胃癌根治术后血清微小RNA-92a、X型胶原α1链、胃泌素、胃动素水平与其预后的关系

目的 探究胃癌根治术后血清微小RNA-92a(miR-92a)、X型胶原α1链(COL10A1)、胃泌素(gastrin,GAS)与胃动素(motilin,MOT)水平与其预后的关系。方法 将2017年1月至2022年1月于山西省临汾市中心医院行胃癌根治术的65例患者作为研究对象,比较术前及术后3d血清miR-92a、COL10A1、GAS及MOT水平,随访患者术后1年的预后情况,将患者分为预后良好组与预后不良组,比较两组血清miR-92a、COL10A1、GAS及MOT水平,并采用受试者操作特征(ROC)曲线分析其对预后的预测价值。结果 胃癌根治术后患者血清miR-92a、COL10A1、GAS及MOT水平均较术前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组肿瘤直径≥5cm、TNM分期为Ⅲ期、miR-92a及COL10A1水平高于预后良好组(P<0.05),GAS、MOT水平低于预后良好组(P<0.05);两组患者的年龄、性别、肿瘤位置之间的差异无统计学意义(P>0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,肿瘤直径、TNM分期、miR-92a、COL10A1、GAS、MOT是患者预后不良的影响因素(P<0.05)。绘制ROC特征曲线显示,血清miR-92a、COL10A1、GAS、MOT对预后不良均具有一定的预测效能。结论 血清miR-92a、COL10A1水平上调,GAS、MOT水平下调会增加胃癌根治术后预后不良的发生风险,四项指标对胃癌根治术后预后水平均具有一定预测价值。

微小RNA-92a调控音猥因子途径对心肌缺血再灌注损伤后促血管再生的影响及机制

目的探究微小RNA-92a(miR-92a)调控音猥因子(SHH)途径对心肌缺血再灌注(I/R)损伤后促血管再生的影响及机制。方法从1~3d龄SD大鼠中培养原代心肌细胞后建立心肌细胞缺氧/复氧模型,将其分成心肌细胞常氧培养组和心肌细胞I/R组。miR-92a模拟物(mimic)和拮抗剂(inhibitor)转染入大鼠原代心肌细胞,使miR-92a过表达或低表达,分成对照组、I/R组、miR-92amimic组和miR-92ainhibitor组。细胞计数法8测定各组细胞活力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,ELISA和QT-PCR测定血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和血管生成素1等血管新生因子表达,Westernblot法测定SHH信号通路蛋白表达。结果心肌细胞I/R组miR-92a表达显著高于心肌细胞常氧培养组(3.89±0.29vs1.53±0.19,P<0.01)。对照组、miR-92ainhibitor组、I/R组和miR-92amimic组SHH蛋白(0.57±0.13vs0.51±0.11vs0.24±0.03vs0.14±0.02,P<0.01)、Smoothened蛋白(0.53±0.12vs0.49±0.10vs0.14±0.04vs0.09±0.01,P<0.01)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(0.56±0.14vs0.50±0.13vs0.15±0.03vs0.08±0.01,P<0.01)和神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(0.58±0.11 vs0.49±0.12vs0.18±0.02vs0.11±0.03,P<0.01)比较差异有统计学意义。结论miR-92a在心肌I/R损伤中异常高表达,抑制miR-92a表达可激活SHH信号通路有效促进血管再生因子表达。

