有氧运动联合黑果枸杞色素补充对非酒精性脂肪肝病小鼠肝脏脂肪酸氧化功能的干预效果

目的:观察7周有氧运动联合黑果枸杞色素补充对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝脏脂肪酸氧化相关因子表达、线粒体氧化速率及抗氧化能力的影响,探讨有氧运动和补充黑果枸杞色素在NAFLD良性转归中的干预作用、交互效应及可能机制。方法:3周龄KM种雄性小鼠48只,随机分为空白组(n=8)和高糖高脂组(n=40)。高糖高脂组采用高糖高脂膳食灌服7周建立NAFLD模型。建模成功后,随机分为模型组(MX组)、有氧运动组(E组)、黑果枸杞色素组(C组)和有氧运动联合黑果枸杞色素组(EC组),E、EC组的有氧运动干预采用中等强度跑台运动,坡度0°,速度12 m/min,时间60 min,每周6次,共7周。C、EC组每日补充黑果枸杞色素(200 ml/kg体重),MX、E组灌服同等体积生理盐水,共7周。干预结束后,测定体重、肝湿重、血脂水平、血清转氨酶活性,肝组织切片观察肝脏组织结构,ELISA检测肝脏TG含量,比色法监测线粒体β氧化速率、TARBS、GSH-px含量,羟胺法测定SOD活性,SABC法检测肝脏PPARα、TNFα蛋白阳性表达水平,RT-PCR检测肝脏PPARα、TNFα、LCAD、CPT1、AOX、CYP4A10、CYP4A12 mRNA表达。结果:(1)镜下显示,MX组小鼠肝脏结构紊乱,细胞核畸形变位于细胞边缘,肝细胞中出现大量脂滴空泡样变,各干预组肝索较清晰,肝细胞脂滴空泡样变减少,细胞核圆居中,脂质变性程度下降。(2)与MX组相比,E、EC组体重、肝湿重下降(P<0.01),C组体重无显著性差异,肝湿重下降(P<0.01);E、C、EC组血清TG、TC、LDL-C、ALT、AST水平下降(P<0.01或P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.01);肝脏TG、TBARS含量下降(P<0.01),GSH-px、SOD含量、肝线粒体β氧化速率上升(P<0.01或P<0.05)。对于上述血清和肝脏检测指标,除血清AST水平以外,有氧运动与黑果枸杞色素间均存在协同效应。(3)与MX组相比,E、C、EC组肝脏脂肪酸氧化调控基因TNFα基因表达、蛋白阳性表达水平下降,PPARα基因表达、蛋白阳性表达水平升高(P<0.05或P<0.01),下游靶基因AOX、CPT1、LCAD、CYP4A10、CYP4A12mRNA表达上调(P<0.05)。对于PPARαmRNA表达、TNFα蛋白阳性表达、CPT1 mRNA表达、CYP4A10mRNA表达,有氧运动与黑果枸杞色素存在协同效应。结论:7周有氧运动及黑果枸杞色素补充可明显改善NAFLD小鼠肝脏脂质代谢紊乱,可能通过促进肝脏脂肪酸氧化减少肝细胞中脂质蓄积,降低肝脏脂质变性程度,同时降低肝脏氧化损伤,促进非酒精性脂肪肝的良性转归,有氧运动与黑果枸杞色素联合应用效果最佳。