长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22调控微小RNA-27b-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)22调控微小RNA(miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞(CAL-27、SCC-25和HSC-3),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测癌组织、癌旁组织、HOK细胞和3种OSCC细胞中SNHG22、miR-27b-3p表达情况。对SCC-25细胞进行转染并将其分为Ctrl组(未进行转染)、si-SNHG22组、si-NC组、miR-27b-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、si-SNHG22+inhibitor-NC组和si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组,检测各组SCC-25细胞增殖情况[细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测增殖率、流式细胞术检测增殖指数(PI)];Transwell实验检测各组SCC-25细胞侵袭情况;划痕愈合实验检测各组SCC-25细胞迁移情况;双荧光素酶实验验证SNHG22与miR-27b-3p的靶向作用关系。结果与癌旁组织比较,OSCC癌组织中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低(P<0.05);与HOK细胞比较,CAL-27、SCC-25和HSC-3细胞中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低,且SCC-25细胞中SNHG22与miR-27b-3p的表达与HOK细胞差异最大(P<0.05)。与Ctrl组比较,si-SNHG22组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著减少(P<0.05),miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05);与si-SNHG22组比较,si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05)。双荧光素酶实验显示SNHG22与miR-27b-3p存在靶向作用关系。结论SNHG22在OSSC中高表达,miR-27b-3p在OSSC中低表达,SNHG22可能通过海绵化miR-27b-3p促进SCC-25细胞增殖、侵袭和迁移,SNHG22/miR-27b-3p轴可能是OSCC一个新的诊断和治疗靶点。

miR-27b-3p联合miR-215对早期胃癌内镜黏膜下剥离术后复发的预测效能

目的探讨微小RNA(miR)-27b-3p联合miR-215对早期胃癌内镜黏膜下剥离术(ESD)后复发的预测效能。方法2021年1月~2022年2月医院收治的早期胃癌病人122例,所有病人均接受ESD术,随访10~15个月,平均(12.57±1.83)个月,根据早期胃癌病人ESD术后是否复发分为复发组与非复发组。对比两组miR-27b-3p、miR-215相对表达量及临床资料,分析早期胃癌病人ESD术后复发的影响因素,分析miR-27b-3p、miR-215相对表达量及二者联合对早期胃癌病人ESD术后复发的预测价值。结果随访10~15个月,平均(12.57±1.83)个月,122例病人失访3例,随访率为97.54%,其中12例复发,剩余107例均未复发。复发组miR-27b-3p低于非复发组(P<0.05),复发组miR-215相对表达量高于非复发组(P<0.05)。复发组病变大小≥3 cm、浸润深度为SM2~SM3例数占比高于非复发组(P<0.05),复发组R0切除例数占比低于非复发组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示病变大小≥3 cm、浸润深度为SM2~SM3、miR-27b-3p相对表达量、miR-215相对表达量为早期胃癌病人ESD术后复发的影响因素(P<0.05)。miR-27b-3p、miR-215相对表达量及二者联合预测早期胃癌病人ESD术后复发的曲线下面积(AUC)AUC分别为0.783、0.845、0.935。结论miR-27b-3p、miR-215可用于预测早期胃癌病人ESD术后复发风险,二者联合具有更高的预测价值。

结直肠癌患者血清miRNA-21、miRNA-27b表达水平及其与预后的相关性分析

目的研究结直肠癌患者血清微小RNA(miRNA)-21、miRNA-27b表达水平及其与预后的相关性。方法选取2021年1-5月在该院接受治疗的结直肠癌患者60例作为观察组。另选取同期在该院参加体检的健康志愿者60例作为对照组。检测并对比两组血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平,不同病理特征患者的血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平,比较不同血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平患者的生存预后。结果观察组血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平明显高于对照组(P<0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期及有淋巴结转移的患者血清miRNA-21及miRNA-27b表达水平分别较Ⅰ~Ⅱ期及无淋巴结转移者更低(P<0.05)。随访2年,miRNA-21高表达组平均生存时间(15.36±2.32)个月,miRNA-21低表达组平均生存时间(21.54±2.46)个月;miRNA-27b高表达组平均生存时间(16.11±3.20)个月,miRNA-27b低表达组平均生存时间(21.37±2.55)个月;miRNA-21高表达组及miRNA-27b高表达组的1、2年生存率均分别明显低于miRNA-21低表达组及miRNA-27b低表达组(P<0.05)。血清miRNA-21及miRNA-27b水平与患者的生存预后均呈负相关(P<0.05)。结论结直肠癌患者的血清miRNA-21及miRNA-27b均呈高表达,且二者表达与患者预后均呈负相关,可用于临床监测患者的病情及预后情况,值得重视。

