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Circular RNA circ_0003609 ameliorates hypertrophied ligamentum flavum by regulating the miR-155/SIRT1 axis
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作者 GUIBIN ZHONG SHURONG WANG +5 位作者 YUJIN HE DAMING FENG KE WEI YANQIU YANG JIANWEI CHEN JUNLING CHEN 《BIOCELL》 SCIE 2024年第6期1001-1008,共8页
Background:Hypertrophy of the ligamentumflavum(HLF)is a common contributor to spinal stenosis which results in significant neurological impairments.Circular RNA(circRNA)circ_0003609 has been linked to HLF;however,the ex... Background:Hypertrophy of the ligamentumflavum(HLF)is a common contributor to spinal stenosis which results in significant neurological impairments.Circular RNA(circRNA)circ_0003609 has been linked to HLF;however,the exact mechanism by which it causes this disease is unclear.Methods:Circ_0003609 expressions were regulated in HLF cells by overexpression vectors and RNA interference.Cell proliferation andfibrosis-related gene expression were checked by the Cell Counting Kit-8(CCK-8)assay and western blotting.CircBank’s prediction of the association between miR-155 and circ_0003609 was supported by a dual-luciferase reporter experiment.The function of the miR-155/sirtuin 1(SIRT1)axis in controlling HLFfibrosis was further examined.Results:Overexpression of circ_0003609 suppressed HLF cell propagation andfibrosis compared to its silencing.It was found that circ_0003609 served as the sponge for miR-155 and that the circ_0003609/miR-155 axis controlled thefibrosis of HLF cells.It was found that circ_0003609 acted as a sponge for miR-155,regulating thefibrosis of HLF cells.Further,miR-155 targets SIRT1,and the miR-155/SIRT1 axis promotes HLF cellfibrosis.Conclusion:Circ_0003609 ameliorates hypertrophied ligamentumflavum(LF)by modulating the miR-155/SIRT1 axis,indicating a potential treatment approach for HLF. 展开更多
关键词 Circular rna Circ_0003609 Hypertrophy of ligamentum flavum mir-155 Sirtuin 1 FIBROSIS
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血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a在早期宫颈癌中的诊断价值
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作者 茹晓翠 徐燕 郭明 《长春中医药大学学报》 2024年第11期1265-1268,共4页
目的 探讨血清微小RNA(miRNA)21、miRNA155-5P及miRNA20a在早期宫颈癌中的诊断价值。方法 选取新疆生产建设兵团第十三师红星医院2019年6月-2023年6月收治的100例早期宫颈癌患者作为观察组,另选同期收治的100例进展期宫颈癌患者为进展期... 目的 探讨血清微小RNA(miRNA)21、miRNA155-5P及miRNA20a在早期宫颈癌中的诊断价值。方法 选取新疆生产建设兵团第十三师红星医院2019年6月-2023年6月收治的100例早期宫颈癌患者作为观察组,另选同期收治的100例进展期宫颈癌患者为进展期组,100名健康志愿者为对照组。采取荧光定量聚合酶链反应法(qRT-PCR)检测所有受检者血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a表达水平,比较血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a表达水平与早期宫颈癌临床特征;采用Spearman相关性分析miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a与早期宫颈癌临床特征的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a对早期宫颈癌的诊断价值。结果 各组血清miRNA21、miRNA155-5P及miRNA20a相对表达水平及临床分期、病理分级、浸润深度比较,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析结果表明,miRNA21、miRNA20a与早期宫颈癌临床分期、病理分级、浸润深度呈正相关,miR155-5P与早期宫颈癌临床分期呈正相关(P<0.05);ROC曲线结果显示,三者联合、miRNA21、miRNA155-5P、miRNA20a的曲线下面积(AUC)依次为0.897、0.721、0.698、0.641,灵敏度分别为83.54%、73.25%、72.67%、69.57%,特异度分别为81.45%、78.56%、82.54%、72.67%。结论 早期宫颈癌患者血清miRNA21、miRNA155-5P及 miRNA20a表达水平明显升高,且与临床特征密切相关。 展开更多
