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人卵巢癌组织细胞中miR-134表达及与耐药的可能机制
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作者 刘新荣 刘永华 楚蔚琳 《中国计划生育学杂志》 2022年第3期500-504,共5页
目的:探讨微小miR-134在紫杉醇耐药的人卵巢癌细胞中表达及耐药的可能机制。方法:收集2016年3月-2020年3月本院治疗的卵巢癌患者,其中对紫杉醇耐药19例、非耐药21例病变标本行miR-134水平检测,采用Agilent Human miRNA V21.0芯片对紫杉... 目的:探讨微小miR-134在紫杉醇耐药的人卵巢癌细胞中表达及耐药的可能机制。方法:收集2016年3月-2020年3月本院治疗的卵巢癌患者,其中对紫杉醇耐药19例、非耐药21例病变标本行miR-134水平检测,采用Agilent Human miRNA V21.0芯片对紫杉醇耐药及敏感细胞进行miRNA基因表达谱分析,在miR-134中选出表达差异较大的基因簇,并验证芯片结果。利用生物信息学分析软件对miR-134的潜在靶基因进行预测,通过Western Blot对部分靶基因进行验证。结果:miR-134在对紫杉醇耐药的卵巢癌SKOV3-TR30细胞中低表达,分析软件预测得到miR-134潜在靶基因共128个,耐药卵巢癌细胞中靶基因c-Myc蛋白表达高于敏感卵巢癌细胞(P<0.05)。在SKOV3-TR30细胞中过表达miR-134后,c-Myc基因表达下降,其编码的蛋白也随之下降;SKOV3细胞中敲低miR-134表达后,c-Myc基因表达上升,其编码的蛋白也随之上升(均P<0.05)。结论:miR-134在紫杉醇耐药卵巢癌细胞中较敏感癌细胞中低表达且影响耐药,其机制可能是通过调节c-Myc蛋白表达而产生耐药性。 展开更多
关键词 卵巢癌细胞 耐药性 基因表达 微小mir-134 机制
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过表达miR-134b抑制CD133^+ U87胶质瘤干细胞增殖及侵袭 被引量:3
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作者 刘义锋 张保朝 +6 位作者 温昌明 闻公灵 周国平 张敬伟 贺海发 汪宁 李巍 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期637-642,共6页
目的探讨微小RNA-134b(miR-134b)在胶质瘤干细胞(GSC)中的作用及相关机制。方法实时定量PCR检测U87胶质瘤细胞系分离出的CD133^+ GSC和CD133^- GSC中miR-134b的表达量;包装慢病毒,构建过表达miR-134b的GSC,实时定量PCR检测其miR-134b、C... 目的探讨微小RNA-134b(miR-134b)在胶质瘤干细胞(GSC)中的作用及相关机制。方法实时定量PCR检测U87胶质瘤细胞系分离出的CD133^+ GSC和CD133^- GSC中miR-134b的表达量;包装慢病毒,构建过表达miR-134b的GSC,实时定量PCR检测其miR-134b、CD133、神经干细胞蛋白(nestin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和MMP-12 mRNA表达水平;Western blot法检测过表达miR-134b的GSC中Notch2、MMP-2、MMP-9和MMP-12蛋白表达;Transwell^(TM)侵袭实验检测过表达miR-134b对GSC侵袭能力的影响;建立U87细胞裸鼠成瘤模型,皮下注射过表达miR-134b(实验组)及空载体(对照组)的CD133^+ GSC,定期测量肿瘤大小,70 d后处死裸鼠,测定肿瘤质量,以探讨过表达miR-134b对在体肿瘤生长的影响。结果实时定量PCR检测结果表明,与CD133^- GSC相比,CD133^+ GSC中miR-134b表达显著下调;通过慢病毒包装的方法成功构建过表达miR-134b的GSC,其miR-134b的表达显著高于空载体对照细胞,而MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达无显著变化,而MMP-12的mRNA及蛋白表达均显著下降;Transwell^(TM)侵袭实验结果表明,与对照组相比,过表达miR-134b抑制CD133^+ GSC的侵袭能力;实验组裸鼠体内肿瘤体积显著低于对照组,与对照组相比,过表达miR-134b的实验组肿瘤质量也降低了42%。结论过表达miR-134b抑制CD133^+ GSC的生长和侵袭。 展开更多
关键词 微小RNA-134b(mir-134b) 基质金属蛋白酶(MMP) U87胶质瘤
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miR-134靶向EGFR对非小细胞肺癌增殖的影响 被引量:3
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作者 刘东利 贺小龙 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2016年第12期1063-1068,共6页
目的探讨微小RNA-134(miR-134)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测miR-134在NSCLC细胞株(A549、H252)和正常胚肺细胞株WI38中的表达情况;将A549和H252细胞分为3组,分别为空白... 目的探讨微小RNA-134(miR-134)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测miR-134在NSCLC细胞株(A549、H252)和正常胚肺细胞株WI38中的表达情况;将A549和H252细胞分为3组,分别为空白对照组(不转染)、miR-NC组(转染不相关siRNA)和miR-134组(转染miR-134 mimics)。分别于转染后24、48、72、96h收集细胞,采用MTS法检测细胞的增殖情况;转染后96h用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验检测miR-134与表皮生长因子受体(EGFR)3’-UTR的结合情况,QPCR检测过表达miR-134的A549和H252细胞中EGFR的表达情况。结果与WI38细胞相比,miR-134在A549细胞中的表达下调85.91%,在H252细胞中下调78.13%(P<0.05)。MTS检测显示,miR-134能显著降低A549和H252细胞的增殖能力,并呈时间依赖性。流式细胞仪检测显示,与空白对照组比较,miR-134组A549细胞的凋亡比例提高226.31%,H252细胞提高47.85%(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-134能与EGFR3’-UTR结合,显著降低荧光值(P<0.05)。QPCR检测显示,与空白对照组比较,转染miR-134 mimics后,EGFR在A549细胞中的相对表达量下调57.0%,在H252中下调35.0%,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-134在NSCLC中低表达,能通过靶向EGFR抑制NSCLC细胞增殖,并诱导凋亡。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌(NSCLC)微小RNA-134(mir-134)表皮生长因子受体(EGFR)增殖 凋亡
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