乳腺癌患者血清GP73、miR-27a水平的变化及其与临床病理、化疗疗效的相关性

目的 分析乳腺癌患者血清高尔基体蛋白73 (GP73)、微小RNA-27a (miR-27a)水平变化及其与临床病理特征、化疗疗效的相关性。方法 选取2021年10月至2023年1月南阳市中心医院收治的80例乳腺癌患者作为研究组,另选取同期健康女性志愿者80例作为对照组。比较两组受检者以及研究组不同临床病理特征患者的血清GP73、miR-27a水平,并比较研究组不同化疗疗效患者化疗前后的血清GP73、miR-27a水平及变化值(△GP73、△miR-27a),采用Spearman相关法分析化疗前血清GP73、miR-27a水平与临床病理特征相关性,以及△GP73、△miR-27a与化疗疗效的相关性。结果 研究组患者的血清GP73、miR-27a水平分别为(121.35±40.12) ng/L、0.71±0.20,明显高于对照组的(47.68±15.29) ng/L、0.21±0.07,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者中,不同临床分期、分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移患者血清GP73、miR-27a水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关法分析结果显示,研究组血清GP73、miR-27a水平与乳腺癌临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与分化程度呈负相关(P<0.05);无效者化疗前后的血清GP73、miR-27a水平明显高于有效者,差异均有统计学意义(P<0.05);无效者△GP73、△miR-27a分别为13.52±3.16、0.07±0.02,明显低于有效者的21.31±5.42、0.12±0.03,差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关法分析结果显示,△GP73、△miR-27a与化疗疗效呈正相关(r=0.658、0.714,P<0.05)。结论 血清GP73、miR-27a水平与乳腺癌临床病理特征、化疗疗效密切相关,可以作为评估病情进展及化疗疗效的潜在指标。

丹参酮ⅡA通过调控miR-27a抑制肝星状细胞活化的机制研究

目的探讨丹参酮ⅡA(TⅡA)通过调控微小RNA-27a(miR-27a)抑制人肝星状细胞(LX2细胞)活化的机制。方法使用10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导LX2细胞活化;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-27a的表达;瞬时转染miR-27a的模拟物和抑制剂增强或抑制miR-27a的表达,细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖情况,Western blot法检测胶原蛋白Iα2(COL1A2)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(P-GSK3β)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)的表达;用不同浓度的TⅡA干预LX2细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况,RT-qPCR检测miR-27a的表达,Western blot法检测COL1A2、α-SMA、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、P-GSK3β、SFRP1和细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达。结果miR-27a在TGF-β1干预的LX2细胞中表达增加(P<0.05)。LX2细胞中miR-27a被敲低48 h和72 h后,细胞增殖显著被抑制(P<0.05),抑制miR-27a表达减少了LX2细胞中COL1A2、α-SMA和P-GSK3β蛋白的表达,却增加了SFRP1蛋白的表达(P<0.05),过表达miR-27a则呈现相反的结果(P<0.05)。TⅡA能抑制LX2细胞的增殖,其显著降低了miR-27a的表达,且下调了COL1A2、α-SMA、P-GSK3β、CCND1蛋白的表达并上调了SFRP1蛋白的表达(P<0.05)。结论miR-27a在活化的LX2细胞中表达升高,并能促进LX2细胞的增殖和活化。TⅡA通过下调miR-27a抑制Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路激活,进而抑制LX2细胞活化。

