血清miR-130a、miR-449a对冠心病患者接受经皮冠状动脉介入术后发生支架内再狭窄的预测价值

目的探讨微小RNA-130a(miR-130a)和微小RNA-449a(miR-449a)对冠心病患者接受经皮冠状动脉介入术(PCI)后发生支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选取2019年10月至2022年10月在该院确诊为冠心病并接受PCI的90例患者作为研究对象,PCI后对其进行6个月的随访,根据患者是否发生ISR分为ISR组和非ISR组,收集整理临床资料。采用荧光定量聚合酶链反应检测两组血清miR-130a、miR-449a水平;采用多因素Logistic回归分析影响冠心病患者接受PCI后发生ISR的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-130a、miR-449a水平预测冠心病患者接受PCI后发生ISR的效能。结果随访6个月后,发生ISR 17例,未发生ISR 73例。ISR组血清miR-130a水平明显高于非ISR组,miR-449a水平明显低于非ISR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ISR组和非ISR组的年龄、性别、体质量指数、吸烟史、高血压病史及甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);ISR组总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇及总胆红素水平明显高于非ISR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同病变部位、病变类型、支架大小的ISR患者血清miR-130a和miR-449a水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05),不同狭窄支数、病变长度的ISR患者血清miR-130a和miR-449a水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-130a、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总胆红素水平升高均是冠心病患者接受PCI后发生ISR的独立危险因素(P<0.05),miR-449a水平升高是PCI后发生ISR的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-130a、miR-449a单项及二者联合检测预测冠心病患者PCI后发生ISR的曲线下面积(AUC)分别为0.805、0.889、0.967,二者联合检测预测ISR的AUC明显大于miR-130a、miR-449a单独检测(Z=2.239,P=0.025;Z=2.266,P=0.024)。结论miR-130a、miR-449a水平与冠心病患者接受PCI后发生ISR关系密切,且miR-130a、miR-449a联合检测对冠心病患者接受PCI后发生ISR具有较高的临床预测价值。

精神分裂症患者外周血中mRNA/miRNA网络综合分析

目的探索精神分裂症患者外周血中mRNA/微小核糖核酸(miRNA)网络综合分析。方法纳入2022年12月至2023年2月就诊于该院的精神分裂患者6例作为实验组,志愿者4例作为对照组。收集两组人群血液样本,采用RNA-seq技术检测mRNA及miRNA的表达水平。最后利用基因表达综合数据库中GSE145554基因集进行生物信息学验证分析。结果与对照组相比,实验组中共分析出差异mRNA 2133个,其中包括上调mRNA 1410个,下调mRNA 723个;差异miRNA 150个,其中包括上调miRNA 72个,下调miRNA 78个。京都基因与基因组百科全书和基因本体论富集的生物学过程和信号途径主要包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路、坏死性凋亡及内质网中的蛋白质加工信号通路等。结论PI3K-AKT、mTOR、坏死性凋亡及内质网中的蛋白质加工信号通路参与精神分裂的发生发展过程,为阐明精神分裂症的预防、诊断及治疗提供新的研究方向。

口腔鳞状细胞癌组织中差异微小RNA/mRNA表达谱的对接研究

目的构建分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)中差异表达的微小RNA(miRNA)和mRNA表达谱,初步预测与OSCC发生和发展相关的miRNA和mRNA。方法运用高通量深度测序技术构建miRNA和mRNA表达谱,通过Gene Ontology功能显著性富集分析预测与OSCC细胞周期、增殖、分化和凋亡相关的miRNA和mRNA。结果共发现77个miRNA和1 298个mRNA显著性差异表达,富集分析显示与OSCC细胞周期、增殖、分化和凋亡相关的miRNA共73个,且一个miRNA可调控多个mRNA。结论 OSCC中差异表达的miRNA和mRNA对OSCC的发生和发展有潜在的作用。

CK20mRNA RT-PCR检测诊断胃癌微小转移

目的:观察胃癌患者骨髓、门静脉和外周血CK20mRNA的RT-PCR检测在诊断胃癌微小转移的意义.方法:采用RT-PCR方法检测47例胃癌患者和8例非恶性病手术患者骨髓、门静脉及外周血CK20mRNA的表达.结果:CK20mRNA在胃癌患者骨髓、门静脉及外周血中阳性表达率分别为41/47;40/47;33/47,随临床分期进展阳性表达率升高.骨髓和门静脉血阳性表达率稍高于外周血(P>0.05);外周血与骨髓和门静脉血阳性表达符合率分别为88.4%和91.2%.8例对照患者均无阳性表达.结论:CK20mRNA是较特异的胃癌微小转移指标,外周血与骨髓和门静脉血有相近的CK20mRNA阳性表达率和较高的符合率.可成为方便的检测指标,作为指导综合治疗、判断疗效及预后的因素之一.

