毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗前后血清白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、微小RNA-302e、核因子-κB mRNA水平变化及意义

目的:探讨毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗前后血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、miR-302e、核因子-κB(NF-κB)mRNA水平变化及意义。方法:选取毛细支气管炎患儿108例为研究对象,均行糖皮质激素治疗。比较糖皮质激素治疗前后患儿血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平变化。采用Pearson法分析IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA间的相关性。根据糖皮质激素治疗效果将患儿分为有效组和无效组,比较不同疗效患儿一般资料及生化指标。分析IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平对糖皮质激素治疗效果的影响,以及它们对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值。结果:糖皮质激素治疗后患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平低于治疗前,miR-302e水平高于治疗前(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,患儿血清IL-6与TNF-α、NF-κB mRNA水平呈正相关(r=0.512、0.564,均P<0.05),与miR-302e呈负相关(r=-0.573,P<0.05);患儿血清TNF-α与NF-κB mRNA水平呈正相关(r=0.521,P<0.05),与miR-302e水平呈负相关(r=-0.559,P<0.05);患儿血清miR-302e与NF-κB mRNA水平呈负相关(r=-0.571,P<0.05)。无效组患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平,以及重度病情患儿占比高于有效组,miR-302e水平低于有效组(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA水平异常以及病情严重程度(重度)是毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的危险因素(均P<0.05)。血清IL-6、TNF-α、miR-302e、NF-κB mRNA联合检测对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值高于上述指标单独预测。结论:经糖皮质激素治疗后,毛细支气管炎患儿血清IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA水平降低,miR-302e水平升高,四者水平异常是毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的危险因素,联合检测对毛细支气管炎患儿糖皮质激素治疗无效的预测价值更高。

微小RNA-302b在急性心肌梗死患者血清中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-302b(miR-302b)在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达,并探讨其与心肌损伤的关系。方法选取2016年陕西省第四人民医院72例AMI患者为AMI组,采用随机数字表法选取同期体检的48名健康人作为对照组。两组均通过实时荧光定量PCR法检测血清miR-302b含量(AMI组患者在临床确诊后12 h内检测),spearman法分析血清miR-302b表达与心肌酶谱的相关性。结果miR-302b在AMI组患者血清中的相对表达量显著高于对照组(3.14±0.76比1.13±0.22,t=17.706,P<0.001);AMI患者的血清miR-302b相对表达量与天门冬氨酸氨基转移酶(r=0.428,P=0.017)、乳酸脱氢酶(r=0.519,P=0.045)、肌酸激酶同工酶(r=0.718,P=0.003)和心肌肌钙蛋白I(r=0.772,P<0.001)呈正相关。ROC曲线分析示miR-302b诊断AMI的敏感度为88.6%、特异度为64.3%。结论miR-302b在AMI患者血清中呈高表达,并与心肌损伤相关。

血清微小RNA-302b在老年急性心肌梗死患者中的诊断价值

目的:探讨微小RNA-302b在老年急性心肌梗死(AMI)患者中的表达及诊断价值。方法:选取125例老年AMI患者(AMI组)和56例健康体检者(对照组),比较两组血清miR-302b、心肌肌钙蛋白I(cTnI)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平的变化。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-302b、cTnI及CK-MB水平对老年AMI诊断的价值。老年AMI患者miR-302b水平与cTnI、CK-MB的相关性分析采用Pearson相关分析。结果:AMI组血清miR-302b(4.20±1.27对0.48±0.14)、cTnI[(3.13±1.32)ng/mL对(0.03±0.01)ng/mL]及CK-MB[(70.42±19.15)U/L对(10.63±2.24)U/L]水平均明显高于对照组(P均<0.01)。ROC曲线分析显示,miR-302b、cTnI及CK-MB诊断AMI的临界值分别为2.68、1.50 ng/mL、60.74 U/L,3项联合诊断老年AMI的曲线下面积(AUC)最大,为0.932(95%CI:0.870~0.981),其敏感度和特异度为94.5%和89.0%。相关分析显示,老年AMI患者血清miR-302b表达水平与cTnI(r=0.817)和CK-MB(r=0.726)均呈正相关(P均<0.01)。结论:血清miR-302b在老年AMI患者中呈高表达,与cTnI、CK-MB联合检测有助于提高老年AMI诊断的敏感度和特异度。