miR-27a和miR-128在种植体周围炎患者龈沟液中的水平及其与骨吸收的关系

目的探讨微小RNA(miR)-27a和miR-128在种植体周围炎患者龈沟液中的水平及其与骨吸收的关系。方法将2018年1月至2021年12月于上海长征医院口腔科完成牙种植修复术的患者136例纳入研究,根据种植牙状况分为健康种植体患者66例(健康组)和种植体周围炎患者70例(炎症组)。另外,选取同期进行牙龈健康检查的志愿者70例作为对照组。收集所有纳入研究者探诊深度(PD)、龈沟出血指数(SBI)、龈沟液量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-4水平的数据。采用口腔锥形束CT(CBCT)进行骨吸收测定。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测龈沟液中miR-27a和miR-128水平。采用Pearson相关法分析种植体周围炎患者龈沟液中miR-27a和miR-128水平及二者与炎症因子、骨吸收量的相关性。结果与对照组相比,炎症组和健康组龈沟液中PD、SBI、龈沟液量、骨吸收量,TNF-α、IL-6、miR-128水平升高,IL-4、miR-27a水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与健康组相比,炎症组龈沟液中PD、SBI、龈沟液量、骨吸收量、TNF-α、IL-6、miR-128水平升高,IL-4、miR-27a水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,种植体周围炎患者龈沟液中miR-27a和miR-128水平呈负相关(r=-0.365,P=0.002)。种植体周围炎患者龈沟液中miR-27a水平与PD、SBI、骨吸收量、TNF-α、IL-6水平呈负相关(P<0.05),与IL-4水平呈正相关(P<0.05);miR-128水平与PD、SBI、骨吸收量、TNF-α、IL-6水平呈正相关(P<0.05),与IL-4水平呈负相关(P<0.05)。结论miR-128在种植体周围炎患者龈沟液中呈高水平,miR-27a呈低水平,二者与骨吸收相关。

白藜芦醇单用或与miR-27b激动剂联合应用对脑出血大鼠脑组织继发性病理损伤的防治作用观察

目的观察白藜芦醇(Res)单用或与miR-27b激动剂联合应用对脑出血(ICH)大鼠脑组织继发性病理损伤的防治作用。方法将180只雄性SD大鼠随机分为假手术组、ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组,每组36只。ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组以及NC组大鼠采用胶原酶注射尾状核法制备ICH模型。Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠在造模前连续7 d腹腔注射Res,假手术组及ICH组采注射等体积DMSO。Res+miR-27b agomir组大鼠在造模前3 d将miR-27b激动剂miR-27b agomir注入大鼠右侧脑室,NC组大鼠注射agomir阴性对照试剂,假手术组、ICH组、Res组注射等量生理盐水。各组大鼠造模成功后继续喂养24 h,使用mNSS评分量表评估神经功能。各组大鼠处死后取脑组织,采用TUNEL法测算脑组织神经细胞凋亡率,采用ELISA法检测大鼠脑组织炎症因子、氧化应激相关因子,采用qRT-PCR法检测大鼠脑组织中miR-27b、核因子相关因子2(Nrf2)mRNA,采用Western Blotting法检测大鼠脑组织中Nrf2/ARE信号通路相关蛋白Nrf2、血红素加氧酶(HO-1)、醌氧化还原酶1(Nqo1)。结果假手术组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均低于其余各组(P均<0.05),SOD活力均高于其余各组(P均<0.05);ICH组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均高于其余各组(P均<0.05),SOD活力均低于其余各组(P均<0.05);且Res+miR-27b agomir组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均高于Res组和NC组(P均<0.05),SOD活力均低于Res组和NC组(P均<0.05)。与假手术组相比,ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与ICH组相比,Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2 mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与Res+miR-27b agomir组相比,Res组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2 mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05)。结论Res单用或联合miR-27b激动剂可对ICH大鼠脑组织继发性病理损伤起防治作用,其防治作用可能与激活Nrf2/ARE信号通路有关。

