血清微小RNA-31和微小RNA-27b表达对持续性心房颤动患者射频消融术后复发的预测价值

目的探究血清微小RNA-31(miR-31)、微小RNA-27b(miR-27b)表达水平对持续性心房颤动(房颤)患者射频消融术后复发的预测价值。方法选取2016年10月至2019年12月濮阳市油田总医院收治的首次行射频消融术的持续性房颤患者114例(持续性房颤组),根据患者随访时是否复发房颤分为复发组41例和未复发组73例;同期选择健康体检者114例为对照组。利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-31、miR-27b相对表达水平。分析持续性房颤射频消融术后复发患者的血清miR-31、miR-27b表达水平与左心房内径、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-31、miR-27b对持续性房颤射频消融术后复发的诊断效能。结果与对照组比,持续性房颤组患者的血清miR-31、miR-27b相对表达水平较高(均为P<0.05);与未复发组比,复发组患者血清中hs-CRP、NT-proBNP水平、miR-31、miR-27b相对表达水平较高(均为P<0.05),左心房内径较大(P<0.05)。持续性房颤射频消融术后复发的患者血清miR-31、miR-27b表达水平与左心房内径、hs-CRP、NT-proBNP均呈正相关(均为P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-31、miR-27b联合诊断持续性房颤射频消融术后复发的AUC为0.915,敏感度为80.50%,特异度为95.90%。结论血清miR-31、miR-27b可能参与了持续性房颤的发生,且与房颤病情发展密切相关,可作为房颤射频消融预后的判断指标。

白藜芦醇单用或与miR-27b激动剂联合应用对脑出血大鼠脑组织继发性病理损伤的防治作用观察

目的观察白藜芦醇(Res)单用或与miR-27b激动剂联合应用对脑出血(ICH)大鼠脑组织继发性病理损伤的防治作用。方法将180只雄性SD大鼠随机分为假手术组、ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组,每组36只。ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组以及NC组大鼠采用胶原酶注射尾状核法制备ICH模型。Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠在造模前连续7 d腹腔注射Res,假手术组及ICH组采注射等体积DMSO。Res+miR-27b agomir组大鼠在造模前3 d将miR-27b激动剂miR-27b agomir注入大鼠右侧脑室,NC组大鼠注射agomir阴性对照试剂,假手术组、ICH组、Res组注射等量生理盐水。各组大鼠造模成功后继续喂养24 h,使用mNSS评分量表评估神经功能。各组大鼠处死后取脑组织,采用TUNEL法测算脑组织神经细胞凋亡率,采用ELISA法检测大鼠脑组织炎症因子、氧化应激相关因子,采用qRT-PCR法检测大鼠脑组织中miR-27b、核因子相关因子2(Nrf2)mRNA,采用Western Blotting法检测大鼠脑组织中Nrf2/ARE信号通路相关蛋白Nrf2、血红素加氧酶(HO-1)、醌氧化还原酶1(Nqo1)。结果假手术组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均低于其余各组(P均<0.05),SOD活力均高于其余各组(P均<0.05);ICH组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均高于其余各组(P均<0.05),SOD活力均低于其余各组(P均<0.05);且Res+miR-27b agomir组大鼠mNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、MDA表达水平均高于Res组和NC组(P均<0.05),SOD活力均低于Res组和NC组(P均<0.05)。与假手术组相比,ICH组、Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与ICH组相比,Res组、Res+miR-27b agomir组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2 mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与Res+miR-27b agomir组相比,Res组、NC组大鼠脑组织中miR-27b相对表达量均降低,Nrf2 mRNA和蛋白、HO-1蛋白、NQO1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05)。结论Res单用或联合miR-27b激动剂可对ICH大鼠脑组织继发性病理损伤起防治作用,其防治作用可能与激活Nrf2/ARE信号通路有关。

