肝细胞癌组织中微小RNA-552、微小RNA-383的表达及其对患者术后5年不良预后结局的影响

目的检测微小RNA-552(miR-552)、微小RNA-383(miR-383)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达情况,探讨miR-552与miR-383对HCC患者预后的影响。方法选取2011年2月—2014年2月于广州市花都区人民医院住院并行根治性切除术的68例HCC患者,取患者的HCC组织作为研究样本,取患者的癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm)作为对照样本。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测miR-552、miR-383的相对表达量;分别按HCC患者癌组织的miR-552、miR-383相对表达量高低,将其分为miR-552低表达组(miR-552相对表达量<1.28,n=26)、miR-552高表达组(miR-552相对表达量>1.28,n=42)、miR-383低表达组(miR-383相对表达量<0.83,n=29)、miR-383高表达组(miR-383相对表达量>0.83,n=39);χ2检验分析HCC组织中miR-552、miR-383表达与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析影响HCC术后预后的因素;COX回归分析影响HCC术后5年预后结局的因素。结果HCC组织中miR-552相对表达量高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),miR-383相对表达量低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);miR-552低表达组与miR-552高表达组患者的年龄、性别、肝硬化比例比较,差异无统计学意义(P>0.05);miR-552低表达组患者的组织高分化、肿瘤直径≥5 cm、发生淋巴结转移、发生远处转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、发生血管侵袭比例均低于miR-552高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-383低表达组与miR-383高表达组患者的年龄、性别、肝硬化、发生远处转移、发生血管侵袭比例比较,差异无统计学意义(P>0.05);miR-383低表达组患者的组织高分化、肿瘤直径≥5 cm、发生淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期比例高于miR-383高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-552低表达组患者的5年生存率高于miR-552高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-383低表达组患者的5年生存率低于miR-383高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-552高表达是影响患者术后5年不良预后结局的独立危险因素(β=0.558,HR=1.748,95%CI=1.065~2.870,P<0.05);miR-383高表达是影响患者术后5年不良预后结局的独立保护因素(β=-0.458,HR=0.634,95%CI=0.467~0.861,P<0.05)。结论HCC组织中miR-552、miR-383表达分别升高、降低,二者与HCC患者的5年生存率相关,对患者预后判断可能具有一定的价值。

微小RNA-383对骨肉瘤细胞生物学特性的影响

目的观察微小RNA(mi R)-383对骨肉瘤细胞生物学特性的影响。方法脂质体转染骨肉瘤细胞(U-2OS),检测对细胞凋亡、增殖的影响,并检测细胞迁移侵袭能力、克隆形成能力的改变。结果细胞凋亡情况:空白对照组、无义序列组和实验组细胞的凋亡率分别为(8.56±1.45)%、(12.6l±1.37)%、(33.20±2.59)%,差异有统计学意义(P<0.05);细胞迁移实验:空白对照组、无义序列组和实验组分别为(82±5)个、(68±3)个和(45±7)个,差异有统计学意义(P<0.05);细胞迁移与侵袭实验:空白对照组、无义序列组和实验组细胞穿膜数分别为(82±5)个、(68±3)个和(45±7)个,以及(35±9)个、(32±4)个和(13±5)个,差异有统计学意义(P<0.05);克隆形成实验:空白对照组、无义序列组和实验组克隆数分别为(12.7±4.1)个、(12.3±3.6)个和(6.4±2.7)个。结论抑制mi R-383使骨肉瘤细胞凋亡增加,使细胞增殖、侵袭与迁移及克隆形成受到抑制。

非小细胞肺癌病人血清中miR-455、miR-383表达水平及其临床诊断价值分析

目的检测分析非小细胞肺癌(NSCLC)病人血清微小RNA(miR)-455和miR-383的表达水平,并探讨其临床诊断价值。方法选取我院2020年3月~2023年1月收治的98例NSCLC病人为NSCLC组,同期收治的98例肺部良性疾病病人为肺良性病变组,同期98例体检健康志愿者为健康组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清miR-455和miR-383的表达水平。Pearson分析NSCLC病人血清miR-455表达水平与miR-383水平的相关性;多元Logistic回归分析及ROC曲线分析NSCLC发生的影响因素及诊断价值。结果健康组、肺良性病变组、NSCLC组血清miR-455、miR-383表达水平依次降低。Pearson分析显示,NSCLC病人血清miR-455表达水平与miR-383水平呈正相关(r=0.582,P<0.05)。Logistic分析发现,miR-455、miR-383低表达是影响NSCLC发生的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-455和miR-383联合诊断NSCLC的AUC显著大于miR-455单独诊断的AUC(Z=3.604,P=0.000)及miR-383单独诊断的AUC(Z=2.594,P=0.010)。结论NSCLC病人血清miR-455、miR-383相对表达水平明显下调,二者联合检测对NSCLC具有较高的诊断价值。