微小RNA-302c在高糖下对人肾小球系膜细胞的影响

目的探讨微小RNA-302c(miR-302c)在高糖环境下对人肾小球系膜细胞功能的影响。方法采用双荧光素酶报告实验验证miR-302c是否参与TIMP3表达的调控;在高糖环境下培养人肾小球系膜细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测细胞miR-302c以及TIMP3 mRNA相对表达量,检测肾小球系膜细胞的存活数,采用qRT-PCR方法检测细胞炎症因子IL-6以及IL-8 mRNA的表达。结果经双荧光素酶报告基因实验证实TIMP3是miR-302c的直接靶基因;在不同糖浓度下培养人肾小球系膜细胞,结果发现,与正常糖培养相比较,高糖处理下的人肾小球系膜细胞的miR-302c表达显著性增加,TIMP3 mRNA表达显著性下降,同时存活细胞的数量显著性减少。与正常糖培养相比较,高糖培养下人肾小球系膜细胞的炎症因子IL-6以及IL-8 mRNA的表达显著性增高。结论高糖环境下miR-302c的表达上调,并靶向下调TIMP3的表达,可能促使炎症因子分泌增加、参与高糖环境下对人肾小球系膜细胞的损伤作用。

甲状腺癌患者血清miR-302e、MYCBP2及B7-H3表达水平与临床分期和预后的相关性研究

目的甲状腺癌(TC)患者血清微小RNA-302e(miR-302e),MYC结合蛋白2(MYCBP2)及共刺激分子(B7-H3)表达水平与临床分期和预后的相关性研究。方法选取本院2018年7月至2020年7月期间接诊的138例TC患者作为疾病组,同期选取138例进行体检的健康者作为对照组。根据对患者随访3年的结果,将疾病组分为预后不良组(n=20)和预后良好组(n=118)。采用qRT-PCR法检测血清miR-302e、MYCBP2水平,ELISA法检测血清B7-H3水平;TargetScanHuman网站预测miR-302e与MYCBP2的靶向关系;运用ROC曲线分析血清miR-302e,MYCBP2,B7-H3对TC患者预后的预测价值。结果与对照组(1.05±0.23、1.03±0.22、28.46±4.18μg/L)相比,疾病组血清miR-302e(1.78±0.40),B7-H3(34.33±5.94μg/L)水平明显升高,血清MYCBP2(0.82±0.15)水平降低,差异有统计学意义(t=18.586,9.265,9.494,P<0.05);与临床分期Ⅰ+Ⅱ期患者(1.65±0.37、0.90±0.15、32.68±3.29μg/L)相比,Ⅲ+Ⅳ期患者血清miR-302e(2.16±0.48),B7-H3(39.20±4.08μg/L)水平明显升高,血清MYCBP2(0.58±0.14)水平降低,差异有统计学意义(t=6.511,9.510,11.084,P<0.05);预后不良组临床分期Ⅲ期+Ⅳ期占比、淋巴结转移占比、血清miR-302e(2.16±0.45),B7-H3水平(43.26±6.85μg/L)显著高于预后良好组,血清MYCBP2(0.58±0.11)低于预后良好组(1.72±0.39、0.86±0.16、32.82±5.79μg/L),差异有统计学意义(χ^(2)=10.954,24.620,t=4.561,7.519,7.257,P<0.05);MYCBP2与miR-302e可能有靶向关系,且经Pearson相关性分析,MYCBP2与miR-302e呈负相关性(r=-0.513,P<0.001);血清miR-302e,MYCBP2,B7-H3、临床分期、淋巴结转移是TC患者预后的影响因素(P<0.05);血清miR-302e,MYCBP2,B7-H3联合预测TC患者预后的曲线下面积(AUC)为0.975,优于各自单独预测(Z_(联合vs miR-302e)=2.448、Z_(联合vs MYCBP2)=3.024、Z_(联合vs B7-H3)=2.133,P=0.014、0.003、0.033)。结论TC患者血清miR-302e,B7-H3水平明显升高,血清MYCBP2明显降低,与患者临床分期及预后密切相关,3项联合检测对患者预后有更高的预测价值。