微小RNA-92a-3p靶向PTEN调控胰腺癌细胞增殖和转移

目的:探讨微小RNA-92a-3p(microRNA-92a-3p,miR-92a-3p)靶向第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tension homolog deleted on chromosome ten,PTEN)调控胰腺癌细胞增殖和转移的作用机制。方法:采用Real-time PCR检测人正常胰腺导管上皮细胞株(HPDE6-C7)与胰腺癌细胞株(Panc-1,BxPC-3,AsPC-1,MIA Paca-2,Capan-2)中的miR-92a-3p表达;同时,采用蛋白质印迹法检测上述细胞中PTEN的表达。选取胰腺癌细胞株BxPC-3和Panc-1的细胞进行实验,分为转染对照模拟物组(NC mimics组)、miR-92a-3p模拟物组(miR-92a-3p mimics组)、对照拮抗剂组(NC inhibitor组)、miR-92a-3p拮抗剂(miR-92a-3p inhibitor组),采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞转移能力,蛋白质印迹法检测PTEN蛋白表达水平。将野生型PTEN的3’-非编码区(untranslated regions,UTR)(wt-PTEN 3’UTR)或突变体PTEN的3’-UTR(mutPTEN 3’UTR)分别与NC mimics,miR-92a-3p mimics,NC inhibitor,miR-92a-3p inhibitor共转染293T细胞,采用双萤光素酶报告实验检测miR-92a-3p与PTEN的靶向结合关系。在BxPC-3细胞的回复实验中,实验又分NC inhibitor+siNC组、miR-92a-3p inhibitor+si-NC组、NC inhibitor+si-PTEN组和miR-92a-3p inhibitor+si-PTEN组;在Panc-1细胞的回复实验中,实验又分为NC mimics+NC组、miR-92a-3p mimics+NC组、NC mimics+PTEN组和miR-92a-3p mimics+PTEN组,再分别采用CCK-8检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞转移能力,蛋白质印迹法检测PTEN蛋白的表达。结果:与HPDE6-C7细胞相比,miR-92a-3p在胰腺癌细胞株中均呈高表达(均P<0.01),PTEN在胰腺癌细胞株中均呈低表达(均P<0.05)。与NC mimics组相比,miR-92a-3p mimics组BxPC-3和Panc-1细胞活力均升高(均P<0.01);与NC inhibitor组相比,miR-92a-3p inhibitor组BxPC-3和Panc-1细胞活力均降低(均P<0.01)。与NC mimics组相比,miR-92a-3p mimics组穿过微孔的BxPC-3和Panc-1细胞数均增多(均P<0.01);与NC inhibitor组相比,miR-92a-3p inhibitor组穿过微孔的BxPC-3和Panc-1细胞数均减少(均P<0.01)。与NC mimics组相比,miR-92a-3p mimics组的wtPTEN 3’UTR荧光素酶活性被抑制(P<0.01);与NC inhibitor组相比,miR-92a-3p inhibitor组的wt-PTEN 3’UTR荧光素酶活性被增强(P<0.01)。与miR-92a-3p inhibitor+si-NC组相比,miR-92a-3p inhibitor+si-PTEN组恢复了miR-92a-3p inhibitor对BxPC-3细胞增殖和转移的影响;与miR-92a-3p mimics+NC组相比,miR-92a-3p mimics+PTEN组恢复了miR-92a-3p mimics对Panc-1细胞增殖和转移的影响。结论:MiR-92a-3p可靶向抑制PTEN的表达,促进胰腺癌细胞的增殖和转移。

微小RNA-92a在前列腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨微小RNA-92a(miR-92a)在前列腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集本院2013年12月至2016年12月收治的前列腺癌患者的癌组织97例和癌旁组织标本62例,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测癌组织和癌旁组织样本中miR-92a的表达水平,分析癌组织miR-92a水平与临床病理学参数(年龄、临床分期、淋巴结转移、Gleason评分、术前PSA水平及远处转移)的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价组织中miR-92a的表达水平在前列腺癌早期诊断及区分不同临床病理参数的效能。结果前列腺癌组织中的miR-92a水平为3.497±1.993,高于癌旁组织的1.165±0.623,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示miR-92a区分前列腺癌与正常前列腺组织的曲线下面积(AUC)为0.8832(95%CI:0.8327~0.9336,P<0.001),当miR-92a的界值取2.337时,灵敏度为72.16%、特异度为93.55%。miR-92a的表达水平与年龄、术前PSA水平及远处转移均无关(P>0.05),而与临床分期、淋巴结转移和Gleason评分有关(P<0.05)。ROC曲线分析显示miR-92a区分临床分期、淋巴结转移及Gleason评分的效能较好,AUC分别为0.7378、0.8758和0.8292,差异均有统计学意义(P<0.05);当临界值取3.405、3.435和2.895时,miR-92a区分临床分期、淋巴结转移及Gleason评分的灵敏度分别为67.24%、89.29%和83.61%,特异度分别为79.49%、71.01%和75.00%。结论 miR-92a高表达于前列腺癌组织,其表达水平与临床分期、淋巴结转移和Gleason评分有关,对于前列腺癌的诊断有一定价值,可以作为评估前列腺癌恶性程度的一个诊断指标。

