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微测序技术检测12个Y-SNP及其遗传多态性 被引量:6
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作者 杜宏 张林 +3 位作者 周斌 张海军 梁伟波 沈月华 《法医学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期125-129,共5页
目的应用SNaPshotKit对Y染色体上12个SNP位点进行快速而准确的检测,对四川地区78个汉族男性无关个体进行群体遗传学研究,并对陈旧骨骼和性犯罪案件的相关物证进行检验。方法对SRY2627、SRY1532、M13、M20、SRY8299、Tat、M69及M9、92R7... 目的应用SNaPshotKit对Y染色体上12个SNP位点进行快速而准确的检测,对四川地区78个汉族男性无关个体进行群体遗传学研究,并对陈旧骨骼和性犯罪案件的相关物证进行检验。方法对SRY2627、SRY1532、M13、M20、SRY8299、Tat、M69及M9、92R7、M17、M19、M112两组共12个Y-SNP位点进行复合扩增,PCR产物经纯化处理后,采用SNaPshotKit试剂结合毛细管电泳技术对单核苷酸多态性进行检测。结果建立了12个Y-SNP位点的微测序快速检测系统,在四川地区人群中发现M9、SRY8299二个位点存在变异。结论复合扩增结合微测序技术能够同时对多个Y-SNP的多态性进行快速而准确的检测,建立的检测系统在法医学个体识别中具有应用价值。 展开更多
关键词 Y—SNP 微测序 遗传多态性 复合扩增
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微测序技术检测武汉汉族群体26个Y-SNPs的遗传多态性 被引量:2
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作者 黄代新 种书亚 +2 位作者 易少华 杨荣芝 梅焜 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期64-70,共7页
目的研究汉族群体26个Y-SNPs的遗传多态性,探讨其在法医学和人类进化研究中的应用价值。方法自行设计引物并构建用于检测26个Y-SNPs的3个SNaPshot复合分型检测体系,然后用构建的复合分型检测体系对120名武汉汉族男性无关个体进行分型。... 目的研究汉族群体26个Y-SNPs的遗传多态性,探讨其在法医学和人类进化研究中的应用价值。方法自行设计引物并构建用于检测26个Y-SNPs的3个SNaPshot复合分型检测体系,然后用构建的复合分型检测体系对120名武汉汉族男性无关个体进行分型。结果成功构建了用于检测26个Y-SNPs的3组荧光复合扩增检测体系,每一复合体系中,同一位点的2个不同等位基因显示为不同颜色的产物峰,不同位点的等位基因之间片段大小不同。所有26个Y-SNPs在武汉汉族群体中均具有遗传多态性,120名武汉汉族男性个体中共检出26种单倍型,其频率范围为0.008 3~0.125 0,单倍型多样性为0.934 9。结论所构建的26个Y-SNPs荧光复合扩增检测体系具有简便、高效、准确的特点,在法医学应用和群体进化研究中具有一定实用价值,可作为Y-STRs标记的有效补充。 展开更多
关键词 Y染色体 单核苷酸多态性 SNaPshot微测序 单倍型
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应用焦磷酸微测序技术行HLA-DRB基因型分析 被引量:2
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作者 袁建林 武国军 +6 位作者 薛丽 赵锦荣 白玉杰 杨芳 王禾 张运涛 杨力军 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1164-1166,1170,共4页
目的应用焦磷酸微测序技术进行HLA-DRB基因型分析。方法PCR扩增外显子2基因片段,经链亲和素包被磁珠纯化、制备单链DNA测序模板,应用焦磷酸微测序技术进行实时测序和HLA-DRB基因分型。结果焦磷酸微测序技术一次可判读40~80个碱基,采用... 目的应用焦磷酸微测序技术进行HLA-DRB基因型分析。方法PCR扩增外显子2基因片段,经链亲和素包被磁珠纯化、制备单链DNA测序模板,应用焦磷酸微测序技术进行实时测序和HLA-DRB基因分型。结果焦磷酸微测序技术一次可判读40~80个碱基,采用3-4个微测序可以判读全部扩增区域的多态性位点,测序结果与HLA数据库基因序列比较,可准确进行HLA-DRB基因型分析。结论焦磷酸微测序技术应用于HLA-DRB基因型分析具有高分辨率、高通量和快速等优点,该方法可应用于器官及骨髓移植的供体/受体筛查。 展开更多
关键词 人白细胞抗原 焦磷酸微测序 基因型 器官移植
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6个线粒体DNASNP的微测序技术检测及群体遗传学研究 被引量:3
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作者 杜冰 杜宏 +1 位作者 周斌 张林 《川北医学院学报》 CAS 2015年第1期15-19,共5页
目的:应用SNa Pshot技术建立一个检测6个线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的复合检测系统,并利用其对四川地区140名汉族无血缘关系个体进行群体遗传学研究。方法:选择mt DNA上70... 目的:应用SNa Pshot技术建立一个检测6个线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的复合检测系统,并利用其对四川地区140名汉族无血缘关系个体进行群体遗传学研究。方法:选择mt DNA上709、6455、10398、12705、14569和15043等6个SNP位点进行复合扩增,利用荧光标记单碱基延伸技术(SNa Pshot kit)结合毛细管电泳技术对SNP进行检测。结果:6个SNP位点均具有遗传多态性,在140名个体中检测到12种单体型,单体型多样性为0.763 8。结论:该复合检测系统能快速而准确的对样本进行分型,在法医学实践中具有应用价值。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性(SNP) 线粒体DNA 复合扩增 微测序 毛细管电泳