MicroRNA-27a-3p靶向调控SLC7A11抑制结直肠癌细胞铁死亡

目的:探究微小RNA-27a-3p(microRNA-27a-3p,miR-27a-3p)对结直肠癌细胞系HT-29和SW480铁死亡的调控及作用机制。方法:分别用0、2.5和5μmol/L Erastin处理结直肠癌细胞系HT-29和SW480,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)mRNA表达水平,筛选Erastin的合适浓度;将HT-29和SW480细胞各分为siControl组、siSLC7A11-1组和siSLC7A11-2组,分别转染对照siRNA、siSLC7A11-1和siSLC7A11-2,与5μmol/L Erastin共培养0、24、48、72 h,检测不同时间点细胞增殖活性,并检测细胞内丙二醛水平。另将HT-29和SW480细胞各分为miR-NC组、miR-27a-3p组和anti-miR-27a-3p组,分别转染miR-NC、miR-27a-3模拟物和miR-27a-3p抑制物,采用qRT-PCR法检测SLC7A11 mRNA表达水平,采用荧光素酶报告基因实验检测SLC7A113′UTR序列(SLC7A11-WT)及突变序列(SLC7A11-Mut)荧光素酶活力;与5μmol/L Erastin共培养0、24、48、72 h,检测不同时间点细胞增殖活性,并检测细胞内丙二醛含量。结果:随Erastin浓度升高,结直肠癌HT-29和SW480细胞SLC7A11 mRNA表达水平显著升高(P均<0.01);在结直肠癌HT-29和SW480细胞中,与siControl组相比,siSLC7A11-1组和siSLC7A11-2组48 h和72 h细胞增殖活性显著增强(P<0.05),丙二醛含量显著下降(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-27a-3p组细胞增殖活性显著增强(P<0.05),丙二醛水平和SLC7A11-WT荧光素酶活性显著下降(P<0.05或P<0.01),SLC7A11-Mut荧光素酶活性没有显著变化(P>0.05),anti-miR-27a-3p组细胞活力显著下降(P<0.01),丙二醛含量和SLC7A11-WT荧光素酶活性显著升高(P均<0.01),SLC7A11-Mut荧光素酶活性没有显著变化(P>0.05)。结论:miR-27a-3p可能通过靶向SLC7A11 mRNA 3′UTR,调控Erastin诱导的结直肠癌细胞铁死亡。

微小RNA-27a-5p对抑郁症大鼠桡骨骨折愈合的影响

目的 探讨微小RNA (miR)-27a-5p对抑郁症大鼠桡骨骨折愈合的影响。方法 将SD大鼠随机分为骨折对照组、骨折+抑郁组、miR-27a-5p agomir(激活剂)阴性对照组、miR-27a-5p agomir组、miR-27a-5p antagomir(抑制剂)阴性对照组、miR-27a-5p antagomir组,除骨折对照组外,其余各组大鼠均通过慢性温和不可预知应激刺激建立抑郁模型。所有大鼠均折断前右肢桡骨中段制备骨折模型,并以miR-27a-5p激活剂及抑制剂进行干预分组后,以强迫游泳实验与蔗糖水消耗实验检测各组大鼠抑郁症状。检测各组大鼠骨折段骨痂量和骨微结构;检测各组大鼠血清炎性因子白细胞介素(IL)-2、IL-6及核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测各组大鼠骨痂组织miR-27a-5p、IL-2 mRNA表达。体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),随机分为对照组、miR-27a-5p mimics(模拟物)组、miR-27a-5p mimics阴性对照组、miR-27a-5p inhibitor(抑制剂)组、miR-27a-5p inhibitor阴性对照组。诱导各组细胞成骨分化并以miR-27a-5p模拟物及抑制剂分组干预后,以碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组细胞成骨分化;以qRT-PCR实验检测各组细胞miR-27a-5p、IL-2 mRNA表达。以双荧光素酶报告基因实验检测大鼠BMSC中miR-27a-5p对IL-2的靶向调节作用。结果 与骨折对照组相比,骨折+抑郁组大鼠强迫游泳不动时间延长,血清IL-2、IL-6及RANKL水平、骨痂组织IL-2 mRNA表达升高,蔗糖水消耗量、骨痂量、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量减少,血清OPG水平、骨痂组织miR-27a-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与骨折+抑郁组相比,miR-27a-5p agomir组大鼠强迫游泳不动时间缩短,血清IL-2、IL-6及RANKL水平、骨痂组织IL-2 mRNA表达降低,蔗糖水消耗量、骨痂量、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量增加,血清OPG水平、骨痂组织miR-27a-5p表达升高,差异有统计学意义(P<0.05), miR-27a-5p antagomir组大鼠各指标变化趋势与miR-27a-5p agomir组相反,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-27a-5p mimics组细胞ALP阳性细胞相对比例、miR-27a-5p表达升高,IL-2 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05), miR-27a-5p inhibitor组细胞各指标变化趋势与miR-27a-5p mimics组相反,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠BMSC中miR-27a-5p可靶向下调IL-2表达。结论 miR-27a-5p可通过减轻炎症缓解抑郁症大鼠抑郁症状,并促进其桡骨骨折愈合,其分子机制是miR-27a-5p可靶向下调大鼠BMSC中IL-2表达。