关键词 微小rna mirna21 mirna155-5P mirna20a 早期宫颈癌 诊断效能 相关性
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MiR-155靶向talin-1基因调控柱状黄杆菌胞外多糖诱导的EPC细胞凋亡
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作者 王骞 王承德 +4 位作者 罗敏意 黎果 车行 林蠡 赵丽娟 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期24-31,共8页
为研究miR-155在柱状黄杆菌胞外多糖(FC-EPS)诱导的细胞凋亡中的作用机制,本实验采用RNA干扰(RNAi)技术,通过过表达miR-155和敲降踝蛋白基因(talin-1),皆能抑制FC-EPS诱导的细胞凋亡,并鉴定出talin-1为miR-155的靶蛋白。在FC-EPS诱导细... 为研究miR-155在柱状黄杆菌胞外多糖(FC-EPS)诱导的细胞凋亡中的作用机制,本实验采用RNA干扰(RNAi)技术,通过过表达miR-155和敲降踝蛋白基因(talin-1),皆能抑制FC-EPS诱导的细胞凋亡,并鉴定出talin-1为miR-155的靶蛋白。在FC-EPS诱导细胞凋亡的过程中,踝蛋白水平显著升高,在凋亡发生阶段检测到凋亡执行蛋白Caspase-3的活化,同时检测到2条踝蛋白剪切异构体,大小分别约为200 ku和250 ku;将构建的鲤Talin-1真核表达质粒转染鲤上皮瘤细胞(EPC),过表达的Talin-1延迟且延长了细胞凋亡的进程,并检测到上述2条踝蛋白异构体。然而,当以FC-EPS转染EPC细胞时,Talin-1先下降再恢复到正常水平,细胞不发生凋亡。因此,在FC-EPS诱导细胞凋亡的过程中,细胞通过上调miR-155来调控靶基因talin-1 mRNA和蛋白转录的变化,以及产生Talin-1蛋白异构体来抑制细胞发生凋亡。本研究为有效防治柱状黄杆菌疾病提供新思路。 展开更多
关键词 柱状黄杆菌 mir-155 talin-1 细胞凋亡 rna干扰
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丙型肝炎患者血清miR-155、miR-205-5p水平变化及诊断价值
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作者 肖小丽 谢瑶 龙志 《天津医药》 CAS 2024年第9期967-971,共5页
目的探讨丙型肝炎患者血清miR-155和miR-205-5p表达水平的变化及临床意义。方法收集丙型肝炎患者141例,根据基因分型将其分为丙型肝炎病毒(HCV)-1b组(92例)和非HCV-1b组(49例),另取同期于本院进行体检的健康志愿者141例为对照组。比较3... 目的探讨丙型肝炎患者血清miR-155和miR-205-5p表达水平的变化及临床意义。方法收集丙型肝炎患者141例,根据基因分型将其分为丙型肝炎病毒(HCV)-1b组(92例)和非HCV-1b组(49例),另取同期于本院进行体检的健康志愿者141例为对照组。比较3组一般资料、生化指标及血清miR-155、miR-205-5p水平;根据肝炎活动度分级,将丙型肝炎患者分为G0、G1、G2、G3、G4级,比较5组血清miR-155、miR-205-5p水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-155、miR-205-5p诊断丙型肝炎患者肝炎活动度为G1—G4级的临床价值。结果HCV-1b组和非HCV-1b组丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平均高于对照组,血清白蛋白(ALB)水平低于对照组(P<0.05);对照组、非HCV-1b组和HCV-1b组血清miR-155水平依次升高,血清miR-205-5p水平依次降低(P<0.05);随着肝炎活动度分级的增加,血清miR-155水平依次升高,miR-205-5p水平依次下降(P<0.05);miR-155、miR-205-5p以及两者联合诊断丙型肝炎患者肝炎活动度为G1—G4级的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.855、0.793和0.913,联合优于二者各自单独诊断(P<0.05)。结论丙型肝炎患者血清miR-155水平上升,miR-205-5p水平下降,两者联合对肝炎活动度为G1—G4级的诊断具有较高效能。 展开更多
关键词 肝炎病毒属 rnaS 丙型肝炎病毒 微小rna-155 微小rna-205-5p HCV-1b基因型 肝炎活动度
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LncRNA CCAT1调节miR-155表达增强CD8^(+)T细胞对食管癌抗肿瘤活性的机制研究 被引量:3
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作者 周立远 叶玉祥 +1 位作者 林琳 王东阳 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第3期79-85,共7页
目的 研究长链非编码RNA结肠癌相关转录本1(long non-coding RNA colon cancer-associated transcript-1,LncRNA CCAT1)对CD8^(+)T细胞抗食管癌肿瘤活性的影响及其作用机制。方法 分离食管癌患者和健康受试者外周血单个核细胞(periphera... 目的 研究长链非编码RNA结肠癌相关转录本1(long non-coding RNA colon cancer-associated transcript-1,LncRNA CCAT1)对CD8^(+)T细胞抗食管癌肿瘤活性的影响及其作用机制。方法 分离食管癌患者和健康受试者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用qRT-PCR法分别检测PBMC中CCAT1和miR-155的表达。分别下调CCAT1和miR-155表达,采用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞凋亡率,Western blot检测Cleaved Caspase 3蛋白表达,qRT-PCR检测IL-2 mRNA和IFN-γ mRNA基因表达,分析CD8+T细胞对食管癌细胞的杀伤作用。采用miRanda和双荧光素酶实验研究CCAT1与miR-155之间的相互作用。分析上调LncRNA CCAT1靶向miR-155对CD8^(+)T细胞凋亡率、杀伤作用及其Eca-109细胞增殖和迁移的影响。结果 食管癌患者PBMCs中CCAT1表达(2.58±0.28)高于健康受试者(1.35±0.34),miR-155表达(0.53±0.09)低于健康受试者(1.54±0.29),差异具有统计学意义(t=12.04,21.05,均P <0.05)。