微小RNA-187在原发性肝癌组织的表达和其调控机制

目的检测微小RNA（miRNA，miR）-187在原发性肝癌患者癌组织和癌旁组织中的表达，使用miR-187 mimics转染后观察其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖和迁移侵袭的影响。 方法收集74例原发性肝癌患者的癌组织和癌旁组织，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测miR-187的相对表达。使用噻唑蓝（MTT）法、划痕实验和Transwell小室侵袭实验观察miR-187 mimics转染后其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖、迁移和侵袭的影响。 结果在癌组织与癌旁组织的比较中，癌组织[1.61（1.55，1.68）] miR-187表达水平明显高于癌旁组织[0.47（0.41，0.49）]，差异有统计学有意义（P＝0.028）。肝癌细胞系Hep3B （4.1±0.6）和HepG2（2.5±0.4）的miR-187相对表达水平，明显高于肝正常细胞系THLE-2（1.0±0.1），差异有统计学意义（P＝0.003，P＝0.013）。转染miR-187 mimic后36h和48h，HepG2和Hep3B均表现出明显的增殖能力（0.75±0.16和0.56±0.22）、迁移能力[（64.6±8.3）%和（58.4±6.2）%]和侵袭能力[（37.5±7.8）%和（71.2±5.0）%]的增强，且差异有统计学意义（P＝0.011和P＝0.020；P＝0.009和P＝0.016；P＝0.004和P＝0.008）。 结论癌组织中的miR-187表达水平升高，通过机制研究结果显示，miR-187与肿瘤细胞株的增殖和迁移侵袭有关，miR-187的过表达能够明显增加HepG2和Hep3B细胞株的增殖和迁移侵袭能力。

miRNA-182与miRNA-187联合检测对前列腺癌诊断的价值

目的探讨微小RNA(miRNA)-182与miRNA-187联合检测对前列腺癌(PCa)的临床诊断价值。方法选取河北北方学院附属第一医院2019年12月至2020年12月收治的PCa患者33例为试验组,前列腺增生(BPH)患者30例为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测前列腺影像学异常区域(IAA)组织中miRNA-182和miRNA-187表达水平。分析miRNA-182和miRNA-187表达水平与试验组各项临床资料间的关系及对PCa的诊断效能。结果试验组IAA组织中miRNA-182表达水平明显高于对照组(P=0.002),miRNA-187表达水平明显低于对照组(P<0.001)。miRNA-187表达水平同血清前列腺特异性抗原水平、远端转移、IAA大小相关(P<0.05);与年龄、Gleason评分、临床分期无关(P>0.05)。IAA组织中miRNA-182与miRNA-187联合检测诊断PCa的效能最高(AUC=0.822,95%CI:0.771~0.839,P<0.001)。结论IAA组织中miRNA-182与miRNA-187联合检测可提高PCa诊断效能,具有一定临床应用价值。

上调miR-187*表达对人结肠癌细胞株增殖活性的影响

目的:研究微小RNA-187*(miR-187*)在人结肠癌细胞株及正常结肠组织中的表达,同时分析miRNA-187*上调对人结肠癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法:选取3例结直肠癌组织及配对正常黏膜组织进行miRNA芯片检测,筛选出大肠癌组织中异常表达的miRNA;提取8株结肠癌细胞株和10例正常结肠组织中总RNA,采用Taqman实时定量PCR方法检测miR-187*的表达;预测miR-187*的靶基因,采用实时定量PCR方法检测靶基因的表达;采用脂质体介导的转染方法将miR-187*模拟物转染人结肠癌细胞株HCT116;检测转染后miR-187*和靶基因的表达;通过MTS试剂盒检测细胞增殖能力,流式细胞术检测miR-187*对细胞周期的影响。结果:miRNA芯片检测结直肠癌组织中miR-187*的表达较正常黏膜明显降低;miR-187*在结肠癌细胞株中的表达较正常结直肠黏膜组织明显下调;而B细胞特异性莫洛尼小鼠白血病病毒整合位点1(BMI-1)mRNA在结肠癌细胞株中表达较正常黏膜组织中明显增高;转染miR-187*模拟物后,miR-187*表达明显增加;同时miR-187*的高表达可以显著抑制BMI-1 mRNA的水平;miR-187*模拟物转染组和阴性对照组相比,细胞增殖活力明显受抑制(P<0.05),同时增殖细胞核抗原表达亦明显降低;细胞周期检测结果显示,miR-187*模拟物转染组G2/M期细胞增多,和阴性对照组间差异有统计学意义。结论:miR-187*在人结肠癌细胞株中表达下调;上调miR-187*表达可抑制结肠癌细胞增殖活性,影响结肠癌细胞周期;miR-187*可能通过抑制BMI-1在结肠癌中发挥抑癌作用。

