血清微小RNA-199a-3p、E盒结合锌指蛋白1水平对急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入术后预后的预测价值

目的探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后预后的预测价值。方法选取2021年5月至2022年5月秦皇岛市第二医院接收的行PCI术治疗的113例ACS患者为观察组,根据观察组患者PCI术后1年内是否发生主要不良心血管事件(MACE),分为MACE组26例和非MACE组87例,同期健康体检者106例为对照组。检测血清miR-199a-3p、ZEB1水平,比较MACE组和非MACE组临床资料,Pearson分析患者血清miR-199a-3p和ZEB1水平相关性,多因素Logistic分析影响ACS患者PCI术后发生MACE的影响因素,ROC曲线分析血清miR-199a-3p、ZEB1对ACS患者PCI术后发生MACE的预测价值。结果与对照组相比,观察组血清miR-199a-3p水平较低,ZEB1水平较高(t=13.709、25.641,P<0.05);在ACS患者中miR-199a-3p与ZEB1呈负相关(r=-0.421,P<0.05);ACS患者PCI术后较PCI术前血清miR-199a-3p水平高,ZEB1水平低(t=4.820、6.040,P<0.05);MACE组与非MACE组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、左心室射血分数、miR-199a-3p、ZEB1比较,差异有统计学意义(t=3.310、2.717、3.947、7.068、6.544,P<0.05);LDL-C、ZEB1水平是ACS患者PCI术后MACE的危险因素,左心室射血分数、HDL-C、miR-199a-3p水平是ACS患者PCI术后MACE的保护因素;miR-199a-3p、ZEB1联合预测ACS患者PCI术后MACE的曲线下面积为0.947,优于单独预测(Z=1.970、2.791,P<0.05)。结论ACS患者血清中miR-199a-3p、ZEB1水平呈负相关,两者均对ACS患者PCI术后MACE有预测价值,两者联合的预测价值更高。

槐角黄酮调控miR-199a-3p/p38MAPK/NF-κB对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌的影响

目的 探讨槐角黄酮对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌的影响。方法 将乳腺癌细胞BT549分为正常对照(NC)组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、miR-NC组、miR-199a-3p组、高剂量+anti-miR-NC组、高剂量+anti-miR-199a-3p组。采用CCK-8、克隆形成实验评估细胞增殖;采用Transwell法评估细胞迁移和侵袭。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-199a-3p表达。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及白细胞介素-1β(IL-1β)水平。采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测p-p38MAPK和p-p65蛋白表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,miR-199a-3p表达升高,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-199a-3p组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与高剂量+anti-miR-NC组比较,高剂量+anti-miR-199a-3p组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数升高,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,高剂量组BT549细胞p-p38MAPK和p-p65蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与高剂量+anti-miR-NC组比较,高剂量+anti-miR-199a-3p组BT549细胞p-p38MAPK和p-p65蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 槐角黄酮可抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症反应,其机制可能是通过上调miR-199a-3p表达、抑制p38MAPK/NF-κB通路实现的。

结直肠癌患者血清miR-150-5p和miR-200b-3p水平及临床意义

目的结直肠癌患者血清微小RNA(miR)-150-5p和miR-200b-3p水平及临床意义。方法回顾性选择2020年6月至2022年11月在沧州市人民医院就诊的结直肠癌患者116例为结直肠癌组,同时选取同期在本院治疗的结肠息肉患者60例作为结直肠良性肿瘤组,选择同期在本院行健康体检者60名为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测受试者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平;采用Pearson相关性分析对结直肠癌患者血清miR-150-5p与miR-200b-3p表达水平的相关性进行分析;分析结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平与病理特征的关系;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miR-150-5p、miR-200b-3p表达水平对结直肠癌的诊断价值。结果结直肠癌组、结直肠良性肿瘤组血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平均显著低于对照组,且结直肠癌组血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平均显著低于结直肠良性肿瘤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,结直肠癌患者血清miR-150-5p与miR-200b-3p表达水平呈正相关(r=0.562,P<0.05)。结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平与分化程度、淋巴结转移、TNM分期、浸润深度有关(P<0.05),其中低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、浸润深度T 3~T 4的结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平显著低于中高分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、浸润深度T_(1)~T_(2)的患者(P<0.05)。血清miR-150-5p、miR-200b-3p单独及联合诊断结直肠癌的曲线下面积(AUC)分别为0.800、0.828、0.893,联合诊断AUC显著高于单独预测AUC(P<0.05)。结论结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平降低,二者可作为诊断结直肠癌发生的辅助指标。

