长链非编码RNA PVT1调控miR-551通过Wnt信号通路对卵巢癌迁移和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制。方法:q PCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的变化;双萤光素酶报告基因检测PVT1与微小RNA(miR)-551的相互作用;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后miR-551-inhibitor对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测沉默PVT1后Wnt信号通路相关蛋白的表达情况。裸鼠皮下成瘤实验检测沉默PVT1对卵巢癌成瘤重量及体积的影响。结果:与正常卵巢组织相比,卵巢瘤组织中PVT1表达明显增高(P<0.05);卵巢癌细胞株ES-2中PVT1表达水平最高(P<0.05);沉默PVT1可以抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;PVT1能与miR-551的位点特异性结合;沉默PVT1后,miR-551-inhibitor可以促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;沉默PVT1后Wnt信号通路蛋白的表达相应下调;与阴性对照组相比,PVT1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小(P<0.05)。结论:PVT1在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,它可以靶向调节miR-551,通过Wnt信号通路调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。

miR-551b在甲状腺癌中的表达及对SW579细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR)-551b在甲状腺癌中的表达及对SW579细胞增殖、凋亡的影响。方法收集2017年10月至2019年10月本院获得的28例甲状腺癌组织及其癌旁正常组织标本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-551b在甲状腺癌组织及癌旁正常组织中的表达情况。体外培养甲状腺癌细胞SW579,分为对照组(不转染)、siRNA NC组(转染nonsense siRNA)、miR-551b siRNA组(转染miR-551b siRNA)、mimic NC组(转染negative control-miR-551b)和miR-551b mimic组(转染hsa-miR-551b mimic)。qRT-PCR法检测各组SW579细胞中miR-551b表达情况。CCK-8法检测各组SW579细胞增殖情况。流式细胞仪检测各组SW579细胞凋亡情况及其细胞周期分布情况。蛋白印迹法检测各组SW579细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达情况。结果甲状腺癌组织中miR-551b表达水平较癌旁正常组织显著降低(P<0.05)。与siRNA NC组相比,miR-551b siRNA组SW579细胞中miR-551b水平、细胞凋亡率、G 0/G 1期细胞比例及Bax蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞OD值、S期、G2/M期细胞比例及PCNA、Cyclin D1蛋白水平显著升高(P<0.05)。与mimic NC组相比,miR-551b mimic组SW579细胞中miR-551b水平、细胞凋亡率、G 0/G 1期细胞比例及Bax蛋白水平显著升高(P<0.05),细胞OD值、S期、G2/M期细胞比例及PCNA、Cyclin D1蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论miR-551b在甲状腺癌组织中表达下调,可抑制癌细胞增殖并诱导其凋亡,可能与甲状腺癌发生发展密切相关。

急性胰腺炎患者血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平与病情严重程度的相关性

目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小RNA-551-5p(miR-551-5p)、微小RNA-126a-5p(miR-126a-5p)表达水平与AP严重程度的相关性。方法:收集127例AP患者的临床资料,根据病情严重程度分为轻症AP(MAP组)63例和重症AP(SAP组)64例;另选取健康体检者60例为对照组。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测3组血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶(AMS)及脂肪酶(LPS)水平;利用Pearson法分析血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平与患者Ranson评分、急性生理与慢性健康评估(APCHEⅡ)评分、血清生化指标的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平对AP的诊断价值;采用Logistic回归分析评估影响AP的危险因素。结果:与对照组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、IL-18、CRP、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P<0.05),MAP组血清IL-6、IL-18、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P<0.05);与MAP组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、CRP水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清miR-551-5p与TNF-α、IL-6、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分呈正相关(r值依次为0.755,0.684,0.531,0.519,0.712,0.679,均P<0.05);血清miR-126a-5p与IL-6、IL-18、AMS水平及Ranson评分呈正相关(r值依次为0.711,0.678,0.628,0.701,均P<0.05);血清miR-551-5p、miR-126a-5p诊断SAP的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.809、0.800,截断值分别为2.01、1.54,敏感度分别为73.1%、85.3%,特异性分别为82.8%、72.4%;二者联合诊断的AUC为0.965,敏感度为96.5%,特异性为82.4%;多因素Logistic分析结果显示高水平血清AMS、LPS、miR-551-5p、miR-126a-5p是AP的危险因素。结论:血清高水平miR-551-5p及miR-126a-5p可能反映AP患者病情严重程度,是评估SAP患者预后的潜在指标。

