微小RNA-331-3p在上皮性卵巢癌血清中的表达及其临床意义

目的探讨微小RNA-331-3p (miR-331-3p)在上皮性卵巢癌(EOC)患者血清中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法收集2015年1月至2018年1月70例初诊EOC患者(EOC组)和70例健康女性(对照组)的外周血样本,收集EOC组70例患者的卵巢肿瘤组织和30例正常卵巢组织。分别提取血清及组织中miRNA并采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测血清和组织中miR-331-3p的表达水平,分析血清miR-331-3p水平与EOC临床病理特征和预后的关系。结果QPCR结果显示,miR-331-3p在EOC组织中的相对表达量为8. 02±1. 07,高于正常卵巢组织的3. 53±1. 51(P<0. 05); EOC组患者血清中miR-331-3p的相对表达量为9. 59±1. 17,高于对照组的4. 87±1. 98(P<0. 05)。血清miR-331-3p表达与EOC临床分期有关(P<0. 05),但与年龄、组织类型、组织学分级、淋巴结转移和血清CA125水平无关(P>0. 05)。受试者工作特征曲线显示,血清miR-331-3p水平诊断EOC的曲线下面积为0. 868(95%CI:0. 789～0. 948)。EOC患者中血清miR-331-3p高表达者的中位总生存期为15. 5个月,显著低于低表达者的27. 1个月,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 miR-331-3p与EOC的发生发展有关,血清miR-331-3p表达有可能成为EOC诊断及预后评估的新标志物并可作为EOC治疗的有效靶点。

三阴性乳腺癌组织中微RNA-331-3p和跨膜蛋白119水平变化与临床预后的相关性

目的探究三阴性乳腺癌(TNBC)组织中微RNA-331-3p(miR-331-3p)和跨膜蛋白119(TMEM119)水平变化与临床预后的相关性。方法选取2017年1月至2019年1月在信阳市中心医院行手术治疗的98例TNBC病人的癌组织以及癌旁组织,分别作为TNBC组和癌旁组。在术后3年对所有病人进行随访,分为预后良好组为23例,预后不良组为75例。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-331-3p和TMEM119的表达水平;采用Pearson法分析TNBC组织中miR-331-3p和TMEM119表达水平的相关性;分析miR-331-3p和TMEM119水平与TNBC病人预后的关系;影响TNBC病人预后的影响因素采用Cox回归的方法进行分析。结果TNBC组TMEM119(1.53±0.24)的表达水平与癌旁组相比(1.01±0.13)显著上升,miR-331-3p(0.74±0.13)的表达水平与癌旁组(1.02±0.11)相比显著下降(t=41.53、41.53,P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,miR-331-3p和TMEM119表达水平呈负相关关系(r=−0.49,P<0.001)。miR-331-3p和TMEM119表达水平与肿瘤长径、TNM分期、腋窝淋巴结转移有关(P<0.05)。miR-331-3p高表达组病人3年内生存率16/49(32.65%)高于低表达组7/49(14.29%);TMEM119高表达组病人3年内生存率4/49(8.16%)低于低表达组19/49(38.78%)(Z=4.60,P=0.032;Z=12.78,P<0.001)。预后不良组miR-331-3p(0.65±0.13)表达水平与预后良好组(1.03±0.12)相比显著降低,TMEM119(1.69±0.27)表达水平与预后良好组(1.02±0.14)相比显著升高(t=38.74、33.30,P<0.05)。结果显示,TNM分期(HR=5.88)、miR-331-3p(HR=2.45)和TMEM119(HR=2.86)表达水平是影响TNBC病人预后的危险因素(P<0.05)。结论TNBC病人癌组织中miR-331-3p低表达,TMEM119高表达,二者水平与预后评估密切相关。