sPE患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达变化及与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系

目的观察重度子痫前期(sPE)患者血清微小核糖核酸-199a-5p(miR-199a-5p)、微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)表达变化,并分析其与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系,为围产儿结局的改善提供参考。方法选取sPE患者200例(观察组)和产检健康孕妇200例(对照组),采用RT-PCR法测算两组血清miR-199a-5p、miR-142-3p,酶联免疫吸附试验检测两组血清可溶性细胞内皮因子(sEng)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF),Pearson相关分析法分析观察组血清miR-199a-5p、miR-142-3p与血管内皮功能相关指标的相关性。根据围产儿结局将观察组分为结局不良组(29例)和结局良好组(171例),采用单因素分析法及多因素Logistic回归分析法分析患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达与围产儿结局的关系。结果与对照组比较,观察组血清miR-199a-5p表达及VEGF水平降低,血清miR-142-3p表达及sEng、sFlt-1、ET-1水平升高(P均<0.05)。观察组血清miR-199a-5p表达与sEng、sFlt-1、ET-1水平呈负相关,与VEGF水平呈正相关(P均<0.05);血清miR-142-3p表达与sEng、sFlt-1、ET-1水平呈正相关,与VEGF水平呈负相关(P均<0.05)。结局不良组和结局良好组年龄、早发型sPE比例、并发水肿比例、并发子痫比例、并发胎盘早剥比例、并发产后出血比例、血清miR-142-3p表达变化、血清miR-199a-5p表达变化比较,P均<0.05;多因素Logistic回归分析显示,早发型sPE、胎盘早剥、miR-142-3p高表达是sPE围产儿结局不良的危险因素(P均<0.05),miR-199a-5p高表达是sPE围产儿结局不良的保护因素(P<0.05)。结论sPE患者血清miR-199a-5p表达降低、miR-142-3p表达升高,与血管内皮损伤有关,miR-142-3p高表达是sPE围产儿结局不良的危险因素,miR-199a-5p高表达是sPE围产儿结局不良的保护因素。

微小RNA-199b-3p靶向调控SOX6的表达及其对结肠癌细胞SW620增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)靶向调控SOX6的表达及其对结肠癌细胞SW620增殖及凋亡的影响。方法采用Lipofectamine脂质体法将miR-199b-3p抑制剂及阴性对照(NC)转染至SW620细胞并分为抑制剂组和NC组,同时以未转染的SW620细胞作对照。采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测3组miR-199b-3p的表达以评价转染效果,MTT法和AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测转染后的增殖活性及凋亡率,QPCR和Western blotting检测各组凋亡相关基因(Bax和caspase-3)及SOX6的mRNA和蛋白水平,构建含有野生型及突变型SOX6-3’UTR的荧光报告基因质粒并采用双荧光素酶报告实验验证miR-199b-3p对SOX6的靶向调控作用。结果 QPCR检测显示,转染48 h后抑制剂组的miR-199b-3p的表达水平为0.526±0.034,低于未转染组的1.009±0.064和NC组的0.960±0.057,差异有统计学意义(P<0.05);与其余两组相比,抑制剂组转染24、48、72 h后的SW620细胞的增殖活性均降低(P<0.05);抑制剂组的凋亡率为(37.533±1.459)%,高于未转染组的(6.101±0.663)%和NC组的(8.753±1.061)%,差异均有统计学意义(P<0.05);抑制剂组SW620细胞的SOX6、Bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达水平均高于未转染组和NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验表明miR-199b-3p可显著抑制野生型SOX6-3’UTR的荧光荧光素酶活性,而对突变型质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响。结论 miR-199b-3p可靶向调控SOX6的表达,且下调miR-199b-3p表达可抑制SW620细胞的增殖并诱导凋亡,为结肠癌的治疗提供潜在的分子治疗靶点。

