微小RNA-588靶向调控脾酪氨酸激酶的表达及其对胃癌细胞增殖、凋亡的作用

目的探讨微小RNA-588(miR-588)对胃癌细胞增殖、凋亡的影响以及潜在的作用机制。方法运用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞SGC-7901、BGC-823和正常胃黏膜细胞GES-1中miR-588的表达水平;将胃癌细胞SGC-7901、BGC-823分为anti-miR-NC组、anti-miR-588组、anti-miR-588+si-NC组、anti-miR-588+si-脾酪氨酸激酶(Syk)组;蛋白质印迹法(Westernblotting)检测蛋白表达;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测BGC-823细胞活性;流式细胞术检测BGC-823细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测miR-588和Syk的靶向关系。结果胃癌细胞SGC-7901、BGC-823中miR-588的表达水平高于GES-1细胞[(0.58±0.06)、(0.84±0.08)比(0.36±0.04),P<0.05]。抑制miR-588表达可抑制胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡;促进P21、Bax蛋白的表达,抑制cyclinD1、Bcl-2蛋白的表达。miR-588靶向负调控Syk的表达,抑制Syk表达能逆转抑制miR-588对细胞BGC-823细胞的作用。结论miR-588可抑制胃癌细胞细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Syk有关。

长链非编码RNA核受体亚家族2 F组成员2反义RNA 1靶向微小RNA-588调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移侵袭的分子机制

目的探讨长链非编码RNA核受体亚家族2 F组成员2反义RNA 1(lncRNA NR2F2-AS1)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖、迁移侵袭的影响及分子机制。方法选取郑州大学第一附属医院35例RA患者滑膜组织及正常滑膜组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NR2F2-AS1和微小RNA(miR)-588的表达水平;将RASF分为si-NR2F2-AS1组、si-NC组、miR-588组、miR-NC组、si-NR2F2-AS1+anti-miR-588组、si-NR2F2-AS1+anti-miR-NC组;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;划痕实验检测细胞划痕愈合率;Transwell检测细胞侵袭数;蛋白质印迹法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测NR2F2-AS1和miR-588的靶向关系。用SPSS 20.0软件进行统计学分析。结果 RA患者滑膜组织中NR2F2-AS1表达水平高于正常滑膜组织(3.50±0.23比1.00±0.06,t=62.223,P<0.05),而miR-588表达水平低于正常滑膜组织(0.29±0.04比1.00±0.09,t=42.649,P<0.05)。si-NR2F2-AS1组细胞活性低于si-NC组(0.55±0.04比1.03±0.08,t=16.100,P<0.05),细胞克隆形成数低于si-NC组[(47.58±5.03)个比(103.93±10.24)个,t=14.818,P<0.05]、侵袭细胞数[(55.31±5.28)个比(123.37±10.09)个,t=17.929,P<0.05]低于si-NC组,划痕愈合率低于si-NC组[(23.21±2.47)%比(64.19±5.55)%,t=20.238,P<0.05],E钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平高于si-NC组,N钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平低于si-NC组(P<0.05)。过表达miR-588与其作用相同。NR2F2-AS1靶向调控miR-588;下调miR-588表达逆转抑制NR2F2-AS1表达对RASF增殖、迁移侵袭的作用。结论抑制lncRNA NR2F2-AS1表达可通过靶向调控miR-588抑制RA滑膜成纤维细胞的增殖、迁移侵袭。