结直肠癌组织miR-331-3p、MLLT10 mRNA表达变化及其临床意义

目的观察结直肠癌(CRC)组织微小RNA-331-3p(miR-331-3p)、混合谱系白血病转位辅因子10(MLLT10)mRNA表达变化,并探讨其表达与临床病理特征和上皮间质转化的关系。方法选择CRC患者156例,取术中获取的CRC组织及其配对的癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-331-3p、MLLT10mRNA表达以及上皮间质转化相关基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录因子Snail mRNA表达。比较CRC组织与癌旁正常组织miR-331-3p及MLLT10、E-cadherin、N-cadherin、Snail mRNA表达;分析CRC组织miR-331-3p、MLLT10 mRNA表达与临床病理特征的关系,二者表达的关系及其与E-cadherin、N-cadherin、Snail mRNA表达的关系。结果CRC组织MLLT10、N-cadherin、Snail mRNA相对表达量均高于癌旁正常组织,miR-331-3p、E-cadherin mRNA相对表达量均低于癌旁正常组织(P均<0.01)。CRC组织miR-331-3p、MLLT10 mRNA表达与TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤位置、组织分化程度无关(P均>0.05)。Pearson相关分析显示,CRC组织miR-331-3p表达与MLLT10 mRNA表达呈负相关(r=-0.678,P<0.05);CRC组织miR-331-3p表达与E-cadherin mRNA表达呈正相关(r=0.589,P<0.05),与N-cadherin、Snail mRNA表达呈负相关(r分别为-0.712、-0.654,P均<0.05);CRC组织MLLT10 mRNA表达与E-cadherin mRNA表达呈负相关(r=-0.549,P<0.05),与N-cadherin、Snail mRNA表达呈正相关(r分别为0.668、0.714,P均<0.05)。结论CRC组织miR-331-3p低表达、MLLT10 mRNA高表达,二者表达与TNM分期、淋巴结转移以及上皮间质转化密切相关。

胃癌中靶向E2F1基因的miR-331真核表达载体的构建及功能

目的:研究构建靶向E2F1基因的miR-331真核表达载体,评估其转染人胃癌细胞株SGC-7901细胞后对E2F1基因的干扰效果及其功能,探讨miR-331在胃癌中可能的作用机制.方法:将外源性重组真核表达载体pSuper/miR-331转染到人胃癌细胞株SGC-7901内,经G418筛选并建立高表达miR-331的稳定转染细胞株.稳定表达该miR-331的细胞为SGC-7901-pSuper/miR-331组,转染空质粒细胞及未处理细胞SGC-7901-pSuper组和SGC-7901组作为对照,采用实时荧光定量PCR验证miR-331在稳定转染细胞的表达,蛋白印迹检测其对E2F1基因表达的干扰效果和SGC-7901细胞的功能.结果:与SGC-7901-pSuper组相比,转染了pSu-per/miR-331高表达质粒的SGC-7901细胞中E2F1蛋白表达明显减少,降低了4.27倍(0.206±0.037vs0.879±0.082,P<0.05);与SGC-7901-pSuper组相比,转染了pSuper/miR-331高表达质粒的SGC-7901细胞的克隆形成明显减少,降低了3.80倍(1.863±0.098vs7.074±0.182,P<0.05),而SGC-7901-pSuper组与SGC-7901组组间无统计学意义.结论:miR-331真核表达载体构建和稳定表达胃癌细胞筛选成功,为继续深入的研究miR-331在胃癌中的功能奠定了基础.

帕金森病患者血浆外泌体中miR-331-5p的表达及临床意义

目的探索帕金森病(PD)患者血浆外泌体中微小RNA-331-5p(miR-331-5p)的表达及临床意义。方法选取2020-01—2022-12于新疆医科大学第一附属医院诊治的PD患者78例作为研究对象(PD组),另纳入同期无任何基础疾病的健康志愿者36例为对照组。检测2组患者血浆外泌体中miR-331-5p水平、血清中炎症及氧化应激指标水平,评估2组患者认知功能及精神行为症状,分析miR-331-5p与炎症、氧化应激、认知功能及精神行为症状的关系,探讨PD发病的影响因素,计算miR-331-5p对PD发病的诊断价值。结果PD组患者血浆外泌体miR-331-5p水平显著高于对照组(P<0.05)。PD组患者神经精神调查问卷(NPI)评分、PD评定量表运动检查(UPDRS)评分显著高于对照组,生活活动能力量表(ADL)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分及简易精神状态检查表(MMSE)评分明显低于对照组(P<0.05)。PD组患者血清髓过氧化物酶(MPO)、白细胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平显著高于对照组(P<0.05)。PD组患者血浆外泌体miR-331-5p与IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD、MDA、AOPP呈正相关(P<0.05)。PD组患者血浆外泌体miR-331-5p与NPI评分、UPDRS评分呈正相关,与MoCA评分、MMSE评分、ADL评分呈负相关(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示miR-331-5p(OR=2.024)、MDA(OR=1.925)、UPDRS评分(OR=2.447)、MoCA评分(OR=0.544)均是PD发病的影响因素(P<0.05)。miR-331-5p诊断PD的ROC曲线下面积(AUC)为0.809(95%CI:0.715~0.903),截断值为0.833(2-ΔΔCt),灵敏度为75.6%,特异度为77.8%。结论血浆外泌体miR-331-5p与PD患者炎症、氧化应激反应、认知功能及精神行为症状密切相关,且对PD的发生具有良好的诊断价值,可为早期诊治提供新方向。