类风湿关节炎患者血清lncRNA TUG1、miR-199a-3p表达水平及其与疾病严重程度的相关性

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)和miR-199a-3p表达水平,以及两者与疾病严重程度的关系。方法选取102例RA患者为RA组,另选取102例健康者作为健康组。比较RA组与健康组之间血清lncRNA TUG1、miR-199a-3p表达水平,以及不同疾病活动度RA患者之间血清lncRNA TUG1和miR-199a-3p表达水平、基于C反应蛋白的28个关节疾病活动度评分(DAS28-CRP)、血清类风湿因子水平、血沉。分析RA患者血清lncRNA TUG1表达水平与血清miR-199a-3p表达水平的相关性,以及两者与DAS28-CRP、血清类风湿因子水平、血沉的相关性。结果RA组患者血清lncRNA TUG1表达水平高于健康组,血清miR-199a-3p表达水平低于健康组(均P<0.05)。随RA疾病活动度增加,RA患者血清lncRNA TUG1表达水平、血清类风湿因子水平、DAS28-CRP及血沉均呈升高趋势,而血清miR-199a-3p表达水平呈降低趋势(均P<0.05)。RA患者的血清lncRNA TUG1表达水平与DAS28-CRP、血清类风湿因子水平、血沉均呈正相关,而血清miR-199a-3p表达水平与血清lncRNA TUG1表达水平及上述指标均呈负相关(均P<0.05)。结论RA患者血清lncRNA TUG1表达水平上调,血清miR-199a-3p表达水平下调,二者均与疾病严重程度相关,两者有助于临床评估RA患者的病情。

重症肺炎支原体肺炎患儿外周血miR-199a-3p表达水平及其对预后不良的预测价值

目的检测重症肺炎支原体肺炎(SMPP)患儿外周血微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)表达水平,并分析其对患儿预后不良的预测价值。方法选择2019年2月至2020年10月陕西省榆林市星元医院收治的168例SMPP患儿作为重症组,165例轻症MPP患儿作为轻症组,150例健康儿童作为健康组。采用实时荧光定量PCR检测3组研究对象外周血miR-199a-3p表达水平;重症组、轻症组均予以常规治疗,统计治疗28 d后预后不良发生率;采用Logistic回归分析探讨外周血miR-199a-3p表达水平与重症组预后不良的关系,并分析其对重症组患儿预后不良的预测价值。结果重症组、轻症组患儿外周血miR-199a-3p表达水平均低于健康组,且重症组低于轻症组,差异均有统计学意义(P<0.05);重症组患儿治疗28 d后预后不良发生率高于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05);发病至入院时间>3 d、入院时急性生理和慢性健康状况评分Ⅱ评分>30分、外周血miR-199a-3p表达水平降低均是重症组患儿预后不良的最佳独立危险因素(P<0.05);外周血miR-199a-3p表达水平预测重症组患儿预后不良的最佳截断值为0.25,灵敏度、特异度、受试者工作特征曲线下面积分别为94.12%、97.35%、0.984。结论SMPP和轻症MPP患儿外周血miR-199a-3p表达水平均下降,SMPP患儿水平更低,预后不良发生率更高,miR-199a-3p表达水平与患儿预后不良有关,对SMPP患儿预后不良具有较好的预测价值。

血清miR-23b-3p、IL-18水平与肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿的病情及预后的关系