子宫内膜癌组织中miRNA-302c的表达变化及其意义

目的观察子宫内膜癌组织中miRNA-302c的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择2012年1月~2013年12月收治的51例子宫内膜癌患者的手术切除肿瘤组织标本为观察组,同期因子宫肌瘤行全子宫切除术的40例患者的正常子宫内膜组织标本为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组标本中的miRNA-302c。分析51例子宫内膜癌患者肿瘤组织标本miRNA-302c相对表达量与临床病理参数的关系。采用受试者工作曲线和最大约登指数法确定用子宫内膜癌组织标本miRNA-302c表达量预测患者死亡和复发的截断值,将其用截断值分为高miRNA-302c表达组和低miRNA-302c表达组,采用Kaplan-Meier法计算并比较高、低miRNA-302c表达组的3年累计生存率和复发率。结果观察组、对照组miRNA-302c表达量分别为1.721±2.804、4.024±6.518,两组相比P<0.05。51例子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织标本miRNA-302c表达量与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05)。用肿瘤组织标本miRNA-302c表达量预测患者死亡的截断值为1.568,用其将51例子宫内膜癌患者分为高miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量<1.568)30例和低miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量≥1.568)21例,其3年累计生存率分别为96.67%(29/30)、90.47%(19/21),P<0.05。用肿瘤组织标本miRNA-302c表达量预测患者复发的截断值为1.803,用其将51例子宫内膜癌患者分为高miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量<1.803)24例和低miRNA-302c表达组(miRNA-302c表达量≥1.803)27例,其复发率分别为16.67%(4/24)、29.63%(8/27),P<0.05。结论子宫内膜癌组织miRNA-302c表达降低。检测子宫内膜癌组织miRNA-302c表达有助于判断子宫内膜癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移及预测预后、复发。

miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞“干性”维持中的作用

目的探讨miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞"干性"维持中的作用及可能机制。方法体外培养人结肠癌细胞株HT-29,转染miRNA-302b模拟物(miRNA-302b mimics),同时以未转染组(control)和阴性模拟物转染组(negative control-mimics,NC-mimics)作为对照,采用实时定量反转录聚合酶链反应法(real-time PCR)检测HT-29细胞结肠癌"干性"标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2mRNA的表达情况;采用蛋白印迹法(Western blot)检测以上"干性"标志蛋白表达的变化;采用克隆形成实验及干细胞成球实验分别观察HT-29细胞克隆形成和细胞球形成能力的变化。结果 Realtime PCR结果示,miR-302b mimics转染HT-29细胞48 h,"干性"标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2 mRNA表达一致性上调(P<0.05);Western blot结果示Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2蛋白表达也上调(P<0.05)。克隆形成实验及干细胞成球实验结果示,miR-302b mimics转染后HT-29细胞克隆形成和细胞球形成能力增强,与control组和NC-mimics组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-302b可通过上调"干性"标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2的表达促进HT-29细胞的克隆形成和细胞球形成能力,从而在结肠癌"干性"维持中发挥重要作用。