冠心舒通胶囊对STEMI合并阻塞性睡眠呼吸暂停患者外周血循环微小RNA-92a表达的影响

目的探讨冠心舒通胶囊对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)合并阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者外周血循环微小RNA-92a(miR-92a)表达及临床预后的影响.方法根据多导睡眠监测(PSG)结果,连续入选2017年8月至2019年8月在广西壮族自治区人民医院心内科住院的90例STEMI合并OSA患者,按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组45例.所有STEMI患者均接受急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)及常规冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)二级预防治疗,治疗组在常规治疗基础上加用冠心舒通胶囊(每次0.9 g,每日3次),均随访6个月.所有患者分别在治疗前、PCI术后24 h以及用药后6个月随访时抽取外周血,检测外周血循环miR-92a的表达.比较两组患者用药后6个月随访期间主要不良心脑血管事件(MACCE),包括心源性死亡、非致死性心肌梗死/再发心绞痛致再次入院、再次血运重建、脑卒中和心力衰竭(心衰)的发生情况.结果PCI术后24 h,两组患者的miR-92a表达水平均较治疗前明显降低〔2^(-ΔCt):治疗组为80.67(5.62,168.59)比219.79(77.62,293.00),对照组为92.86(10.93,193.31)比189.33(89.34,269.25),均P<0.05〕;用药后6个月随访,治疗组循环miR-92a表达水平明显低于对照组〔2^(-ΔCt):1.10(0.13,4.04)比8.39(4.04,44.66),P<0.05〕.随访期间治疗组MACCE总发生率明显低于对照组〔40.0%(18/45)比71.1%(32/45),P<0.05〕,其中非致死性心肌梗死/再发心绞痛致再次入院率以及心衰发生率均明显低于对照组〔非致死性心肌梗死/再发心绞痛致再次入院:2.2%(1/45)比20.0%(9/45),心衰:20.0%(9/45)比40.0%(18/45),均P<0.05〕.结论冠心舒通胶囊可进一步下调接受PCI治疗的STEMI患者的过表达miR-92a水平,对减少非致死性心肌梗死/再发心绞痛致再次入院和心衰以及MACCE的发生有益.

微小RNA-92a靶向PTEN/Akt信号通路对鼻咽癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨微小RNA-92a(miR-92a)通过靶向PTEN/Akt信号通路对鼻咽癌HONE1细胞增殖与凋亡的调控作用。方法采用Lipofectamine脂质体法向HONE1细胞转染miR-92a抑制剂(miR-92a组)和阴性对照(NC组),设不行转染的HONE1细胞为对照组。转染成功后用实时荧光定量PCR(QPCR)检测miR-92a在不同细胞组中的表达情况;MTT法检测各组细胞的增殖率;流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率;Western blotting实验检测PTEN/Akt信号通路中PTEN和p-Akt蛋白的表达量。结果转染48 h miR-92a组与对照组和NC组相比,miR-92a的表达量明显降低(P<0.05),而对照组和NC组的差异无统计学意义(P>0.05)。miR-92a组转染24、48、72、96 h的细胞增殖率分别为(84.51±2.74)%、(77.21±3.55)%、(62.07±3.57)%和(49.25±4.15)%,其中72、96 h的细胞增殖率低于对照组和NC组(P<0.05);miR-92a组转染48 h的细胞凋亡率为(46.12±1.79)%,高于对照组的(6.99±0.72)%和NC组的(8.42±0.81)%,差异有统计学意义(P<0.05);miR-92a组转染48 h PTEN和pAkt蛋白的表达水平分别为0.61±0.12和0.37±0.09,对照组分别为0.41±0.11和0.73±0.14,NC组分别为0.39±0.08和0.68±0.07,与对照组和NC相比,miR-92a组细胞的PTEN表达升高,p-Akt表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过抑制miR-92a的表达来抑制鼻咽癌细胞增殖且促进其凋亡,可能是通过负调控PTEN/Akt信号通路来实现的。

子宫内膜异位症患者血清微小RNA-92a相对表达水平、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因表达水平与预后的相关性

目的探讨子宫内膜异位症患者血清微小RNA-92a(miRNA-92a)相对表达水平、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)表达水平与预后的关系。方法选取200例行腹腔镜手术的子宫内膜异位症患者为研究组,120例行腹腔镜子宫肌瘤切除术的患者为对照组。采用荧光定量PCR技术检测两组患者血清miRNA-92a相对表达水平和PTEN水平,采用Pearson法分析研究组患者血清miRNA-92a相对表达水平与PTEN水平的相关性。术后随访3个月,根据子宫内膜异位症患者复发情况分为复发组和未复发组,采用酶联免疫吸附法检测两组患者血清雌二醇、孕酮、促卵泡激素(FSH)水平,比较两组患者血清miRNA-92a相对表达水平及PTEN、雌二醇、孕酮、FSH水平,采用Pearson法分析复发组患者血清miRNA-92a相对表达水平、PTEN水平与内分泌指标的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNA-92a相对表达水平、PTEN水平及二者联合检测预测子宫内膜异位症复发的价值。结果研究组患者血清miRNA-92a相对表达水平高于对照组,PTEN水平低于对照组(P<0.05);研究组患者血清miRNA-92a的相对表达水平与PTEN水平呈负相关(P<0.05)。复发组患者血清miRNA-92a相对表达水平、雌二醇、孕酮、FSH水平均高于未复发组,PTEN水平低于未复发组(P<0.05)。Pearson分析结果显示,复发组患者血清miRNA-92a的相对表达水平与雌二醇、孕酮、FSH水平均呈正相关(均P<0.05),PTEN水平与雌二醇、孕酮、FSH水平均呈负相关(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miRNA-92a相对表达水平、PTEN水平预测子宫内膜异位症复发的曲线下面积分别为0.831(95%CI:0.785,0.870;P=0.025)、0.867(95%CI:0.824,0.902;P=0.024),最佳截断值分别为1.77 ng/mL、0.80 ng/mL,对应的灵敏度分别为85.00%、91.00%,特异度分别为77.50%、73.33%;二者联合检测的曲线下面积为0.965(95%CI:0.932,0.987;P=0.007),灵敏度和特异度分别为92.00%、90.71%。血清miRNA-92a相对表达水平、PTEN水平联合检测预测子宫内膜异位症复发的曲线下面积高于二者单独检测(P<0.05)。结论子宫内膜异位症患者血清miRNA-92a呈高表达,PTEN呈低表达,二者与患者内分泌指标水平相关,且对子宫内膜异位症复发均有一定的预测价值,可能共同影响子宫内膜异位症患者病情发展及预后。

