MicroRNA-630对三阴性乳腺癌细胞增殖的影响及其机制研究

目的研究MicroRNA-630(miR-630)是否通过下调Sox4影响三阴性乳腺癌细胞系(MDA-MB-231)细胞的增殖。方法转染miR-630mimic和miR-NC至离体培养的MDA-MB-231细胞中,Western blot检测MDA-MB-231细胞中P27、Ki67、Sox4的表达情况,MTT法检测细胞增殖情况,利用荧光素酶素实验验证Sox4是miR-630的靶基因;再通过转染过表达Sox4的质粒至MDA-MB-231细胞,检测MDA-MB-231细胞中P27、Ki67、Sox4的表达情况,MTT法观察细胞增殖情况。结果相比于空质粒组,转染miR-630-mimic后,MDA-MB-231细胞中Ki67、Sox4的表达减少(P<0.05),P27表达增加(P<0.05),MDA-MB-231细胞的增殖减少(P<0.05);荧光素酶试验结果显示,miR-630能够降低Sox4-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.05);相比于miR-630+空质粒组,转染过表达Sox4质粒后,MDA-MB-231细胞中Ki67表达增加(P<0.05),P27表达减少(P<0.05),细胞的增殖增加(P<0.05)。结论 miR-630可以通过下调Sox4从而抑制MDA-MB-231的增殖。

miR-630在胃癌组织中的表达变化及对胃癌细胞SGC-7901增殖、侵袭能力的影响

目的观察miR-630在胃癌组织中的表达变化,及miR-630对胃癌细胞株SGC-7901增殖、侵袭能力的影响。方法收集131例胃癌患者的胃癌组织及癌旁正常胃组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-630。培养SGC-7901细胞,分为实验组、空载组和对照组,实验组转染miR-630,空载组转染空质粒,对照组仅加入PBS;分别于培养12、24、48、72 h后采用MTT法检测细胞增殖能力;培养24 h后以Transwell小室检测细胞侵袭能力;培养24 h后,采用Western blotting法检测细胞中的p27、MMP-2、MMP-9蛋白。结果胃癌组织、癌旁组织中miR-630的相对表达量分别为1.93±0.41、2.74±0.48,胃癌组织中miR-630相对表达量低于癌旁组织(P均<0.05)。肿瘤直径≥5 cm者胃癌组织中miR-630相对表达量低于直径<5 cm者,有淋巴结转移者低于无淋巴结转移者,浸润深度为T2~T4级者低于T1级者,Ⅲ~Ⅳ期者低于Ⅰ~Ⅱ期者(P均<0.05)。转染24、48、72 h后,实验组细胞增殖能力均低于转染同时点的空载组和对照组(P均<0.01)。实验组、空载组、对照组穿膜细胞数分别为15.4±2.7、24.3±23.1、29.7±19.4,实验组穿膜细胞数少于对照组和空载组(P均<0.01)。实验组细胞中p27蛋白相对表达量高于空载组和对照组,MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量低于空载组和对照组(P均<0.01)。结论胃癌组织中miR-630表达减少,mir-630低表达可能与胃癌的发生发展有关;miR-630有抑制胃癌细胞增殖、侵袭的作用,机制可能与p27蛋白表达上调及MMP-2、MMP-9蛋白表达下调有关。