超声联合miR-302,miR-322表达筛查胎儿产前神经管畸形临床价值

目的:探究超声联合微小RNA-302(miR-302)、微小RNA-322(miR-322)表达在产前筛查胎儿神经管畸形(NTDs)临床价值。方法:回顾性收集2020年6月-2022年6月本院产前检查孕妇222例,根据分娩或引产确诊为NTDs为NTDs组(114例),未发生NTDs 108例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-302、miR-322表达水平;Pearson法分析miR-302、miR-322的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-302、miR-322对胎儿产前NTDs的诊断价值。结果:NTDs组miR-302(1.42±0.35)高于对照组(1.01±0.13),miR-322(0.78±0.19)低于对照组(1.02±0.11)(均P<0.05),NTDs患者血清miR-302与miR-322表达呈负相关(r=-0.399,P<0.001),二者联合产前筛查胎儿NTDs的曲线下面积(AUC)(0.951)高于miR-302(0.870)和miR-322(0.907)单独诊断(P<0.001),二者联合超声产前诊断胎儿NTDs的敏感度(92.4%)高于超声(62.3%)、miR-302(75.4%)、miR-322(80.5%)单独诊断(P<0.05)。结论:胎儿NTDs孕妇血清miR-302异常高表达、miR-322异常低表达,超声联合miR-302、miR-322检测用于产前筛查胎儿NTDs有较高的诊断敏感性。

慢性心力衰竭患者血清miR-208a和miR-302b表达与心室重构及预后的关系

目的分析慢性心力衰竭(CHF)患者血清微小RNA(miR)-208a,miR-302b表达与心室重构及预后的关系。方法选取2019年6月至2020年12月于华西医院健康管理中心收治CHF患者153例为CHF组,另选取同期体检健康者72例为对照组。使用qPCR检测血清miR-208a、miR-302b水平,Pearson相关性分析血清miR-208a、miR-302b水平与心室重构相关指标的相关性。多因素Logistics回归分析血清miR-208a、miR-302b水平与CHF患者预后不良的关系,ROC曲线分析血清miR-208a、miR-302b水平对CHF患者预后不良的预测价值。结果与对照组比较,CHF组血清miR-208a、miR-302b,N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平和左心室质量指数(LVMI)、右心室内径(RVD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)升高,左心室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF)降低(t=25.646、35.611、28.040、36.482、38.098、26.651、-24.933、-45.351,P均<0.001)。CHF患者血清miR-208a、miR-302b水平与NT-proBNP,LVMI、RVD、LVEDD呈正相关(r=0.604、0.544、0.488、0.517,0.586、0.594、0.546、0.572;P均<0.001),与LVFS、LVEF呈负相关(r=-0.483、-0.536,-0.487、-0.550;P均<0.001)。血清miR-208a(OR=1.600,95%CI:1.188~2.154)、miR-302b(OR=1.428,95%CI:1.044~1.952)水平是CHF患者预后不良的独立危险因素。miR-208a+miR-302b预测CHF患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.876大于miR-208a(AUC=0.801)、miR-302b(AUC=0.792)单独预测(Z/P=2.577/0.010、2.712/0.007)。结论CHF患者血清miR-208a,miR-302b水平升高,与心室重构和预后不良密切相关,两者联合能提升预后不良预测价值。

miR-16和miR-302在乳腺癌组织中的表达及临床意义

探究微小RNA-16(miR-16)、微小RNA-302(miR-302)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。2016年1月—2017年3月,经手术切除且经病理证实的乳腺癌组织标本40例,癌旁正常组织40例。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测乳腺癌组织及癌旁正常组织中miR-16、miR-302表达水平;采用Kapalan-Meier生存曲线分析miR-16、miR-302表达与乳腺癌患者术后无病生存期(DFS)的关系;采用Cox比例风险模型分析影响乳腺癌患者预后的危险因素。结果显示,乳腺癌组织miR-16、miR-302表达水平显著低于癌旁正常组织(P<0.05);miR-16、miR-302在乳腺癌组织中的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);miR-16低表达患者中位生存时间为25.40月,显著短于miR-16高表达乳腺癌患者(30.00月)(P<0.05);miR-302低表达患者中位生存时间为24.30月,显著短于miR-302高表达乳腺癌患者(32.10月)(P<0.05);单因素分析显示,miR-16、miR-302表达、淋巴结转移、肿瘤分化程度均是影响乳腺癌患者预后不良的危险因素;多因素分析显示,miR-16、miR-302表达和淋巴结转移是影响乳腺癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结果表明,miR-16、miR-302在乳腺癌组织中表达水平降低,其与淋巴结转移及DFS相关,可能作为评定乳腺癌患者预后的临床指标。