下调CCAT1后,CD8^(+)T细胞凋亡率(12.05%±0.28%)明显低于si-control组(19.86±0.45)%,CD8^(+)T细胞的细胞杀伤活性(0.49±0.05)%明显高于si-control组(0.34%±0.02%),差异具有统计学意义(t=9.82,-17.54,均P<0.05)。si-CCAT1组细胞内Cleaved Caspase 3蛋白表达(0.32±0.09)低于si-control组(1.37±0.72),IL-2 mRNA(2.38±0.47)和IFN-γ mRNA(3.28±0.26)表达高于si-control组(1.12±0.23,1.28±0.37),差异具有统计学意义(t=-20.05,-18.29,-19.86,均P<0.05)。CCAT1和miR-155之间存在互补碱基对,双荧光素酶实验结果显示CCAT1野生型和mi R-155模拟物共转染后miR-155 mimics组细胞荧光素酶活性(0.41±0.08)显著低于对照组(1.24±0.18),差异具有统计学意义(t=17.92,P<0.01)。下调miR-155后CD8^(+)T细胞凋亡率(24.87%±0.95%)明显高于inhibitor control组(18.24%±1.25%),CD8+T细胞的细胞杀伤活性(0.26%±0.06%)明显低于inhibitor control组(0.43%±0.05%),差异具有统计学意义(t=10.03,20.06,均P<0.05)。miR-155 inhibitor组细胞内Cleaved Caspase 3蛋白表达(1.07±0.23)高于inhibitor control组(0.42±0.02),IL-2 mRNA(0.73±0.26)和IFN-γ mRNA(0.54±0.18)表达低于inhibitor control组(1.39±0.08,1.16±0.24),差异具有统计学意义(t=18.75,19.27,18.35,均P<0.01)。上调CCAT1通过miR-155促进CD8^(+)T细胞凋亡并降低细胞杀伤活性,且促进了Eca-109细胞增殖和迁移。结论 LncRNA CCAT1在食管癌患者中表达显著上调,敲低CCAT1通过调节miR-155表达可抑制CD8^(+)T细胞凋亡,增强细胞的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 长链非编码rna结肠癌相关转录本1(Lncrna CCAT1) 微小核糖核酸-155(mir-155) CD8^(+)T 食管癌 抗肿瘤活性
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妊娠高血压疾病患者血清miR-155-5p、LncRNA MALAT1表达及与糖脂代谢关系 被引量:2
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作者 魏占超 赵志玲 +3 位作者 孟彤 叶琪 万颖 刘亚非 《中国计划生育学杂志》 2023年第10期2467-2471,共5页
目的:探讨微小RNA-155-5p(miR-155-5p)、长链非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)在妊娠期高血压疾病患者血清中的表达及与糖脂代谢关系。方法:选择2019年8月-2021年12月本院收治的103例妊娠期高血压疾病患者为病例组,其中妊... 目的:探讨微小RNA-155-5p(miR-155-5p)、长链非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)在妊娠期高血压疾病患者血清中的表达及与糖脂代谢关系。方法:选择2019年8月-2021年12月本院收治的103例妊娠期高血压疾病患者为病例组,其中妊娠期高血压患者41例、轻度子痫前期患者35例、重度子痫前期患者27例,选择同期产前检查正常孕妇40例为对照组,qRT-PCR检测血清miR-155-5p、LncRNA MALAT1表达,检测血清糖脂代谢指标水平,Pearson法分析血清miR-155-5p与LncRNA MALAT1表达相关性,及与血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平的相关性。结果:与对照组比较,妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组患者血清miR-155-5p、FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C水平升高,且随疾病程度增加而升高,LncRNA MALAT1、HDL-C水平降低,且随疾病程度增加而降低(均P<0.05);相关性分析显示,血清miR-155-5p与LncRNA MALAT1表达呈负相关性,miR-155-5p与FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C呈正相关,与HDL-C呈负相关;LncRNA MALAT1与FBG、HbA1c、TG、TC、LDL-C呈负相关,与HDL-C呈正相关(均P<0.01)。结论:妊娠期高血压疾病患者血清miR-155-5p高表达、LncRNA MALAT1低表达,二者具有相关性且与糖脂代谢水平和病情严重程度相关,可能作为评估患者糖脂代谢及病情变化的标志物。 展开更多
关键词 妊娠期高血压疾病 病情程度 微小rna-155-5p 长链非编码rna肺癌转移相关转录本1 糖脂代谢 相关性
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抑郁症患者血清炎症因子、糖脂代谢指标、miR‐155及BDNF表达水平与其认知功能的相关性 被引量:1
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作者 袁俊端 包玲 +1 位作者 刘恋 张娟 《广西医学》 CAS 2024年第2期248-254,共7页
目的探讨抑郁症患者血清炎症因子、糖脂代谢指标、miR-155及脑源性神经营养因子(BDNF)表达水平与其认知功能的关系。方法选取240例抑郁症患者作为研究对象,根据24项汉密尔顿抑郁(HAMD-24)量表的评分结果,将其分为轻度抑郁组、中度抑郁... 目的探讨抑郁症患者血清炎症因子、糖脂代谢指标、miR-155及脑源性神经营养因子(BDNF)表达水平与其认知功能的关系。方法选取240例抑郁症患者作为研究对象,根据24项汉密尔顿抑郁(HAMD-24)量表的评分结果,将其分为轻度抑郁组、中度抑郁组、重度抑郁组,每组80例。比较3组患者的蒙特利尔认知评估(MoCA)量表得分,血清炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]及BDNF水平,总胆固醇、三酰甘油、HDL、LDL水平,以及空腹血糖水平和血清miR-155表达水平。采用Pearson相关分析评估血清miR-155表达水平与相关指标的相关性,采用非条件Logistic回归模型分析抑郁症患者发生认知功能障碍的影响因素。结果轻度抑郁组、中度抑郁组、重度抑郁组患者的血清IL-6水平、TNF-α水平、miR-155表达水平依次升高(P<0.05),MoCA量表总分、视空间与执行能力得分、语言得分、注意力得分、抽象思维得分、延迟记忆得分,以及HDL水平和血清BDNF水平依次降低(P<0.05)。抑郁症患者的血清miR-155表达水平与HAMD-24量表总分、空腹血糖水平、血清TNF-α水平呈正相关,与MoCA量表总分、MoCA量表视空间与执行能力得分、HDL水平、血清BDNF水平呈负相关(P<0.05)。非条件Logistic回归分析结果显示,HAMD-24量表总分、血清TNF-α水平、血清miR-155表达水平升高是抑郁症患者发生认知功能障碍的危险因素(P<0.05)。结论血清TNF-α水平、miR-155表达水平升高是抑郁症患者发生认知功能障碍的独立危险因素,血清炎症因子水平增高,以及血清BDNF和HDL水平降低与抑郁症患者发生认知功能障碍关系密切。 展开更多
