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H5N1禽流感病毒微磁粒捕捉系统和SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立
被引量:
3
1
作者
张坤
李刚
贾凤芹
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期1144-1148,共5页
利用禽流感H1N1抗体包被微磁珠制备免疫磁珠,再通过抗原抗体反应得到了含有N1亚型的病毒,然后设计针对H5亚型的特异性引物,同时构建含有H5亚型HA基因部分序列的标准质粒,定量后作为模板,建立了可以检测H5亚型禽流感病毒的SYBR GreenⅠ...
利用禽流感H1N1抗体包被微磁珠制备免疫磁珠,再通过抗原抗体反应得到了含有N1亚型的病毒,然后设计针对H5亚型的特异性引物,同时构建含有H5亚型HA基因部分序列的标准质粒,定量后作为模板,建立了可以检测H5亚型禽流感病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法。结果表明,制备的免疫磁珠可以吸附4个血凝单位的H5N1流感病毒和5个血凝单位的H1N1流感病毒,而对H9N2亚型流感病毒无特异性结合,从而可以富集N1亚型的流感病毒。H5亚型RRT-PCR检测灵敏度可达到4.6拷贝/μL,线性范围达5个数量级;特异性强,与NDV和H1、H9亚型禽流感病毒不发生交叉反应。因此,利用该方法可以很好地检测H5N1禽流感病毒。
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关键词
H5N1禽流感病毒
微磁粒捕捉系统
荧光定量RT-PCR
原文传递
题名
H5N1禽流感病毒微磁粒捕捉系统和SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立
被引量:
3
1
作者
张坤
李刚
贾凤芹
机构
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
西南大学动物科技学院
动物营养学国家重点实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第9期1144-1148,共5页
基金
联合国FAO/IAEA资助项目(14133)
文摘
利用禽流感H1N1抗体包被微磁珠制备免疫磁珠,再通过抗原抗体反应得到了含有N1亚型的病毒,然后设计针对H5亚型的特异性引物,同时构建含有H5亚型HA基因部分序列的标准质粒,定量后作为模板,建立了可以检测H5亚型禽流感病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法。结果表明,制备的免疫磁珠可以吸附4个血凝单位的H5N1流感病毒和5个血凝单位的H1N1流感病毒,而对H9N2亚型流感病毒无特异性结合,从而可以富集N1亚型的流感病毒。H5亚型RRT-PCR检测灵敏度可达到4.6拷贝/μL,线性范围达5个数量级;特异性强,与NDV和H1、H9亚型禽流感病毒不发生交叉反应。因此,利用该方法可以很好地检测H5N1禽流感病毒。
关键词
H5N1禽流感病毒
微磁粒捕捉系统
荧光定量RT-PCR
Keywords
H5N1 virus
magnetic bead capture system
SYBR Green i real time RT-PCR
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
R535 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
H5N1禽流感病毒微磁粒捕捉系统和SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立
张坤
李刚
贾凤芹
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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