食管癌根治术患者血清microRNA-27a、microRNA-203a-3p表达及与预后的关系

目的 探究食管癌根治术患者术前血清microRNA-27a(miR-27a)、microRNA-203a-3p(miR-203a-3p)表达及与预后的关系。方法 选取2016年3月—2017年3月在南阳医学高等专科学校第一附属医院行食管癌根治术的123例食管癌患者作为研究组。另取同期该院健康体检人群64例作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测研究组术前和对照组体检时血清miR-27a、miR-203a-3p的表达。分析食管癌患者血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量与临床病理特征的关系。Kaplan-Meier生存曲线分析血清miR-27a、miR-203a-3p表达与患者预后的关系。单因素及多因素Cox回归分析食管癌患者预后的影响因素。结果 研究组血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量高于对照组(P <0.05)。肿瘤分期Ⅲ期、分化程度低分化、有淋巴结转移食管癌患者根治术前血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量高于肿瘤分期Ⅰ、Ⅱ期、分化程度高中分化、无淋巴结转移患者(P <0.05)。不同年龄、性别及肿瘤位置食管癌患者根治术前血清miR-27a、miR-203a-3p相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-27a高表达组5年总生存率低于miR-27a低表达组(P <0.05)。miR-203a-3p高表达组5年总生存率低于miR-203a-3p低表达组(P <0.05)。单因素Cox回归分析结果显示:肿瘤分期[HR=1.730(95%CI:1.434,2.099)]、淋巴结转移[HR=1.602(95%CI:1.191,2.153)]、miR-27a[HR=2.041(95%CI:1.813,2.463)]、miR-203a-3p[HR=2.060(95%CI:1.921,2.279)]是食管癌患者预后的影响因素(P <0.05)。多因素Cox回归分析结果显示:肿瘤分期Ⅲ期[HR=1.973(95%CI:1.245,3.219)]、有淋巴结转移[HR=2.637(95%CI:1.158,6.008)]、miR-27a≥3.09[HR=2.484(95%CI:1.435,4.301)]、miR-203a-3p≥2.79[HR=1.660(95%CI:1.236,3.058)]是食管癌患者预后的独立影响因素(P <0.05)。结论 食管癌患者血清miR-27a、miR-203a-3p表达上调,两者表达与肿瘤TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关,是食管癌根治术患者预后不良的独立危险因素。

LncRNA PSMA3-AS1调控miR-27b-3p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)人蛋白酶体α亚基3型反义RNA1(PSMA3-AS1)通过调控微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响。方法选取20例非小细胞肺癌标本和20例健康志愿者肺部上皮样本。购买人体正常的肺部上皮细胞H1299、H358、A549及NC-LH2073.采用实时荧光RT-PCR检测LncRNA PSMA3-AS1、miR-27b-3p表达,构建抑制LncRNA PSMA3-AS1表达的A549细胞,采用MTT法、流式细胞仪、Transwell检测细胞增殖、凋亡、迁移情况,Western Blot法检测细胞周期蛋白-D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达变化。结果与人体正常肺上皮组织相比,非小细胞肺癌组织中LncRNA PSMA3-AS1表达升高,miR-27b-3p表达下降(P<0.05)。与BEAS-2B组相比,H1299组、H358组、NC-LH2073组、A549组中LncRNA PSMA3-AS1水平上升,miR-27b-3p水平降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-PSMA3-AS1组lncRNA PSMA3-AS1水平表达降低(P<0.05),与si-NC组相比,si-HIF-1a组OD值、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、迁移细胞数下降,凋亡率升高(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-27b-3p组miR-27b-3p表达水平降低(P<0.05),与miR-NC组相比,miR-27b-3p组OD值、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、迁移细胞数降低,凋亡率上升(P<0.05)。双荧光素酶报告试验显示,LncRNA PSMA3-AS1靶向miR-27b-3p表达,且经转染后,通过RT-qPCR检测显示miR-NC组及miR-27b-3p组中的miR-27b-3p表达差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告发现同时转染miR-27b-3p、WT-PSMA3-AS1后,荧光素酶活性下降(P<0.05)。与si-NC组相比,抑制lncRNA-PSMA3-AS1表达可使PC3细胞中miR-27b-3p表达降低(P<0.05),与si-PSMA3-AS1+anti-miR-NC组相比,si-PSMA3-AS1+anti-miRNA-27b-3p组OD值、CyclinD1、MMP2、MMP9、迁移细胞数上升,凋亡率降低(P<0.05)。结论干扰LncRNA PSMA3-AS1水平表达,可对miR-27b-3p进行有效调控,从而抑制非小细胞肺癌细胞的增殖与迁移,加速其凋亡,阻碍非小细胞肺癌的恶性发展。