肾癌患者血清中微小RNA-27b和胱抑素C、肌酐的表达水平及其临床意义

目的探讨血清中微小RNA(miRNA,miR)-27b、胱抑素C(Cys C)和血肌酐(Cr)在肾癌患者中的表达水平及其临床意义。方法收集2017年1月至2018年1月于徐州医科大学附属医院就诊的肾癌患者42例作为研究组,另外选取同期来我院进行体检的健康志愿者42例作为对照组,收集研究对象的一般基线特征,检测各研究对象血清中Cys C以及血Cr水平。分析miR-27b、Cys C、血Cr水平与肾癌严重程度的相关性,采用SPSS 21.0统计软件分析,通过受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-27b,Cys C和血Cr对肾癌的诊断效能。结果研究组和对照组在性别、年龄和体重指数上差异无统计学意义[实验组年龄(50.05±4.10)岁,对照组(49.50±3.20)岁,t=-0.173,P>0.05];实验组体重指数(19.9±1.9)kg/m2,对照组(19.4±2.2)kg/m2,t=1.274,P>0.05),差异有统计学意义。miRNA在肾癌患者血清中高表达(2.59±1.10,t=36.880,P<0.05),高表达miR-27b组肾癌患者具有更高的临床分期、血Cr水平、蛋白尿水平(χ2=58.129、58.224、62.985,P<0.05),差异均有统计学意义。表明miR-27b与肾癌严重程度有关。联合miR-27b与血Cr和Cys C在肾癌患者的临床诊断中具有极为优良的效能[曲线下面积(AUC)为0.904,灵敏度为85.7%,特异度为87.5%]。结论肾癌血清中miR-27b、Cys C和血Cr水平与肾癌临床预后明显相关,miR-27b参与了肾癌的发生。

外周血微小RNA-27b表达与高血压左心室肥厚的关系

目的探讨外周血微小RNA(miR)-27b表达与高血压患者发生左心室肥厚(LVH)的相关性。方法回顾性分析中南大学湘雅医学院附属株洲医院2019年2月至2021年2月120例高血压患者的临床资料。其中,发生LVH 70例(LVH组),未发生LVH 50例(NLVH组)。采用超声心动图检测室间隔厚度(VST)、左心室舒张期后壁厚度(LVPWTd)和左心室舒张末期内径(LVEDD),并计算左心室质量(LVM)和左心室质量指数(LVMI)。采用实时定量聚合酶链反应检测外周血miR-27b表达水平。相关性采用Pearson相关分析;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价外周血miR-27b诊断高血压患者发生LVH的效能。结果LVH组外周血miR-27b表达水平明显高于NLVH组(6.37±0.23比3.42±0.18),差异有统计学意义(t=9.58,P<0.01)。Pearson相关分析结果显示,高血压LVH患者外周血miR-27b表达与LVMI、VST、LVEDD和LVPWTd呈正相关(r=0.71、0.63、0.75和0.68,P<0.01);在排除危险诱因(高血压病程、收缩压、舒张压、不同药物治疗、尿酸)后,多元线性回归分析结果显示,高血压LVH患者外周血miR-27b表达与LVMI、VST、LVEDD和LVPWTd仍呈正相关(β=0.07、0.63、0.42和0.48,P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,外周血miR-27b表达预测高血压患者发生LVH的曲线下面积为0.905(95%CI 0.854~0.957),最佳截断值为4.45,灵敏度为84.0%,特异度为82.9%。结论高血压LVH患者外周血miR-27b呈高表达,且与LVMI等超声心动图参数呈正相关,对高血压LVH诊断具有良好的预测价值。

microRNA-27b与结直肠癌患者血管生成拟态的相关性分析

目的探讨microRNA-27b与结直肠癌患者血管生成拟态的相关性。方法收集我院与合作中心2018年1月至2020年1月收治的结直肠癌患者100例作为观察组,同期收集100例健康成人作为对照组。比较两组人群血清microRNA-27b,同时分析结直肠癌患者microRNA-27b与结直肠癌患者血管生成拟态、微血管密度、淋巴管密度等病理特征的相关性。结果与对照组比较,观察组患者microRNA-27b相对表达量显著降低(0.87±0.20 vs.1.55±0.28,P=0.000)。与无血管生成拟态的结直肠癌患者相比,有血管生成拟态的结直肠癌患者microRNA-27b水平更低(0.62±0.24 vs.1.38±0.28,P=0.000)。多因素Logistics回归分析显示,血清MicroRNA-27b相对表达量<1.0、淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm是结直肠癌患者血管生成拟态的危险因素(P<0.05)。结论microRNA-27b在结直肠癌患者中降低,与血管生成拟态形成有关。