目的 分析血清微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)、白细胞介素-18(IL-18)水平与肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿的病情及预后的关系。方法 选取2019年1月至2022年1月于郑州大学附属儿童医院诊治的163例肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿作为研究对象(重症肺炎组),根据患儿预后分为预后不良组(48例)和预后良好组(115例);另选取同期收治的95例普通肺炎支原体肺炎患儿作为对照(普通肺炎组)。检测各组对象血清miR-23b-3p、IL-18水平的变化,分析miR-23b-3p、IL-18与病情相关指标的相关性,评估miR-23b-3p和IL-18对肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿预后不良的预测价值。结果 重症肺炎组患儿血清miR-23b-3p水平、小儿危重病例评分(PCIS)评分低于普通肺炎组(P<0.05),而血清IL-18、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)及血沉(ESR)高于普通肺炎组(P<0.05)。重症肺炎组患儿血清miR-23b-3p与PCT(r=-0.617,P<0.001)、WBC(r=-0.696,P=0.015)均呈负相关,而与PCIS评分呈正相关(r=0.705,P=0.002)。重症肺炎组患儿血清IL-18与CRP(r=0.639,P<0.001)、PCT(r=0.596,P=0.003)、WBC(r=0.602,P=0.013)均呈正相关,而与PCIS评分呈负相关(r=-0.669,P=0.024)。预后不良组患儿血清miR-23b-3p水平低于预后良好组,而IL-18水平高于预后良好组(P<0.05)。miR-23b-3p、IL-18预测肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.791、0.779,二者联合预测的AUC为0.857。结论 肺炎支原体感染所致重症肺炎患儿血清miR-23b-3p水平降低,IL-18水平升高,二者与患儿病情及预后均具有较好的量化关系,二者可为患儿的早期病情评估及诊治提供帮助。

血清miR-199a-3p、TXNIP与甲亢患者心房颤动的相关性分析

目的探讨血清中微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)水平与甲状腺功能亢进症(简称甲亢)患者心房颤动(简称房颤)的相关性。方法选取2018年3月至2020年9月蔡甸区人民医院收治的甲亢患者218例作为研究对象,按照是否合并房颤分为合并房颤组(98例)与未合并房颤组(120例)。采集患者入院后静脉血,检测患者血清中miR-199a-3p、TXNIP水平;采用多因素Logistic回归分析甲亢患者发生房颤的影响因素;采用TargetScan Human网站预测miR-199a-3p与TXNIP的靶向关系;采用Pearson相关分析miR-199a-3p与TXNIP水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-199a-3p与TXNIP对甲亢患者发生房颤的诊断价值。结果与未合并房颤组比较,合并房颤组患者总胆固醇和血清中miR-199a-3p水平较低,年龄、心率、左心房内径、左心室内径、血清中TXNIP水平较高(P<0.05)。总胆固醇、miR-199a-3p水平升高均是甲亢患者发生房颤的独立保护因素,年龄增加、左心房内径增大、TXNIP水平升高均是甲亢患者发生房颤的独立危险因素(P<0.05)。TargetScan Human网站预测,miR-199a-3p与TXNIP存在靶向结合位点。Pearson相关分析结果显示,甲亢合并房颤患者血清miR-199a-3p与TXNIP水平呈负相关(r=-0.226,P=0.025);血清miR-199a-3p水平与心率、左心房内径呈负相关(r=-0.248、-0.260,P=0.037、0.029);血清TXNIP水平与心率、左心房内径呈正相关(r=0.255、0.236,P=0.032、0.042)。血清miR-199a-3p、TXNIP评估甲亢患者发生房颤的曲线下面积分别为0.848、0.738,灵敏度分别为95.92%、82.65%,特异度分别为72.50%、57.50%。结论甲亢合并房颤患者血清miR-199a-3p呈低表达,TXNIP呈高表达,二者对评估甲亢患者发生房颤的风险具有一定的参考价值。