微小RNA-4286调控肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型对胃癌细胞系HGC-27生长、迁移及侵袭的影响

目的探讨微小RNA-4286(miRNA-4286)调控肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)对胃癌细胞系NGC-27生长、迁移及侵袭的影响。方法将胃癌HGC-27细胞分为空白对照组和阴性对照组、干预组,空白对照组不作任何处理,阴性对照组转染p EGFP-N1质粒,干预组转染pEGFP-N1-miRNA-4286质粒,采用Real-time PCR检测3组胃癌HGC-27细胞miRNA-4286表达量,采用Western blotting检测3组胃癌HGC-27细胞中INPP4A蛋白表达量,采用八肽胆囊收缩素(CCK8)法检测3组胃癌HGC-27细胞增殖率,采用Transwell小室侵袭实验检测3组胃癌HGC-27细胞侵袭能力,采用划痕实验检测3组胃癌HGC-27细胞迁移能力。结果干预组miRNA-4286表达量、增殖率、穿过小室膜的HGC-27细胞数明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);干预组INPP4A蛋白表达量、划痕伤口愈合间距明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);阴性对照组miRNA-4286表达量、INPP4A蛋白表达量、增殖率、穿过小室膜的HGC-27细胞数、划痕伤口愈合间距较空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论MiRNA-4286可能通过下调INPP4A表达而促进胃癌细胞系HGC-27生长、迁移及侵袭。

循环miR-27a-3p水平与新发皮质下小梗死严重程度及短期神经功能预后的关系

目的 探讨循环microRNA(miRNA)-27a-3p水平与新发皮质下小梗死(RSSI)严重程度及患者短期神经功能预后的相关性。方法 选取2018年5月至2021年6月海南省东方市人民医院收治的153例RSSI患者作为RSSI组,另外纳入头部磁共振成像(MRI)检查无异常的健康志愿者150例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测循环miR-27a-3p表达水平。结果 RSSI组患者循环miR-27a-3p水平显著高于健康对照组(P<0.05)。经Spearman秩相关系数和多元线性回归分析,RSSI患者循环miR-27a-3p水平与梗死体积、MRI总负荷、白质高信号(WMH)、血管周围间隙增大(EPVS)呈正相关(P<0.05)。RSSI患者循环miR-27a-3p水平与发病14 d时美国国立卫生研究院卒中量表评分变化(ΔNIHSS)、NIHSS改善率也呈正相关(P<0.05),而与基线NIHSS无相关性(P>0.05)。结论 循环miR-27a-3p反映了RSSI的严重程度,可作为短期神经功能预后的预测因子。在脑小血管病影像学特征上,它可以反映WMH和EPVS的严重程度,对脑血管疾病的诊断和治疗具有一定指导意义。

血清miR-21、NT-proBNP、HSP27联合检测对慢性肺源性心脏病患者的临床诊疗价值

目的探讨血清微小RNA-21(miR-21)、N末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、热休克蛋白27(HSP27)联合检测对慢性肺源性心脏病(CPHD)患者疾病转归的诊断效能。方法选择2019年1月至2021年6月河南省郑州市金水区总医院收治且获得随访的CPHD患者174例作为研究对象,均于治疗结束后随访6个月,并根据随访结果分为预后良好组(141例)和预后不良组(33例)。比较两组治疗14 d后血清miR-21、NT-proBNP、HSP27水平,动脉血氧分压(PaO_(2))、肺动脉收缩压(PASP)值及其相关性,采用偏回归模型分析CPHD患者预后不良的危险因素,以及治疗14 d后血清miR-21、NT-proBNP、HSP27联合检测对CPHD患者预后不良的预测价值。结果预后不良组患者治疗14 d后血清miR-21、NT-proBNP、HSP27水平及PASP值均较预后良好组升高,PaO_(2)值较预后良好组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。CPHD患者治疗14 d后血清miR-21、NT-proBNP、HSP27水平与PaO_(2)值呈负相关(P<0.05),与PASP值呈正相关(P<0.05);治疗14 d后血清miR-21、NT-proBNP、HSP27水平是CPHD患者预后不良的危险因素(P<0.05);血清miR-21、NT-proBNP、HSP27联合预测CPHD患者预后不良的受试者工作特征曲线下面积、灵敏度、特异度均优于单项检测。结论CPHD患者血清miR-21、NT-proBNP、HSP27呈异常表达,且与疾病转归具有一定关系,联合检测能提高诊断效能。

丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒抗体滴度、miR-27a和 miR-130a水平及意义

目的 探究丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、微小RNA-27a(miR-27a)和miR-130a表达水平及意义。方法 选取2020年1月至2022年6月就诊于西安市北方医院的152丙型肝炎患者作为观察组,另选取同期在该院体检的健康人员152例作为对照组。测定两组血清miR-27a、miR-130a水平及观察组血清HCV-Ab滴度和HCV-DNA载量。比较两组血清miR-27a、miR-130a水平,分析观察组血清HCV-Ab滴度、miR-27a、miR-130a水平与HCV-DNA载量、肝脏组织炎症活动度和纤维化程度的相关性,探究其在丙型肝炎肝硬化预测中的价值。结果 观察组血清miR-27a、miR-130a水平均显著高于对照组(P<0.01)。观察组血清HCV-Ab滴度、miR-27a、miR-130a水平均与HCV-DNA载量呈正相关性(P<0.01);肝脏炎症G4级患者的血清HCV-Ab滴度、miR-27a、miR-130a水平>G3级>G2级>G1级(P<0.01);肝脏纤维化S4期患者血清HCV-Ab滴度、miR-27a、miR-130a水平>S2~S3期>S1期>S0期(P<0.01)。受试者工作特征曲线分析结果显示,丙型肝炎患者血清HCV-Ab滴度、miR-27a、miR-130a水平均对肝硬化发生具有一定预测价值,且3项指标联合检测的曲线下面积明显高于各指标单独检测(P<0.01)。结论 丙型肝炎患者血清miR-27a、miR-130a表达水平上调,患者HCV-Ab滴度、miR-27a、miR-130a水平均与HCV-DNA载量、肝脏炎症活动度和纤维化严重程度呈一定相关性,故血清miR-27a、miR-130a水平和HCV-Ab滴度对肝硬化具有一定预测价值,且联合检测预测肝硬化效能更高。

调节miR-27b-3p和Nrf2对人RPE细胞代谢记忆形成的抑制作用

目的探讨微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)/核因子E2相关因子2(Nrf2)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞代谢记忆损伤的影响及其调控机制。方法取ARPE-19细胞,将其置于5.5 mmol/L葡萄糖培养基培养6 d作为正常对照组;于30 mmol/L高糖培养基中培养3 d后,换成5.5 mmol/L葡萄糖培养基继续培养3 d作为代谢记忆组;慢病毒转染细胞并加入嘌呤霉素,筛选转染成功的细胞,并将其置于30 mmol/L高糖培养3 d后换成5.5 mmol/L葡萄糖培养基继续培养3 d作为miR-27b-3p抑制剂组;细胞于30 mmol/L高糖+利拉鲁肽培养基培养3 d后换成5.5 mmol/L葡萄糖培养基继续培养3 d作为利拉鲁肽组。采用实时荧光定量PCR检测miR-27b-3p、Nrf2、醌氧化还原酶-1(NQO1)、血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA表达水平;采用Western blot法检测Nrf2总蛋白、核蛋白水平;采用细胞免疫荧光检测Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达水平;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增生率以评估细胞活力;采用DHE试剂盒检测活性氧簇(ROS)水平。结果正常对照组、代谢记忆组、miR-27b-3p对照组和miR-27b-3p抑制剂组miR-27b-3p mRNA相对表达量分别为1.000±0.000、1.881±0.034、1.683±0.088和0.111±0.008,总体比较差异有统计学意义(F=850.815,P<0.001),其中,正常对照组miR-27b-3p mRNA相对表达量低于代谢记忆组,miR-27b-3p抑制剂组miR-27b-3p mRNA相对表达量低于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。代谢记忆组Nrf2 mRNA及总蛋白、核蛋白相对表达量较正常对照组降低,miR-27b-3p抑制剂组较miR-27b-3p对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01);代谢记忆组NQO1、HO-1 mRNA相对表达量较正常对照组降低,miR-27b-3p抑制剂组较miR-27b-3p对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。代谢记忆组Nrf2、NQO1、HO-1荧光强度均低于正常对照组,miR-27b-3p抑制剂组Nrf2、NQO1、HO-1荧光强度均高于miR-27b-3p对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与代谢记忆组相比,利拉鲁肽组miR-27b-3p mRNA相对表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。利拉鲁肽组Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA、Nrf2总蛋白及核蛋白相对表达水平均较代谢记忆组升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),利拉鲁肽组荧光强度较代谢记忆组增强,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与正常对照组及利拉鲁肽组相比,代谢记忆组细胞增生活力均下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。代谢记忆组ROS相对含量较正常对照组及利拉鲁肽组升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论利拉鲁肽通过下调miR-27b-3p逆转代谢记忆对Nrf2、NQO1和HO-1的抑制作用。