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7个mt-SNP的微测序技术检测及群体遗传学研究 被引量:1
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作者 杜宏 王艳云 +4 位作者 周斌 张海军 梁伟波 江继平 张林 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期450-453,共4页
目的建立基于SNaPshot Kit的线粒体上7个单核苷酸多态性(SNP)位点快速、准确的检测方法,并利用该方法对四川地区85个汉族男性无关个体进行群体遗传学研究。方法对4216、7028、10398、10400、12308、12705、14766共7个mt-SNP位点进行复... 目的建立基于SNaPshot Kit的线粒体上7个单核苷酸多态性(SNP)位点快速、准确的检测方法,并利用该方法对四川地区85个汉族男性无关个体进行群体遗传学研究。方法对4216、7028、10398、10400、12308、12705、14766共7个mt-SNP位点进行复合扩增,采用SNaPshot Kit结合毛细管电泳技术对SNP进行检测。结果建立了7个mt-SNP位点的微测序快速检测系统,在四川地区人群中发现10400、12705和10398位点存在变异,共发现有4种单体型。结论复合扩增结合微测序技术能够同时对多个mt-SNP的多态性进行快速、准确的检测,在法医学实践中有一定应用价值。 展开更多
关键词 mt-SNP 微测序 遗传多态性 SNAPSHOT
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用焦磷酸微测序技术进行HLA-DRB基因型分析(英文)
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作者 袁建林 武国军 +6 位作者 薛丽 赵锦荣 白玉杰 杨芳 王禾 张运涛 杨力军 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第18期1633-1637,共5页
目的:探索应用焦磷酸微测序技术进行HLADRB基因型分析.方法:PCR扩增外显子2基因片段后,应用焦磷酸微测序技术进行实时测序和HLADRB基因分型.结果:磷酸微测序反应可以判读HLADRB基因的多态性位点,最长可判读90个核苷酸,采用特异性等位基... 目的:探索应用焦磷酸微测序技术进行HLADRB基因型分析.方法:PCR扩增外显子2基因片段后,应用焦磷酸微测序技术进行实时测序和HLADRB基因分型.结果:磷酸微测序反应可以判读HLADRB基因的多态性位点,最长可判读90个核苷酸,采用特异性等位基因和PCR反应所得到的纯化DNA对血样中的杂合子进行分析,测序结果与HLA数据库基因序列比较,可准确进行HLADRB基因型分析.结论:用焦磷酸微测序技术进行HLADRB基因型分析具有高分辨率的优点,该方法可应用于临床器官移植的供体/受体筛查. 展开更多
关键词 多态现象(遗传学) HLA抗原 焦磷酸微测序 基因型
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微测序技术分析人类单核苷酸多态性 被引量:2
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作者 苏畅 刘敬忠 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第4期36-38,共3页
关键词 微测序技术 人类 单核苷酸多态性 DNA列多态性
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基于多重PCR-质谱微测序技术的结核分枝杆菌对一线治疗药物耐药性检测系统构建 被引量:2
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作者 徐晓娜 赵欣 +3 位作者 欧喜超 肖迪 宋衍燕 赵雁林 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期586-593,共8页
目的构建一种基于多重聚合酶链式反应-质谱微测序技术的结核分枝杆菌耐药基因多位点检测方法和检测模块,实现结核分枝杆菌对一线抗结核药物的高通量快速检测,为结核病诊疗提供一种新型技术支撑。方法通过对5个单核苷酸多态性位点靶基因... 目的构建一种基于多重聚合酶链式反应-质谱微测序技术的结核分枝杆菌耐药基因多位点检测方法和检测模块,实现结核分枝杆菌对一线抗结核药物的高通量快速检测,为结核病诊疗提供一种新型技术支撑。方法通过对5个单核苷酸多态性位点靶基因进行多重PCR扩增、单碱质量探针延伸及分子质量测定,同时完成16个突变位点、26种突变型的检测,实现结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、吡嗪酰胺和乙胺丁醇等一线治疗药物抗性的通量检测。采用40例结核分枝杆菌样本、50例呼吸道感染患者咽拭子样本进行检测体系准确性及特异性验证。结果本研究构建了基于5重PCR-质谱联用的结核分枝杆菌对一线治疗药物的泛耐药检测方法,并开发了质谱配套检测系统。采用该系统,结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇抗性检测的准确率和特异性均为100.00%,且具有7 h内完成96个样本的检测通量。结论本研究构建的方法有操作简便、低成本、高通量特点,耐药位点检测全面且准确,并具扩展性,可根据需要增添新突变位点,在结核分枝杆菌耐药性检测中具有良好应用前景。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 一线治疗药物 耐药性 多重聚合酶链式反应-质谱微测序技术