血清外泌体微小RNA-146a、微小RNA-92a对重症社区获得性肺炎患者发生急性呼吸窘迫综合征评估价值研究

目的探讨血清外泌体微小RNA(miR)-146a、miR-92a对重症社区获得性肺炎(sCAP)患者发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的评估价值。方法选取自2019年1月至12月重庆市长寿区人民医院收治的72例sCAP患者为研究对象,根据合并ARDS情况将患者分为合并ARDS组(n=35)与未合并ARDS组(sCAP组,n=37)。根据入院28 d内的存活情况,将合并ARDS组患者进一步分为存活亚组与死亡亚组。采用超速离心法从患者血清中提取并纯化得到外泌体,采用实时荧光定量PCR法检测血清外泌体miR-146a、miR-92a水平,记录ARDS患者28 d院内死亡情况等。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清外泌体miR-92a、miR-146a水平对于sCAP患者发生ARDS的预测价值。结果合并ARDS组患者miR-146a、miR-92a水平均明显高于sCAP组,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清外泌体miR-146a、miR-92a水平预测sCAP患者发生ARDS的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.817(95%可信区间0.717~0.918)、0.801(95%可信区间0.688~0.913)。入院28 d,死亡亚组患者miR-146a、miR-92a水平均高于与存活亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清外泌体miR-146a、miR-92a水平预测ARDS患者28 d死亡的AUC分别为0.832(95%可信区间0.680~0.984)、0.859(95%可信区间0.734~0.983)。结论血清外泌体miR-92a、miR-146a水平对预测sCAP患者ARDS发生风险和院内病死率有一定的临床价值。

微小RNA-92a靶向Krüppel样因子2基因促进卵巢癌细胞侵袭的作用

目的 研究微小RNA-92a(miR-92a)靶向Krüppel样因子2(KLF2)基因促进卵巢癌细胞侵袭的作用及机制。方法2019年1月至2020年3月进行本研究。培养卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、OVCAR-3及卵巢上皮细胞系HOSEpiC,检测miR-92a的表达水平;SKOV3细胞分为阴性对照(NC)组、miR-92a抑制物组、miR-92a组、pcDNA组、pcDNA+miR-92a组、pcDNAKLF2+miR-92a组,分别转染NC序列、miR-92a、miR-92a抑制物、空白pcDNA质粒、过表达KLF2的pcDNA重组质粒,检测细胞侵袭数目、KLF2表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-92a靶向KLF2基因。结果 A2780、SKOV3、OVCAR-3细胞中miR-92a的表达水平分别为(0.92±0.15)、(1.62±0.19)、(1.21±0.13),均高于HOSEpiC的(0.62±0.09)(P<0.05);与NC组(75.38±13.82)、(0.42±0.08)比较,miR-92a抑制物组SKOV3细胞的侵袭数目(42.38±8.79)减少、KLF2表达水平(0.78±0.20)增加,miR-92a组SKOV3细胞侵袭数目(109.38±21.38)增加、KLF2表达水平(0.29±0.06)减少,野生型KLF2双荧光素酶报告基因的荧光活力降低(P<0.05);与pcDNA组比较、pcDNA+miR-92a组SKOV3细胞的侵袭数目增加,与pcDNA+miR-92a组比较、pcDNAKLF2+miR-92a组SKOV3细胞的侵袭数目减少(P<0.05)。结论 卵巢癌细胞中miR-92a表达增加,miR-92a能够促进SKOV3细胞侵袭、其机制可能与靶向调控KLF2基因表达有关。

