黄曲霉毒素高危区肝细胞癌患者微粒体环氧化物水解酶基因检测

目的 :探讨微粒体环氧化物水解酶 (microsomalepoxidehydrolase ,mEH)低活性基因型与肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)的相关性。方法 :应用PCR RFLP和PCR方法检测 5 2例HCC患者和5 6例健康成人中微粒体环氧化物水解酶及谷胱甘肽硫转移酶M1和T1基因型频率的分布。结果 :发现mEH第 3外显子 113纯合组氨酸型和第 4外显子 139纯合组氨酸型都是低活性基因型 ,在HCC组和对照组分别占 5 7 1% (30 /5 2 )、4 8 2 % (2 7/5 6 ) ,82 7% (4 3/5 2 )、73 2 % (4 1/5 6 ) ,两组比较差异无显著意义 ,P >0 0 5。然而 ,mEH低活性型联合谷胱甘肽硫转移酶 (glutathiones transferase ,GST)M1和T1基因缺失型 ,差异有显著意义 ,P <0 0 5。结论 :mEH处于低活性基因型可能是地区性易感HCC的原因之一 ,但单一种解毒酶不起决定作用 ,多种解毒酶联合作用 。

微粒体环氧化物水解酶基因多态性与膀胱移行细胞癌发生的关系

目的探讨微粒体环氧化物水解酶(mEH)基因型与膀胱移行细胞癌(BTCC)的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法检测BTCC患者(BTCC组,216例)和健康人群(对照组,300例)mEH基因型频率的分布。设计流行病学调查问卷进行面访调查。结果 BTCC组野生型、杂合型和变异型mEH第3外显子(mEH-exon3)分别占60.6%、27.3%和12.0%,对照组分别占46.3%、39.0%和14.7%(P<0.05);杂合型mEH-exon3为BTCC发生的保护性因素(OR=0.56,95%CI=0.41-0.82)。BTCC组野生型、杂合型和变异型mEH第4外显子(mEH-exon4)分别占85.6%、13.4%和0.9%,对照组分别占82.3%、15.0%和2.7%(P>0.05)。吸烟的mEH-exon3野生型人群的BTCC风险高于不吸烟者(P<0.05)。结论 mEH-exon3非野生型可能是BTCC发生、发展中的保护性因素之一;吸烟为BTCC发生的重要危险因素。而mEH-exon4基因多态性和BTCC的发生无明显相关性。

中国北方汉族人微粒体环氧化物水解酶基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的关系

目的 探讨中国北方汉族人微粒体环氧化物水解酶基因多态性与慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法 应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法 ,检测微粒体环氧化物水解酶基因型在 5 5例中国北方汉族人吸烟COPD患者和 5 2例健康吸烟者中频率的分布。结果 5 5例吸烟COPD患者微粒体环氧化物水解酶外显子 3的同源野生型、杂合型、同源突变型频率分布分别为2 7.3%(15 / 5 5 )、2 7.3%(15 / 5 5 )、45 .5 %(2 5 / 5 5 ) ,外显子 4的同源野生型、杂合型、同源突变型频率分布分别为 72 .7%(4 0 / 5 5 )、18.2 %(10 / 5 5 )、9.1%(5 / 5 5 ) ,与 5 2例健康吸烟者的分布比较差异无显著性。结论 微粒体环氧化物水解酶基因与中国北方汉族人COPD易感性无关。

微粒体环氧化物水解酶基因多态性与慢性阻塞性肺疾病的关系

目的 明确微粒体环氧化物水解酶 (mEH)基因多态性与中国人慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法 用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)分析的方法检测 10 0对年龄、性别匹配的COPD患者和健康对照者mEH外显子 3(Tyr113→His)、外显子 4 (His139→Arg)基因多态性。结果 (1)COPD组有 4 2例 (42 % ) ,对照组有 32人 (32 % )为mEH外显子 3的His139突变杂合子 (P =0 .0 15 ) ,经年龄、性别、体块指数和吸烟年支数调整后的OR值为 2 .96 (95 %CI为 1.2 4～ 7.0 9) ;(2 )极慢代谢活性的mEH基因型对应其他代谢活性基因型在病例组和对照组间未发现明显差别 ;(3)将病例组分为不吸烟者和吸烟者 (包括目前仍吸烟者和戒烟者 )两组 ,极慢代谢活性的mEH基因型对应其他代谢活性基因型在不吸烟者OR值均大于 1.0 0 ,而在吸烟者中均小于1.0 0。结论 (1)mEH外显子 3的His113突变杂合子与中国COPD易感性有关 ;(2 )COPD患者mEH基因型与吸烟之间可能存在交互作用。