关键词 抑郁症 炎症因子 糖脂代谢 微小rna155 脑源性神经营养因子 认知功能
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miRNA-155靶向SOCS5对无乳链球菌诱导罗非鱼脑星形胶质细胞炎症的影响 被引量:3
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作者 张祥 黄瑜 +2 位作者 蔡佳 简纪常 王蓓 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期1-10,共10页
【目的】探究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)微小RNA-155(miR-155)和SOCS5(Suppressor of cytokine signaling 5)的靶向关系,并研究其对无乳链球菌诱导的尼罗罗非鱼脑星形胶质细胞炎症反应的影响。【方法】通过实时荧光定量PCR(qRT-... 【目的】探究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)微小RNA-155(miR-155)和SOCS5(Suppressor of cytokine signaling 5)的靶向关系,并研究其对无乳链球菌诱导的尼罗罗非鱼脑星形胶质细胞炎症反应的影响。【方法】通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测感染无乳链球菌后尼罗罗非鱼脑星形胶质细胞中miR-155、SOCS5及炎症因子表达变化规律,生物信息学方法预测miR-155与SOCS5的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验进行靶基因验证,qRT-PCR方法分析过表达和敲降miR-155对SOCS5基因表达的影响和miR-155对SOCS5的调控机制。【结果】无乳链球菌诱导尼罗罗非鱼脑星形胶质细胞中miR-155表达量极显著上升(P<0.001),4 h达到最高值。SOCS5表达量极显著上升(P<0.01),6 h达到最高值。促炎症因子IL-1β、TNF-α表达显著升高(P<0.0001),抑炎症因子IL-10、TGF-β表达显著下调(P<0.05)。构建尼罗罗非鱼SOCS53′UTR野生型和突变型荧光素酶报告载体。双荧光素酶实验结果表明miR-155极显著抑制(P<0.0001)SOCS5野生型质粒表达。突变靶位点后,miR-155对SOCS5的抑制作用极显著降低(P<0.0001),抑制效果减弱53.7%。过表达miR-155能显著抑制(P<0.001)SOCS5表达,而抑制miR-155后SOCS5表达显著上升(P<0.05)。转染miR-155抑制物6 h和12 h后,miR-155表达量显著下调(P<0.01),12 h表达量最低,而SOCS5表达量显著上调(P<0.05),在12 h达到最高值。【结论】miR-155通过靶向负调控SOCS5的表达参与无乳链球菌诱导的尼罗罗非鱼脑星形胶质细胞炎症反应,通过下调SOCS5表达影响炎症变化。 展开更多
关键词 微小核糖核酸155(mir-155) SOCS5 炎症反应 无乳链球菌 罗非鱼脑星形胶质细胞
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巨噬细胞中脂多糖诱导微小RNA-155表达与地塞米松的抑制 被引量:4
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作者 王中华 王首红 +3 位作者 吴岩 李宙 廖小龙 覃铁和 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第11期1591-1596,共6页
背景:目前地塞米松对巨噬细胞中微小RNA-155表达的调控作用尚不明确。目的:了解地塞米松是否调节巨噬细胞中微小RNA-155的表达。方法:1脂多糖刺激小鼠巨噬细胞:体外培养小鼠巨噬细胞株Raw264.7细胞,予脂多糖刺激。分别在培养0,0.5,2,6 ... 背景:目前地塞米松对巨噬细胞中微小RNA-155表达的调控作用尚不明确。目的:了解地塞米松是否调节巨噬细胞中微小RNA-155的表达。方法:1脂多糖刺激小鼠巨噬细胞:体外培养小鼠巨噬细胞株Raw264.7细胞,予脂多糖刺激。分别在培养0,0.5,2,6 h收集细胞,检测miR NA-155的动态表达。2地塞米松对巨噬细胞的干预:实验分4组:对照组予磷酸盐缓冲液培养;脂多糖组予脂多糖刺激;地塞米松+脂多糖组予地塞米松和脂多糖共同作用;地塞米松组予地塞米松培养。6 h后收集培养上清用ELISA法检测培养液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6等炎症因子表达,用实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞中微小RNA-155的表达。结果与结论:1脂多糖刺激Raw264.7巨噬细胞6 h后炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及微小RNA-155表达明显增加(P<0.05)。2用地塞米松+脂多糖干预后炎症因子及微小RNA-155的表达轻度升高(P<0.05)。3单独地塞米松处理组中炎症因子无明显变化(P>0.05),但微小RNA-155却明显减低(P<0.05)。4结果说明地塞米松抑制脂多糖诱导的巨噬细胞中微小RNA-155的表达。 展开更多
关键词 微小rna 巨噬细胞 脂多糖 组织构建 组织工程 微小rna-155 地塞米松 炎症
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miR-155在树突状细胞免疫调节中的研究进展
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作者 乔文玉 陈鹏 +1 位作者 刘锋 师伟 《医学综述》 CAS 2023年第21期4415-4420,4427,共7页