白细胞介素-1β对大鼠软骨细胞MMP-13表达的影响及miR-27b的调控作用

目的观察白细胞介素(IL)-1β对大鼠软骨细胞基质金属蛋白酶(MMP)-13表达的影响及mi R-27b的调控作用。方法雄性Wistar大鼠7只提取软骨细胞。Western blot检测IL-1β刺激软骨细胞0 h、24 h、48 h各时间点MMP-13表达变化;mi RNAs微阵列分析48 h内软骨细胞差异表达的mi RNAs;Real-time PCR定量分析筛选出下调最为明显的mi RNAs;荧光素酶报告基因实验验证mi R-27b与MMP-13的靶定调控关系。结果 IL-1β刺激软骨细胞后,MMP-13蛋白在0 h、24 h、48 h各时间点表达逐渐增加(P<0.05);mi RNAs微阵列分析发现48 h内软骨细胞有36个mi RNAs出现表达变化,变化最为明显的有6个,分别为mi R-27b、mi R-31、mi R-26a、mi R-26b、mi R-23、mi R-204;Real-time PCR显示mi R-27b下调最为明显;mi R-27b拟似物和荧光素酶表达质粒共转染软骨细胞后,荧光素酶活性受到明显抑制(P<0.05)。结论 IL-1β刺激软骨细胞后,出现mi R-27b的表达下调和MMP-13蛋白的表达上调,mi R-27b与MMP-13存在靶定调控关系。

脊柱结核的CT征象表现、miR-27b表达和鉴别效能研究及与临床病理分期的关系

目的探讨脊柱结核的CT征象表现、miR-27b表达和鉴别效能及与临床病理分期的关系。方法选取2017年1月至2020年3月我院收治的61例脊柱结核患者,均行CT检查,根据临床病理分期分为活动期组(n=38)、稳定期组(n=23)。比较两组CT征象表现、miR-27b表达,采用Logistic回归方程分析CT征象表现、miR-27b与脊柱结核临床病理分期的关系,采用ROC-AUC分析CT征象表现、miR-27b评估脊柱结核不同临床病理分期的价值。结果脊柱结核活动期患者病灶内死骨、椎间盘受累、椎旁肿块钙化患者占比高于稳定期患者,miR-27b表达低于稳定期患者(P<0.05);病灶内死骨、椎间盘受累、椎旁肿块钙化、miR-27b与脊柱结核活动期有关(P<0.05);CT征象表现、miR-27b联合鉴别脊柱结核活动期的AUC大于任一单一指标,为0.884。结论CT征象表现、miR-27b表达在脊柱结核活动期、稳定期患者中存在差异,利于二者诊断与鉴别,为治疗方案制定及预后评估提供依据。

血清miR-27b、miR-223水平与骨肉瘤患者化疗效果的相关性

目的:观察骨肉瘤患者血清微小RNA-27b、miR-223水平与化疗效果的相关性,指导未来临床对骨肉瘤患者实施合理的化疗。方法:选择我院2016年01月至2020年01月收治的241例骨肉瘤患者作为研究对象,均于化疗前检测血清miR-27b及miR-223水平,实施化疗治疗,分析血清miR-27b及miR-223水平与化疗效果的相关性。结果:241例骨肉瘤患者行化疗治疗后,总缓解率为59.75%;化疗后未缓解组肿瘤直径≥5 cm占比高于缓解组,化疗前血清miR-27b相对表达量高于缓解组,miR-223相对表达量低于缓解组,差异有统计学意义(P<0.05);两组其他基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05);经二元Logistic回归分析后建立多元回归模型,结果显示,骨肉瘤患者肿瘤直径、化疗前血清miR-27b及miR-223表达水平是化疗后未缓解的影响因素(OR>1,P<0.05);绘制受试者工作曲线(ROC)发现,化疗前血清miR-27b及miR-223水平预测化疗后未缓解的曲线下面积(area under curve,AUC)均>0.80,有一定预测性能。结论:骨肉瘤患者血清miR-27b、miR-223水平与化疗效果存在密切相关,化疗前血清miR-27b过表达及miR-223表达下调均可能提示化疗效果不佳,可将二者作为骨肉瘤患者化疗效果的有效预测因子,并根据评估结果合理调整治疗方案,可能对提高化疗整体获益意义重大。