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噬菌体展示随机肽克隆的一种快速、高通量测序技术
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作者 杨芳 张文红 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2011年第3期453-455,共3页
目的:探索应用焦磷酸微测序(Pyrosequencing)技术建立一种针对噬菌体展示随机肽的高通量序列测定方案。方法:环7肽噬菌体展示随机肽库的淘筛后随机挑选10个蓝色噬菌斑作为模板,PCR扩增随机7肽区序列,应用Pyrosequencing技术进行实时测... 目的:探索应用焦磷酸微测序(Pyrosequencing)技术建立一种针对噬菌体展示随机肽的高通量序列测定方案。方法:环7肽噬菌体展示随机肽库的淘筛后随机挑选10个蓝色噬菌斑作为模板,PCR扩增随机7肽区序列,应用Pyrosequencing技术进行实时测序和分析。结果:应用Pyrosequencing技术对10例样品的随机7肽区进行序列分析,得到一个GXXXHPQ的同源基序(X为任意氨基酸),此基序为链亲合素的结合肽基序,结果与预期相符合。结论:Pyrosequencing技术具有操作简易快速、高通量的优点,必定可以广泛应用于各种随机肽库的筛选测序。 展开更多
关键词 随机肽 焦磷酸微测序技术
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荧光标记线粒体DNA SNPs检测体系建立及单倍型频率调查
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作者 何琼 刘长晖 +1 位作者 王慧君 刘超 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期104-108,共5页
【目的】利用荧光标记-单碱基延伸技术建立线粒体DNA SNPs高通量检测体系并应用于法医学检案。【方法】从线粒体DNA上选择18个SNPs(16个位于编码区和2个控制区)位点,自行设计PCR引物和单碱基延伸引物并结合毛细管电泳,实现对线粒体多个S... 【目的】利用荧光标记-单碱基延伸技术建立线粒体DNA SNPs高通量检测体系并应用于法医学检案。【方法】从线粒体DNA上选择18个SNPs(16个位于编码区和2个控制区)位点,自行设计PCR引物和单碱基延伸引物并结合毛细管电泳,实现对线粒体多个SNPs位点的高通量检测。【结果】建立了18个线粒体DNA SNPs复合检测体系,并调查这18个SNPs位点在广东地区汉族人群的单倍型频率。【结论】所建立的线粒体SNPs复合检测体系,在法医学应用中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性(SNPs) 线粒体 复合扩增 微测序 毛细管电泳
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不同方法检测遂宁市MTHFR C677T基因多态性效果比较
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作者 胥国强 康清秀 《现代医药卫生》 2020年第16期2541-2544,共4页
目的采用TaqMan-MGB探针法与微测序法检测遂宁市女性亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性的分布特征,并进行比较分析。方法选取到遂宁市中心医院进行孕前与孕期检查的无亲缘关系女性1972例作为研究对象,通过TaqMan-MGB探针法进... 目的采用TaqMan-MGB探针法与微测序法检测遂宁市女性亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性的分布特征,并进行比较分析。方法选取到遂宁市中心医院进行孕前与孕期检查的无亲缘关系女性1972例作为研究对象,通过TaqMan-MGB探针法进行MTHFR C677T基因多态性检测,统计分析该地区MTHFR C677T基因多态性的分布特征,并与其他地区数据进行比较。另随机选择68例样本,以微测序法检测MTHFR C677T基因多态性,对其分布特征进行比较分析。结果遂宁市女性MTHFR C677T基因CC型、CT型和TT型频率分别为42.9%、45.0%、12.1%,以CC型和CT型为主。遂宁市分布特征与昆明、德阳、湘潭地区基因型比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与郑州、廊坊、烟台、延边、乌鲁木齐、镇江、荆州、惠州、淄博、临沂、武汉、广州、琼海、松滋、西安、尚志、郫县地区比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。TaqMan-MGB探针法与微测序法检测的分布频率具有高度一致性,CC型、CT型和TT型符合率均为100.0%。结论遂宁市女性MTHFR C677T基因多态性分布不同于其他地区,具有地域特异性。微测序法技术准确、检测效率高,适用于临床实验室基因多态性的快速筛检。 展开更多
关键词 亚甲基四氢叶酸还原酶 单核苷酸多态性 TaqMan-MGB探针法 微测序 基因多态性
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23-plex Y-SNPs复合扩增体系在法医学应用的研究 被引量:2
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作者 张爱平 刘超 +4 位作者 李越 刘长晖 陈丽伟 葛璐璐 陈晓晖 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期685-691,共7页
