微小RNA-200b-GATA2-血管内皮生长因子受体2通路在糖尿病创面愈合中的作用及其机制

目的探讨糖尿病创面不愈合是否与微小RNA(miR)-200b-GATA2-血管内皮生长因子受体(VEGFR)2通路表达异常引起的血管再生障碍有关。方法将12只C57/BL6小鼠作为对照组,24只db/db糖尿病小鼠采用随机数字表法分为模型组和miR-200b敲低组,每组12只,在每只小鼠背面制作直径10 mm圆形创面;分别于造模后第1、7和14天记录各组小鼠创面愈合率;造模后第14天取材,采用苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠创面组织形态,免疫组织化学检测CD34阳性表达,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-200b表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测GATA2、VEGFR2蛋白相对表达量。结果造模后第7天和第14天,模型组的创面愈合率低于对照组[(22.46±2.33)%比(34.63±1.42)%,(49.53±2.81)%比(72.48±2.54)%,F=9.37、8.42,P均<0.01];造模后第7天miR-200b敲低组的创面愈合率增加高于模型组[(27.52±1.64)%比(22.46±2.33)%,F=9.37、8.42,P<0.05],造模后第14天miR-200b敲低组的创面愈合率明显高于模型组[(61.93±2.55)%比(49.53±2.81)%,F=9.37、8.42,P<0.01]。对照组创面皮肤细胞排列整齐,无炎性细胞浸润;模型组创面表皮坏死,原纤维结构消失;miR-200b敲低组创面有肉芽组织形成,修复明显。模型组的CD34阳性表达量低于对照组(0.21±0.08比0.63±0.06,F=12.32,P<0.05);而miR-200b敲低组CD34阳性表达量高于模型组(0.48±0.05比0.21±0.08,F=12.32,P<0.01)。模型组miR-200b相对表达量高于对照组(1.43±0.18比0.73±0.12,F=6.44,P<0.01);miR-200b敲低组miR-200b相对表达量低于模型组(0.92±0.15比1.43±0.18,F=6.44,P<0.01)。模型组GATA2蛋白和VEGFR2蛋白相对表达量低于对照组(0.36±0.07比0.78±0.09,0.43±1.41比0.86±1.32,F=4.85、3.79,P均<0.01);miR-200b敲低组GATA2和VEGFR2蛋白相对表达量高于模型组(0.64±0.07比0.36±0.07,0.68±1.57比0.43±1.41,F=4.85、3.79,P均<0.01),差异均有统计学意义。结论 miR-200b-GATA2-VEGFR2信号轴对糖尿病创面愈合有重要的调控作用,调控该信号轴可以改善糖尿病足创面愈合过程,缩短创面愈合时间。