性冠脉综合征患者PCI术后发生主要不良心血管事件的预测价值

目的探讨术前血清miR-186-5p表达对急性冠脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选择拟行PCI治疗的150例ACS患者(ACS组)和103例体检健康者(对照组),检测PCI术前及术后1、2、3、7 d血清miR-186-5p表达。出院后随访ACS患者12个月,以随访期间MACE为终点事件,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-186-5p表达预测ACS患者PCI术后发生AMCE的价值。采用Kaplan-Meier生存分析不同miR-186-5p表达患者MACE发生率,采用Cox风险回归分析ACS患者PCI术后发生MACE的危险因素。结果ACS患者术前、术后1 d血清miR-186-5p表达高于对照组(P均<0.05),术前血清miR-186-5p表达高于术后1、2、3、7 d(P均<0.05),术后1 d血清miR-186-5p表达高于术后2、3、7 d(P均<0.05)。术前血清miR-186-5p预测ACS患者PCI术后发生MACE的效能最高,曲线下面积为0.878,灵敏度为82.86%,特异度为88.70%。Kaplan-Meier生存分析显示,miR-186-5p高表达者MACE发生率高于miR-186-5p低表达者(P<0.05),Cox风险回归分析示术前Gensini评分、术前miR-186-5p表达是ACS患者PCI术后发生MACE的危险因素(P均<0.01)。结论术前高表达miR-186-5p是ACS患者PCI术后MACE的危险因素,对预测ACS患者PCI术后发生MACE有较高价值,可作为ACS患者预后评估提供参考。

miR-186在乳腺癌中的表达水平及临床意义

探讨miR-186在乳腺癌中表达水平及与临床特征的相关性。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测乳腺癌组织、正常乳腺组织、乳腺癌细胞和正常乳腺细胞中miR-186的表达水平;分析miR-186高表达组乳腺癌患者与miR-186低表达组乳腺癌患者的5年生存率;分析miR-186与乳腺癌患者临床特征的相关性。结果显示,乳腺癌组织中miR-186的表达水平低于乳腺正常组织;有淋巴结转移的乳腺癌患者的组织中miR-186的表达水平低于无淋巴结转移的乳腺癌患者;乳腺癌细胞系中miR-186的表达水平低于正常乳腺细胞;miR-186低表达的乳腺癌患者5年生存率低于miR-186高表达的乳腺癌患者;miR-186的表达水平与乳腺癌患者的雌激素受体、TNM分期和淋巴结转移相关。结果表明,miR-186在乳腺癌患者中处于低表达水平,且与患者的TNM分期和淋巴结转移相关。

miR-186-5p对冠心病大鼠血管内皮细胞损伤及FGF2/FGFR1信号通路的影响

目的探究微小RNA-186-5p(miR-186-5p)对冠心病(CHD)大鼠血管内皮细胞损伤的影响,以及对成纤维细胞生长因子2(FGF2)/成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)信号通路的作用。方法48只雄性SD大鼠均分成对照组、模型组、miR-186-5p抑制剂组和miR-186-5p抑制剂NC组。除对照组外,其余组大鼠均构建CHD模型,并给予相应干预4周。测定大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)以及血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)-1水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠冠状动脉组织的病理学变化;Western blot法检测大鼠冠状动脉组织中FGF2、FGFR1蛋白相对表达水平;双荧光素酶验证miR-186-5p与FGF2的靶向关系。结果对照组大鼠冠状动脉血管管壁形态均匀,无炎性细胞浸润;模型组和miR-186-5p抑制剂NC组血管内皮细胞排列紊乱,炎性细胞浸润明显;miR-186-5p抑制剂组较模型组病理变化程度减轻,炎性细胞浸润减少。与对照组比较,模型组LVEF、LVFS、HDL-C、NO水平及FGF2、FGFR1蛋白相对表达水平降低,而TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-6、TNF-α、ET-1水平升高(P<0.05)。与模型组和miR-186-5p抑制剂NC组比较,miR-186-5p抑制剂组大鼠LVEF、LVFS、HDL-C、NO水平及FGF2、FGFR1蛋白相对表达水平升高,而TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-6、TNF-α、ET-1水平降低(P<0.05)。模型组和miR-186-5p抑制剂NC组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告实验结果证实,miR-186-5p与FGF2存在靶向结合位点。结论miR-186-5p的下调可减轻CHD大鼠的炎症反应和血管内皮细胞损伤,该作用与激活FGF2/FGFR1信号通路有关。

miR-186海绵载体的构建及其在EA.hy926细胞株中的表达

目的:构建微小RNA-186(miR-186)基因的海绵载体,建立稳定敲减miR-186的EA.hy926细胞株。方法:化学合成miR-186海绵体序列,并克隆到慢病毒FV040表达载体上;采用lipofectamine 2000共转染FV040-miR-186-sponge载体和慢病毒辅助包装质粒到HEK293T细胞,包装慢病毒,测定病毒滴度;FV040-control慢病毒作为对照组,FV040-miR-186-sponge作为实验组,分别感染EA.hy926细胞,筛选稳转细胞株;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测空白对照组、FV040-control对照组及FV040-miR-186-sponge实验组中EA.hy926细胞miR-186的相对表达水平。结果:测序结果显示克隆的目的基因序列与设计的miR-186海绵体序列完全一致。在感染的EA.hy926细胞中观察到绿色荧光蛋白(GFP)的表达。FV040-control包装的慢病毒滴度为2×108TU·mL^-1,FV040-miR-186-sponge组慢病毒滴度为6×108TU·mL^-1;成功建立了稳定表达miR-186-sponge的EA.hy926细胞株,感染效率达95%;qPCR检测,与空白对照组和FV040-control组比较,FV040-miR-186-sponge组EA.hy926细胞中miR-186相对表达水平降低(P<0.01)。结论:成功构建了miR-186基因的海绵载体,建立了稳定下调miR-186表达的EA.hy926-miR-186-sponge细胞株。

miR-186在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的分析探讨微小RNA-186(miR-186)在急性髓系白血病(AML)患者中的表达水平及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法检测85例初发AML(非M3型)患者miR-186相对表达量,回顾性分析其与患者临床特征以及预后的相关性。结果与健康人群相比,AML患者miR-186表达水平明显降低。以miR-186中位表达量将患者分为低表达组和高表达组,miR-186低表达组较高表达组骨髓原始细胞比例明显偏高,在低危核型出现的概率明显偏低。miR-186低表达组和高表达组的3年总生存(OS)率分别为30%和68%,3年无事件生存率分别为20%和61%,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,miR-186低表达是AML患者OS的独立不良预后因素(P=0.030)。此外,在正常核型AML患者中,miR-186低表达组和高表达组的3年OS分别为33%和70%,差异有统计学意义(P=0.016)。结论初诊AML普遍存在miR-186表达下调,miR-186低表达可能是AML患者的独立预后不良因子。