miR-27b靶向BNIP3对缺氧复氧心肌细胞Wnt/β-catenin通路及自噬的影响

目的探讨微小RNA-27b(miR-27b)靶向B淋巴细胞瘤(Bcl)-2/腺病毒E1B 19-kD相互作用蛋白(BNIP)3对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞Wnt/β-catenin通路及自噬的影响。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,设置正常对照组(H9c2细胞正常培养)、H/R组(H9c2细胞经H/R处理)、H/R+NC组(H9c2细胞转染无序siRNA后经H/R处理)和H/R+miR-27b siRNA组(H9c2细胞转染miR-27b siRNA后经H/R处理)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达情况;CCK-8法检测各组H9c2细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组H9c2细胞凋亡情况;Western印迹法检测各组H9c2细胞中BNIP3、轴抑制因子(Axin)1、β-连环蛋白(catenin)、微管相关蛋白1轻链(LC)3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达情况。结果与正常对照组相比,H/R组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、细胞凋亡率、BNIP3、Axin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),细胞吸光度(OD)值、β-catenin、LC3Ⅰ蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);H/R组与H/R+NC组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、细胞OD值、细胞凋亡率、BNIP3、Axin1、β-catenin、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与H/R组、H/R+NC组相比,H/R+miR-27b siRNA组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、细胞凋亡率、BNIP3、Axin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),细胞OD值、β-catenin、LC3Ⅰ蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论沉默miR-27b表达后可抑制BNIP3水平,激活Wnt/β-catenin信号转导通路,并抑制自噬过程。

miR-27b靶向BNIP3对缺氧/复氧心肌细胞β-catenin通路的影响

目的探讨微小RNA-27b(miR-27b)靶向Bcl-2/腺病毒E1B 19-kDa相互作用蛋白3(BNIP3)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞β-catenin通路的影响。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,设置正常对照组(H9c2细胞正常培养)、H/R组(H9c2细胞经H/R处理)、H/R+NC组(H9c2细胞转染无序siRNA后经H/R处理)和H/R+miR-27b siRNA组(H9c2细胞转染miR-27b siRNA后经H/R处理)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达情况;蛋白印迹(WB)法检测各组H9c2细胞中BNIP3、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达情况。结果H/R组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、BNIP3表达水平均高于正常对照组(P<0.05),β-catenin蛋白表达水平均低于正常对照组(P<0.05);H/R组与H/R+NC组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、BNIP3、β-catenin蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);与H/R组、H/R+NC组相比,H/R+miR-27b siRNA组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、BNIP3蛋白表达水平较低(P<0.05),β-catenin蛋白表达水平较高(P<0.05)。结论沉默miR-27b表达后可抑制BNIP3水平,激活β-catenin信号转导通路。

四种miRNA在布鲁氏杆菌感染脊柱炎与脊柱结核患者诊治中的应用

目的探究微小RNA-150-5p(miR-150-5p)、miR-197-3p、miR-145-3p、miR-27b四种miRNA在布鲁氏杆菌感染致脊柱炎(BS)以及脊柱结核(TS)患者诊治中应用价值。方法以焦作市人民医院2016年7月-2019年7月收治的30例BS与32例TS作为研究对象,分别为BS组与TS组,同时选择同期于医院进行体检的健康者35名作为对照组。测定并比较外周血miR-150-5p、miR-197-3p、miR-145-3p、miR-27b四种miRNA表达水平及其在患者诊断治疗中临床意义。结果三组外周血miR-150-5p、miR-145-3p、miR-27b表达水平为TS组<BS组<对照组,而miR-197-3p表达水平为TS组>BS组>对照组(P<0.05);外周血miR-150-5p、miR-197-3p、miR-145-3p、miR-27b用于诊断脊柱结核曲线下面积(AUC)分别为0.938、0.880、0.729、0.528;BS组患者miR-150-5p、miR-197-3p、miR-145-3p、miR-27b水平与C-反应蛋白、红细胞沉降率、虎红平板凝集试验阳性、试管凝集试验滴度有关(P<0.05);BS组与TS组患者治疗后1年四种miRNA水平较治疗前改善(P<0.05),且治疗后1年两组患者上述四种miRNA水平与对照组比较差异无统计学意义。结论BS与TS患者体内miR-150-5p、miR-197-3p、miR-145-3p、miR-27b表达水平异常,可用于两者病情诊断以及治疗疗效评价。