过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3、Panc-1铁死亡的作用机制

目的 探讨过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3和Panc-1铁死亡的作用机制。方法 瞬时转染miR-199-3p/5p模拟物和抑制物至BxPC-3、Panc-1细胞中。qRT-PCR检测细胞中miR-199-3p/5p表达水平;Western blotting检测SCL7A11、BTRC、TFRC蛋白水平。谷胱甘肽(GSH)、Fe^(2+)、脂质过氧化物(LPO)试剂盒检测细胞GSH、Fe^(2+)、LPO水平。免疫共沉淀检测BTRC、TFRC泛素化水平。双荧光素酶报告实验检测miR-199与靶基因的相互作用。结果 转染miR-199-3p/5p模拟物后,胰腺癌BxPC-3、Panc-1细胞株中miR-199-3p/5p、TFRC蛋白水平显著上调;SLC7A11、BTRC蛋白水平显著降低;LPO、Fe^(2+)含量升高,GSH含量降低。过表达BTRC能够显著降低TFRC蛋白水平。miR-199-3p靶向结合SLC7A11,miR-199-5p靶向结合BTRC。结论 过表达miR-199-3p/5p诱导胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1铁死亡,可能与靶向抑制BTRC、SLC7A11促进LPO累积有关。

miR-199-3p通过靶向VegfA抑制大鼠糖尿病视网膜病变

目的探究miR-199-3p在糖尿病视网膜病变(DR)中的作用及其机制。方法单次注射链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,RT-qPCR检测大鼠视网膜组织miR-199-3p、血管内皮生长因子A(VEGFA)表达;双荧光素实验验证miR-199-3p和VegfA的靶向关系;TUNEL染色检测视网膜细胞凋亡;Western blot检测VEGFA、转化生长因子-β(TGF-β)、肝细胞生长因子(HGF)、色素上皮衍生因子(PEDF)蛋白。结果成功建立糖尿病模型大鼠,且模型大鼠视网膜组织miR-199-3p显著下降,VEGFA显著升高(P<0.001);miR-199-3p靶向VegfA。miR-199-3p抑制显著降低视网膜神经节细胞数目,增强视网膜细胞凋亡,而抑制VegfA可显著减轻miR-199-3p抑制对视网膜细胞的损伤(P<0.01)。miR-199-3p过表达后TGF-β1、HGF显著降低,PEDF升高(P<0.001),而过表达miR-199-3p联合VEGFA可显著改变这种作用。结论miR-199-3p通过靶向VegfA抑制糖尿病大鼠视网膜病变。

原发性肝癌精准肝切除术临床效果观察及患者血清miR-199a/b-3p水平变化

目的观察原发性肝癌精准肝切除术的临床效果及患者血清miR-199a/b-3p水平变化。方法将108例肝癌患者按随机数字表法分为两组各54例,观察组行精准肝切除术治疗,对照组行传统肝切除术治疗。比较两组肝门阻断率、术中出血量、手术时间、术后住院时间、总住院费用,检测血清肝功能(ALT、TBIL、AST、ALB)、miR-199a/b-3p,记录术后并发症及术后1年复发情况。结果与对照组比较,观察组肝门阻断率低、术中出血量少、手术时间长、术后住院时间短、总住院费少(P均<0. 05);两组术前肝功能及血清miR-199a/b-3p比较差异无统计学意义,术后观察组ALT、TBIL、AST低于对照组而ALB、miR-199a/b-3p高于对照组(P均<0. 05);观察组术后并发症发生率、术后1年复发率均低于对照组(P均<0. 05)。结论肝癌患者行精准肝切除术治疗,可有效降低肝门阻断率、减少术中出血量、减轻肝功能损害,提高血清miR-199a/b-3p水平,降低术后并发症发生率及肝癌复发率,减轻患者的经济负担。