【目的】应用SNaPshot技术建立23-plexY-SNPs的复合扩增体系,研究其在法医学中的应用价值。【方法】从Y染色体单体群命名树上选择23个Y-SNP位点:P164、P203、P148、P145、M89、P151、M216、P128、P157、P149、P131、P199、P123、P191、P... 【目的】应用SNaPshot技术建立23-plexY-SNPs的复合扩增体系,研究其在法医学中的应用价值。【方法】从Y染色体单体群命名树上选择23个Y-SNP位点:P164、P203、P148、P145、M89、P151、M216、P128、P157、P149、P131、P199、P123、P191、P201、M111、M9、P132、P200、P197、M119、P136和M134,进行复合PCR扩增,PCR产物纯化后利用荧光标记单碱基延伸技术(SNaPshot试剂盒)结合毛细管电泳技术对单核苷酸多态性进行检测,应用该体系调查了290名广东地区无亲缘关系的男性个体。【结果】所建立的23个Y-SNPs检测体系,各位点均具有遗传多态性,基因多样性范围为0.0137~0.4912。在290名男性中检测到143个单体型,单体型多样性为0.9907。【结论】该23个Y-SNPs检测体系能快速而准确的对样本进行SNP分型,在法医学、人类学和相关学科的研究中具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 个体识别 单碱基延伸(微测序) SNaPshot试剂盒 单核苷酸多态性 Y染色体
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质谱技术在核酸检测分析中的研究进展
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作者 赵欣 肖迪 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期98-106,共9页
质谱技术是一种基于质谱仪设备检测物质分子量的谱学技术方法。质谱类型众多、功能各异,在各个学科领域中广泛用于科学研究与应用技术开发。近年来,质谱技术在核酸检测分析中显现出巨大的潜力,尤其是基于基质辅助激光解吸电离飞行时间... 质谱技术是一种基于质谱仪设备检测物质分子量的谱学技术方法。质谱类型众多、功能各异,在各个学科领域中广泛用于科学研究与应用技术开发。近年来,质谱技术在核酸检测分析中显现出巨大的潜力,尤其是基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的核酸检测分析技术,因其快速、高通量、准确等特性而成为研究热点。采用质谱技术进行核酸研究,突出表现在对单核苷酸多态性、基因突变、DNA甲基化及DNA拷贝数变异的检测分析。本文对质谱技术在核酸检测中的研究与应用进行阐述,以期为基于质谱的新型核酸检测技术的开发与应用提供参考。 展开更多
关键词 质谱 DNA甲基化 单核苷酸多态性 DNA拷贝数变异 多重PCR-质谱微测序
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Variations of phyllosphere microorganisms in asymptomatic and tobacco brown spot leaves before and after spraying 12% difenoconazole + fluxapyroxad SC
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作者 LI Tong WANG Hancheng +6 位作者 YE Guo WANG Qing NGANGUEM NZALLE Yranney Brice WANG Feng CAI Liuti FENG Ruichao ZHANG Songbai 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期932-948,共17页
12%difenoconazole+fluxapyroxad SC(commercial name:Jiangong)was first released by BASF in China in 2016.It has been registered to control many diseases,including pear scab,apple Alternaria leaf spot,tomato early blight... 12%difenoconazole+fluxapyroxad SC(commercial name:Jiangong)was first released by BASF in China in 2016.It has been registered to control many diseases,including pear scab,apple Alternaria leaf spot,tomato early blight,cucumber powdery mildew,etc.This study evaluated the bioactivity of Jiangong against Alternaria alternata and explored variations of phyllosphere microorganisms in both asymptomatic and tobacco brown spot leaves at different persistence periods(0,5,10,and 15 days post-fungicide application)using high-throughput sequencing technology.The results indicated that Jiangong effectively inhibited mycelial growth(average EC_(50) value of 0.51μg/mL),conidia germination(average EC_(50) value of 3.47μg/mL),and the carbon metabolism of A.alternata.Both asymptomatic and symptomatic leaves