长链非编码RNA核富集转录本1通过靶向微小RNA-761对缺氧/复氧大鼠星形胶质细胞损伤的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录本1(NEAT1)对缺氧/复氧(H/R)胶质细胞损伤的影响,及其机制是否与调控微小RNA-761(miR-761)有关。方法构建大鼠皮质星形胶质细胞H/R损伤模型。分为对照组、H/R组、H/R+小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、H/R+si-NEAT1组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-761组、H/R+si-NEAT1+miRNA抑制物(anti-miR-NC)组、H/R+si-NEAT1+anti-miR-761组。Real-time PCR分析NEAT1和miR-761的mRNA表达。流式细胞术分析细胞凋亡。试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性。双荧光素酶报告基因实验和Real-time PCR分析NEAT1和miR-761靶向关系。实验重复3次。结果与对照组比较,H/R组细胞凋亡率和MDA含量显著升高,SOD和CAT活性显著降低,NEAT1表达显著升高,miR-761表达显著降低(P<0.05)。与H/R+si-NC组比较,H/R+si-NEAT1组细胞凋亡率和MDA含量显著降低,SOD和CAT活性显著升高(P<0.05)。与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-761组细胞凋亡率和MDA含量显著降低,SOD和CAT活性显著升高(P<0.05)。MiR-761是NEAT1的靶基因,NEAT1负调控miR-761表达。与H/R+si-NEAT1+anti-miR-NC组比较,H/R+si-NEAT1+anti-miR-761组细胞凋亡率、MDA含量显著升高,SOD和CAT活性显著降低(P<0.05)。结论干扰NEAT1表达通过上调miR-761对H/R损伤的星形胶质细胞具有保护作用。

微小RNA-761的研究进展

微小RNA(miRNA,miR)是高度进化保守的长度为18~ 25个核苷酸的非编码核糖核酸,能够在转录后水平调节基因的表达.近年来,大量研究表明miR-761参与细胞内线粒体的分裂、融合及合成,并在不同肿瘤中发挥着抑癌或促癌的作用.此外,还与心血管疾病、海马神经元的塑形和发育等密切相关.本文就miR-761的研究进展进行综述.

LncRNA FAL1靶向miR-761对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响

目的探讨LncRNA FAL1通过靶向miR-761对骨肉瘤MG63细胞生物学行为(增殖、侵袭、迁移、凋亡)的影响。方法常规培养MG63细胞,将其随机分为Vector组、FAL1组、si-FAL1组、si-Ctrl组并分别转染pcDNA3.1空载体、过表达载体pcDNA3.1-FAL1、干扰序列si-FAL1、阴性对照si-Ctrl,用实时荧光定量PCR法检测MG63细胞中miR-761表达,用双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA FAL1与miR-761的靶向关系。取部分MG63细胞随机分为si-Ctrl组(转染si-Ctrl)、si-FAL1组(转染si-FAL1)、si-FAL1+inhibitor-NC组(共转染si-FAL1和inhibitor-NC)、si-FAL1+miR-761 inhibitor组(共转染si-FAL1和miR-761 inhibitor),用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭、迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与Vector组比较,FAL1组LncRNA FAL1相对表达量高,而miR-761相对表达量低(P均<0.05);与si-Ctrl组比较,si-FAL1组LncRNA FAL1相对表达量低,而miR-761相对表达量高(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,LncRNA FAL1可直接靶向miR-761。与si-Ctrl组比较,si-FAL1组细胞增殖活力低,侵袭、迁移数量低,凋亡率高(P均<0.05);与si-FAL1组比较,si-FAL1-miR-761 inhibitor组MG63细胞增殖活力高,侵袭、迁移数量多,凋亡率低(P均<0.05),但si-FAL1-inhibitor-NC组MG63细胞增殖活力、侵袭、迁移数量、凋亡率差异无统计学意义(P均>0.05)。结论LncRNA FAL1可通过靶向调控miR-761的表达以抑制MG63细胞增殖、侵袭、迁移,并促进其凋亡。

