曲古抑菌素A和紫杉醇对子宫内膜癌Ark2细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

背景与目的:晚期子宫内膜癌患者应用现有的抗癌药物治疗预后较差,5年生存率仅为25%,为降低这类患者死亡率,需研发新的抗癌药物。组蛋白去乙酰基酶抑制剂曲古抑菌素A(Trichostatin,TSA)有望应用于临床各种恶性肿瘤的治疗,与传统的抗肿瘤药物联用可以提高肿瘤患者的生存率。本实验探讨TSA和紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人子宫内膜癌Ark2细胞凋亡的影响及其机制。方法:Ark2细胞培养于RPMI-1640培养液中,应用TSA、PTX单独或者联合干预,Annexin V法结合Hoechst33258染色法检测Ark2细胞凋亡;Western blot检测其凋亡信号通路中Caspase-9活化及多聚ADP核糖聚合酶(Poly ADP-ribose polymerase,PARP)裂解情况,以及微管乙酰化的表达及微管稳定性。MitoTracker red法检测其线粒体膜电位。结果:流式细胞仪检测显示,1.5nmol/L PTX联合25nmol/L TSA处理Ark2细胞3d后,可见45.2%的细胞凋亡,明显高于单用1.5nmol/L PTX或25nmol/L TSA组的细胞凋亡率(分别为14.1%、11.2%)。Hoechst33258染色法检测结果与流式细胞仪检测结果一致。TSA和PTX联用组PARP、Caspase-9裂解较单用PTX或TSA明显增加(P<0.05)。Western blot和免疫荧光分析证明PTX和TSA可诱导微管蛋白乙酰化,联合用药后微管蛋白乙酰化明显增加,微管稳定性增强。PTX和TXA联合组细胞线粒体膜电消失较单独用药组明显,两药合用具有协同作用(q=2.54)。结论:TSA和PTX有促进Ark2细胞凋亡的作用,去乙酰化酶抑制剂导致的非组蛋白乙酰化和线粒体膜电位的消失是其可能的抗肿瘤机制。

蛋白激酶TAOKs生物学功能及其与相关疾病关系的研究进展

蛋白激酶TAOKs(thousand and one amino acid protein kinases)是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族成员,属于生发中心激酶(GCK)样类别Ste20样激酶,是一种与细胞骨架稳定性密切相关的蛋白激酶。TAOKs共有三个成员:TAOK1、TAOK2和TAOK3,其结构域均高度保守,广泛表达于多种细胞和组织。作为丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联的上游激酶,TAOKs通过p38 MAPK和JNK/SAPK等信号通路,调节细胞和组织中重要的生理和病理反应,参与细胞有丝分裂和细胞凋亡等生命过程。研究表明,TAOKs在JNK/SAPK种疾病,例如肿瘤和神经退行性疾病等的发生发展过程中发挥了一定作用,此外,TAOKs也参与免疫细胞的成熟活化和机体炎症反应的调控。该文就TAOKs的生物学功能及其在各种疾病中的研究进展进行了综述,并对其今后潜在的研究方向进行了探讨。