上皮性卵巢癌患者血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平变化及其临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌患者血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平变化及其临床意义。方法选择上皮性卵巢癌患者83例(恶性组)、良性卵巢肿瘤患者34例(良性组)、体检健康的女性志愿者29例(对照组),采集外周静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16。分析上皮性卵巢癌患者血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平与临床病理特征的关系以及二者之间的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平对上皮性卵巢癌的诊断价值。结果恶性组血清miR-302b-3p水平低于良性组和对照组,而血清lncRNA SNHG16水平高于良性组和对照组(P均<0.05)。上皮性卵巢癌患者血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平与FIGO分期、组织分化程度、淋巴结转移、远处转移有关(P均<0.05),而与年龄、病理类型及血清CA125水平无关(P均>0.05)。上皮性卵巢癌患者血清miR-302b-3p水平与血清lncRNA SNHG16水平呈负相关关系(r=-0.678,P<0.05)。血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平诊断上皮性卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.664、0.742,二者联合诊断上皮性卵巢癌的AUC为0.898。血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平联合诊断上皮性卵巢癌的AUC高于血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平单独(Z分别为4.245、3.447,P均<0.05)。结论上皮性卵巢癌患者血清miR-302b-3p水平下调、血清lncRNA SNHG16水平上调,二者呈负相关关系并与肿瘤FIGO分期、组织分化程度、淋巴结转移、远处转移密切相关;血清miR-302b-3p、lncRNA SNHG16水平对上皮性卵巢癌均具有一定诊断价值,二者联合时诊断价值更高。

门冬氨酸钾镁联合重组人脑利钠肽对急性心肌梗死病人心室重塑及血清miR-208b、miR-302b表达的影响

目的 探讨门冬氨酸钾镁联合重组人脑利钠肽对急性心肌梗死(AMI)病人心室重塑及血清微小RNA-208b(miR-208b)、血清微小RNA-302b(miR-302b)表达的影响。方法 选取2019年1月—2020年6月我院123例AMI病人作为研究对象,采用简单随机化法分为3组,每组41例。对照A组给予门冬氨酸钾镁治疗,对照B组给予重组人脑利钠肽治疗,研究组给予门冬氨酸钾镁联合重组人脑利钠肽治疗。比较3组临床疗效、心功能指标[左心室收缩末期容积指数(LVESVI)、左心室舒张末期容积指数(LVEDVI)、左室射血分数(LVEF)]、心室重构指标[左室后壁厚度(LVPWT)、室间隔厚度(IVST)、左心室质量指数(LVMI)]、血清炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]及血清miR-208b、miR-302b水平。结果 研究组治疗总有效率高于对照A组、对照B组(P<0.05);研究组治疗后LVESVT、LVEDVI低于对照A组、对照B组,LVEF高于对照A组、对照B组,且对照B组LVESVT、LVEDVI低于对照A组,LVEF高于对照A组(P<0.05);研究组治疗后血清IL-6、CRP、MCP-1水平低于对照A组、对照B组,且对照B组血清IL-6、CRP、MCP-1水平低于对照A组(P<0.05);研究组治疗后LVPWT、IVST、LVMI低于对照A组、对照B组,且对照B组LVPWT、IVST、LVMI低于对照A组(P<0.05);研究组治疗后血清SOD、GSH-Px水平高于对照A组、对照B组,且对照B组SOD、GSH-Px水平高于对照A组(P<0.05);研究组治疗后血清miR-208b、miR-302b表达水平低于对照A组、对照B组,且对照B组血清miR-208b、miR-302b表达水平低于对照A组(P<0.05)。结论 门冬氨酸钾镁联合重组人脑利钠肽治疗AMI疗效较好,能减轻氧化应激及全身炎症反应,下调血清miR-208b、miR-302b表达水平,有效抑制心室重塑,增强病人心功能。

