用于毛细管电泳或微芯片电泳的半导体激光诱导荧光检测方法

激光诱导荧光是毛细管电泳和微芯片电泳重要的检测方法。半导体激光器(或称激光二极管)以其价格低、体积小、寿命长、稳定可靠的优势,在激光诱导荧光分析方面,得到了人们的广泛重视。特别是在分析仪器小型化的时代,会带来巨大的影响。本文就其与毛细管电泳和微芯片电泳联用的检测装置、检测方法、荧光试剂、分析应用和发展趋势作了综述。

毛细管电泳微芯片在临床尿蛋白检测中的应用研究

用微芯片毛细管电泳法对临床患者尿蛋白进行了分离,初步探讨了用于判断肾损伤的应用前景.以pH10.3,75mmol?L-1的硼酸盐缓冲液作为芯片电泳缓冲体系,利用蛋白质的紫外吸收特性,在210nm波段检测吸光度并进行信号收集和分析.研究两种添加剂对提高尿蛋白分离效率的影响,分析了肾病综合症、妊娠高血压症、风湿性心脏病和多发性骨髓瘤等患者尿样本,并与美国Helena电泳系统分析结果对比,得到了较一致的结果.

应用微流路芯片高压凝胶电泳检测精子RNA

目的检测精子的RNA,以保证后续实验有可靠、准确的结果。方法收集成年男性活力正常的精子,提取其RNA,应用微流路芯片高压凝胶电泳检测精子总RNA,以健康成人淋巴细胞总RNA作对照。结果检测发现在人类精子中有大量的基因表达。精子RNA的电泳图出现两个峰,两峰的位置都较正常体细胞提前,先出的峰其形相对尖锐,后出的峰其形较宽,跨越5S,但仍呈典型的倒U形分布,两峰的比值,远远大于2∶1,在其他位置无明显吸收峰。结论应用微流路芯片高压凝胶电泳,可进行精子RNA简单、直观地检测和质量控制。

微芯片电泳及毛细管电泳在筛查急性髓系白血病FLT3-ITD基因突变中的应用研究

本研究旨在比较微芯片电泳及毛细管电泳在急性髓系白血病(AML)FLT3-ITD基因突变检测中的可靠性。应用PCR-微芯片电泳和PCR-毛细管电泳法同时检测214例初治AML患者DNA样本FLT3-ITD基因突变,并通过直接测序法进行序列分析。PCR-微芯片电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性151例,阳性58例(58/214,27.1%),可疑阳性5例(5/214,2.3%);PCR-毛细管电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性147例,阳性67例(67/214,31.3%)。在毛细管电泳结果为阳性的67例样本中,其中4例微芯片电泳结果为阴性,5例为可疑阳性,用直接测序法进行检测,结果均为突变阳性。这一结果揭示,PCR-毛细管电泳法用于检测FLT3-ITD突变更为准确,虽然微芯片电泳组与毛细管电泳组FLT3-ITD突变检测阳性率并无显著差异(卡方检验,P>0.05)。结论:PCR-微芯片电泳与PCR-毛细管电泳均可作为简便的FLT3-ITD基因突变筛查方法,但作为新的检测手段,PCR-毛细管电泳法准确度与测序法一致、可用,而PCR-微芯片电泳法作为诊断检测的方法,其准确度有待于改进。

微芯片毛细管电泳法快速测定盐酸二甲双胍

提出用带有非接触电导检测的微芯片毛细管电泳法快速测定片剂中盐酸二甲双胍的含量。取盐酸二甲双胍片20片,剥除糖衣后混匀研细,称取0.100 0g,用水超声溶解、过滤,滤液定容至100mL供毛细管电泳分析。十字通道芯片使用前按规定进行清洗。试验中采用含5%(体积分数)乙醇和0.1mmol·L-1十二烷基磺酸钠的2.0mmol·L-1柠檬酸缓冲溶液作为分离介质,进时间为10.0s,分离电压为1.3kV,可在1min内实现分离和测定。盐酸二甲双胍的质量浓度在10.0~110.0mg·L-1范围内与相应峰高呈线性关系,检出限(3S/N)为1.0mg·L-1。应用此方法分析了3个片剂样品,并用标准加入法做回收试验,测得回收率在94.5%~103%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在0.63%~1.1%之间。