miR-199b-3p对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制探讨

目的探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并分析其调控机制。方法应用RT-qPCR检测人正常肾小管上皮细胞株HK-2细胞、肾癌细胞株786-O中的miR-199b-3p。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics建立miR-NC组和miR-199b-3p mimics组,分别应用CCK-8增殖实验、克隆形成实验、细胞流式实验、Transwell实验观察各组细胞增殖、凋亡、侵袭能力。应用生物信息学方法分析miR-199b-3p可能作用的靶基因。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics(10 nmol/L)、miR-199b-3p mimics(50 nmol/L)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)-siRNA,建立miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组、FGF2-siRNA组,应用Western blotting法检测FGF2及PI3K/AKT信号通路关键分子表达蛋白。结果786-O细胞中miR-199b-3p表达低于HK-2细胞(P<0.05)。CCK-8增殖实验、克隆形成实验验显示miR-199b-3p mimics组细胞增殖能力低于miR-NC组(P均<0.05)。细胞流式实验显示,miR-199b-3p mimics组细胞凋亡率高于miR-NC组(P<0.05)。Transwell实验结果显示,miR-199b-3p mimics组786-O细胞侵袭能力低于miR-NC组(P<0.05)。TargetScan7.2软件在线预测显示FGF23′非编码区与miR-199b-3p具有结合位点。Western boltting法实验结果显示,miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组FGF2蛋白表达分别为0.87±0.11、0.42±0.06、0.23±0.04,三组两两比较P均<0.05。miR-199b-3p mimics组、FGF2-siRNA组细胞中FGF2、p-AKT、p-ERK蛋白表达低于miR-NC组,AKT、ERK蛋白表达高于miR-NC组(P均<0.05)。结论miR-199b-3p在肾癌细胞中低表达,可以抑制肾癌细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,其作用机制可能与miR-199b-3p负靶向调控FGF2、PI3K/AKT信号通路有关。

MiR-199b-3p、miR-373、miR-548c-3p及Lin28在肺癌中表达及其意义

探讨miR-199b-3p、miR-373、miR-548c-3p与Lin28在肺癌中的表达,以及它们与临床指标的相关关系.用溶液法提取46例肺癌患者的癌组织和癌旁组织中的总RNA,Q-PCR检测基因的相对表达量.经过两独立样本t检验,比较miR-373(t=3.28,P=0.0007)、lin28(t=3.94,P=0.0016)及miR-548c-3p(t=2.98,P=0.002)在肺癌组织和癌旁组织中的表达,基因表达均有显著性差异.使用Spearman肺癌组织中RNA与免疫组织化学指标发现MiR-b199b-3p与MRP(Rs=0.40,P=0.029),miR-548c-3p和Ki167呈正相关关系(Rs=0.52,P=0.0056),miR-373与K167呈正相关关系(Rs=0.43,P=0.029),Lin28与P53呈负相关关系(Rs=-0.43,P=0.022),还与PGP呈负相关关系(Rs=-0.38,P=0.034).miR-373在肺癌患者组织中基因表达显著下调,而miR-548c-3p与Lin28基因表达呈上调,3个基因的表达与肿瘤的发生发展关系密切.