苦杏仁苷对镉暴露大鼠骨损伤的防治作用及对miR-302b-NF-κB-mTOR信号通路的影响

目的 苦杏仁苷对镉中毒大鼠骨损伤的防治作用及对微小RNA-302b(microRNA-302b,miR-302b)-核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)-雷帕霉素靶蛋白(rapamycin target protein,mTOR)信号通路的影响。方法 清洁级SD大鼠100只分成对照组、镉暴露模型组(30 mg/kg二氯化镉)、苦杏仁苷低、中、高剂量组(50.0、100.0和200.0 mg/kg)。镉暴露模型组、苦杏仁苷低、中、高剂量组大鼠每日腹腔注射二氯化镉溶液,持续12周,期间,苦杏仁苷低、中、高剂量组大鼠每日予以相应剂量的苦杏仁苷灌胃,试验结束后获取双侧股骨组织测量股骨远端的骨密度(bone density,BMD)、骨小梁数量、骨小梁厚度、骨小梁分散度,股骨骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、股骨miR-302b、NF-κB、mTOR水平。结果 与对照组比较,镉暴露模型组股骨BMD、骨小梁数量、骨小梁厚度、股骨OC、OPN、OPG、miR-302b水平明显降低(均P<0.05),骨小梁分散度、股骨NF-κB、mTOR mRNA蛋白水平明显升高(均P<0.05)。与镉暴露模型组比较,苦杏仁苷各剂量组股骨BMD[(1.21±0.19)vs(1.38±0.23)(1.55±0.26)(1.61±0.27)g/cm^(3)]、骨小梁数量[(2.36±0.39) vs(3.98±0.67)(4.69±0.78)(5.87±0.94)个/mm^(2)]、骨小梁厚度[(0.04±0.01) vs(0.07±0.01)(0.09±0.02)(0.12±0.02)mm]、股骨OC[(328.91±105.85)vs(585.25±184.20)(895.25±298.52)(1 250.21±358.52)moL/mg]、OPN[(589.52±185.54)vs(854.29±258.22)(1 358.96±420.59)(1 852.20±595.20)moL/mg]、OPG [(485.63±121.65)vs (741.25±222.69)(1 259.95±489.52)(1752.63±652.85)moL/mg]、miR-302b(0.69±0.11 vs 0.95±0.16、1.29±0.21、1.65±0.26)水平明显升高(均P<0.05)。骨小梁分散度[(0.68±0.14)vs(0.52±0.11)(0.48±0.09)(0.31±0.07)mm]、股骨NF-κB(3.56±0.73 vs 1.37±0.21、2.90±0.41、2.02±0.23、0.95±0.48 vs 0.87±0.14、0.72±0.25、0.43±0.12)、mTOR mRNA蛋白(4.37±0.76 vs 3.52±0.25、2.57±0.65、1.55±0.21、1.02±0.36 vs 0.82±0.47、0.68±0.54、0.38±0.35)水平明显降低(均P<0.05)。伴随着苦杏仁苷给药剂量的增加,苦杏仁苷各剂量组BMD、骨小梁数量、骨小梁厚度、股骨OC、OPN、OPG、miR-302b水平逐渐增加,骨小梁分散度、股骨NF-κB、mTOR mRNA蛋白水平逐渐降低,均有明显剂量反应关系(均P<0.05)。结论 苦杏仁苷能明显改善骨小梁结构数量,增加骨密度,对Cd暴露骨损伤有明显治疗作用,其机制与苦杏仁苷可激活miR-302b进而抑制NF-κB、mTOR表达有关。