微小RNA-20a、微小RNA-92a在乳腺癌诊断及预后评估中的应用

目的分析微小RNA(miR)-20a、miR-92a在乳腺癌病人血清中的表达情况,并探讨其对乳腺癌诊断及预后评估的价值。方法选取2012年1月至2013年5月中国人民解放军中部战区总医院首次确诊为乳腺癌并经手术治疗的病人89例为观察组,以80例同期健康体检者为健康对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测乳腺癌病人术前和术后及健康对照组血清miR-20a和miR-92a表达水平,分析miR-20a和miR-92a表达与临床病理特征的关系。Spearman相关性分析血清miR-20a和miR-92a表达相关性,ROC曲线分析miR-20a、miR-92a以及二者联合检测对乳腺癌的诊断价值,Kaplan-Meier法分析miR-20a和miR-92a表达对病人5年总生存期(OS)影响,logistic回归分析影响乳腺癌预后的因素。结果乳腺癌病人血清miR-20a[术前(1.76±0.15)、术后(1.38±0.12)比(1.02±0.08)]和miR-92a水平[术前(1.83±0.13)、术后(1.45±0.11)比(1.11±0.07)]较健康对照组均显著升高(P<0.05)。miR-20a和miR-92a表达与病人肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05)。乳腺癌病人血清miR-20a和miR-92a表达呈线性正相关(r=0.52,P<0.05)。miR-20a和miR-92a二者联合诊断乳腺癌的敏感度、特异度以及AUC均显著升高(P<0.05)。miR-20a和miR-92a低表达病人5年OS均显著高于高表达病人[miR-20a(93.24%比73.28%)、miR-92a(94.85%比74.57%),P<0.05]。miR-20a和miR-92a、分化程度、淋巴结转移均是影响乳腺癌病人预后的独立危险因素(P<0.05)。结论乳腺癌病人血清中miR-20a和miR-92a表达异常,与病人肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移相关,可能用于乳腺癌的诊断和预后判断。

微小RNA-92a在前列腺癌细胞中的表达水平及其临床意义

目的:探究前列腺癌细胞中,微小RNA-92a(miR-92a)的表达水平及其临床意义,为临床提供理论参考。方法:选取2014年1月~2021年6月行手术切除治疗的60例前列腺癌标本,并选取其相对应癌旁组织作为对照。检测各组织的miR-92a的表达水平,分析miR-92a表达水平与前列腺癌患者临床病理参数间的关系及其对预后的影响。结果:前列腺癌细胞miR-92a表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Gleason评分≥7分、肿瘤分期Ⅰ期~Ⅱ期、骨转移患者的miR-92a表达水平高于Gleason评分<7分、肿瘤分期Ⅲ期~Ⅳ期、无骨转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-92a表达阳性患者3年生存率、生存期均低于阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:前列腺癌细胞组织中的miR-92a表达水平高于癌旁组织,阳性表达会对患者的预后产生不良影响。

微小RNA-92a在结直肠癌患者血清、肿瘤组织和粪便中的表达及其临床意义

目的:分析血清、肿瘤组织和粪便样本中微小RNA(miRNA,miR)-92a在结直肠癌患者中的表达及意义。方法:选取45例结直肠癌患者作为实验组,同期45例健康体检人群为对照组,分别检测两组血清、肿瘤与癌旁组织、粪便样本中miR-92a的表达量,通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)定量,对表达量结果进行差异统计学分析,临床特征与肿瘤样本的表达量的分析,临床特征与miRNA表达量相关性。结果:miR-92a在肿瘤组与正常对照对比表达有统计学意义,肿瘤组表达均高于正常组,其中肿瘤组织中的miRNA表达量明显高于血液和粪便(血液样本中:t=28.88,P<0.001,肿瘤组织样本:t=22.78,P<0.001,粪便样本:t=15.97,P<0.001)。血清、肿瘤组织与淋巴结转移、浸润深度、TNM分期和分化程度表达呈正相关,粪便样本仅与分化程度正相关,血液样本比淋巴结转移(r=0.674),血液样本比TMN分期(r=0.691),血液样本比浸润深度(r=0.715),血液样本比分化程度(r=0.648),肿瘤组织比淋巴结转移(r=0.494),肿瘤组织比TMN分期r=0.526,肿瘤组织比浸润深度(r=0.486),肿瘤组织比分化程度(r=0.545),粪便组织比分化程度(r=0.495)。粪便组织比淋巴结转移(r=0.258),粪便组织比TMN分期(r=0.226),粪便组织比浸润深度(r=0.341,P>0.05)。结论:粪便、血浆、组织样本中可检测的miR-92a作为临床生物标志物具有可行性。