presented complex microbial communities.Higher fungal diversity was noted in asymptomatic leaves,while higher bacterial diversity was found in symptomatic leaves.After application,the diversity and abundance of microbial community structures in both types of leaves changed over time.Fungal microbiome communities showed greater sensitivity than bacterial groups,with the microbiome communities of asymptomatic leaves being more affected than those of symptomatic leaves.Fungal community diversity decreased for both symptomatic and asymptomatic leaves after 5 days of application,while the diversity of fungal community in symptomatic leaves showed an upward trend after 10 days of application.Meanwhile,bacterial community diversity increased in both symptomatic and asymptomatic leaves after 5 days of application but then declined in asymptomatic leaves after 15 days.The abundance of the dominant function group of phyllosphere bacteria(metabolism,genetic information processing,environmental information processing)was not affected by the application of Jiangong.However,the abundance of the dominant function group of phyllosphere fungi(animal pathogen-endophyte-wood saprotroph,endophyte-plant pathogen,plant pathogen-undefined saprotroph)was significantly affected by the application of Jiangong,and high variation was found in symptomatic leaves than that of asymptomatic leaves.The application of Jiangong-induced alterations in the community structure of the tobacco phyllosphere microbiome provides a basis for future tobacco brown spot control strategies based on phyllospheric microecology. 展开更多
关键词 tobacco brown spot DIFENOCONAZOLE fluxapyroxad microorganism communities diversity high-throughput sequencing
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黔西南地区99582位新生儿耳聋基因热点突变筛查结果 被引量:8
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作者 张秀秀 慕容红梅 +7 位作者 李盼盼 常华 赵鸿 李琼 向玉婷 唐大春 黄婵 何燕 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第4期612-619,共8页
目的 对黔西南州2016年06月-2020年10月出生的99582名新生儿的耳聋基因突变情况进行分析,为新生儿耳聋基因突变防控提供科学依据。方法 运用微测序技术(Microsequencing)检测黔西南地区99582位新生儿4个遗传性耳聋基因的20个常见突变位... 目的 对黔西南州2016年06月-2020年10月出生的99582名新生儿的耳聋基因突变情况进行分析,为新生儿耳聋基因突变防控提供科学依据。方法 运用微测序技术(Microsequencing)检测黔西南地区99582位新生儿4个遗传性耳聋基因的20个常见突变位点,采用ArcMap 10.2软件基于筛查数据绘制当地耳聋空间分布图。结果 99582名新生儿中,共检测出耳聋基因异常者2812例(2.82%),其中GJB2基因杂合突变1594例(1.60%),线粒体DNA 12SrRNA突变187例(0.19%),SLC26A4基因杂合突变型812例(0.82%),GJB3基因突变192例(0.19%),复合杂合突变型27例(0.03%),在空间分布中存在高发区。结论 黔西南州地区新生儿常见耳聋基因突变以GJB2基因突变为主。基因突变率以兴义市、普安县和兴仁市居多,针对高发区应加强筛查力度以减少耳聋的发生。 展开更多
关键词 新生儿 耳聋基因 微测序 突变
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植入前遗传学诊断新进展 被引量:1
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作者 李雷 金帆 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 2009年第5期320-323,共4页