miR-302b-3p在变应性鼻炎小鼠模型中的作用与机制研究

为探讨miR-302b-3p对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)所致变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠炎症反应的调控作用,将12只4周龄BALB/c小鼠随机分为4组:sham组、AR组、anti-miR-302b-3p NC组、anti-miR-302b-3p组。使用OVA制备AR模型,在建模后期,采用anti-miR-302b-3p NC或anti-miR-302b-3p抑制载体进行鼻内滴注。评估小鼠鼻部症状;采用H-E染色法观察鼻黏膜病变情况;qRT-PCR检测miR-302b-3p及B细胞淋巴瘤6(B-cell lymphoma 6,BCL6)mRNA水平;ELISA检测IL-4、IL-5及IL-13的水平;Western blotting检测BCL6、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)、包含CARD的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、前体Caspase-1(pro-Caspase-1)、活化的Caspase-1 p20亚基[cleaved-Caspase-1(p20)]及成熟IL-1β(mature-IL-1β)蛋白表达水平。结果显示,与sham组比较,AR组小鼠的鼻部过敏症状明显,鼻黏膜组织炎症反应较重,IL-4、IL-5及IL-13的分泌显著增加,NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1(p20)及mature-IL-1β的蛋白表达水平较高,miR-302b-3p表达增加,BCL6 mRNA及蛋白水平显著减少(均P<0.01);与anti-miR-302b-3p NC组比较,anti-miR-302b-3p组小鼠鼻部过敏症状减轻,鼻黏膜炎症反应减轻,上皮结构趋于完整,IL-4、IL-5及IL-13的分泌显著减少,NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1(p20)及mature-IL-1β的蛋白表达水平下降,miR-302b-3p表达减少,BCL6 mRNA及蛋白水平显著增加(均P<0.01)。该研究提示,miR-302b-3p可能通过靶向抑制BCL6调节NLRP3/ASC及下游炎症信号通路,进而促进AR进展。

布比卡因对胃癌细胞抑制作用的机制研究

目的探讨布比卡因对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因(LncRNA SNHG16)/微小RNA-302c-3p(miR-302c-3p)分子轴的调控作用。方法体外培养人胃癌细胞AGS,细胞中分别加入3个剂量(50,100,200μmol·L^(-1))的布比卡因处理细胞(命名为低、中、高3个剂量实验组),分别将pcDNA、pcDNA-SNHG16转染至AGS细胞随后加入高剂量布比卡因处理细胞(命名为第1转染组、第2转染组)。噻唑蓝法、Transwell实验用于检测AGS细胞增殖、迁移及侵袭,实时荧光定量-PCR法用于分析SNHG16和miR-302c-3p基因表达水平,通过双荧光素酶报告实验确定SNHG16和miR-302c-3p基因之间靶向关系。结果空白对照组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别为(99.21±5.45)%,(83.98±11.87)%,(59.78±4.93)%,(41.00±5.45)%;这4组的SNHG16基因的表达水平分别为0.98±0.05,0.70±0.06,0.49±0.07,0.30±0.06;这4组的miR-302c-3p基因的表达水平分别为0.98±0.04,1.26±0.11,1.65±0.12,2.29±0.31;这4组的迁移细胞数分别为(104.56±3.57),(84.56±6.86),(60.44±10.78),(36.11±5.42)个;这4组的侵袭细胞数分别为(117.89±7.66),(84.67±6.78),(63.56±6.48),(28.89±4.20)个。SNHG16可竞争性结合miR-302c-3p。第1转染组、第2转染组细胞存活率分别为(41.73±13.11)%,(90.15±5.83)%;miR-302c-3p的表达水平分别为0.99±0.06,0.47±0.17;迁移细胞数分别为(36.89±8.34),(74.78±8.63)个;侵袭细胞数分别为(28.67±4.87),(79.11±10.56)个。上述指标:3个剂量实验组与空白对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),且有剂量组依赖性;第2转染组与第1转染组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论布比卡因可通过下调SNHG16基因的表达而上调miR-302c-3p基因的表达进而减弱胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。