miR-222-3p对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的探讨微小RNA-222-3p(miR-222-3p)对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法采用qRT-PCR检测口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞和正常口腔角质细胞株(hNOK)中miR-222-3p的表达,培养CAL-27细胞并分为对照组(NC组)、inhibitor NC组(转染阴性对照质粒)和miR-222-3p inhibitor组(转染miR-222-3p inhibitor)。分别采用MTT法、流式细胞术及Trasnwell法检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力变化,蛋白质印迹法检测BAX、Bcl-2、MMP-2、N-cadherin及E-cadherin的表达。结果CAL-27细胞中miR-222-3p的表达水平显著高于hNOK细胞(P<0.05)。与inhibitor NC组和NC组相比,miR-222-3p inhibitor组CAL-27细胞的凋亡率显著升高,增殖、侵袭能力显著降低(P<0.05),且Bcl-2、MMP-2和N-cadherin蛋白表达水平显著降低,BAX和E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论miR-222-3p在CAL-27细胞中高表达,下调miR-222-3p可抑制CAL-27细胞的增殖和侵袭能力,并促进细胞凋亡。

微小RNA-27a-3p在肝癌细胞增殖与凋亡中的表达

目的探讨微小RNA-27a-3p在肝癌细胞增殖与凋亡中的表达。方法回顾性分析2015年3月至2016年6月期间于我院接受治疗的69例肝癌患者的临床资料,随访3年后,分析是否发生复发患者肝癌细胞内微小RNA-27a-3p的表达情况。结果经3年随访发现,复发患者有23例,未复发患者有46例;经检测,复发组患者微小RNA-27a-3p表达水平为(0.26±0.13),显著低于未复发组的(0.62±035),差异有统计学意义(P<0.05);微小RNA-27a-3p表达水平用于预测肝癌患者术后复发风险评估的ROC曲线下面积:AUC=0.948,在微小RNA-27a-3p表达水平临界值为0.375时,可以获得最为理想的敏感度及特异度,分别为:0.913、0.717。结论微小RNA-27a-3p在肝癌未复发组患者体内表达水平较高,临床可通过提高肝癌患者微小RNA-27a-3p水平,降低肝癌复发率。

血清微小RNA-31和微小RNA-27b表达对持续性心房颤动患者射频消融术后复发的预测价值

目的探究血清微小RNA-31(miR-31)、微小RNA-27b(miR-27b)表达水平对持续性心房颤动(房颤)患者射频消融术后复发的预测价值。方法选取2016年10月至2019年12月濮阳市油田总医院收治的首次行射频消融术的持续性房颤患者114例(持续性房颤组),根据患者随访时是否复发房颤分为复发组41例和未复发组73例;同期选择健康体检者114例为对照组。利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-31、miR-27b相对表达水平。分析持续性房颤射频消融术后复发患者的血清miR-31、miR-27b表达水平与左心房内径、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-31、miR-27b对持续性房颤射频消融术后复发的诊断效能。结果与对照组比,持续性房颤组患者的血清miR-31、miR-27b相对表达水平较高(均为P<0.05);与未复发组比,复发组患者血清中hs-CRP、NT-proBNP水平、miR-31、miR-27b相对表达水平较高(均为P<0.05),左心房内径较大(P<0.05)。持续性房颤射频消融术后复发的患者血清miR-31、miR-27b表达水平与左心房内径、hs-CRP、NT-proBNP均呈正相关(均为P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-31、miR-27b联合诊断持续性房颤射频消融术后复发的AUC为0.915,敏感度为80.50%,特异度为95.90%。结论血清miR-31、miR-27b可能参与了持续性房颤的发生,且与房颤病情发展密切相关,可作为房颤射频消融预后的判断指标。

微小RNA-27与心血管疾病

微小RNA(miRNA)对心血管疾病的发生发展起重要的调控作用。miR-27可以通过调节多种靶基因的表达直接或间接作用于心血管疾病的发生发展过程,该文就miR-27在心血管疾病中的调控作用机制作一综述。