血清miR-367、miR-383表达水平与宫颈癌根治术后复发及预后的相关性

目的:探讨血清微小RNA-367(microRNA-367,miR-367)、微小RNA-383(microRNA-383,miR-383)表达水平与宫颈癌根治术后复发及预后的相关性。方法:选取2012年01月至2014年12月在本院行宫颈癌根治术的114例患者为研究对象,记录患者年龄、肿瘤大小、病理类型、病理分级、临床分期、间质浸润深度、淋巴结转移等一般资料,根据术后36个月复发与否将其分为预后良好组(97例)及预后不良组(17例),采用荧光实时定量聚合酶链反应法(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测血清中miR-367、miR-383表达水平并进行比较;分析miR-367、miR-383表达水平与宫颈癌患者临床病理特征的关系;采用乘积极限法(Kaplan-Meier,K-M)进行宫颈癌患者术后36个月预后分析,并采用Log-rank检验进行显著性比较;采用COX模型分析影响宫颈癌患者术后复发的因素。结果:宫颈癌患者血清miR-367、miR-383表达水平与年龄、肿瘤大小、病理类型均无关(P>0.05),与病理分级、临床分期、间质浸润程度、淋巴结转移均有关(P<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组血清miR-367、miR-383表达水平均较低(P<0.05)。114例接受宫颈癌根治术的患者随访36个月,17例复发,复发率为14.91%。K-M曲线结果显示,miR-367高表达组、miR-367低表达组术后36个月复发率分别为8.20%、22.64%,无进展生存期平均值分别为35.049个月(95%CI:34.165~35.933)、32.736个月(95%CI:30.954~34.517)(P=0.028);miR-383高表达组、miR-383低表达组术后36个月复发率为5.08%、25.45%,无进展生存期平均值分别为35.153个月(95%CI:34.213~36.092)、32.091个月(95%CI:30.164~34.017)(P=0.002)。COX风险评估模型结果显示,miR-367低表达、miR-383低表达、低分化、Ⅱa期、间质浸润深度>1/2、伴淋巴结转移均是影响宫颈癌患者术后复发的独立危险因素(P<0.05)。结论:宫颈癌患者血清miR-367、miR-383均为低表达,且与术后复发情况密切相关,可能为预测患者预后提供临床参考依据。

皮肤鳞状细胞癌中miR-383-5p、KIF3B mRNA的表达及临床意义

目的分析皮肤鳞状细胞癌(cSCC)组织中微小RNA(miRNA)-383-5p、驱动蛋白家族成员3B(KIF3B)mRNA的表达及临床意义。方法选取2016年1月—2021年8月华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤科收治手术切除cSCC患者49例,qRT-PCR检测癌组织和癌旁组织中miR-383-5p、KIF3B mRNA表达。Pearson相关性分析cSCC癌组织中miR-383-5p与KIF3B mRNA表达的相关性。分析miR-383-5p、KIF3B mRNA表达与cSCC患者临床病理参数的关系。ROC曲线分析miR-383-5p、KIF3B mRNA表达对cSCC发生的预测价值。结果与癌旁组织比较,癌组织中miR-383-5p表达降低,KIF3B mRNA表达升高(t=31.868、33.517,P均<0.001)。Pearson相关性分析显示,cSCC癌组织中miR-383-5p与KIF3B mRNA表达呈负相关(r=-0.573,P<0.001)。miR-383-5p、KIF3B mRNA表达与cSCC患者TNM分期、侵袭程度、淋巴结转移有关(P<0.01)。ROC曲线显示,miR-383-5p、KIF3B mRNA及二者联合预测cSCC发生的曲线下面积(AUC)分别为0.807、0.800、0.905,敏感度分别为0.837、0.878、0.735,特异度分别为0.653、0.612、0.918。二者联合预测cSCC发生的AUC大于单独预测(Z=2.936、3.220,P=0.003、0.001)。结论cSCC癌组织中miR-383-5p低表达,KIF3B mRNA高表达,与TNM分期、侵袭程度、淋巴结转移有关,二者可能共同参与cSCC发生发展,可作为cSCC发生预测指标。