微RNA(miRNA)是一类小的单链非编码RNA,可通过抑制信使RNA(mRNA)的翻译或促进mRNA的降解调节转录后靶基因的表达。miR-155是一种多功能miRNA,参与肿瘤的发生、发展、炎症、移植免疫耐受及自身免疫性疾病调控等。在小鼠、大鼠、恒河猴等... 微RNA(miRNA)是一类小的单链非编码RNA,可通过抑制信使RNA(mRNA)的翻译或促进mRNA的降解调节转录后靶基因的表达。miR-155是一种多功能miRNA,参与肿瘤的发生、发展、炎症、移植免疫耐受及自身免疫性疾病调控等。在小鼠、大鼠、恒河猴等实验动物的基因组中亦存在miRNA同源基因,其中miR-155与免疫系统密切相关,在活化的树突状细胞、B细胞、T细胞、单核/巨噬细胞中普遍高表达。因此,深入研究miR-155在树突状细胞免疫调节中的作用,可以为相关疾病的治疗提供新思路。 展开更多
关键词 肿瘤 炎症 rna mir-155 树突状细胞
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miR-155靶向调控SP1、E2F2mRNA转录水平的功能验证
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作者 赵盼 刘真 +3 位作者 管静芝 袁龙 舒彬 尹斌 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第46期35-38,共4页
目的观察微小RNA155(miR-155)对端粒酶逆转录酶(h TERT)调控相关蛋白特异性蛋白1(SP1)及转录因子E2F2重组质粒表达的影响,为进一步研究miR-155调控肿瘤细胞h TERT表达的机制提供实验基础。方法采用生物信息学预测软件Target Scan和Mira... 目的观察微小RNA155(miR-155)对端粒酶逆转录酶(h TERT)调控相关蛋白特异性蛋白1(SP1)及转录因子E2F2重组质粒表达的影响,为进一步研究miR-155调控肿瘤细胞h TERT表达的机制提供实验基础。方法采用生物信息学预测软件Target Scan和Miranda预测SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR是否是人miR-155的作用靶点。针对SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR设计互补的两条寡核苷酸,包括目标序列(即SP1、E2F2野生型序列)及突变序列(SP1-mu、E2F2-mu),构建SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR报告基因载体p MIR-SP1、p MIR-E2F2、p MIR-SP1-mu和p MIRE2F2-mu。培养HEK-293细胞,采用脂质体法将SP1和E2F2的野生型和突变型p MIR-Luc质粒共转染HEK-293细胞24 h。将细胞分为SP1空白对照组、SP1目标序列组、SP1突变序列组、E2F2空白对照组、E2F2目标序列组、E2F2突变序列组,均加入0.2μg重组质粒、0.01μg对照质粒和0.375μL寡核苷酸,培养24 h。采用双荧光素酶报告基因系统检测双荧光素酶活性,以萤火虫荧光素酶活性值(F)/海肾荧光素酶活性值(R)比值评价miR-155与SP1及E2F2 mRNA 3'-UTR结合效果。结果在线预测结果示,SP1 mRNA 3'-UTR和E2F2 mRNA 3'-UTR均有与miR-155完全互补配对的序列,确定二者均为miR-155的靶基因。经鉴定,SP1和E2F2报告基因重组质粒构建成功。SP1目标序列组F/R低于SP1空白对照组及SP1突变序列组(P均<0.05),E2F2目标序列组F/R低于E2F2空白对照组及E2F2突变序列组(P均<0.05)。结论成功构建了SP1和E2F2报告基因重组质粒,证实miR-155能够靶向结合SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR,在转录后水平抑制SP1和E2F2的表达。 展开更多
关键词 特异性蛋白1 E2F2转录因子 微小rna155 荧光素酶报告基因 人端粒酶逆转录酶 质粒
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miR-155在脓毒症脏器功能障碍中的研究进展
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作者 李志华 王毅 于湘友 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2023年第2期85-89,113,共6页
脓毒症是由宿主对感染反应失调引起的威胁生命的器官功能障碍。脓毒症发病过程中炎症介质的过度释放,导致机体炎症反应失控,严重者导致脓毒性休克及多脏器功能衰竭。miRNA是近年来研究较多的内源性非编码小RNA,长度在20~25 nt之间。miR-... 脓毒症是由宿主对感染反应失调引起的威胁生命的器官功能障碍。脓毒症发病过程中炎症介质的过度释放,导致机体炎症反应失控,严重者导致脓毒性休克及多脏器功能衰竭。miRNA是近年来研究较多的内源性非编码小RNA,长度在20~25 nt之间。miR-155是目前研究较多的一种miRNA,近年来,miR-155表达分析显示miR-155的表达与脓毒症的严重程度以及器官功能障碍有关。 展开更多
关键词 脓毒症 器官功能障碍 非编码rna mir-155
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血清miRNA210、miRNA155表达水平对NSCLC的诊断价值
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作者 余桂东 余桂永 马旭晓 《实验与检验医学》 CAS 2023年第4期519-522,共4页
目的探讨血清微小RNA210(miRNA210)、微小RNA155(miRNA155)联合检测诊断非小细胞肺癌(NSCLC)的临床价值。方法收集我院2016年3月至2018年9月间经病理学检查证实为NSCLC患者60例作为NSCLC组、肺部良性病变患者60例作为良性组,60例健康体... 目的探讨血清微小RNA210(miRNA210)、微小RNA155(miRNA155)联合检测诊断非小细胞肺癌(NSCLC)的临床价值。方法收集我院2016年3月至2018年9月间经病理学检查证实为NSCLC患者60例作为NSCLC组、肺部良性病变患者60例作为良性组,60例健康体检对象作为对照组,采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测三组的血清miRNA210、miRNA155水平;采用受试者工作曲线(ROC)分析两项指标单独及联合应用鉴别诊断NSCLC与肺部良性病变的临床价值。结果NSCLC组患者血清miRNA210、miRNA155水平显著高于良性组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而良性组和对照组血清miRNA210、miRNA155水平差异无统计学意义(P>0.05);不同TNM分期、有无淋巴结转移的NSCLC患者血清miRNA-210水平差异有统计学意义(P<0.05),不同TNM分期的NSCLC患者血清miRNA-155水平差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清miRNA210、miRNA155单独检测对NSCLC与肺部良性病变均具有较好的鉴别诊断价值(AUC>0.7),而二者联合应用能在一定程度上提高NSCLC诊断的AUC、敏感度及特异度(0.913、86.67%及88.33%)。结论NSCLC患者血清miRNA210、miRNA155表达明显升高,且与临床分期和淋巴结转移具有一定的相关性,血清miRNA210、miRNA155定量检测对NSCLC诊断具有一定的临床价值,而二者联合检测能进一步提高NSCLC的临床诊断效能。 展开更多