他汀类药物对冠心病患者循环微小RNA-92a表达的影响

目的探讨他汀类药物对冠心病患者循环微小RNA-92a（miR-92a）的调节作用，评价miR-92a作为新血管内皮损伤治疗靶点的临床应用价值。方法采用病例对照研究方法，分析236例冠心病患者的血脂异常率、他汀类药物治疗率以及治疗后低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）达标率；多因素方差分析他汀类药物治疗对合并2型糖尿病（DM）冠心病患者LDL—C及循环miR-92a表达的影响，比较各组治疗后急性冠脉综合征（ACS）的发生率。结果冠心病非他汀类药物治疗患者LDL—C未达标率高达95．7％（112／117），应获得而未得到他汀类药物治疗者占47．5％（112／236）；他汀类药物治疗者LDL—C达标率为27．7％（33／119）。冠心病他汀类药物治疗组LDL—C（mmol／L）显著低于非治疗组（2．457±0．802比3．218±1．130，z=-9．760，P=0．001），ACS发生率也显著低于非治疗组（33．6％比71．8％，x2=34．491，P=0．001）。在他汀类药物治疗组中，LDL—C达标者与未达标者ACS发生率无明显差异（33．3％比33．7％，×。=0．002，P=0．968）。稳定型心绞痛（SAP）合并DM患者循环miR一92a表达显著高于未合并DM者（0．492比-0．121，z=-3．038，P=0．002）；他汀类药物治疗的SAP合并DM者循环miR-92a表达低于非治疗者（0．419比0．687，z=1．289，P=0．072）；他汀类药物治疗的SAP未合并DM患者与非治疗者循环miR一92a表达差异无统计学意义（-0．032比-0．198，z=-0．614，P=0．539）。多因素方差分析显示：他汀类药物治疗是影响冠心病患者LDL-C水平的主要因素（F=22．863，P=0．001），合并DM是影响SAP患者循环miR-92a表达的主要因素（F=9．641，P=0．003）。结论他汀类药物通过调控循环miR-92a表达，对减轻冠心病患者的血管内皮损伤可能具有临床意义。

肝癌患者血清微小RNA-92的表达及与不良预后的关系

目的探讨肝癌患者血清微小RNA(miR)-92的表达及与不良预后的关系。方法回顾性分析2015年5月至2018年5月浙江省湖州市第一人民医院和浙江省湖州市中心医院收治的70例肝癌患者的临床资料,采用实时定量聚合酶链反应法检测miR-92表达水平,并与80例健康体检者比较。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价血清miR-92诊断肝癌和早期(Ⅰ~Ⅱ期)肝癌的效能;分析血清miR-92表达水平与临床病理特征的关系;多因素Cox回归模型分析影响肝癌患者预后的独立危险因素。结果肝癌患者血清miR-92表达水平明显高于健康体检者(4.10 ± 1.74比1.88 ± 0.78),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-92诊断肝癌的曲线下面积(AUC)为0.874,最佳截断值为2.43,灵敏度为82.86%,特异度为86.25%;血清miR-92诊断早期肝癌的AUC为0.755,最佳截断值为2.38,灵敏度为68.57%,特异度为84.42%。血清miR-92表达水平与TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.01),而与性别、年龄、肿瘤直径、肝炎病史、肝硬化、分化程度及门静脉癌栓无关(P>0.05)。血清miR-92高表达肝癌患者5年总生存率明显低于血清miR-92低表达肝癌患者(17.1%比31.5%),差异有统计学意义(χ^(2) = 5.561,P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,miR-92是影响肝癌患者预后的独立危险因素(HR = 0.282,95%CI 1.179~3.562,P<0.05)。结论肝癌患者血清miR-92表达水平明显升高,在病情进展中发挥重要作用;血清miR-92可作为肝癌早期诊断、预后评估的指标。

外周血cTnT、Hcy及miRNA-92表达水平对急性冠状动脉综合征患者病情严重程度及短期预后的诊断价值

目的探讨外周血心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)及微小RNA(microRNA,miRNA)-92表达水平对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)患者病情严重程度及短期预后的诊断价值。方法选取广安市人民医院心血管科于2020年1月至2021年1月收治的206例ACS患者作为研究对象。分析外周血c TnT、Hcy及miRNA-92表达水平与Gensini评分的相关性,并对患者治疗后30 d进行随访,观察再次发生主要不良心血管事件(major adverse cardiac events,MACE)情况,建立ACS患者30 d MACE的预测模型,并对模型的诊断效能进行分析。结果206例患者中急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者135例(65.5%),不稳定型心绞痛(unstable angina,UA)患者71例(34.5%),冠状动脉单支病变25例(12.1%),双支病变62例(30.1%),多支病变119例(57.8%)。与UA组患者比较,AMI组患者外周血cTnT、Hcy和miRNA-92表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。而不同冠状动脉病变支数组患者间上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多元线性回归分析提示,外周血c TnT、Hcy和miRNA-92表达水平与Gensini评分呈正相关,回归方程为Y_(Gensini)=27.269+1.870×X_(miRNA)-92+1.595×X_(cTnT)+0.827×X_(Hcy)。不同预后患者二元Logistic回归分析提示,外周血c TnT、Hcy和miRNA-92表达水平升高是ACS患者30 d内并发MACE的独立危险因素,联合上述3个指标预测MACE发生的AUC较单个指标显著提升,结果具有统计学意义(P<0.01)。结论外周血cTnT、Hcy和miRNA-92表达水平与ACS患者病情严重程度密切相关,且联合上述3个指标可显著提升对ACS患者短期预后的预测价值。

