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题名伊氏锥虫微管结合蛋白p15基因的分子克隆与表达
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作者
张广州
索勋
侯丽丽
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机构
中国农业大学动物医学院
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出处
《寄生虫与医学昆虫学报》
CAS
2007年第4期193-198,共6页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30070573
30270991)
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文摘
根据报道的布氏锥虫(Trypanosoma brucei)微管结合蛋白p15(Tb-MAPp15)基因及其3′非翻译区保守序列设计引物,采用PCR法从伊氏锥虫云南水牛株(Trypanosoma evansi stock YNB)基因组DNA中克隆得到伊氏锥虫微管结合蛋白p15(Te-MAP p15)基因。克隆片段长273bp,编码90个氨基酸,预测分子量9.0kDa。经同源性比较,所得基因与Tb-MAP p15基因同源率达到94%。抗原性分析Te-MAP p15基因表达的氨基酸序列比T.brucei微管结合蛋白p15多5个,均参与组成其中1个抗原决定簇,并且此抗原决定簇序列形成在蛋白中常作为识别位点的α螺旋。将该基因亚克隆到pGEX-6P-1原核表达载体,转化大肠杆菌E.coli RS21宿主菌,经IPTG诱导,可成功表达。重组融合蛋白大小为35kDa,与预期大小一致,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定为重组伊氏锥虫微管结合p15蛋白。
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关键词
伊氏锥虫
微管结合蛋白p15
pGEX-6p-1
原核表达
RS21大肠杆菌
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Keywords
Trypanosoma evansi
Microtubule-associated protein p15
pGEX-6p-1
prokaryotic expression
Escherichia coliRS21
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分类号
S855.9
[农业科学—临床兽医学]
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