植入前遗传学诊断是辅助生殖技术的一个重要方面,其发展日新月异。新方法、新技术不断出现并应用于临床植入前遗传学诊断中,如微阵列比较基因组杂交、微测序技术、多重置换扩增等。这些方法及两个或两个以上方法的综合应用大大增加了诊... 植入前遗传学诊断是辅助生殖技术的一个重要方面,其发展日新月异。新方法、新技术不断出现并应用于临床植入前遗传学诊断中,如微阵列比较基因组杂交、微测序技术、多重置换扩增等。这些方法及两个或两个以上方法的综合应用大大增加了诊断的准确性,减小误诊风险。同时,也有一些关于植入前遗传学诊断的争议,如胚胎植入前遗传学筛查,以及对植入前遗传学诊断远期安全性的担忧。就该领域一些新方法及其原理和争议等进行综述。 展开更多
关键词 植入前遗传学诊断 比较基因组杂交 微测序技术 多重置换扩增 胚胎植入前遗传学筛查
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与大白菜耐热性相关的葡萄糖磷酸变位酶的分离和纯化 被引量:3
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作者 崔洪昌 李丽 +1 位作者 郑晓鹰 Samuel S.Sun 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1998年第4期86-92,共7页
依次经过抽提、分步硫酸铵沉淀、二乙氨乙基纤维素(DEAECelulose)柱层析,以及聚丙烯酰胺自然胶制备电泳(PreparativePAGE)等分离步骤,从耐热性较强的“白阳”大白菜品种的黄化种苗中,分离和纯化了... 依次经过抽提、分步硫酸铵沉淀、二乙氨乙基纤维素(DEAECelulose)柱层析,以及聚丙烯酰胺自然胶制备电泳(PreparativePAGE)等分离步骤,从耐热性较强的“白阳”大白菜品种的黄化种苗中,分离和纯化了与耐热性密切相关的一个葡萄糖磷酸变位酶(PGM)同工酶。通过SDSPAGE电泳,纯化的酶样品在29KD处呈现一个显著条带。推测此酶为细胞质来源。我们还同时纯化了与耐热性无关的另一个细胞质PGM同工酶。结果表明,它们只有自然电泳迁移率(电荷量)的不同,而没有明显分子大小的差别。 展开更多
关键词 大白菜 PGM 同工酶 蛋白质纯化 微测序 耐热基因
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黄芪-丹参药对通过下调miR-466b-5p改善高血压肾损害 被引量:5
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作者 李祥宇 崔涛 +1 位作者 姜月华 李伟 《世界中医药》 CAS 2023年第5期613-619,共7页
目的:探讨黄芪-丹参药对通过调节微小核糖核酸-466b-5P(miR-466b-5p)改善高血压肾损害的机制。方法:基于微RNA(miRNA)测序寻找自发性高血压大鼠与Wistar-京都鼠(WKY)的差异基因,构建腺相关病毒转染小鼠,24只C57BL/6小鼠,随机选取12只尾... 目的:探讨黄芪-丹参药对通过调节微小核糖核酸-466b-5P(miR-466b-5p)改善高血压肾损害的机制。方法:基于微RNA(miRNA)测序寻找自发性高血压大鼠与Wistar-京都鼠(WKY)的差异基因,构建腺相关病毒转染小鼠,24只C57BL/6小鼠,随机选取12只尾静脉注射小鼠腺相关病毒miR-466b-5P(rAAV-miR-466b-5P)构建miR-466b-5p过表达组,余12只作为空白对照组注射腺相关病毒-9(AAV-9)空载体,转染6周后再各随机分为2组,每组6只,A组(黄芪-丹参+miR-466b-5P过表达组)和C组(黄芪-丹参+空白对照组)以黄芪配方颗粒:2.036 g/kg+丹参配方颗粒:0.255 g/kg灌胃;B组(miR-466b-5P过表达组)和D组(空白对照组)以相同体积生理盐水灌胃;灌胃28 d后观察各组小鼠尿β2-微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)、微量白蛋白(mALB),血清胱抑素C(Cys-C)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、C反应蛋白(CRP)水平和肾脏病理,进行实时荧光定量(RT-qPCR)与蛋白质印迹法(Western Blotting)寻找其靶基因。结果:1)基于前期miRNA测序选定了miR-466b-5p;2)与D组比较,B组小鼠尿β2-MG、NAG、mALB、血清Cys-C、AngⅡ、CRP均显著升高(P<0.01);与B组比较,A组小鼠血清Cys-C、CRP明显升高(P<0.05),尿β2-MG、NAG、mALB、血清AngⅡ无明显改变(P>0.05);3)与D组比较,B组小鼠出现明显肾小球硬化、小管纤维化,A组较B组有明显改善;4)与D组比较,B组小鼠透明质酸酶2(HAS2)明显下调,而经黄芪-丹参干预后有所回调。结论:miR-466b-5p的过表达会导致高血压肾损害的发生,黄芪-丹参药对通过靶向HAS2下调miR-466b-5p改善高血压肾损害。 展开更多
关键词 高血压肾损害 小鼠 黄芪-丹参药对 RNA miR-466b-5p 肾脏病理 透明质酸酶2
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染色质可及性分析的研究进展 被引量:3
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作者 许兰 任立成 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1462-1470,共9页