微小RNA-92a靶向FHIT基因调控淋巴瘤细胞增殖及凋亡的机制研究

目的 研究微小RNA?92a(miR?92a)靶向脆性组氨酸三联(FHIT)基因调控淋巴瘤细胞增殖、凋亡的机制.方法 采用脂质体转染法对淋巴瘤细胞进行不同的转染处理,miR?92a抑制剂组、阴性对照组、miR?92a抑制剂+si?FHIT组、miR?92a抑制剂+si?NC组分别转染miR?92a抑制剂、抑制剂阴性对照、共转染miR?92a抑制剂和FHIT小干扰RNA(siRNA)、共转染miR?92a抑制剂和siRNA阴性对照.实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测miR?92a抑制剂组、阴性对照组淋巴瘤细胞miR?92a表达水平,CCK?8测定各组细胞增殖变化,流式细胞术测定各组细胞凋亡变化,免疫印迹检测各组细胞中Bax和Bcl?2蛋白水平.生物信息学软件预测miR?92a与FHIT有靶向结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶基因.结果 与阴性对照组相比,miR?92a抑制剂组淋巴瘤细胞中miR?92a(0.43±0.05比1.01±0.08,P<0.001)表达水平、细胞增殖能力(0.27±0.03比0.42±0.06,P=0.018)明显降低,细胞凋亡率[(14.75± 1.26)%比(3.38±0.36)%,P<0.001]、Bax蛋白(0.56±0.08比0.30±0.05,P=0.009)、FHIT蛋白(0.42±0.05比0.27±0.07)表达水平升高,Bcl?2蛋白(0.57±0.07比0.94±0.10,t=5.250,P=0.006)表达水平降低.靶基因预测和鉴定结果表明,FHIT为miR?92a的靶基因.与miR?92a抑制剂+si?NC组比较,miR?92a抑制剂+si?FHIT组淋巴瘤细胞增殖能力升高(0.38±0.04比0.28±0.02,P=0.018),细胞凋亡率减少[(7.15± 0.74)%比(13.84 ± 1.78)% ,P=0.004],细胞中Bax蛋白表达水平降低(0.30 ± 0.04比0.54 ± 0.06,P=0.005),Bcl?2蛋白表达水平升高(0.88±0.09比0.48±0.0,P=0.003).结论 下调miR?92a靶向促进FHIT表达抑制淋巴瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡.

血清miRNA-196a、miRNA-92a表达水平与宫颈癌根治术后复发的关系

目的 探讨血清微小RNA(miRNA)-196a、miRNA-92a表达水平与宫颈癌根治术后复发的关系。方法 选取2015年1月至2016年6月甘肃省肿瘤医院收治的113例行宫颈癌根治术患者为宫颈癌组,68名体检健康女性为对照组,qRT-PCR检测两组血清miRNA-196a、miRNA-92a表达。分析宫颈癌患者血清miRNA-196a、miRNA-92a水平与临床病理特征的关系。术后随访5年,根据血清miRNA-196a、miRNA-92a水平均值将宫颈癌患者分为高表达和低表达。比较高表达和低表达宫颈癌患者复发率。多因素Cox回归分析宫颈癌根治术后复发的影响因素。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miRNA-196a、miRNA-92a水平对宫颈癌根治术后复发的预测价值。结果 宫颈癌组血清miRNA-196a、miRNA-92a表达高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、间质浸润深度、淋巴结转移的宫颈癌患者血清miRNA-196a、miRNA-92a水平比较,差异有统计学意义(P <0.05)。截至末次随访,113例宫颈癌患者术后复发25例(22.12%),miRNA-196a、miRNA-92a高表达复发率高于低表达,差异有统计学意义(P <0.05)。FIGO分期ⅡA期、间质浸润深度≥1/2、淋巴结转移、miRNA-196a≥5.239、miRNA-92a≥1.816是宫颈癌根治术后复发的独立危险因素(HR> 1,P <0.05)。ROC曲线显示,miRNA-196a联合miRNA-92a预测宫颈癌根治术后复发的曲线下面积大于两者单独预测(Z=2.319、2.582,P=0.020、0.010)。结论 宫颈癌血清miRNA-196a、miRNA-92a水平高表达,二者与FIGO分期、间质浸润深度、淋巴结转移、复发有关,可作为宫颈癌根治术后复发的预测指标。

