高效毛细管电泳法测定金针菇提取物中β-烟酰胺单核苷酸含量的初步研究

金针菇既是一种美味食品,又是较好的保健食品,营养成分十分丰富,建立了金针菇提取液中β-烟酰胺单核苷酸(β-nicotinamide mononucleotide,NMN)的高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE-DAD)含量测定方法。试验结果表明,检测波长218 nm,运行缓冲液30 mmol·L^(-1)硼砂缓冲液和10 mmol·L^(-1)磷酸二氢钠缓冲液(pH 9.2),分离电压25 kV,进样时间为5 s时,该方法能够检测到金针菇提取液中的β-烟酰胺单核苷酸,检测限为0.17μg·mL^(-1),并在0.03~2.00 mg·mL^(-1)范围内呈较好的线性关系,利用标准曲线获得回归方程y=2E+6x-345.69,R2=0.9994,将金针菇图谱中的相应β-烟酰胺单核苷酸(NMN)峰面积带入回归方程,计算得β-烟酰胺单核苷酸含量为27.57μg·mL^(-1)。方法学考察结果表明β-烟酰胺单核苷酸标准品迁移时间和峰面积相对偏差为0.68%和1.44%;且样品8 h内的迁移时间和峰面积的相对偏差分别为1.26%和2.82%;β-烟酰胺单核苷酸在金针菇样品中的回收率为89%~94%。结果表明该方法适用于金针菇提取液中β-烟酰胺单核苷酸的测定,为食用菌中β-烟酰胺单核苷酸含量的测定提供了新的方法。

高效毛细管电泳-电喷雾飞行时间质谱联用分析黄连中的生物碱

建立了高效毛细管电泳-电喷雾飞行时间质谱联用(HPCE-ESI-TOF/MS)快速定性分析黄连中生物碱类化合物的分析方法.使用未涂层石英毛细管,以50mmol/L乙酸铵-0.5%甲醇溶液(用氨水调至pH=7.2)作为运行缓冲液,分离电压为25kV;鞘液组成为50%甲醇-49.5%水-0.5%乙酸,鞘液流速为4μL/min;质谱选用正离子模式,碰撞电压(Fragmentor)为100V.结果表明,通过各色谱峰紫外光谱和质谱测得精确分子量结果,结合文献,对黄连中7种生物碱进行了鉴定.表明本方法简便、快速,是黄连中生物碱类化合物快速分离、鉴别的有效方法.

高效毛细管电泳-间接紫外吸收检测法测定食品中的氨基酸

研究了鸟氨酸、脯氨酸和谷氨酰胺的高效毛细管电泳 间接紫外吸收检测的特征。以5mmol/L对氨基苯磺酸钠 10mmol/LKH2PO4(pH11 5)为运行缓冲液,在分离电压12kV下,于11min实现了上述3种氨基酸的基线分离,迁移时间和峰高的相对标准偏差分别小于0 72%和2 0%,检测限分别为6 78,8 71,7 86mg/L。应用该法测定食品中的氨基酸及各氨基酸在样品中的加标回收率,3种氨基酸的加标回收率为96 8%～104%。

高效毛细管电泳法测定酱油中5′-单磷酸核苷酸

建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-环糊精为分离缓冲溶液,50mmol/L醋酸溶液为样品介质,检测波长为254nm。GMP及IMP的校正峰面积与质量浓度在5～100mg/L范围内具有良好线性关系,线性相关系数分别为0.9998和0.9997,检出限均为2mg/L,定量限均为5mg/L。用该法测定了9种酱油,并与文献报道的高效液相色谱法的结果进行比较,结果满意。

高效毛细管电泳法手性分离D-氨基酸取代胸腺五肽类似物的研究

采用高效毛细管电泳法分离两对D-氨基酸取代的胸腺五肽类似物。对影响分离的缓冲液pH值、电泳温度、电泳电压等进行了系统的研究。用含20mmol/L2,6-二甲基-β-环糊精(DM-β-CD),40mmol/L磷酸盐缓冲液(Ⅰ:pH6.03;Ⅱ:pH5.05)作运行缓冲液,柱温15℃,电压20kV,使样品获得基线分离,取得了满意的分离结果。结果显示,两组样品的D-氨基酸取代物均比L-氨基酸取代物出峰早,提示D-氨基酸取代物的电泳移动速度较快,与DM-β-CD的结合稳定性较L-氨基酸取代物弱。

