孕中期唐氏筛查血清标志物及miR-200C与病理妊娠的关系

目的探究孕中期唐氏筛查血清中甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素(β-h CG)、游离雌三醇(u E3)及微小RNA200C(miR-200C)与病理妊娠的关系。方法回顾性选择862例孕中期妊娠者作为研究对象,收集所有研究对象血清。采用时间分辨荧光法测定血清中AFP、β-h CG、u E3水平,RT-PCR法检测血清中miR-200C水平。根据血清标志物中位数值的倍数(MOM)值、miR-200C平均值进行分组,对比不同水平AFP、β-h CG、u E3、miR-200C病理妊娠发生情况。Logistic多因素回归性分析血清检测指标与病理妊娠的相关性,创建受试者工作特征曲线(ROC)对比不同指标曲线下面积(AUC)。结果 102例妊娠者发生病理妊娠,占11.83%,主要包括胎膜早破、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、早产以及胎儿先天畸。AFP、β-h CG升高组、u E3降低组以及miR-200C高表达组在胎膜早破、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、早产、胎儿先天畸形病理妊娠中发生率高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic多因素回归性分析显示病理妊娠的发生与血清AFP、β-h CG、u E3、miR-200C均具有显著相关性(OR=1.536,1.732,1.248,1.671,P<0.05)。ROC曲线分析显示,AFP、β-h CG、u E3、miR-200C预测病理妊娠AUC值分别为0.782、0.869、0.806、0.713,其中β-h CG预测价值最高。结论孕中期血清AFP、β-h CG、miR-200C升高,u E3降低与病理妊娠的发生相关,推测其可作为病理妊娠的预测指标。

冬凌草甲素调控miR-200c/EZH2轴抑制黑色素瘤细胞上皮-间质转化的机制研究

目的 探究冬凌草甲素调控微小RNA200c(miR-200c)/组蛋白甲基化转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)轴抑制黑色素瘤细胞(A375细胞)上皮-间质转化(EMT)的影响机制。方法 MTT法检测冬凌草甲素对A375细胞活力的影响;将A375细胞分为对照组、冬凌草甲素组、mimic control组、miR-200c mimics组、冬凌草甲素+inhibitor control组、冬凌草甲素+miR-200c inhibitor组,qRT-PCR检测miR-200c、EZH2 mRNA表达情况;免疫印迹法检测EZH2及EMT相关蛋白表达情况;黏附实验检测A375细胞黏附能力;Transwell实验检测A375细胞侵袭及迁移能力;荧光素酶报告基因实验检测miR-200c与EZH2的靶向关系;构建移植瘤裸鼠模型,检测肿瘤质量;免疫组化法分析EMT相关蛋白表达情况。结果 A375细胞存活率随冬凌草甲素浓度的增加以剂量依赖性显著降低(P<0.05),由于40μmol/L冬凌草甲素接近半数抑制浓度,因此选取40μmol/L冬凌草甲素进行后续实验;与对照组相比,冬凌草甲素组、miR-200c mimics组A375细胞中miR-200c、钙粘附蛋白E(E-cadherin)表达水平显著增加,EZH2 mRNA及蛋白表达水平、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达水平、迁移细胞数、侵袭细胞数、黏附细胞数显著降低(P<0.05);与对照组、mimic control组相比,miR-200c mimics组EZH2蛋白表达水平显著降低(P<0.05);miR-200c沉默可逆转冬凌草甲素对A375细胞的作用;与对照组相比,冬凌草甲素组肿瘤质量、EZH2 mRNA、N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平显著降低,miR-200c、E-cadherin蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与冬凌草甲素组相比,冬凌草甲素+miR-200c inhibitor组肿瘤质量、EZH2 mRNA、N-cadherin及Vimentin蛋白表达水平显著增加,miR-200c、E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论 冬凌草甲素可能通过促进miR-200c/EZH2轴来抑制A375细胞的EMT及肿瘤生长。

母体血液指标miR-200C、hsA-miR-124A-3p与常规血清标志物在孕中期唐氏综合征筛查中的随机对照研究

目的探究母体血液指标微小RNA200C(miR-200C)、hsA-miR-124A-3p与常规血清标志物在孕中期唐氏综合征(DS)筛查中的临床价值。方法选取我院2015年1月~2020年6月孕中期(14~27w)DS孕妇55例作为观察组,按照1:1原则随机选取正常妊娠孕妇55例作为对照组。比较两组一般资料、母体血液指标miR-200C、hsA-miR-124A-3p、常规血清标志物[游离雌三醇(uE_(3))、人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)、甲胎蛋白(AFP)]MOM值,分析血浆miR-200C、hsA-miR-124A-3p与血清uE_(3)、β-hCG、AFP相关性及各指标与DS的关系,评价miR-200C、hsA-miR-124A-3p、血清uE_(3)、β-hCG、AFP对DS的诊断价值。结果两组文化程度、既往吸烟、饮酒、规律服用叶酸、孕期接触放射性物质比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血浆miR-200C、hsA-miR-124A-3p、血清β-hCG、AFP MOM值高于对照组,血清uE_(3) MOM值低于对照组(P<0.05)。血浆miR-200C、hsA-miR-124A-3p与血清β-hCG、AFP MOM值呈正相关,与uE_(3) MOM值呈负相关(P<0.05)。血浆miR-200C、hsA-miR-124A-3p、血清uE_(3)、β-hCG、AFP与DS发生显著相关(P<0.05)。miR-200C+hsA-miR-124A-3p诊断DS的AUC高于uE_(3)+β-hCG+AFP诊断,且敏感度、特异度分别为78.18%、87.27%。结论母体血液指标miR-200C、hsA-miR-124A-3p联合对DS的诊断效能优于常规血清标志物,可为孕中期DS筛查提供一种新途径,具有较高临床应用价值。