外周血miR-92b-5p与miR-148b-3p在2型糖尿病进展至糖尿病肾病中的表达及交互作用

目的探究2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)进展至糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)过程中血清微小RNA(microRNA,miR)-92b-5p、miR-148b-3p水平变化和作用。方法选取我院T2DM患者400例开展前瞻性研究,其中200例非DN患者作为T2DM组,200例DN患者作为DN组。比较两组临床资料、血清miR-92b-5p、miR-148b-3p水平,并比较DN组不同分期患者血清miR-92b-5p、miR-148b-3p水平,分析DN组血清miR-92b-5p、miR-148b-3p水平与临床分期的相关性,并分析T2DM进展至DN过程中血清miR-92b-5p与miR-148b-3p的交互作用,及血清miR-92b-5p、miR-148b-3p水平预测DN的价值。结果DN组血肌酐(serum creatinine,SCr)、血清miR-148b-3p水平高于T2DM组,估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)及血清miR-92b-5p水平低于T2DM组(P<0.05);DN组临床期患者血清miR-148b-3p水平高于早期患者,血清miR-92b-5p水平低于早期患者(P<0.05);DN组血清miR-92b-5p水平与临床分期呈负相关,血清miR-148b-3p水平与临床分期呈正相关(P<0.05);在T2DM进展至DN过程中,miR-92b-5p低表达与miR-148b-3p高表达呈次相乘模型的正向交互作用(P<0.05);miR-92b-5p、miR-148b-3p预测T2DM进展至DN的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.840、0.812,二者联合预测的AUC最大,为0.911。结论DN患者血清miR-92b-5p水平明显降低,miR-148b-3p水平明显升高,且与DN临床分期密切相关,miR-92b-5p低表达、miR-148b-3p高表达共同促进T2DM进展至DN过程。

血清miR-92a、miR-17、miR-19b对冠心病患者冠状动脉病变程度的评估价值

目的 探讨血清微小RNA-92a(miR-92a)、miR-17、miR-19b对冠心病(CAD)患者冠状动脉(冠脉)病变程度的评估价值。方法 选取因胸闷胸痛不适行冠脉造影检查的92例患者,依据造影检查结果分为对照组30例、CAD组62例。用Gensini评分评估CAD组冠脉病变情况,并将CAD患者分为低评分组(≤40分)32例、高评分组(>40分)30例。收集各组临床资料;用实时荧光定量PCR法检测各组血清miR-92a、miR-17、miR-19b表达;用多因素Logistic回归模型分析CAD发生的影响因素;用Spearman相关分析法分析血清miRNA表达与Gensini积分的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miRNA对CAD病情的评估价值。结果 CAD组HDL-C低于对照组(P<0.05),两组其他临床资料比较差异无统计学意义(P均>0.05)。CAD组miR-92a、miR-17相对表达量高于对照组,miR-19b相对表达量低于对照组(P均<0.05)。miR-92a、miR-17表达升高为CAD发生的危险因素(P均<0.05),miR-19b表达升高为CAD发生的保护因素(P均<0.05)。高评分组血清miR-92a、miR-17相对表达量高于低评分组(P均<0.05),血清miR-19b相对表达量低于低评分组(P<0.05)。CAD患者血清miR-92a、miR-17相对表达量与Gensini积分呈正相关(rs分别为0.529、0.519,P均<0.05),血清miR-19b相对表达量与Gensini积分呈负相关(rs=-0.579,P<0.05)。血清miR-92a、miR-17、miR-19b及三者联合评估CAD患者冠脉病变程度的曲线下面积分别为0.806(95%CI:0.695~0.917)、0.800(95%CI:0.689~0.911)、0.834(95%CI:0.737~0.932)、0.967(95%CI:0.930~1.000)。三者联合评估CAD冠脉病变程度的曲线下面积高于单独评估(P均<0.05)。结论 血清miR-92a、miR-17、miR-19b可作为CAD患者冠状动脉病变程度的评估指标,三者联合检测评估价值更高。

急性髓系白血病患者血清外泌体中miR-92a-3p的表达及其意义

目的:检测急性髓系白血病(AML)患者血清外泌体中微小RNA-92a-3p (miR-92a-3p)表达水平,探讨其对AML的诊断价值。方法:选取AML患者51例(AML组)和34名同期健康体检志愿者(对照组)作为研究对象,收集研究对象外周血标本;差速离心法提取血清外泌体,通过透射电子显微镜、纳米粒度分析仪和Western blotting法鉴定外泌体;采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组研究对象血清外泌体中miR-92a-3p表达水平;根据血清外泌体中miR-92a-3p表达水平绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(AUC),确定其临界值,根据灵敏度和特异度评估miR-92a-3p表达水平对AML的诊断效能。结果:在透射电子显微镜下外泌体呈外观圆形且中间凹陷的膜状结构,纳米粒度分析仪检测外泌体粒径为30~100 nm,Western blotting法在提取外泌体中检测到CD63和CD9蛋白表达。与对照组比较,AML组患者血清外泌体中miR-92a-3p表达水平明显降低(P<0.01);ROC曲线分析,血清外泌体miR-92a-3p诊断AML的最佳临界值为0.51,灵敏度为76.47%,特异度为94.12%,AUC为0.913,AUC 95%置信区间(CI)为(0.856,0.971)(P<0.001)。结论:AML患者血清外泌体中miR-92a-3p表达水平诊断AML的灵敏度和特异度较高,可应用于早期AML的临床诊断。