高效毛细管电泳测定α-乳白蛋白、β-乳球蛋白A及β-乳球蛋白B的纯度

采用毛细管电泳分析手段,用校正峰面积归一化法同时测定了本实验室购得的α-Lac、β-LgA及β-LgB三个蛋白参考物的纯度,其值分别为75.4%、84.5%和76.9%,相对标准偏差分别为1.6%、0.7%及1.4%。所得结果与应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺平板凝胶电泳法的测定结果进行了比较,并讨论了造成二者差异的原因。结果表明毛细管电泳法是分析此类蛋白的有效潜在手段。

3种新型α_1-受体阻断剂的高效毛细管电泳手性分离

目的 建立 3种新型α1 受体拮抗剂阿夫唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪的手性分离方法。方法 通过探讨环糊精的种类、浓度、缓冲液的浓度、pH值对分离的影响 ,选择手性分离的最佳条件。结果 3种新型α1 受体阻断剂的光学异构体得到基线分离。

高效毛细管电泳法手性拆分盐酸2-氨基萘满对映体

目的分离盐酸2-氨基萘满对映体。方法采用高效毛细管区带电泳法,以高磺化-β-环糊精作为手性添加剂,考察了不同环糊精种类、缓冲液pH、分离电压、温度、进样量、分离模式等对分离效果的影响。结果采用反相分离模式,PDA检测器在190 nm处检测,温度25℃,分离电压-18 kV,进样量0.5 psi,分离度3.4,检测限10μg.m l-1。结论所用方法可快速有效地分离盐酸2-氨基萘满对映体,且重复性好,可用于其手性拆分及纯度测定。

高效毛细管电泳联用电喷雾-质谱法研究新型抗癌铂配合物的稳定性

研究了新型抗癌铂配合物3，5-二异丙基水杨酸-1，2-环己二胺合铂（11）（SM54111）在溶液中的稳定性。采用高效毛细管电泳（HPCE）法，分离在pH3．7～9．0的缓冲液中铂配合物与其降解产物，联用电喷雾质谱（ESI-MS／MS）检测，确证降解产物的结构。结果表明，SM54111溶液，在pH5．0～9．0时基本稳定，pH〈5．0时发生解离反应。证实该新型抗癌铂配合物SM54111在生理pH范围的溶液中稳定。在pH4．5时，以SM54111色谱峰面积计算，得到降解反应速率常数K=0．133h^-1，半衰期t1/2=5．6h。降解产物为母体化合物Pt—O键水解断裂的单齿水杨酸-Pt配合物，同时观察到Pt配合物的新裂解方式，可以经过亲柱攻击和重排反应同时脱去2个中性分子（C2H7N和H2），并证实其电离程度强烈依赖于电离原条件。该结果可为研究SM54111的药代动力学和药理学提供方法和参考。

高效毛细管电泳法分离4-羟基-苯异丙胺对映体

在内径100μm的毛细管内,以甲基丙烯酸甘油酯(GMA)和双(六-O-丁烯二酸单酯)-β-环糊精为单体原位聚合制得了手性毛细管电色谱整体柱,采用高效毛细管电泳法拆分了4-羟基-苯异丙胺对映体。考察了背景电解质的pH值、运行电压、柱温、流动相的配比等因素对分离度的影响。在背景电解质pH为4.2、运行电压20 kV、柱温18℃、乙腈-9 mmol.L-1磷酸盐缓冲溶液(60+40)为流动相、在4 min内成功地分离了4-羟基-苯异丙胺对映体,其分离度达到1.56。

高效毛细管电泳法测定桑叶中β-蜕皮激素

用高效毛细管电泳法测定了桑叶中蜕皮激素的含量.结果表明,β-蜕皮甾酮的质量浓度在0.01～1.20mg/mL内与相应峰面积的线性关系良好(r=0.9968),桑叶中的蜕皮激素能够完全分离,方法快速简便,重现性好.