关键词 微小rna210 微小rna155 非小细胞肺癌 诊断
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LncRNA MALAT1、miR-155在心力衰竭患者血清中的表达及与心功能的相关性 被引量:3
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作者 王自豪 李素娟 +2 位作者 宋晓光 张南南 侯艳艳 《中国循证心血管医学杂志》 2021年第11期1336-1340,共5页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)、微小RNA-155(miR-155)在慢性心力衰竭(CHF)患者血清中的表达水平及其与心功能及预后的相关性。方法选取2018年9月至2019年10月诊治的103例CHF患者为CHF组,并纳入同期40例... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)、微小RNA-155(miR-155)在慢性心力衰竭(CHF)患者血清中的表达水平及其与心功能及预后的相关性。方法选取2018年9月至2019年10月诊治的103例CHF患者为CHF组,并纳入同期40例体检健康者为健康组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平;比较两组心功能指标左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)水平;依据美国纽约心脏病学会(NYHA)分级将CHF患者分为Ⅱ级组(44例)、Ⅲ级组(32例)、Ⅳ级组(27例),比较不同NYHA分级CHF患者血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平及心功能指标;Pearson法分析CHF患者血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平与心功能指标的相关性,及血清LncRNA MALAT1表达水平与miR-155的相关性;对CHF患者随访1年,比较不同预后CHF患者血清LncRNA MALAT1、miR-155水平;应用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LncRNA MALAT1、miR-155水平对CHF患者预后的评估价值。结果CHF组患者血清LncRNA MALAT1表达水平、LVEDD水平均明显高于健康组(P<0.05),血清miR-155表达水平及LVEF水平明显低于健康组(P<0.05);随NYHA分级增高,CHF患者血清LncRNA MALAT1表达水平、LVEDD水平呈升高趋势(P<0.05),血清miR-155表达水平及LVEF水平呈降低趋势(P<0.05);CHF患者血清LncRNA MALAT1表达水平与LVEF、miR-155呈负相关(P<0.05),与LVEDD呈正相关(P<0.05),而血清miR-155表达水平与LVEF呈正相关(P<0.05),与LVEDD呈负相关(P<0.05);预后不良亚组CHF患者血清LncRNA MALAT1表达水平明显高于预后良好亚组(P<0.05),miR-155表达水平明显低于预后良好亚组(P<0.05);血清LncRNA MALAT1、miR-155表达水平预测CHF患者不良预后的曲线下面积(AUC)分别为0.895、0.854,截断值分别为2.09、0.43,敏感度均为89.7%,特异度分别为79.7%、81.1%;两者联合预测CHF患者不良预后的AUC为0.937,其敏感度、特异度分别为86.2%、91.9%。结论CHF患者血清LncRNA MALAT1呈高表达,miR-155呈低表达,两者均与心功能及预后显著相关,两者联合可提高对CHF患者预后的预测价值,更好的判定CHF患者预后情况。 展开更多
关键词 长链非编码rna肺腺癌转移相关转录本1 微小rna-155 慢性心力衰竭 心功能 预后
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LncRNA CASC2与miR-155-5p的靶向关系及对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响 被引量:6
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作者 冯双苗 杨贺佳 +1 位作者 袁银花 张化莲 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第2期243-247,共5页
目的:探讨LncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法:qRT-PCR法检测人正常子宫内膜上皮细胞hEEC,人子宫内膜癌细胞HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2、miR-155-5p的表达。利用双荧光素酶报告实验验证C... 目的:探讨LncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法:qRT-PCR法检测人正常子宫内膜上皮细胞hEEC,人子宫内膜癌细胞HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2、miR-155-5p的表达。利用双荧光素酶报告实验验证CASC2和miR-155-5p的靶向关系。将HEC-1A细胞分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2,anti-miR-NC、anti-miR-155-5p,pcDNA3.1、pcDNA3.1-CASC2+miR-NC、pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p。48 h后Western blot法测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果:与hEEC细胞相比,HEC-1A、KLE、HHUA中CASC2表达降低,miR-155-5p表达升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,CASC2和miR-155-5p存在靶向关系。与未转染组和pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-CASC2组迁移细胞数和侵袭细胞数均降低,MMP-2、MMP-9蛋白表达亦降低(P<0.05)。与未转染组和anti-miR-NC组相比,anti-miR-155-5p组细胞中miR-155-5p表达降低,迁移细胞数和侵袭细胞数均降低,MMP-2、MMP-9蛋白表达亦降低(P<0.05)。与pcDNA3.1-CASC2和pcDNA3.1-CASC2+miR-NC组相比,pcDNA3.1-CASC2+miR-155-5p组细胞中CASC2表达降低,miR-155-5p表达升高,迁移细胞数和侵袭细胞数均升高,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平亦升高(P<0.05)。结论:CASC2可靶向负调节miR-155-5p,抑制子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码rna CASC2 子宫内膜癌 mir-155-5p
