微小RNA-592靶向调控JAK1表达及对非小细胞肺癌细胞侵袭迁移的影响

目的探讨微小RNA-592(miR-592)对Janus激酶1(JAK1)表达的靶向调控作用及非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测NSCLC细胞系A549和人正常肺上皮细胞BEAS-2B的miR-592水平。经脂质体Lipofectamine 2000法向A549细胞转染miR-592模拟物(过表达组)和阴性对照(NC组)后采用QPCR检测miR-592水平,划痕实验和Transwell小室实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数以评价迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-592对JAK1的靶向调控作用,Western blotting检测JAK1、磷酸化JAK1(p-JAK1)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白水平。结果QPCR结果显示A549细胞的miR-592水平为0.312±0.097,低于BEAS-2B细胞的1.062±0.136(P<0.05);过表达组的miR-592相对表达量为6.647±1.847,高于NC组的1.054±0.168(P<0.05)。过表达组的愈合率和穿膜细胞数分别为(27.45±2.51)%和(105.2±15.8)个,均低于NC组的(54.45±3.06)%和(312.4±19.2)个,差异有统计学意义(P<0.05)。A549细胞中miR-592模拟物可抑制JAK1野生型3′非翻译区的相对荧光素酶活性,但对突变型JAK1的无影响。与NC组相比,过表达组的JAK1、p-JAK1、p-STAT3和MMP-9蛋白水平均下调(P<0.05)。结论miR-592负调控NSCLC细胞侵袭和迁移,可能与抑制JAK/STAT3信号通路活性有关,提示miR-592发挥抑癌作用且可能是NSCLC治疗的潜在靶标。

结肠癌中miR-592、SOX9的表达与临床病理特征及预后的关系

目的探究微小RNA-592(miR-592)和Sry相关组蛋白9(SOX9)表达水平与结肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2010年2月至2016年2月在长武县人民医院治疗的结肠癌患者106例,术中收集患者结肠癌组织及相应癌旁组织(距肿瘤组织>5 cm)。采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测其miR-592和SOX9 mRNA表达水平,并采用免疫组织化学染色法检测SOX9蛋白表达水平。采用Pearson法进行相关性分析,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Cox比例风险回归模型分析结肠癌患者不良预后发生的危险因素。结果miR-592在结肠癌组织中表达水平为0.56±0.16,明显低于癌旁组织的0.99±0.30,差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌组织中SOX9 mRNA表达水平及SOX9蛋白阳性表达率分别为2.38±0.74、64.15%,明显高于癌旁组织的1.01±0.32、16.03%,差异均有统计学意义(P<0.05);结肠癌组织中miR-592、SOX9表达水平与分化程度、浸润程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05);miR-592低表达组患者3年总生存率为22.03%,明显低于高表达组的68.08%,差异有统计学意义(P<0.05);SOX9高表达组患者3年总生存率为42.11%,明显低于低表达组的76.32%,差异具有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、miR-592低表达、SOX9高表达是影响结肠癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05);结肠癌组织中miR-592与SOX9 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.562,P<0.05)。结论结肠癌组织中miR-592低表达、SOX9高表达,与TNM分期、淋巴结转移等临床病理特征及3年生存率有关,两者可能共同参与结肠癌发生发展,影响患者预后。

胃癌患者血清中miR-373和miR-592的表达变化及意义

目的观察胃癌患者血清miR-373和miR-592表达变化,并探讨其意义。方法选取胃癌患者75例(胃癌组),同时选择体检健康者40例作为对照组。采用RT-PCR检测两组血清中的miR-373和miR-592,分析miR-373和miR-592表达与胃癌患者临床病理特征的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清中miR-373和miR-592表达对胃癌的诊断价值;采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清中miR-373和miR-592表达对胃癌患者生存预后的影响。结果胃癌组血清中miR-373、miR-592的相对表达量高于对照组(P均<0.01)。胃癌患者血清中miR-373和miR-592的表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清中miR-373表达诊断胃癌的曲线下面积为0.904(95%CI:0.845~0.963,P<0.01),最佳诊断界值为4.93,此时其特异性为0.950,敏感性为0.787;血清中miR-592表达诊断胃癌的曲线下面积为0.941(95%CI:0.900~0.982,P<0.01),最佳诊断界值为1.24,此时其特异性为0.850,敏感性为0.893。分别以胃癌患者血清中miR-373、miR-592相对表达量中位数值为截断值,将患者分别分为miR-373高表达(43例)、miR-373低表达(32例)和miR-592高表达(47例)、miR-592低表达(28例)。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-373低表达者预后生存率高于miR-373高表达者(P<0.05)。结论miR-373和miR-592在胃癌患者血清中表达升高,可能与胃癌的转移有关,对胃癌的诊断有一定价值。miR-373高表达可能作为患者预后生存不良的标志物。