外周血甲胎蛋白mRNA和白蛋白mRNA在评估肝癌微小转移中的比较研究

目的 探讨肝病患者外周血甲胎蛋白mRNA(AFPmRNA)和白蛋白mRNA(ALBmRNA) ,作为肝癌微小转移标志物的特异性。方法 提取患者和健康志愿者的外周血单个核细胞总RNA ,进行RT PCR ,扩增产物再进行Southern杂交。结果 原发性肝癌 (HCC)组外周血AFPmRNA的检出率为 4 1.4 % ,对照组为 0 % ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ;HCC组外周血ALBmRNA的检出率为4 4 .8% ,对照组为 2 9.2 % ,二者差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 作为肝癌微小转移的标志物 。

长链非编码RNAs⁃微小RNAs⁃mRNAs调控轴在脑缺血/再灌注损伤机制中的作用进展

脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤是继发于缺血性脑卒中的一种脑组织损伤,具有较高的致死致残率。长链非编码RNAs(long non⁃coding RNAs,lncRNAs)是一类能够在表观遗传水平、转录水平和转录后水平对基因表达进行调控的非编码RNAs。LncRNAs能作为微小RNAs(microRNAs,miRNAs)的内源性海绵来吸附并抑制miRNAs的表达,从而抑制miRNAs对mRNAs的负性调控作用。大量研究发现,lncRNAs⁃miRNAs⁃mRNAs调控轴参与了脑I/R损伤的病理过程,本文通过对lncRNAs⁃miRNAs⁃mRNAs调控轴在脑I/R损伤机制中的作用研究进行综述,以加深对lncRNAs和miRNAs在治疗缺血性脑血管病中作用机制的认识。

结直肠癌组织中微小RNA-449b的水平及临床意义

目的探讨微小RNA-449b(miR-449b)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法收集本院2012年1月至2014年12月收治的92例手术切除的结直肠癌组织和88例癌旁正常肠黏膜组织存档蜡块,采用实时定量PCR(QPCR)法检测以上组织中miR-449b的表达情况,并分析其与临床病理特征(性别、年龄、部位、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度及血清CEA、CA50和CA199水平)的关系,根据随访资料分析miR-449b表达与预后的关系。结果 QPCR检测发现92例结直肠癌组织中miR-449b水平分别为0.367±0.183,低于癌旁组织的1.029±0.228(P<0.05);miR-449b表达与结直肠癌患者的性别、年龄、部位、分化程度及血清CEA、CA50和CA199水平均无关(P>0.05),而与浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期均有关(P<0.05)。miR-449b低表达者的中位总生存期为37.0(95%CI:33.168～40.382)个月,低于miR-449b高表达者的47.0(95%CI:42.561～51.419)个月(P<0.001)。结论 miR-449b在结直肠癌组织中表达降低,与结直肠癌的发生发展有关,且miR-449b低水平的预后较差,在该类型恶性肿瘤的诊断和预后预测上有一定价值。

脓毒症患儿外周血单个核细胞中微小RNA-466和GPR18 mRNA的表达及诊断价值

目的探讨微小RNA-466(miRNA-466)和G蛋白偶联受体18(GPR18)mRNA在脓毒症患儿外周血单个核细胞中的表达及诊断价值。方法选取中山大学附属第八医院儿科2017年10月至2019年6月收治的脓毒症患儿90例为病例组,选取体检健康儿童60例为对照组,检测两组外周血白细胞计数(WBC)和C反应蛋白(CRP)水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量。采用受试者工作特征(ROC)曲线比较WBC、CRP及外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量对患儿脓毒症的诊断价值。结果病例组WBC、CRP水平,外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量均高于对照组(P<0.05)。病例组CRP水平(r=0.472,P<0.01),外周血单个核细胞中miRNA-466相对表达量(r=0.489,P<0.001)和GPR18 mRNA相对表达量(r=0.507,P<0.001)均与序贯器官衰竭评分(SOFA评分)呈正相关。外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA表达水平呈正相关(r=0.618,P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,CRP水平、miRNA-466和GPR18 mRNA相对表达量诊断脓毒症的曲线下面积分别为0.758(95%CI:0.669~0.817)、0.901(95%CI:0.813~0.969)和0.858(95%CI:0.761~0.917)。联合检测miRNA-466和GPR18 mRNA时诊断脓毒症的曲线下面积为0.947(95%CI:0.898~0.981),灵敏度为90.9%,特异度为93.9%。结论脓毒症患儿外周血单个核细胞中miRNA-466和GPR18 mRNA表达升高,联合检测可提高脓毒症诊断效能。

