原发性肝癌患者四跨膜蛋白8、埃兹蛋白及微小RNA-634与预后的相关性

目的探讨原发性肝癌患者四跨膜蛋白8(tetraspanin-8,Tspan8)、埃兹蛋白(Ezrin)及微小RNA-634(microRNA-634,miR-634)水平与预后的相关性。方法选取2012年2月至2013年2月于天门市第一人民医院住院的120例原发性肝癌患者为研究对象,记录患者体重指数(body mass index,BMI)、肝癌组织分化程度、TNM分期、肝内转移及淋巴结转移等。采用免疫组织化学法检测肝癌组织和癌旁组织Tspan8和Ezrin表达水平,采用酶联免疫吸附法检测甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-634相对表达量。采用Spearman相关性分析肝癌组织分化程度、TNM分期、肝内转移及淋巴结转移与肝癌组织Tspan8、Ezrin、miR-634水平的相关性,采用Pearson相关性分析肝癌组织Tspan8、miR-634、Ezrin水平与AFP的相关性,采用Cox回归分析患者5年生存的危险因素。结果肝癌组织Tspan8[(1.76±0.14)%vs(0.23±0.03)%]和Ezrin[(1.97±0.22)%vs(1.28±0.17)%]显著高于癌旁组织,miR-634相对表达量显著低于癌旁组织(0.25±0.03 vs 1.11±0.23),差异均有统计学意义(t值分别为117.059、27.186、40.616,P均<0.001)。不同肝癌组织分化程度[低分化vs中、高分化:Tspan8(1.64±0.28)%vs(1.93±0.24)%,Ezrin(1.88±0.21)%vs(1.99±0.28)%,miR-6340.33±0.05 vs 0.21±0.07]、TNM分期[Ⅰ~Ⅱ期vsⅢ~Ⅳ期:Tspan8(1.63±0.46)%vs(1.92±0.19)%,Ezrin(1.64±0.33)%vs(2.12±0.45)%,miR-6340.33±0.09 vs 0.15±0.03]、淋巴结转移[有vs无:Tspan8(1.94±0.12)%vs(1.60±0.16)%,Ezrin(2.03±0.52)%vs(1.68±0.39)%,miR-6340.22±0.08 vs 0.32±0.04]及肝内转移[有vs无:Tspan8(1.94±0.52)%vs(0.62±0.03)%,Ezrin(1.99±0.45)%vs(1.77±0.33)%,miR-6340.22±0.07 vs 0.35±0.03]原发性肝癌患者的Tspan8、Ezrin及miR-634差异有统计学意义(P均<0.05)。患者肝癌组织分化程度、TNM分期、肝内转移及淋巴结转移分别与Tspan8和Ezrin呈正相关(rs>0.1,P<0.05),与miR-634呈负相关(rs<-0.2,P<0.05)。Tspan8、Ezrin表达水平与AFP呈正相关(r=0.87,P=0.012;r=0.91,P=0.006),miR-634相对表达量与AFP呈负相关(r=-0.92,P=0.0001)。Cox回归分析表明,年龄≥55岁、存在淋巴结转移、Tspan8及Ezrin是患者5年生存的独立危险因素,miR-634是患者5年生存的独立保护因素。结论原发性肝癌患者的不良结局与Tspan8和Ezrin呈正相关,与miR-634呈负相关。

lncRNA LINC00689靶向调控miRNA-634促进胶质瘤U251细胞增殖、侵袭和迁移

目的探讨长链基因间非蛋白编码RNA689(LINC00689)对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法RT-PCR实验检测正常胶质细胞HEB、胶质瘤细胞系A172、U251、U87、SHG-4中LINC00689和miRNA-634的表达。将si-NC、si-LINC00689、miRNA-634 mimics、miRNA-NC、si-LINC00689+anti-miRNA-NC、si-LINC00689+anti-miRNA-634质粒转染至U251细胞中;CCK-8实验检测细胞增殖、Transwell实验检测细胞侵袭和迁移。结果与正常胶质细胞HEB比较,胶质瘤细胞系A172、U251、U87和SHG-4的LINC00689表达水平较高,而miRNA-634表达水平较低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-LINC00689组LINC00689表达水平、细胞增殖活力、侵袭和迁移细胞数明显较低(P<0.05)。与miRNA-NC组比较,miRNA-634 mimics组miRNA-634表达水平明显增高(P<0.05),细胞增殖活力、侵袭和迁移细胞数明显降低(P<0.05)。与si-LINC00689+anti-miR⁃NA-NC组比较,si-LINC00689+anti-miRNA-634组细胞增殖活力、侵袭和迁移细胞数明显增高(P<0.05)。结论LINC00689可以促进胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制可能与靶向调控miRNA-634有关。