急性胰腺炎患者血浆miR-21-3p和miR-551-5p表达水平及临床意义

目的探讨血浆微小RNA-21-3p(miR-21-3p)和miR-551-5p表达水平对急性胰腺炎(AP)的诊断及预后预测的价值。方法采用前瞻性观察性研究,选择2017年1月1日至2019年12月31日海南省第三人民医院收治的AP患者作为研究对象。根据病情严重程度将患者分为轻症急性胰腺炎(MAP)组、中度重症急性胰腺炎(MSAP)组和重症急性胰腺炎(SAP)组,均于入院次日采集空腹静脉血,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测血浆miR-21-3p及miR-551-5p表达水平。以患者康复出院或死亡作为研究终点。另外以同期50例健康体检者作为健康对照组。用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆miR-21-3p和miR-551-5p表达水平对SAP诊断及预后评估的价值。采用Pearson法分析SAP患者血浆miR-21-3p与miR-551-5p表达水平的相关性。结果共入选164例AP患者,其中MAP 72例,MSAP 47例,SAP 45例。SAP患者中存活27例,死亡18例;MAP组和MSAP组无死亡病例。AP患者血浆miR-21-3p、miR-551-5p表达水平均明显高于健康对照组〔miR-21-3p(2-ΔΔCt):2.17±0.90比0.65±0.12,miR-551-5p(2-ΔΔCt):1.80±0.73比0.42±0.08,均P<0.01〕;且随病情程度加重,患者血浆miR-21-3p、miR-551-5p表达水平逐渐升高(F值分别为11.635、10.204,均P<0.01),SAP组血浆miR-21-3p、miR-551-5p表达水平明显高于MSAP组和MAP组〔miR-21-3p(2-ΔΔCt):3.16±1.08比1.85±0.71、1.70±0.64,miR-551-5p(2-ΔΔCt):2.63±0.95比1.52±0.46、1.36±0.40,均P<0.01〕。ROC曲线分析显示,miR-21-3p与miR-551-5p联合诊断SAP的ROC曲线下面积(AUC)和95%可信区间(95%CI)明显高于miR-21-3p或miR-551-5p单项指标〔0.898(0.841~0.960)比0.820(0.763~0.882)、0.806(0.748~0.867),Z1=4.480、Z2=4.916,均P<0.05〕,其敏感度为90.7%,特异度为85.0%。SAP死亡组患者血浆miR-21-3p、miR-551-5p表达水平均明显高于存活组〔miR-21-3p(2-ΔΔCt):3.75±1.17比2.66±0.87,miR-551-5p(2-ΔΔCt):3.17±1.04比2.24±0.83,均P<0.01〕。ROC曲线分析显示,miR-21-3p与miR-551-5p联合预测SAP患者死亡的AUC和95%CI明显高于miR-21-3p或miR-551-5p单项指标〔0.933(0.875~0.996)比0.856(0.794~0.917)、0.816(0.759~0.874),Z1=4.395、Z2=5.520,均P<0.05〕,其敏感度为95.2%,特异度为87.5%。相关性分析显示,SAP患者血浆miR-21-3p与miR-551-5p表达水平呈显著正相关(r=0.827,P<0.001)。结论血浆miR-21-3p和miR-551-5p表达水平升高与AP患者病情严重程度呈正相关,二者联合检测对SAP诊断和预后评估具有较好的价值。