miR-383和miR-515在胃癌组织中的表达及意义

目的:检测miR-383、miR-515在胃癌组织中的表达及意义,并探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法:选取2016年2月—2017年3月住院治疗的60例胃癌患者,收集切除的癌组织及癌旁组织分别作为胃癌组、癌旁组织组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测胃癌组织中miR-383、miR-515表达水平;Kaplan-meier法分析胃癌组织中miR-383、miR-515表达水平与预后关系,采用Cox回归模型分析影响胃癌患者预后的危险因素。结果:胃癌组中miR-383表达水平明显低于癌旁组织组(P<0.05),miR-515表达水平明显高于癌旁组织组(P<0.05)。胃癌患者中miR-383表达、miR-515表达与肿瘤直径、血管浸润、淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤位置、组织学分级、肿瘤类型无相关性(P>0.05)。Kaplan-meier法分析显示,胃癌组织中miR-383高表达组平均生存时间及3年内总生存率显著高于miR-383低表达组(Log-rank P=0.003),miR-515低表达组平均生存时间及3年内总生存率高于miR-515高表达组(Log-rank P=0.009)。多因素分析显示,miR-383、miR-515表达和肿瘤分化程度是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:胃癌组织中miR-383表达水平降低,miR-515表达水平升高,两者可能作为临床预后判断的靶点,为临床诊治提供一定参考。

miR-383和PRDX3在结肠癌组织中的表达水平及意义

目的检测微小RNA-383(miR-383)和硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶3(PRDX3)在结肠癌组织中的表达情况,探讨二者的表达关系及临床意义。方法选择2016年5月至2018年6月在该院确诊为结肠癌患者的结肠癌标本85份,另选取同期88例行肠镜检查者的正常结肠黏膜组织标本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测结肠癌组织与正常结肠黏膜组织miR-383、PRDX3信使核糖核酸(mRNA)表达水平,采用免疫组织化学染色检测PRDX3蛋白表达情况,采用Pearson相关分析结肠癌组织中miR-383表达水平与PRDX3 mRNA的相关性,分析二者与结肠癌临床病理特征及患者生存情况的关系,Cox回归模型分析影响结肠癌患者预后的危险因素。结果与正常结肠黏膜组织比较,结肠癌组织中miR-383表达水平显著降低,PRDX3 mRNA表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);PRDX3蛋白主要定位于细胞膜与细胞质,结肠癌组织中PRDX3蛋白阳性表达率显著高于正常结肠黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌组织中miR-383和PRDX3 mRNA表达水平呈负相关(P<0.05);miR-383和PRDX3表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05);miR-383高表达组结肠癌患者3年累积生存率显著高于miR-383低表达组,PRDX3高表达组结肠癌患者3年累积生存率显著低于PRDX3低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌低分化、淋巴结转移、miR-383低表达、PRDX3高表达是影响结肠癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论结肠癌组织中miR-383低表达、PRDX3高表达,且与患者生存率有关,可能作为结肠癌患者潜在的预后标志物。

miR-383靶向PRDX3对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨微小RNA-383(miR-383)靶向调控人过氧化物还原酶-3(PRDX3)的表达对肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法体外培养肝癌HepG2细胞,应用实时定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测HepG2细胞中miR-383表达水平;将HepG2细胞分为空白(NG)组、miR-383阴性对照(NC)组、miR-383过表达(miR-383 mimics)组,转染48 h后,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;应用TargetScan数据库预测miR-383的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验加以验证,应用蛋白免疫印记(Western blotting)法检测对PRDX3、Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果与NG组、NC组比较,miR-383 mimics组HepG2细胞中miR-383表达水平显著升高(P<0.05);HepG2细胞增殖抑制率明显升高,侵袭、迁移细胞数明显减少(P<0.05)。TargetScan数据库预测显示PRDX3是miR-383潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系。Western blotting结果显示,miR-383过表达后,PRDX3、Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著下调。结论miR-383可能通过下调PRDX3表达抑制人肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭。

