梅毒血清固定患者外周血单个核淋巴细胞中miR-195与miR-223和miR-589的表达及临床价值

目的探讨早期梅毒及梅毒固定患者外周血单个核淋巴细胞中微小RNA-195(miR-195)、miR-223、miR-589的表达及临床价值。方法选择天津市滨海新区大港医院皮肤性病科2018年3月-2020年3月进行治疗的梅毒患者作为研究对象,根据其驱梅治疗后血清转变情况,从中选择血清转阴及血清固定患者各40例纳入研究,选择同期医院体检的健康人40名纳入对照组。采用快速血浆反应素实验(RPR)检测血清中梅毒抗体滴度;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miR-195、miR-223、miR-589mRNA的表达情况。结果血清固定组miR-195、miR-223、miR-589水平高于正常转阴组及对照组(P<0.05);正常转阴组miR-195、miR-223、miR-589水平高于对照组(P<0.05);初始滴度<1∶8患者miR-195、miR-223、miR-589水平高于1∶8~1∶32患者及>1∶32患者(P<0.05);初始滴度1∶8~1∶32患者miR-195、miR-223、miR-589水平高于>1∶32患者,(P<0.05);临床分期为梅毒II期患者miR-195、miR-223、miR-589水平高于I期患者(P<0.001);受试者工作特征曲线分析结果显示,miR-195、miR-223、miR-589单指标用于梅毒血清固定诊断价值曲线下面积分别为0.725、0.753、0.749,联合诊断时曲线下面积为0.864。结论外周血miR-195、miR-223、miR-589在梅毒血清固定患者mRNA上表达显著上调,可能参与梅毒血清固定的免疫机制调节。

LncRNA ZFAS1对NCI-H460细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响

目的研究LncRNA ZFAS1调控肺癌NCI-H460细胞增殖、侵袭和化疗敏感性的作用机制。方法收集肺癌组织、癌旁正常组织、NCI-H460细胞和BEAS-2B细胞,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分析LncRNA ZFAS1、miR-589-5p的表达量。miRcode软件预测LncRNA ZFAS1和miR-589-5p的结合位点,进一步通过双荧光素酶报告基因确定两者的相关性。以细胞计数法-8(CCK-8)实验检测NCI-H460细胞增殖活力,以Transwell实验检测细胞侵袭数目,以流式细胞仪检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)通路蛋白表达。结果NCI-H460细胞(3.02±0.98)和肺癌组织(2.34±0.67)中LncRNA ZFAS1表达量明显升高(P<0.01),NCI-H460细胞(0.34±0.03)和肺癌组织(0.23±0.01)中miR-589-5p的表达量明显降低(P<0.01)。ZFAS1 siRNA和siRNA NC组细胞增殖活力分别为(37.52±2.58)%,(62.38±3.55)%,细胞侵袭数目分别为(32.50±4.52),(83.50±5.86)个,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。siRNA NC+8μg·mL^(-1)顺铂组、ZFAS1 siRNA+8μg·mL^(-1)顺铂组细胞凋亡率分别为(8.73±2.17)%,(20.06±1.85)%,差异有统计学意义(P<0.01)。LncRNA ZFAS1与miR-589-5p具有靶向结合位点。下调miR-589-5p激活了MAPK/ERK通路。inhibitor NC组、miR-589-5p inhibitor组、miR-589-5p inhibitor+U0126组细胞增殖活力分别为(63.18±3.39)%,(82.35±4.58)%,(60.27±3.93)%,细胞侵袭数目分别为(75.50±6.85),(135.50±5.83),(90.50±6.84)个,差异均有统计学意义(均P<0.01)。inhibitor NC+8μg·mL^(-1)顺铂组、miR-589-5p inhibitor+8μg·mL^(-1)顺铂组、miR-589-5p inhibitor+U0126+8μg·mL^(-1)顺铂组细胞增殖活力分别为(38.25±2.78)%,(75.45±4.28)%,(42.85±5.87)%,细胞凋亡率分别为(12.59±4.15)%,(5.26±2.48)%,(11.06±2.45)%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论LncRNA ZFAS1在肺癌细胞中表达上调且通过miR-589-5p激活MAPK/ERK通路调控NCI-H460细胞增殖、侵袭及化疗敏感性。