miR-761、TIMP-2在老年高血压非小细胞肺癌患者癌组织中的表达及预后相关分析

目的:探究老年高血压非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中微小RNA-761(miR-761)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达水平与预后的关系。方法:以89例高血压NSCLC患者的癌组织为高血压肺癌组,取其癌旁组织作为癌旁对照组;同期选取87例单纯NSCLC患者的癌组织作为肺癌组。比较各组miR-761、TIMP-2表达水平,分析高血压肺癌组miR-761、TIMP-2水平与临床病理特征及生存率的关系;COX回归分析高血压NSCLC预后影响因素。结果:与癌旁对照组相比,高血压肺癌组和肺癌组miR-761表达水平升高,TIMP-2高表达率较低;高血压肺癌组miR-761表达水平高于肺癌组(P<0.05)。miR-761高表达组、TIMP-2低表达组肿瘤≥3.0 cm、有淋巴结转移、组织低分化、TNMⅢ-Ⅳ期患者比例高于miR-761低表达组、TIMP-2高表达组(P<0.05)。miR-761高表达者生存率(31.11%)低于miR-761低表达者(59.09%)(χ^(2)=7.039,P<0.05)。TIMP-2高表达者生存率(64.52%)高于TIMP-2低表达者(34.48%)(χ^(2)=7.364,P<0.05)。miR-761、TIMP-2是高血压NSCLC患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论:高血压NSCLC患者癌组织中miR-761高表达,TIMP-2低表达,与部分临床病理特征及预后相关。

微小RNA 761对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响

目的研究微小RNA 761(miR-761)对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法取多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞培养,随机分为3组,分别为miR-761 inhibitor组(转染miR-761抑制剂),miR-761 mimic组(转染miR-761模拟物),miR-NC组(转染阴性对照寡核苷酸)。用细胞计数法-8(CCK-8)实验检测转染细胞的增殖能力;用TUNEL实验检测转染细胞的凋亡能力;用蛋白质印迹(Western blot)法检测雌激素受体2(estrogen receptor 2,ESR2)的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-761与ESR2之间的结合关系。结果miR-NC组、miR-761 mimic组和miR-761 inhibitor组的细胞存活率分别为(98.33±1.53)%,(121.23±3.74)%,(79.86±3.66)%;细胞凋亡率分别为(6.51±0.26)%,(4.41±0.24)%和(10.48±0.33)%;ESR2蛋白表达水平分别为1.05±0.03,0.74±0.08和3.90±0.28。以上指标,miR-NC组和miR-761 mimic组相比,miR-NC组和miR-761 inhibitor组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-761可与ESR2靶向结合。结论miR-761通过下调ESR2促进PCOS患者卵巢颗粒细胞增殖并抑制细胞凋亡。

超声联合血清miR-761和miR-766水平对非小细胞肺癌淋巴结转移诊断价值探讨

目的探讨超声联合血清微小RNA-761(miR-761)、微小RNA-766(miR-766)对非小细胞肺癌患者颈部/锁骨上淋巴结转移的诊断价值。方法选取2020-05-01-2022-06-01经新乡市中心医院病理确诊的128例非小细胞肺癌患者为研究对象,根据淋巴结转移情况分为未转移组(86例)和转移组(42例)。对所有患者行超声检查,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-761、miR-766水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-761、miR-766水平对非小细胞肺癌患者淋巴结转移的诊断效能;采用一致性Kappa检验分析超声单独及联合血清miR-761、miR-766诊断淋巴结转移与病理诊断结果的一致性。结果转移组边界清晰、类圆形、中等/低回声、回声不均、短径≥10 mm比例高于未转移组,均P<0.05。转移组血清miR-761水平为1.34±0.32,高于未转移组的1.01±0.24,t=6.525,P<0.001;miR-766水平为0.76±0.19,低于未转移组的1.02±0.22,t=6.303,P<0.001。血清miR-761、miR-766诊断非小细胞肺癌患者淋巴结转移的曲线下面积(AUC)分别为0.842(95%CI为0.765~0.918)、0.827(95%CI为0.747~0.906)。超声单独及联合血清miR-761、miR-766诊断非小细胞肺癌患者淋巴结转移与病理诊断结果一致性均较高,Kappa值分别为0.677、0.797(P<0.001)。超声联合血清miR-761、miR-766诊断非小细胞肺癌患者淋巴结转移的灵敏度、阴性预测值均高于超声、血清miR-761、miR-766单独诊断,准确度高于血清miR-761、miR-766单独诊断,均P<0.05。超声诊断淋巴结血流分级与病理诊断分期的一致性较高,Kappa值为0.715,P<0.001。结论超声联合血清miR-761、miR-766检测对非小细胞肺癌患者淋巴结转移有一定的诊断价值。