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猪LIAS基因微环表达载体的构建
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作者 高会贞 王晓婷 +3 位作者 郭豫杰 韩立强 鲁维飞 杨国宇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期380-384,共5页
为了构建猪LIAS基因长期高效的表达载体,本研究通过RT-PCR方法从猪肌肉组织中克隆了LIAS基因片段,并将该基因片段与微环表达载体minicircle进行连接,构建成微环载体minicircle-LIAS,然后转染HeLa细胞,检测其在HeLa细胞中绿色荧光蛋白的... 为了构建猪LIAS基因长期高效的表达载体,本研究通过RT-PCR方法从猪肌肉组织中克隆了LIAS基因片段,并将该基因片段与微环表达载体minicircle进行连接,构建成微环载体minicircle-LIAS,然后转染HeLa细胞,检测其在HeLa细胞中绿色荧光蛋白的持续表达时间。结果表明,本研究克隆了猪LIAS基因,该基因长度为1 119bp,并将该基因成功构建到了微环表达载体minicircle上;转染HeLa细胞对绿色荧光蛋白持续表达时间的观察显示,构建的微环表达载体minicircle-LIAS中绿色荧光蛋白的持续表达时间明显高于常用的pEGFP-N1质粒,为进一步阐明LIAS合成的生化过程及功能调控提供了新思路和试验材料。 展开更多
关键词 硫辛酸合成酶 基因 微环表达载体 HELA细胞
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猪AQP11基因微环表达载体的构建
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作者 郭准 高会贞 +2 位作者 韩立强 郭豫杰 杨国宇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期9-13,共5页
旨在构建猪AQP11基因高效表达载体,观察该载体转染Hela细胞的转染效果。本研究通过PCR方法从猪肠道黏膜组织中克隆AQP11基因,构建了微环表达载体minicircle-AQP11,通过瞬时转染Hela细胞观察绿色荧光蛋白表达。结合测序结果表明,本研究... 旨在构建猪AQP11基因高效表达载体,观察该载体转染Hela细胞的转染效果。本研究通过PCR方法从猪肠道黏膜组织中克隆AQP11基因,构建了微环表达载体minicircle-AQP11,通过瞬时转染Hela细胞观察绿色荧光蛋白表达。结合测序结果表明,本研究成功地克隆了AQP11基因的全序列,包含了完整的CDS区,构建了AQP11基因的微环表达载体,在Hela细胞中观察到了持续1周的绿色荧光蛋白表达。这为进一步阐明AQP11合成的生化过程及功能调控提供新思路。 展开更多
关键词 水通道蛋白11 微环表达载体
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