微小RNA-10b-3p对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨微小RNA-10b-3p (miR-10b-3p)对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用QPCR检测miR-10b-3p在ESCC TE-1、EC109、KYSE30、KYSE150、KYSE180、KYSE450和KYSE510细胞株中的相对表达量,选取相对表达水平最高和最低的细胞株分别转染miR-10b-3p抑制剂和模拟物,并设转染对照载体的对照组。采用MTS实验、克隆集落形成实验及Transwell趋化小室实验检测miR-10b-3p对ESCC细胞增殖,克隆形成及侵袭、迁移能力的影响。结果 miR-10b-3p在TE-1、EC109、KYSE30、KYSE150、KYSE180、KYSE450以及KYSE510细胞株中的相对表达量分别为0. 14、0. 27、0. 66、0. 10、0. 12、0. 08和0. 78。选取miR-10b-3p相对表达量最低的KYSE450细胞株和相对表达量最高的KYSE510细胞进行后续实验。MTS检测显示,与对照组比较,模拟物组KYSE450细胞的增殖能力显著上调(P<0. 05),抑制剂组KYSE510细胞的增殖能力显著降低(P<0. 05)。克隆集落形成实验显示,模拟物组KYSE450细胞的集落数为(613. 7±41. 1)个,高于对照组的(243. 7±25. 3)个(P <0. 05);抑制剂组KYSE510细胞的集落数为(90. 3±11. 0)个,低于对照组的(247. 0±14. 7)个(P<0. 05)。Transwell小室实验显示,模拟物组穿过迁移小室的KYSE450细胞数为(211. 1±27. 3)个,高于对照组的(151. 7±15. 3)个(P<0. 05);模拟物组穿过侵袭小室的细胞数为(183. 3±15. 5)个,高于对照组的(133. 5±8. 8)个(P<0. 05)。抑制剂组穿过迁移小室的KYSE510细胞数为(50. 0±6. 7)个,低于对照组的(83. 3±12. 9)个(P<0. 05);抑制剂组穿过侵袭小室的KYSE510细胞数为(38. 8±8. 5)个,低于对照组的(66. 7±7. 3)个(P<0. 05)。结论 miR-10b-3p可以促进ESCC细胞的增殖、侵袭和迁移,可能作为ESCC基因治疗的有效靶点。

MiR-199a/b-3p通过下调PAK4/MEK/ERK通路对胃癌细胞MGC-803的抑制作用

目的观察MiR-199a/b-3p基因对人胃癌细胞株MGC-803增殖的影响。方法利用q PCR法检测胃癌组织和对应的癌旁组织的MiR-199a/b-3p表达水平。转染MiR-199a/b-3p mimics和PAK4si RNA以明确它们对MGC-803增殖的作用。采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法分析转染细胞的生物学行为。Western blotting检测相应基因的表达水平。结果同癌旁组织相比,癌组织中MiR-199a/b-3p基因的表达水平显著减少(P<0.05)。过表达MiR-199a/b-3p和沉默PAK4都明显抑制MGC-803细胞增殖以及减少p-MEK和p-ERK的活化。此外,过表达MiR-199a/b-3p减少MGC-803细胞的PAK4表达。结论 MiR-199a/b-3p通过下调PAK4/MEK/ERK通路可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖,它可作为一种新的胃癌预后生物标志物和生物治疗靶点。

超表达微RNA-199a/b-3p对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响

目前乳腺癌的治疗靶点及治疗药物仍不能满足组织学形态各异、高度异质性的乳腺癌治疗,因此,探索能够抑制乳腺癌转移的新的治疗靶点、治疗方式,是目前临床上乳腺癌治疗研究的重点。微RNA（miRNA）是近年来发现的一种内源性短链RNA,具有调控细胞分化、生长、增殖、凋亡等的作用,与肿瘤的发生与发展关系密切。