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lncRNA MIR155HG通过调控miR-133a-3p/Furin轴对心肌成纤维细胞增殖、迁移、分化和胶原合成的影响 被引量:6
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作者 司胜勇 李治菁 +1 位作者 缪思斯 刘莉 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第12期1026-1033,1059,共9页
目的探讨长链非编码RNA MIR155宿主基因(lncRNA MIR155HG)对心肌成纤维细胞增殖、迁移、分化和胶原合成的影响及分子机制。方法构建小鼠心肌梗死模型。分离心肌成纤维细胞,然后分为沉默对照组、沉默MIR155HG组、沉默MIR155HG和抑制物对... 目的探讨长链非编码RNA MIR155宿主基因(lncRNA MIR155HG)对心肌成纤维细胞增殖、迁移、分化和胶原合成的影响及分子机制。方法构建小鼠心肌梗死模型。分离心肌成纤维细胞,然后分为沉默对照组、沉默MIR155HG组、沉默MIR155HG和抑制物对照组、沉默MIR155HG和干扰miR-133a-3p组、沉默MIR155HG和过表达弗林蛋白(Furin)组。实时荧光定量PCR检测MIR155HG、miR-133a-3p和Furin表达水平;MTT法检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移;Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、血管内皮生长因子(VEGF)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;荧光素酶报告实验检测MIR155HG和miR-133a-3p以及miR-133a-3p和Furin的靶向关系。结果在心肌梗死模型小鼠心脏组织中MIR155HG、Furin高表达,miR-133a-3p低表达(P<0.05)。抑制MIR155HG表达后心肌成纤维细胞的细胞活力、迁移细胞数及Cyclin D1、VEGF、Col-1、α-SMA表达水平显著降低,P21表达水平显著升高(P<0.05)。MIR155HG靶向调控miR-133a-3p,miR-133a-3p靶向调控Furin。抑制miR-133a-3p表达和过表达Furin逆转了抑制MIR155HG表达对心肌成纤维细胞增殖、迁移、分化和胶原合成相关蛋白的抑制作用。结论抑制MIR155HG表达可抑制心肌成纤维细胞增殖、迁移、分化和胶原合成,其机制可能与调节miR-133a-3p/Furin轴有关。 展开更多
关键词 长链非编码rna MIR155宿主基因 mir-133a-3p 弗林蛋白 心肌梗死 心肌成纤维细胞
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外周血LncRNA MIR155HG、miR-155检测在肺结核筛查中的临床价值 被引量:1
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作者 李君莉 赵慧姝 《临床检验杂志》 CAS 2021年第9期675-678,共4页
目的探讨微小RNA-155(miR-155)、长链非编码RNA MIR155宿主基因(LncRNA MIR155HG)在肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平,并分析其临床筛查价值。方法选取阿坝藏族羌族自治州人民医院诊治的肺结核患者130例作为肺结核组,其中... 目的探讨微小RNA-155(miR-155)、长链非编码RNA MIR155宿主基因(LncRNA MIR155HG)在肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平,并分析其临床筛查价值。方法选取阿坝藏族羌族自治州人民医院诊治的肺结核患者130例作为肺结核组,其中活动性肺结核(ATB)患者56例(ATB组)、潜伏结核感染(LTBI)患者74例(LTBI组),并以体检健康者134例作为健康人对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平;分析ATB患者PBMC中LncRNA MIR155HG的表达水平与miR-155的相关性,并评估二者对ATB患者的临床筛查价值。结果肺结核组患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平[(1.78±0.57)、(1.65±0.54)]均显著高于健康人对照组[(1.02±0.32)、(1.01±0.33)],差异有统计学意义(t分别为13.410、11.658,P均<0.05);ATB组患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平[(2.02±0.68)、(1.90±0.63)]亦显著高于LTBI组[(1.55±0.53)、(1.41±0.46)],差异有统计学意义(t分别为4.430、5.127,P均<0.05);未治愈组ATB患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平[(2.34±0.78)、(2.15±0.72)]显著高于治愈组[(1.83±0.61)、(1.75±0.58)],差异有统计学意义(t分别为2.725、2.280,P均<0.05)。ATB、LTBI患者PBMC中LncRNA MIR155HG的表达均与miR-155呈正相关(r分别为0.461、0.397,P均<0.05);LncRNA MIR155HG、miR-155筛查ATB的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.824(95%CI:0.749~0.900)、0.843(95%CI:0.772~0.914),当cut-off值分别为1.81、1.72时,其敏感性分别为71.4%、73.2%,特异性分别为87.8%、86.5%;二者联合检测筛查ATB的AUCROC为0.917(95%CI:0.871~0.964),当cut-off值为0.46时,其敏感性、特异性分别为89.3%、82.4%。结论肺结核患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平较高,且在ATB患者中的表达水平显著高于LTBI患者,二者联合检测有助于临床筛查ATB,评估患者病情。 展开更多