在细胞核内,染色质可及性模式会随着外部刺激和发育线索的改变而发生动态变化。染色质可及性重构对于基因表达调控至关重要,在建立和维持细胞特性等方面发挥着重要作用。因此开展染色质可及性的研究对染色质功能上的三维解析具有十分重... 在细胞核内,染色质可及性模式会随着外部刺激和发育线索的改变而发生动态变化。染色质可及性重构对于基因表达调控至关重要,在建立和维持细胞特性等方面发挥着重要作用。因此开展染色质可及性的研究对染色质功能上的三维解析具有十分重要的意义。近几年,随着高通量测序技术的进步以及测序成本的降低,基于高通量测序技术的染色质可及性分析方法得到了迅速发展。目前观察和分析全基因组染色质开放与否的常见技术主要有脱氧核糖核酸酶I超敏位点测序(DNase-seq)、微球菌核酸酶测序(MNase-seq)、甲醛辅助分离调控元件测序(FAIRE-seq)以及转座酶可及性测序(ATAC-seq)。本文比较了这4种染色质可及性分析技术的优缺点,详细介绍了它们的原理及主要实验流程,并简要讨论了它们的发展及相关技术的应用,期望通过这些互补的方法为染色质分析领域的未来发展提供一些借鉴和思路。 展开更多
关键词 染色质可及 脱氧核糖核酸酶I超敏位点 球菌核酸酶 甲醛辅助分离调控元件 转座酶可及性
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Characterization of Genome-Wide Microsatellites of Saccharina japonica Based on a Preliminary Assembly of Illumina Sequencing Reads 被引量:2
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作者 ZHANG Linan PENG Jie +3 位作者 LI Xiaojie CUI Cuiju SUN Juan YANG Guanpin 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS 2016年第3期523-532,共10页
Microsatellites or simple sequence repeats(SSR) function widely and locate dependently in genome. However, their characteristics are often ignored due to the lack of genomic sequences of most species. Kelp(Saccharina ... Microsatellites or simple sequence repeats(SSR) function widely and locate dependently in genome. However, their characteristics are often ignored due to the lack of genomic sequences of most species. Kelp(Saccharina japonica), a brown macroalga, is extensively cultured in China. In this study, the genome of S. japonica was surveyed using an Illumina sequencing platform, and its microsatellites were characterized. The preliminarily assembled genome was 469.4 Mb in size, with a scaffold N_(50) of 20529 bp. Among the 128370 identified microsatellites, 90671, 25726 and 11973 were found in intergenic regions, introns and exons, averaging 339.3, 178.8 and 205.4 microsatellites per Mb, respectively. These microsatellites distributed unevenly in S. japonica genome. Mononucleotide motifs were the most abundant in the genome, while trinucleotide ones were the most prevalent in exons. The microsatellite abundance decreased significantly with the increase of motif repeat numbers, and the microsatellites with a small number of repeats accounted for a higher proportion of the exons than those of the intergenic regions and introns. C/G-rich motifs were more common in exons than in intergenic regions and introns. These characteristics of microsatellites in S. japonica genome may associate with their functions, and ultimately their adaptation and evolution. Among the 120140 pairs of designed microsatellite primers, approximately 75% were predicted to be able to amplify S. japonica DNA. These microsatellite markers will be extremely useful for the genetic breeding and population evolution studies of kelp. 展开更多
关键词 Saccharinajaponica GENOME MICROSATELLITE CHARACTERIZATION
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