miR-187、MMP2、CEA在胆囊癌患者中的表达水平及临床意义

目的探讨微小RNA-187(miR-187)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、癌胚抗原(CEA)在胆囊癌患者中的表达水平及临床意义。方法采用回顾性研究方法,收集2016年1月至2018年6月西安高新医院肿瘤科收治的胆囊癌患者102例作为癌症组,100例胆囊良性肿瘤患者作为良性组,收集同期100例体检健康者作为对照组,比较3组研究对象miR-187、MMP2、CEA水平。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析miR-187、MMP2、CEA对胆囊癌的诊断效能。采用COX回归分析胆囊癌患者预后的影响因素。结果癌症组miR-187、MMP2、CEA水平明显高于对照组及良性组,良性组miR-187、MMP2、CEA水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-187、MMP2、CEA联合检测诊断胆囊癌的曲线下面积为0.908,灵敏度和特异度分别为92.2%和80.0%。COX回归分析结果显示,Nevin分期、TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况及miR-187、MMP2、CEA水平是胆囊癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论miR-187、MMP2、CEA水平在胆囊癌患者中明显升高,是影响患者预后的因素,且3项指标联合检测有助于胆囊癌的早期诊断。

circERBB2在卵巢癌中的表达及作用机制研究

目的探讨circERBB2在卵巢癌中的表达及作用机制。方法基于GEO数据库筛选卵巢癌差异表达环状RNA(circRNA),并查找circRNA相关靶基因,绘制韦恩图得到GSE79572数据集中差异表达基因与Targetscan 7.1预测所得微小RNA-187-3p(miR-187-3p)靶基因的交叉基因。收集20例卵巢癌患者的卵巢癌组织和癌旁正常组织,培养人正常卵巢细胞系HOSEpiC和人卵巢癌细胞系OVCAR-3、SKOV-3、3AO、OV90,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circERBB2、miR-187-3p、BCL6表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验和RNA下拉实验验证circERBB2、miR-187-3p、BCL6三者间的相互作用。通过多项细胞实验分析circERBB2、miR-187-3p、BCL6对卵巢癌细胞侵袭、迁移、增殖及细胞周期的影响。结果数据库分析结果显示,卵巢癌中差异表达circRNA为circERBB2,circERBB2靶向的miRNA为miR-187-3p,绘制韦恩图取交集后得到BCL6等7个交叉基因,circERBB2与miR-187-3p、miR-187-3p与BCL6存在潜在结合位点。卵巢癌组织中circERBB2、BCL6表达水平高于癌旁组织,miR-187-3p表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢癌细胞系OVCAR-3、SKOV-3、3AO、OV90中circERBB2表达水平均高于正常卵巢细胞系HOSEpiC,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验及RNA下拉实验证实,circERBB2、miR-187-3p、BCL6之间存在相互作用关系。多项细胞实验结果显示,抑制circERBB2表达能够抑制卵巢癌细胞增殖和迁移,这种抑制作用可在过表达miR-187-3p后被逆转;抑制miR-187-3p表达能够有效促进卵巢癌细胞增殖和迁移,这种促进作用可在抑制BCL6表达后被逆转。结论circERBB2能够通过靶向吸附miR-187-3p促进原癌基因BCL6表达,从而调节卵巢癌发生过程。