血清miR-199a-5p与miR-141-3p的表达水平与慢性乙型肝炎患者预后相关性分析

目的探讨慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者血清中的miR-199a-5p与miR-141-3p表达水平与临床指标、HBV DNA载量、肝纤维化评价指标等的相关性,以及其在疾病诊断、病情进展和临床疗效等中的价值。方法选取2018年1月至2020年9月于重庆市巴南区人民医院就诊的118例CHB患者作为CHB组,并纳入同期在重庆市巴南区人民医院进行体检的120例健康体检者作为对照组。记录研究对象的年龄、性别和抗病毒治疗情况,检测谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、HBV DNA载量,计算APRI和FIB-4值,并检测血清miR-199a-5p与miR-141-3p的相对表达量。结果 CHB组的miR-199a-5p相对表达量为(1.76±0.42),显著高于对照组的相对表达量(0.69±0.13)(t=4.723,P<0.001);CHB组的miR-141-3p的相对表达量为(0.77±0.19),显著低于对照组的相对表达量(1.53±0.33)(t=5.135,P<0.001)。CHB患者的miR-199a-5p的相对表达量与HBV DNA载量和APRI均有显著正相关性(r分别为0.579和0.562,P均<0.05);CHB患者的miR-141-3p的相对表达量与ALT和HBV DNA载量有显著负相关性(r分别为-0.476和-0.513,P均<0.05)。CHB HBeAg阳性患者的miR-199a-5p相对表达量为(1.97±0.49),显著高于HBeAg阴性患者的表达量(1.55±0.32)(t=3.778,P<0.001),CHB HBeAg阳性患者的miR-141-3p相对表达量为(1.32±0.21),显著低于HBeAg阴性患者的表达量(1.69±0.42)(t=3.853,P<0.001)。CHB治疗患者的miR-199a-5p相对表达量为(1.36±0.22),显著低于非治疗患者的表达量(1.93±0.45)(t=4.173,P<0.001),miR-141-3p相对表达量为(1.92±0.44),显著高于非治疗患者的表达量(1.14±0.15)(t=4.324,P<0.001)。结论 CHB患者血清miR-199a-5p与miR-141-3p表达水平与肝功能指标、HBV DNA载量和肝纤维化等指标密切相关,可能在疾病诊断、病情进展和临床疗效的评价中具有一定价值。

miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p在甲状腺癌中的表达及其诊断价值分析

目的分析miR-221-3p、miR-125b-5p与miR-183-5p在甲状腺癌中的表达及其诊断价值。方法收集2016年4月-2018年12月青海大学附属医院肿瘤外科诊治甲状腺乳头状癌患者138例(病例组),选择同期医院诊治的甲状腺结节患者138例作为对照组,采用实时荧光逆转录法分析miR-221-3p、miR-125b-5p与miR-183-5p的表达水平,并用ROC曲线分析其诊断价值。结果与对照组比较,病例组miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p水平明显升高(t=16.321、21.645、26.321,P均=0.000)。miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p阳性率在肿瘤较大、复发、临床Ⅲ~Ⅳ期、血管间隙浸润、转移时明显升高(P<0.05)。miR-221-3p+miR-125b-5P+miR-183-5p联合筛查甲状腺癌的AUC、约登指数、敏感度、特异度、准确度分别为0.843、0.62、90.5%、71.1%、84.4%,均高于miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p单独筛查方法(P<0.05)结论 miR-221-3p、miR-125b-5p与miR-183-5p在甲状腺癌中表达升高,且与甲状腺癌的进展密切相关,三者联合筛查甲状腺癌具有较高的敏感度、特异度、准确度,适合推广应用。

miR-199a-3p靶向调节DUSP5/MAPK轴对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探究微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)靶向调节双特异性磷酸酶5(DUSP5)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)轴对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 RT-qPCR和Western blot法检测miR-199a-3p和DUSP5水平;双荧光素酶检测miR-199a-3p和DUSP5靶向关系;CCK-8检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell法检测细胞侵袭数量;Western blot检测细胞中DUSP5、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化-ERK(p-ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9表达水平。结果 GC细胞系中miR-199a-3p表达上调,DUSP5表达下调(P<0.05)。miR-199a-3p与DUSP5存在靶向调控关系(P<0.05)。抑制miR-199a-3p表达可明显降低GC细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡;同时下调Ki67、MMP-2、MMP-9蛋白水平及Bcl-2/Bax、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK(P<0.05);而沉默DUSP5则表现与抑制miR-199a-3p对GC细胞相反的效果(P<0.05)。此外,沉默DUSP5可逆转抑制miR-199a-3p表达对GC细胞的影响(P<0.05)。结论 下调miR-199a-3p通过负靶向调控DUSP5/MAPK轴抑制GC细胞增殖、凋亡和侵袭。