酮洛芬与蛋白结合作用的高效液相色谱-迎头分析法研究及其与高效毛细管电泳迎头分析法的比较

采用高效液相色谱 迎头分析法(HPLC FA),以67mmol/L(pH7 4,I=0.17mol/L)的等渗磷酸盐缓冲液为流动相,PinkertonGFFⅡ S5 80内表面反相柱(150mm×4 6mmi d ,5μm)为固定相,254nm下检测,研究了酮洛芬与人血清白蛋白(HSA)的结合作用,通过非线性回归参数估算求得酮洛芬与HSA的结合参数。与高效毛细管电泳 迎头分析法(HPCE FA)相比,HPLC FA法具有高灵敏度的优势,但进样量较大,分析时间较长。HPLC FA法的测定结果表明,HSA分子上酮洛芬的两类结合位点(第一类和第二类)共存。当酮洛芬与HSA的量比较低时,酮洛芬主要结合在第一类位点;当它们的量比较高时,结合才发生在第二类结合位点。

核苷酸与β-环糊精及硼酸盐的络合作用在高效毛细管电泳分离核苷酸中的应用

核苷酸和 β_环糊精 (β_CD)及硼酸盐之间存在络合作用 ,可应用于核苷酸的高效毛细管电泳分离 ,在10mmol/Lβ_CD和20mmol/L硼酸盐存在时 ,实现了8种单磷酸核苷酸的分离测定 ;讨论了 pH值、β_CD浓度。

高效毛细管电泳法测定蜂蜜中单糖的含量

采用高效毛细管电泳技术,经α-萘胺衍生化,以鼠李糖作内标物,分别对五种蜂蜜中葡萄糖和果糖的含量进行了测定,获得满意结果。

高效毛细管电泳法检测牛奶中的青霉素中间体以及3种青霉素类药物

建立了高效毛细管电泳(HPCE)同时检测牛奶中青霉素类抗生素中间体6-氨基青霉烷酸(6-APA)以及3种青霉素类药物青霉素钾(PEN)、氨苄青霉素(AMP)和阿莫西林(AMO)的方法。利用正交实验设计,对HPCE中的缓冲液离子浓度和pH值、分离电压、分离温度等分离条件进行了优化。结果表明:在采用40 mmol/L磷酸二氢钾-20 mmo l/L硼砂缓冲体系(pH 7.8)、分离电压为28 kV、分离温度为30℃的电泳条件下,4.5 min内可以实现上述4种青霉素类药物的快速分离检测。各组分在1.56～100 mg/L范围内有良好的线性,相关系数(r 2)为0.997 9～0.999 8,加标回收率为84.91%～96.72%,相对标准偏差(RSDs)为1.11%～9.11%(n=6)。该方法简便、快速,可以应用于市售牛奶中4种青霉素类药物的快速检测。

毛细管电泳用β-环糊精作改性剂分离血清中吗啡和可待因

建立了血清中吗啡和可待因的毛细管电泳分离分析方法。讨论了电泳分离模式、缓冲液 p H、β-环糊精 (β-CD)浓度对分离的影响。吗啡和可待因检测限均为 0 .1μg/ m L,不同浓度的萃取回收率分别大于 92 %和 93 % ,迁移时间的相对标准偏差分别小于 0 .44 %和 0 .3 9% ,峰面积的相对标准偏差分别小于 3 .2 %和 4.1 %。

盐酸雷莫司琼的高效毛细管电泳手性分离

目的:建立盐酸雷莫司琼中S-异构体检查的高效毛细管电泳方法。方法:采用石英毛细管柱(50μm×50 cm,有效长度41.5 cm),运行缓冲液为20 mmol/L的磷酸二氢钠溶液(含1%的磺化-β-环糊精,磷酸调pH至3.0)。操作电压为-20 kV,柱温为25℃,检测波长为210 nm。结果:S-异构体和R-异构体的分离度为8.2,线性范围4.048-80.96μg/mL,平均回收率为99.80%,检测限为2μg/mL。结论:所建立的高效毛细管电泳方法灵敏、简便、准确、可靠,适用于盐酸雷莫司琼中S-异构体的检查。

毛细管电泳-激光诱导荧光法测定缺氧缺血新生大鼠脑组织中氨基酸

建立了新生儿缺氧缺血性脑病(H IE)发生时脑组织中兴奋性氨基酸(EAA)含量的高效毛细管电泳-激光诱导荧光检测(CE-LIF)的新方法。方法的最佳条件为:40 mmol/L硼砂溶液,分离电压20 kV,压力进样5 s,λem=488 nm、λex=560 nm。随机分为假手术组、新生儿缺氧缺血性脑病(H IE)组,小剂量地塞米松(DXM)组和大剂量DXM组的新生大鼠脑组织中EAA的含量测定,结果表明:假手术组EAA含量较低,H IE组EAA含量显著升高,大、小剂量DXM预处理后,EAA含量较H IE组有不同程度的降低。