LncRNA MALAT1调节miR-383-5p/SOCS3轴对人牙周膜干细胞的影响

目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)调控微小RNA-383-5p(microRNA-383-5p,miR-383-5p)/细胞因子信号转导负调控因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)轴对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)增殖、凋亡及成骨分化的影响。方法LPS处理hPDLSCs后用靶向MALAT1的小干扰RNA(small interfering RNA-MALAT1,si-MALAT1)或miR-383-5p抑制物(miR-383-5p inhibitor,in-miR-383-5p)或SOCS3过表达质粒(SOCS3)转染,ELISA检测炎症因子水平;RT-qPCR和Western blot检测转染效率;CCK-8和TUNEL检测细胞增殖、凋亡;使用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红S(alizarin red S,ARS)染色分析成骨分化;Western blot对增殖、凋亡以及成骨分化相关蛋白进行检测。生物信息学与双荧光素酶实验分析miR-383-5p与MALAT1/SOCS3之间的关系。结果LPS可诱导hPDLSCs细胞炎症和凋亡,降低了细胞增殖能力和成骨分化程度;同时上调MALAT1和SOCS3表达,下调miR-383-5p表达(P<0.05)。敲低MALAT1可明显降低LPS诱导的hPDLSCs细胞炎症反应、凋亡能力,细胞增殖能力和成骨分化程度增加;同时还可上调miR-383-5p表达,下调SOCS3表达(P<0.05)。此外,回复实验表明,抑制miR-383-5p表达或上调SOCS3表达可部分逆转MALAT1敲低后对LPS诱导的hPDLSCs细胞的影响(P<0.05)。进一步分析验证,MALAT1海绵化miR-383-5p靶向调控SOCS3表达(P<0.05)。结论敲低MALAT1可通过调节miR-383-5p/SOCS3轴改善炎症状态下hPDLSCs的增殖、凋亡和成骨分化。

miR-383-5p转染对人卵巢颗粒细胞株KGN凋亡的影响及其机制

目的 观察miR-383-5p转染对人卵巢颗粒细胞株KGN凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 取对数生长期KGN细胞,分为3组,Blank组为空白对照组,miR-383-5p mimics组转染150 pmol的微小RNA-383-5p模拟物(miR-383-5p),miR-383-5p mimics+NAC组为转染150 pmol的miR-383-5p mimics后N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预组,比较Blank组与miR-383-5p mimics组、miR-383-5p mimics组与miR-383-5p mimics+NAC组两组间凋亡率及凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3蛋白)的表达和活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 与Blank组比较,miR-383-5p mimics组凋亡率及Bax、cleaved caspase 3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P均<0.05);与miR-383-5p mimics组比较,miR-383-5p mimics+NAC组miR-383-5p mimics组凋亡率及Bax、cleaved caspase 3蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增加(P均<0.05)。与Blank组比较,miR-383-5p mimics组ROS、MDA水平升高,SOD活性降低(P均<0.05);与miR-383-5p mimics组比较,miR-383-5p mimics+NAC组ROS、MDA水平降低,SOD活性升高(P均<0.05)。结论 miR-383-5p过表达可促进KGN细胞凋亡,其作用机制可能是通过激活氧化应激途径。

miR-383-3p靶向PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路对冠心病大鼠内皮细胞凋亡的影响

目的:探究微小RNA-383-3p(miR-383-3p)靶向调节人第10号染色体缺失的磷酸酶/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PTEN/PI3K/AKT/mTOR)信号通路对冠心病(CHD)大鼠内皮细胞凋亡的影响。方法:将SD大鼠分为control组、CHD组、mimic NC组、miR-383-3p mimic组、miR-383-3p mimic+pcDNA3.1组、miR-383-3p mimic+pcDNA3.1-PTEN组,每组15只;除control组外其余组大鼠通过高脂饲料喂养及垂体后叶素注射构建CHD模型,造模前24h,将慢病毒液或质粒载体注射到相应组大鼠中;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测冠状动脉miR-383-3p表达;全自动生化分析仪测定大鼠血脂水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮(NO)水平;HE染色及TUNEL法观察冠状动脉组织病理变化及内皮细胞凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-383-3p与PTEN靶向关系;Western blot检测冠状动脉组织Bcl-2、Bax及PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路蛋白表达。结果:与control组相比,CHD组大鼠miR-383-3p、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、VEGF、NO、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著减少,三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、ET-1、AngⅡ水平、冠状动脉组织病理损伤程度、内皮细胞凋亡指数(AI)、Bax、PTEN表达显著升高(P<0.05);与CHD组相比,miR-383-3p mimic组miR-383-3p、HDL-C、VEGF、NO、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著增加,TG、LDL-C、TC、ET-1、AngⅡ水平、冠状动脉组织病理损伤程度、内皮细胞AI、Bax、PTEN表达显著减少(P<0.05);过表达PTEN可逆转miR-383-3p高表达对CHD大鼠内皮细胞凋亡及功能损伤的改善作用;PTEN是miR-383-3p的靶向基因。结论:miR-383-3p可通过靶向抑制PTEN表达来激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,与抑制CHD大鼠内皮细胞凋亡密切相关。