微芯片毛细管电泳法快速测定黄花鱼中的碱性嫩黄O

采用微芯片毛细管电泳非接触电导检测法,对黄花鱼中非法添加的工业染料碱性嫩黄O进行了分析。探讨了缓冲液种类、浓度,分离电压和进样时间等因素对分离检测的影响。实验选择5.0 mmol/L乳酸缓冲液(pH=3.29)、1.8 kV分离电压,在1.0 min内实现了碱性嫩黄O的快速分离测定。在优化条件下,碱性嫩黄O浓度的线性范围为5.0～100.0 mg/L,黄花鱼中碱性嫩黄O的检出限为0.2 mg/kg,该法可成功测定黄花鱼中碱性嫩黄O的含量。

微芯片毛细管电泳快速测定盐酸洛美沙星

采用微芯片毛细管电泳非接触电导检测法快速测定了盐酸洛美沙星胶囊中盐酸洛美沙星的含量。探讨了缓冲液类型、浓度,添加剂种类、浓度及分离电压、进样时间等因素对分离检测的影响。实验采用5.0mmol/L HAc(pH=2.5)+5%乙醇为缓冲溶液,分离电压3.0 kV,在1 min内实现了盐酸洛美沙星的快速分离测定。优化条件下盐酸洛美沙星的线性范围为20.0～250.0μg/mL,检出限为10.0μg/mL(S/N=3),RSD=2.0%,加标回收率为98.6%～103%。

新型快速准分子激光微加工方法制备毛细管电泳芯片的研究

选用聚合材料聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)代替玻璃,石英等作为毛细管电泳芯片的基片材料.在19kV,5Hz及5mm/min的加工参数下,采用新型快速准分子激光微加工方法完成了毛细管电泳芯片的制备.实验结果表明该方法加工过程简单,耗时短,自动化程度高,有效提高了芯片成品率和加工质量.芯片与相同尺寸的盖片在105℃、160N、恒温20min条件下通过热压键合在一起,得到密闭性好的整体芯片.最后在芯片上应用激光诱导荧光检测法对Cy5染料完成了分离检测,获得了重复性很好的检测信息.

微芯片毛细管电泳电化学/电化学发光同时检测药物分子

提出了基于毛细管电泳芯片的电化学和电化学发光同时检测技术.在此芯片系统中,三联吡啶钌Ru(bpy)2+3[Tris(2,2'-bypiridyl) ruthenium(Ⅱ)]既作为电化学发光(ECL)检测所需的发光试剂与被分析物反应,生成激发态的Ru(bpy)2+3*,从而产生电化学发光信号;又具有催化作用参与电极表面的电化学反应,从而得到增强的电流响应.电化学信号与电化学发光信号同时产生并被分别纪录,从而实现了电化学和电化学发光的同时检测.这种芯片由两部分构成,分别是带有分离和进样通道的聚二甲基硅氧烷(PDMS)层和ITO(Indium tin oxide)工作电极底片.PDMS层与ITO电极底片采用可逆键合的方式组成芯片,该芯片大大简化了操作过程,提高了发光信号的采集效率.在整个实验过程中,ITO电极表现出良好的稳定性,可长时间多次使用.选用山莨菪碱和氧氟沙星两种药物分子作为被分析物,对芯片系统性能进行了表征.

采用激光制备毛细管电泳芯片微结构的研究

提出了一种采用248 nm准分子激光直写微加工系统制备聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)基毛细管电泳芯片的新方法。主要对毛细管电泳芯片的样品池和微通道进行了实验研究。在19 kV,20 Hz,500个脉冲条件下,厚度为1.5 mm PMMA表面获得直径为1 mm、锥度为4.7°的池;对宽度均为100μm,深度不同的微通道底面进行了键合前后比较。最后在键合后宽度为100μm、深度为30μm的芯片上成功地完成了进样实验。

毛细管电泳法和微芯片电泳法在糖类分析中的应用

糖类是三大生命物质之一,它参与多种生物代谢和其他生命活动。由于糖类的结构复杂,对它的研究方法要求较高。毛细管电泳以其快速、高效和高灵敏度、所需样品少等特点被广泛应用于糖类化合物的分析。而近几年快速发展的微芯片技术也在糖类分析中得到应用。本文就毛细管电泳法和微芯片电泳法在各类糖中的应用进行了阐述。