关键词 微小rna-155 长链非编码rna MIR155 宿主基因 肺结核 外周血单个核细胞
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茎环引物的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测miR-155表达及其临床初步应用 被引量:8
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作者 李莉 林晓丹 温旺荣 《检验医学》 CAS 北大核心 2010年第4期296-300,共5页
目的建立茎环状逆转录引物(简称茎环引物)的SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR),并作初步应用。方法应用SYBR GreenⅠ实时FQ-PCR检测CD4+T细胞株的miR-155,初步验证方法的可行性。用所建立的方法对60份临床宫颈刮取物... 目的建立茎环状逆转录引物(简称茎环引物)的SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR),并作初步应用。方法应用SYBR GreenⅠ实时FQ-PCR检测CD4+T细胞株的miR-155,初步验证方法的可行性。用所建立的方法对60份临床宫颈刮取物标本进行检测,分析miR-155与宫颈癌及感染的高危型人类乳头状瘤病毒(HPV)基因型别的关系,其聚合酶链反应(PCR)反应产物通过电泳验证产物特异性。结果所建方法能特异的检测到miR-155的扩增信号,最低检出限为10^-7nmol/L,在10^-1-10^-6nmol/L之间有良好的线性关系,相关系数(r)为0.99,扩增后惟一的熔解曲线特异峰显示很好的特异性。CD4^+T细胞株及60例临床宫颈刮取物标本miR-155均显示阳性,PCR反应产物电泳可获得单一条带。宫颈刮取物miR-155与宫颈癌有关(P〈0.05),但与本研究涉及的HPV基因型别无关(P〉0.05)。结论所建立的茎环引物的SYBR GreenⅠ实时FQ-PCR能快速、敏感、特异地检测细胞株和临床宫颈刮取物miR-155的表达水平,为进一步研究miR-155及其临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 微小rna 逆转录聚合酶链反应 mir-155 SYBR GreenⅠ
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芪参益气滴丸对冠心病慢性心力衰竭病人心功能、免疫功能及micro RNA155水平的影响 被引量:36
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作者 刘亚洋 李鹤 朱源生 《中西医结合心脑血管病杂志》 2017年第11期1342-1344,共3页
目的研究芪参益气滴丸对冠心病慢性心力衰竭病人心功能和免疫功能、微小RNA(micro RNA)155等的影响。方法将冠心病慢性心力衰竭病人60例,随机分为对照组(30例)及芪参益气滴丸治疗组(30例)。两组均给予常规治疗,治疗组加用芪参益气滴丸,... 目的研究芪参益气滴丸对冠心病慢性心力衰竭病人心功能和免疫功能、微小RNA(micro RNA)155等的影响。方法将冠心病慢性心力衰竭病人60例,随机分为对照组(30例)及芪参益气滴丸治疗组(30例)。两组均给予常规治疗,治疗组加用芪参益气滴丸,疗程为90d。观察治疗前后左室收缩末期容积(LVESV)及舒张末容积(LVEDV)、左心室射血分数(LVEF),脑钠肽水平、6min步行距离、免疫细胞亚群、micro RNA155等指标。结果两组治疗后左室射血分数、左心室舒张末期容积、左室收缩末期容积均较治疗前有明显改善(P<0.05);治疗组较对照组改善明显(P<0.05)。两组治疗后N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)、6min步行距离均较治疗前有明显改善(P<0.05);治疗组较对照组改善明显(P<0.05)。治疗组治疗后micro RNA155表达量较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,对照组治疗后,CD_4、CD_8、CD_4/CD_8无明显改变(P>0.05),治疗组治疗后,CD_4、CD_4/CD_8有明显上升,差异有统计学意义(P<0.05),CD_8无明显变化(P>0.05)。血清microRNA155表达水平与lg(NT-proBNP)呈正相关(r=0.695,P<0.01);与LVEF呈负相关(r=-0.539,P<0.01);与CD_4呈负相关(r=-0.581,P<0.05)。结论冠心病心力衰竭病人血清micro RNA155水平升高,免疫细胞亚群比例发生改变,常规药物治疗基础上加用芪参益气滴丸治疗能进一步改善心脏功能,纠正免疫失衡。 展开更多
关键词 冠心病 心力衰竭 芪参益气滴丸 微小rna155
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miR-125b、miR-29a和miR-155-5p作为诊断结核性脑膜炎生物标志的研究 被引量:8
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作者 柴璐璐 田宋新 +1 位作者 袁俐 王宏 《天津医药》 CAS 2015年第6期674-677,共4页
目的探讨结核性脑膜炎患者脑脊液及血浆中micro RNA(mi R)-125b、mi R-29a和mi R-155-5p的表达水平及其临床意义。方法收集20例结核性脑膜炎患者(结脑组)和20例原发性头痛患者(对照组)的脑脊液和血浆,分别提取总RNA,使用实时定量PCR方... 目的探讨结核性脑膜炎患者脑脊液及血浆中micro RNA(mi R)-125b、mi R-29a和mi R-155-5p的表达水平及其临床意义。方法收集20例结核性脑膜炎患者(结脑组)和20例原发性头痛患者(对照组)的脑脊液和血浆,分别提取总RNA,使用实时定量PCR方法分别检测脑脊液和血浆中mi R-125b、mi R-29a及mi R-155-5p的表达水平。结果与对照组相比,结脑组脑脊液、血浆中mi R-29a、mi R-125b表达水平明显上调,结脑组血浆中mi R-155-5p表达水平明显上调,差异均有统计学意义(均P<0.01),而2组脑脊液中mi R-155-5p表达水平比较差异无统计学意义。结论 mi R-125b、mi R-29a和mi R-155-5p可能参与了调节结核性脑膜炎的发生、发展过程,mi R-125b和mi R-29a有可能作为潜在的诊断结核性脑膜炎的生物学标志。 展开更多
关键词 结核 脑膜 血浆 脑脊髓液 rnaS 实时定量PCR mir-125b mir-29a mir-155-5p
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