脑出血患者血清中miR-331-3p和NLRP6表达水平与患者疾病严重程度及神经损伤的关系

目的检测脑出血患者血清中微小RNA-331-3p(miR-331-3p)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白6(NLRP6)的表达水平,探讨两者表达水平与患者疾病严重程度及神经损伤的关系。方法本研究选取2016年5月至2018年5月于该院神经外科诊治的92例脑出血患者作为观察组,同期进行健康体检的92例健康体检者作为对照组,抽取观察组和对照组清晨空腹状态下的静脉血,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组中miR-331-3p和NLRP6的表达水平,比较两者在各组间的差异,根据血肿体积和美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评定脑出血的严重程度和神经受损程度,并进行分组,比较各组血清miR-331-3p和NLRP6的表达水平,Pearson法分析观察组血清miR-331-3p和NLRP6表达水平与血肿体积和NIHSS评分的相关性,及血清miR-331-3p与NLRP6表达水平的相关性。结果与对照组相比,观察组miR-331-3p的表达水平降低,NLRP6表达水平升高(P<0.05);大血肿患者miR-331-3p表达水平低于中、小血肿患者,重型患者miR-331-3p表达水平低于中、轻型患者;大血肿患者NLRP6表达水平高于中、小血肿患者,重型患者NLRP6表达水平高于中、轻型患者,差异有统计学意义(P<0.05);脑出血患者的血清miR-331-3p表达水平与血肿体积和NIHSS评分呈负相关(r=-0.539,P<0.05;r=-0.597,P<0.05),NLRP6表达水平与血肿体积和NIHSS评分呈正相关(r=0.738,P<0.05;r=0.705,P<0.05);血清miR-331-3p与NLRP6呈负相关(r=-0.483,P<0.05)。结论随着脑出血患者病情和神经损伤的加重,miR-331-3p表达水平逐渐降低,NLRP6表达水平逐渐升高,两者共同参与脑出血患者的脑出血和神经受损过程,可能作为脑出血临床治疗的靶点。

miR-331-3p、miR-381-3p表达水平与乳腺癌组织上皮间质转化相关标志物和预后的关系研究

目的研究微小核糖核酸(miR)-331-3p、miR-381-3p的表达水平与乳腺癌组织上皮间质转化指标及临床病理特征的关系,探讨两者的临床预后价值。方法选取2017年1月至2019年1月在该院诊治的乳腺癌患者153例为研究对象。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测癌及癌旁组织中miR-331-3p、miR-381-3p表达水平及上皮间质转化标志物E-钙黏素(E-cad)、N-钙黏素(N-cad)及波形蛋白(Vim)信使RNA(mRNA)的表达水平。Pearson相关性分析miR-331-3p、miR-381-3p表达水平与E-cad、N-cad及Vim mRNA表达水平的相关性。比较miR-331-3p、miR-381-3p表达水平与临床病理特征的关系。Kaplan-Meier生存分析miR-331-3p、miR-381-3p表达水平与临床预后的关系。单因素及多因素COX回归分析影响乳腺癌患者预后的因素。结果与癌旁组织相比,乳腺癌组织中miR-331-3p、miR-381-3p及E-cad mRNA表达水平显著较低,而N-cad mRNA及Vim mRNA表达水平显著较高,差异有统计学意义(均P<0.05)。乳腺癌癌组织中miR-331-3p、miR-381-3p表达水平与E-cad mRNA呈正相关,与N-cad mRNA、Vim mRNA呈负相关(均P<0.05)。乳腺癌组织中miR-331-3p、miR-381-3p表达水平与肿瘤TNM分期、分化程度有关(均P<0.05)。miR-331-3p、miR-381-3p低表达水平组的3年生存率低于高表达水平组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌组织中miR-331-3p低表达、miR-381-3p低表达、肿瘤分期较高、低中分化程度是影响乳腺癌生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论乳腺癌组织中miR-331-3p、miR-381-3p表达水平下调,两者表达水平与上皮间质转化标志物及临床病理特征有关,是影响乳腺癌患者不良生存预后独立危险因素。