新的芯片毛细管电泳及其联用技术研究应用进展

微流路芯片毛细管电泳是20世纪90年代才发展起来的用作微型毛细管电泳分离的新技术。微流路芯片毛细管电泳质谱联用技术是众多仪器联用中的发展前沿。文章综述微流路芯片的制作,微流路芯片毛细管电泳的分离原理、装置和测定技术及微流路芯片毛细管电泳质谱联用技术以及这类分析技术在生物技术和生命科学领域研究中的应用进展。

微纳流控界面的建立及其在芯片毛细管电泳中的定位浓度极化

利用微加工技术可以在玻璃、PDMS、单晶硅等材料上建立纳米级通道界面。该界面上的特殊效应备受关注，并成为纳流控学的重要内容。浓度极化效应是重要的微纳流控效应之一，主要发生在电场极化的表面带电的离子通道界面上，是由于通道的尺度与表面双电层重迭的结果。

集成毛细管电泳芯片研究进展

集成毛细管电泳芯片是一种新型的微全分析系统,它具有被分析的样品用量少、分析速度快、体积小便于携带、成本低等优点.介绍了该芯片的产生和发展过程,综述了芯片的结构、进样方式、检测方法等方面的进展和存在的问题;简述了其主要应用领域并展望了其应用前景.

金属离子Cu^(2+),Co^(2+),Ni^(2+)的微芯片电泳分离及化学发光检测

根据流动注射 -化学发光的通用实验装置图 ,设计并通过标准光刻技术 ,湿化学刻蚀及热键合技术制作了玻璃微芯片 .在该芯片上将毛细管电泳分离与化学发光检测相联用 ,鲁米诺和H2 O2 化学发光反应溶液通过实验室自制的微流泵输送 .对所用电压 ,缓冲溶液和发光试剂流速等实验条件进行了优化 .在所选的最佳条件下 ,成功地实现了金属离子Cu2 + ,Co2 + ,Ni2 + 的电泳分离 -化学发光检测 ,检测限分别为 5 0× 10 -9,5 0× 10 -11和 1 0× 10 -7mol/L .

微流路生物芯片的研制

运用光刻、刻蚀技术在载玻片上刻蚀出条宽 70 μm、深 30 μm、长 7cm的沟槽 ,与另一载玻片键合 ,形成一微流路沟道 ,研制出了用于生物电泳技术的微流路生物芯片。在该芯片的研制中 ,克服了湿法腐蚀、断线、键合等技术难题。该芯片已经交付合作单位使用 。

新型安培检测毛细管电泳微系统

将电极、６ｃｍ分离毛细管、缓冲池、检测池集成于８．４×５．０ｃｍ有机玻璃片上，制作了一个毛细管电泳微系统。以碳纤维微盘电极作为工作电极，采用三电极体系柱端检测了１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ多巴胺（ＤＡ），具有良好的重现性，检测限３．６×１０－８ ｍｏｌ／Ｌ，线性范围５×１０－７～１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ，并在该系统上分离了邻苯二酚（ＣＡ）和多巴胺的混合物。

集成毛细管电泳芯片的设计

利用ANSYS软件对集成毛细管电泳芯片微沟道内样品流动情况进行模拟,获得了不同进样模式下微沟道的结构与流体流速之间的关系,并以此为依据对芯片整体结构参数进行设计:毛细管沟道最终尺寸为宽度16μm,深度10μm,有效分离长度为3.5cm的圆角转弯形沟道,从而确定整个芯片设计。

基于线阵电极电泳芯片的微全分析系统

介绍了用于生化分析的一种新型微分析系统 ,并根据模拟计算和现有实验参数给出了设计方案 ,包括电泳芯片的设计、工艺制作、微机控制系统以及初步实验结果。新型的基于线性阵列电极的微型电泳芯片将会大大降低电泳电压 ,减小实验中的热效应 ,能够灵活设定分离时间、长度、电压等电泳的各项条件 ,可满足多种分离需求。新型材料PDMS使芯片制备更简单 。