微小RNAs-mRNAs调控轴在脑缺血-再灌注损伤机制中的作用进展

脑缺血-再灌注损伤是缺血性脑卒中发生后出现的一种非常严重的并发症,给患者的神经功能造成不可逆或永久性的损伤,具有较高的致残率和死亡率。微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一种小的内源性核糖核酸分子,通过与1个或多个mRNA的3’-UTR端以序列特异性的方式杂交结合来抑制基因的翻译,调控至少1/3的人类基因组表达。近年来,越来越多的研究发现miRNAs能够通过调控下游的靶mRNAs参与细胞凋亡、氧化应激、神经炎症等脑缺血-再灌注损伤的病理过程,对神经功能的损伤或保护具有重要作用。本文通过对miRNAs-mRNAs调控轴在脑缺血-再灌注损伤机制中的作用研究进行综述,以加深对miRNAs在治疗缺血性脑血管病中的作用机制的认识。

外周血中白蛋白mRNA作为肝癌微小转移标志物的进一步研究

目的 检测不同肝脏疾病患者的外周血中白蛋mRNA(ALBmRNA) ,探讨外周血中ALBmRNA作为肝癌微小转移标志物的特异性。方法 分离原发性肝癌患者以及肝硬化、急慢性肝炎、肝转移癌、肝脏良性肿瘤患者和健康志愿者的外周血单个核细胞 ,提取单个核细胞的总RNA ,进行RT PCR ,将RT PCR产物再进行Southern杂交。结果 原发性肝癌患者组外周血中ALBmRNA的检出率为 44 .8% ,对照组检出率为 2 9.2 % ,两者之间的差异无统计学意义 (P≥ 0 .0 5 )。

微小核糖核酸449a与多形性腺瘤基因锌指蛋白2在卵巢癌组织中的表达及意义

目的观察卵巢癌患者癌组织中微小核糖核酸-449(miR-449a)和多形性腺瘤基因锌指蛋白2(PLAGL2)的表达水平及二者关系,并分析其临床意义。方法收集福建医科大学附属医院2014年3月-2016年3月90例卵巢癌患者的术后癌组织和癌旁对照正常组织,分别采用反转录荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和免疫组织化学法检测癌组织和癌旁正常组织中miR-449a及PLAGL2的表达水平;分析二者与患者临床病理特征的关系及其在癌组织的表达水平的相关性。结果qRT-PCR结果显示miR-449a在癌组织的相对表达水平为(0.37±0.17),显著低于癌旁正常组织(P<0.05);免疫组化检测结果显示PLAGL2在癌组织的阳性表达率(68.89%)显著高于正常组织(31.11%)(P<0.05)。miR-449a、PLAGL2表达水平与临床分期有关(P<0.05),与其他病理特征无关(P>0.05)。癌组织中miR-449a表达水平与PLAGL2呈负相关(r=-0.358,P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,癌组织中miR-449a高表达组的生存率显著高于低表达组(P<0.05),PLAGL2阴性表达组的生存率显著高于阳性表达组(P<0.05)。结论卵巢癌癌组织中miR-449a相对表达量较低,PLAGL2蛋白阳性表达率较高,且二者均与临床病理特征及预后密切相关,推测miR-449a、PLAGL2均参与卵巢癌的发生发展,可作为评估患者预后的重要指标。

miR-504N-cadherin mRNA和Gal-9mRNA表达水平与HR-HPV感染转阴关系及联合预测价值

目的探讨微小RNA-504(miR-504)、神经型钙黏附素(N-cadherin)mRNA、半乳糖凝集素9(Gal-9)mRNA与高度鳞状上皮内病变(HSIL)宫颈锥切术后高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染转阴关系及联合预测价值。方法将98例行宫颈锥切术HR-HPV阳性的HSIL患者,根据术后6个月HR-HPV感染是否转阴分为非转阴组27例、转阴组71例。比较两组患者一般资料和miR-504、N-cadherin mRNA、Gal-9 mRNA表达水平,采用多因素Logistic回归分析法分析HR-HPV感染转阴相关影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析miR-504、N-cadherin mRNA、Gal-9 mRNA对HR-HPV感染转阴情况的预测价值。结果两组患者宫颈癌家族史、绝经情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HR-HPV感染非转阴组患者miR-504表达水平低于转阴组,N-cadherin mRNA、Gal-9 mRNA表达水平高于转阴组(P<0.01);将宫颈癌家族史、绝经情况等基线资料控制后,miR-504、N-cadherin mRNA、Gal-9 mRNA表达水平仍与HR-HPV感染转阴情况相关(P<0.01);miR-504、N-cadherin mRNA、Gal-9 mRNA联合预测HR-HPV感染转阴的AUC最大。miR-504高水平表达患者的HR-HPV感染转阴率高于低水平表达患者,N-cadherin mRNA、Gal-9 mRNA高水平表达患者的HR-HPV感染转阴率低于低水平表达患者(P<0.01)。结论miR-504、N-cadherin mRNA、Gal-9 mRNA表达水平与HSIL宫颈锥切术后HR-HPV感染转阴有关,三者联合检测可作为预测HR-HPV感染转阴情况的有效方案。

