包裹阿霉素的高分子材料微泡声学造影剂制备及显影效果实验研究

目的探索包裹药物的微泡声学造影剂制备方法,观察其体内外显影效果。方法采用在体内能生物降解的人工合成高分子聚合物乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)作为成膜材料,通过双乳化法和冷冻干燥技术制备包裹阿霉素(ADM)和空气的PLGA微泡声学造影剂(ADM-PLGA声学造影剂)。光学显微镜进行形态学观察。体外和动物实验观察其显影效果。结果采用本法成功制备了ADM-PLGA声学造影剂;光镜观察其形态规则,呈球型,大小均匀,最大粒径<4μm;体内外显影效果好。结论通过本方法可以合成包裹水溶性药物的微泡声学造影剂,为应用超声波和微泡造影剂进行体内药物定位释放研究打下了基础。

整合素介导微泡声学造影剂与白细胞粘附的实验研究

目的 :研究白细胞与蛋白微泡声学造影剂的粘附过程及机制。方法 :光镜和电镜观察离体不同状态下的白细胞与蛋白微泡的粘附过程 ,流式细胞仪测定白细胞与微泡混合后 ,在存在或缺乏白细胞整合素的情况下 ,荧光强度的变化。结果 :蛋白微泡与PMA激活的白细胞接触后 5min大量结合到白细胞表面 ,未经激活的白细胞表面少有微泡粘附 (2 0 30± 2 67vs4 50± 1 43 ,P <0 0 1 )。1 5min时微泡被吞噬入细胞内 ,并保持形态完整至 30min。两者的结合可被Mac - 1mAb大部分阻止 (P <0 0 1 ) ,VLA - 4mAb轻度阻止 (P <0 0 5)。结论 :蛋白微泡声学造影剂可经 β2 整合素Mac - 1和VLA - 4介导与激活的白细胞结合 ,并进入细胞内从而在炎症部位停留 ,保持形态完整约 1 5min 。

超声微泡破碎技术促进人MxA基因在小鼠肝脏转染的实验研究

目的:观察静脉注射基因和微泡声学造影剂,同时经皮超声辐照肝脏的方式是否能增强外源MxA基因在小鼠肝脏中的定位表达,并探讨不同辐照参数对该基因表达的影响。方法:(1)不同转染方法对转染效率的影响:采用昆明小鼠24只,随机分为4组。分别为质粒转染组、微泡+质粒组、超声+质粒组和微泡+超声+质粒组。7d后分别取肝、心、脾、肾、肺和骨骼肌,采用间接免疫荧光法进行MxA蛋白的半定量检测。(2)不同辐照参数对基因表达的影响:采用昆明小鼠20只,随机分为4组。按转染不同超声辐照声强分为0.25W/cm2组、0.5W/cm2组、0.75W/cm2组和1.0W/cm2组。7d后分别取肝组织,采用间接免疫荧光法进行MxA蛋白的半定量检测。结果:(1)肝脏每高倍视野表达阳性细胞数在微泡+超声+质粒组最高,其次为超声+质粒组,再次为微泡+质粒组,表达最少的为质粒组;各组间两两比较,均有显著统计学差异(P<0.001);超声+微泡+质粒组中检测发现,脾组织偶有MxA表达阳性细胞,其余各组仅在肝组织存在MxA表达。(2)肝脏每高倍视野表达阳性细胞数0.5W/cm2组最高,其次为0.75W/cm2组,再次为1.0W/cm2组,0.25W/cm2组表达最少;各组间两两比较,均有显著统计学差异(P<0.001)。结论:超声微泡破碎技术能显著增强外源MxA基因在小鼠肝脏中的靶向性表达;超声辐照频率不变的条件下,在一定范围内增加声强,能促进外源MxA基因在小鼠肝脏表达;当声强为0.5W/cm2时,转染率最高;该技术生物安全性好,为肝脏疾病的基因治疗提供了一项高效、安全的转染技术。

超声溶栓的研究进展

血栓是危害人类健康的常见病，目前国内外公认的有效治疗方法是早期使用酶性溶栓疗法，国内外目前多用尿激酶（UK）、组织纤溶酶（t-PA）。对酶性溶栓药物的使用，强调治疗窗．如脑血栓一般要求在发病后6h内使用．还由于酶性溶栓药物可引起出血等严重并发症，使临床应用受到限制。随着对超声波生物学效应的研究不断深入。近年对超声溶栓的研究越来越引起人们的重视。目前，国内外学者在这方面开展了许多研究．根据超声波作用特点．超声溶栓技术主要应用在以下两个方面：一是已较成熟的导管介入超声溶栓术，低频高能超声通过导管的能量传送直接在血管内消融血栓：另一方面是体外治疗性超声（ETUS）辅助溶栓，将超声探头置于血栓形成处相对应的体表部位，超声头不接触血栓，经皮发射超声，经过水囊、机体组织或骨骼等媒介传递，聚焦于血管内血栓，同时联合溶栓酶和（或）微泡声学造影剂介导消融血栓，目前认为可以增强药效并减少并发症，近年来在体外和动物实验中发展迅速，本文现将超声溶栓的机制和研究进展作一简要综述。