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微小RNA-507靶向调控VEGFC表达及对肝癌细胞生物学行为和PI3K/Akt通路的影响 被引量:6
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作者 牛虹 周浩本 +4 位作者 刘怀民 高启龙 田同德 马东阳 唐静雯 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期673-679,共7页
目的探讨微小RNA-507(miR-507)对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移能力及PI3K/Akt信号通路的影响并分析miR-507对血管内皮生长因子C(VEGFC)的靶向调控作用。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测2014年1月至2017年3月经病理确诊的90例肝癌患者的... 目的探讨微小RNA-507(miR-507)对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移能力及PI3K/Akt信号通路的影响并分析miR-507对血管内皮生长因子C(VEGFC)的靶向调控作用。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测2014年1月至2017年3月经病理确诊的90例肝癌患者的癌组织及癌旁组织中的miR-507和VEGFC mRNA水平;采用脂质体法向人肝癌细胞Hep G2转染miR-507模拟物(过表达组)或阴性对照(NC组),QPCR检测转染48 h后的miR-507水平,MTT法比较不同处理时间(0、12、24、48 h)各组细胞的增殖情况,AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕实验比较各组迁移情况,QPCR和Western blotting分别检测VEGFC及PI3K/Akt信号通路中p-PI3K和p-Akt的mRNA和蛋白水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-507与靶基因VEGFC间的靶向关系和结合位点。结果 QPCR检测发现肝癌组织中的miR-507水平为0.672±0.089,低于癌旁组织的1.142±0.136,VEGFC mRNA水平为1.482±0.156,高于癌旁组织的1.021±0.087,差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC组和对照组相比,过表达组Hep G2细胞的增殖活力在转染24~48 h后明显减弱(P<0.01)。过表达组的凋亡率为(17.26±1.96)%,高于NC组的(7.85±0.87)%和对照组的(8.13±0.69)%,过表达组的愈合率为(39.65±4.87)%,低于NC组的(58.18±2.73)%和对照组的(57.24±3.17)%,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达组的p-Akt、pPI3K和VEGFC的蛋白和mRNA水平均低于NC组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证明VEGFC是miR-507的直接作用靶点。结论 VEGFC可能通过PI3K/Akt信号通路介导miR-507对肝癌细胞Hep G2增殖、凋亡与迁移能力的调控,因此miR-507可作为肝癌潜在的分子治疗靶点。 展开更多
关键词 肝癌 微小rna-507 增殖 凋亡 迁移 血管内皮生长因子C
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