AD发病机制相关的微小RNA的研究

微小RNA(microRNA,miRNA)是长度在21~25nt的内源性非编码RNA。miRNA调控活性依赖于识别位于mRNA分子上的结合位点,其通过与靶mRNA的3’非翻译区结合并引起靶基因的翻译抑制或降解,在转录后水平调节基因表达。miRNA在许多重要的生物过程中都是至关重要的,也是许多疾病的重要标记物[1]。

能谱CT联合促甲状腺激素受体mRNA对甲状腺乳头状癌诊断意义分析

探讨能谱CT定量联合促甲状腺激素受体(thyroid-stimulating hormone receptor,TSHR)mRNA对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid microcarcinoma,PTMC)的诊断意义分析。方法 收集2017年5月-2021年2月我院经手术及病理证实为甲状腺微小结节的患者105例,其中61例为PTMC,44例为微小结节性甲状腺肿(Micronodular goiter,MNG)。所有患者均行能谱CT及血清TSHR-mRNA检查,在最佳单能量图像上测量病变区碘浓度,计算能谱曲线斜率k值。分析能谱CT定量参数联合血清TSHR-mRNA诊断PTMC的效能。采取曲线下面积(AUC)分析能谱CT定量参数联合血清TSHR-mRNA对PTMC的诊断准确度、特异度、敏感度、阳性预测值、阴性预测值。结果 PTMC和MNG两组能谱CT定量参数碘浓度和能谱曲线斜率在平扫、动脉期、静脉期比较差异均有统计学意义(P<0.05)。PTMC组患者血清TSHR-mRNA的平均表达量为(2.81±1.34)ng/ug,MNG组患者血清TSHR-mRNA的平均表达量为(0.96±0.42)ng/ug,且PTMC和MNG两组血清TSHR-mRNA表达量比较差异有统计学意义(t=31.285,P=0.000)。能谱CT定量参数碘浓度和能谱曲线斜率诊断PTMC的ROC曲线下面积AUC分别为0.721、0.754。采用碘浓度和能谱曲线斜率诊断PTMC,两者诊断PTMC的准确度、特异度、敏感度、阳性预测值、阴性预测值差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 能谱CT定量参数或血清TSHR-mRNA表达量均可在一定程度上诊断PTMC,两者联合应用时可更准确的诊断,对于临床治疗方案的选择具有重要意义。

微小RNA生物功能的研究进展

微小RNA（micmRNA。miRNA）的研究起始于stRNA（small temporal RNA）。1993年Lee等新杆状线虫（C．elegan）中通过基因筛选和定位克隆的方法发现了lin-4．lin-4可以与lin-14基因的3^- UTR（untranslate region）不完全结合．阻断lin-14蛋白的表达却不影响lin-14的mRNA表达水平。抑制幼虫从L1期进入L2期。而后，在2000年，

RT-PCR/Southern杂交方法检测肝癌患者外周血AFP mRNA

目的 寻找一种敏感的方法以检外外周血中的肝癌细胞。方法 分离原发性肝癌患者以及肝硬化、急慢性肝炎、肝转移癌、肝脏良性肿瘤患者和健康志愿者的外周血单个核细胞 ,提取单个核细胞的总RAN ,进行RT -PCR/Southern杂交检测AFPmRNA。结果 原发性肝癌患者外周血AFPmRAN的检出率为 41.4% ,其检出率与肿瘤大小以及TNM分期有关 ,对照组均为阴性。结论 肝癌患者外周血中的AFPmRNA可以作为肝癌细胞的血液微小转移的标志物。

双相躁狂患者治疗前后血浆microRNA-134及LIMK-1 mRNA的表达研究

目的观察双相躁狂患者血浆中微小RNA-134(micro RNA-134)及LIM激酶-1(LIMK-1)m RNA的表达水平与双相躁狂之间的关系。方法 105例双相躁狂患者作为患者组,100例与患者组在年龄和性别上匹配的健康志愿者作为对照组,患者组常规应用情绪稳定剂治疗1个月。患者组于入组时和治疗1个月时、对照组于入组时分别评定Bech-Rafaelsen躁狂量表(BRMS)评分表并收集血浆,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测血浆micro RNA-134及LIMK-1 m RNA的表达水平,最后对检测结果及BRMS评分进行统计分析。结果治疗前,患者组血浆micro RNA-134及LIMK-1 m RNA表达水平分别为(1.17±0.02)、(0.37±0.02)显著低于对照组的(1.46±0.04)、(0.46±0.01),差异有统计学意义(P<0.05);治疗1个月后,患者组血浆micro RNA-134、LIMK-1 m RNA表达水平分别为(1.36±0.07)、(0.52±0.01)较治疗前显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。患者组治疗前及治疗后血浆micro RNA-134表达水平与BRMS评分之间均存在负相关(r=-0.48、-0.39,P<0.05)。结论血浆micro RNA-134、LIMK-1 m RNA的表达水平和双相障碍躁狂发作有关,有可能作为双相躁狂的生物标记物。

miR⁃449a与miR⁃19b⁃3p在急性脑梗死介入取栓前后的水平变化及检测价值

目的探究miR⁃449a与miR⁃19b⁃3p在急性脑梗死介入取栓前后的水平变化及检测价值。方法选取佛山市中医院2019年8月至2021年8月116例急性脑梗死患者作为观察组,另选取同期58例健康体检者作为对照组,比较两组血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p水平,观察组均行介入取栓治疗,比较观察组介入取栓前、介入取栓后12 h血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p水平,对比不同预后患者临床资料、介入取栓前后血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p水平,分析血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p对预后的影响及预测价值。结果观察组血清miR⁃449a低于对照组,miR⁃19b⁃3p高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组介入取栓后12 h血清miR⁃449a高于介入取栓前,miR⁃19b⁃3p低于介入取栓前,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良患者介入取栓后12 h血清miR⁃449a低于预后良好患者,miR⁃19b⁃3p高于预后良好患者,差异有统计学意义(P<0.05);根据介入取栓后12 h血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p表达均数为界分为低表达与高表达,血清miR⁃449a单独低表达所致预后不良的OR为7.619,miR⁃19b⁃3p单独高表达所致预后不良的OR为3.800,两者同时存在时呈正向交互作用OR为20.583,γ为2.265,为次相乘模型;介入取栓后12 h血清miR⁃449a、miR⁃19b⁃3p两者联合预测预后不良的AUC为0.892(95%CI:0.821~0.942),明显优于两者单独预测(P<0.05)。结论miR⁃449a与miR⁃19b⁃3p在急性脑梗死患者中呈异常表达,介入取栓后早期检测两者水平可作为预测预后不良的重要辅助途径。

miR-449a对食管鳞癌细胞Eca-109增殖、迁移、侵袭的影响及机制

目的探讨miR-449a对食管鳞癌细胞Eca-109增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法将食管鳞癌细胞Eca-109分为miR-449a组和NC组,分别转染miR-449a-mimics和NC-mimics;采用实时荧光定量PCR法检测两组miR-449a相对表达量,miR-449a组miR-449a相对表达量明显高于NC组,证实上调miR-449a表达的Eca-109细胞模型建立成功。采用CCK-8法、平板克隆形成试验检测两组细胞增殖能力(分别以培养12、24、48 h吸光度值和克隆数表示),细胞划痕试验检测细胞迁移能力(以细胞之间的距离表示),Transwell小室试验检测细胞侵袭能力(以侵袭到下室的细胞数量表示),流式细胞仪检测细胞周期比例。采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法分别检测两组miR-449a直接靶基因E2F3 mRNA及蛋白相对表达量。结果 miR-449a组细胞培养12、24、48 h时的吸光度值及克隆数、细胞之间的距离、侵袭到下室的细胞数量均低于NC组(P<0.05或<0.01)。miR-449a组G1期细胞比例高于NC组,S期细胞比例低于NC组(P均<0.05);两组G2/M期细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-449a组E2F3 mRNA及蛋白相对表达量均低于NC组(P均<0.01)。结论 miR-449a可抑制食管鳞癌细胞Eca-109的增殖、迁移和侵袭;抑制靶基因E2F3表达可能是其作用机制。

微小RNA与肝纤维化关系的研究进展

微小RNA（microRNAs,miRNAs）是一类大小为19～22个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,通过与靶mRNA完全或不完全互补配对,引起mRNA降解或翻译抑制,从而对基因转录后水平进行调控。