微粒体环氧化物水解酶EPHX1基因多态性与肝细胞性肝癌易感性的Meta分析

目的探讨微粒体环氧化物水解酶编码基因EPHX1多态性与肝细胞性肝癌(HCC)遗传易感性的关系。方法按照制定的检索策略,检索相关数据库中的文献,获取有关EPHX1基因多态性与HCC易感性的病例-对照研究,提取相关数据进行Meta分析。以病例组和对照组基因型分布的比值比(OR)为效应指标,对纳入文献进行异质性检验,应用Stata12.0软件以不同合并模型对各研究原始数据进行Meta合并,计算合并效应量OR值及其95%可信区间(CI)。结果共纳入9篇文献,EPHX1337T>C多态位点的共8个研究,累计病例584例,对照989例。等位基因比较模型(CvsT)的OR值为1.47(95%CI=1.26～1.72,P<0.001);纯合子比较模型(CCvsTT)的OR值为1.88(95%CI=1.40～2.52,P<0.001);隐性模型(CCvsCT/TT)的OR值为1.73(95%CI=1.36～2.21,P<0.001)。EPHX1416A>G多态位点共6项研究,累计病例432例,对照699例。等位基因比较模型(GvsA)的OR值为0.75(95%CI=0.59～0.95,P=0.018)。结论 EPHX1337T>C多态位点CC基因型与HCC易感性升高有关;416A>G多态位点等位基因G可能降低HCC易感性,为保护基因型。

微粒体环氧化物水解酶基因多态性与中国妇女多囊卵巢综合征易感性

目的:探讨微粒体环氧化物水解酶(EPHX)基因多态性与中国妇女多囊卵巢综合征(PCOS)发病易感性的关系。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析的方法检测115例PCOS病人和89例健康对照者EPHX基因外显子3(Tyr113→His)、外显子4(His139→yArg)基因型分布。结果:PCOS组和对照组基因型分布未见明显异常。两组外显子3和外显子4的基因型分布无统计学差异,P=0.185(exon3)和P=0.205(exon4);单点等位基因的分布也未见显著差别P=0.135(exon3)和P=0.135(exon4)。但对比预测的高、中、低和极低酶活性时发现高酶活性的基因突变相对于其他酶活性在PCOS疾病的发生上可以视为一种保护因素(OR=0.605,CI=0.158～2.324)。结论:由于基因变异导致的EPHX高活性基因型可能在多囊卵巢综合征的发病中起保护作用。

微粒体环氧化物水解酶(EPHX1)基因多态性与泌尿系恶性肿瘤易感性的Meta分析

目的探讨微粒体环氧化物水解酶（EPHX1）编码基因多态性与泌尿系恶性肿瘤的遗传易感性的关系。方法按照制定的检索策略,检索相关数据库中的文献,获取有关EPHX1基因多态性与泌尿系恶性肿瘤易感性的病例-对照研究,提取相关数据进行Meta分析。以病例组和对照组基因型分布的比值比（OR）及其95%可信区间（CI）作为效应指标。结果共纳入EPHX1 Y113H多态位点的6篇文献,累计病例806例,对照1 156例。纳入的结果使用Meta分析显示EPHX1 Y113H基因多态性与泌尿系恶性肿瘤易感性无相关性[（CC vs TT：OR=1.33,95%CI：0.87~2.05,P〉0.05）;（CT vs TT：OR=1.11,95%CI：0.93~1.33,P〉0.05）;（CC/CT vs TT：OR=1.11,95%CI：0.95~1.30,P〉0.05）;（CC vs CT/TT：OR=1.24,95%CI：0.86~1.78,P〉0.05）]。EPHX1 H139R多态位点共4篇文献,累计病例491例,对照760例。Meta分析显示EPHX1 H139R基因多态性与泌尿系恶性肿瘤易感性无相关性[（GG vs AA：OR=0.74,95%CI：0.40~1.08,P〉0.05）;（AG vs AA：OR=1.04,95%CI：0.83~1.32,P〉0.05）;（GG/AG vs AA：OR=1.00,95%CI：0.79~1.27,P〉0.05）;（GG vs AG/AA：OR=0.72,95%CI：0.41~1.27,P〉0.05）]。结论 EPHX1 Y113H或H139R基因多态性与泌尿系恶性肿瘤易感性无明显相关性。

脐血中微粒体环氧化物水解酶基因多态性与维汉新生儿低出生体重的关联性

目的探讨乌鲁木齐市维吾尔族与汉族新生儿脐带血中微粒体环氧化物水解酶(EPHX1)基因多态性与低出生体重(LBW)的关系。方法采用病例对照研究方法,收集出生体重<2 500 g的单胎足月新生儿96例作为病例组,出生体重2 500~4 000 g的单胎足月新生儿208例作为对照组,采集所有新生儿脐带血并提取DNA,通过华大基因Wafer Gen平台的4-primer Sequencer-ready建库方法检测EPHX1基因两个位点的基因多态性。对LBW组和正常组基因型频率、等位基因频率的比较采用χ~2检验,采用SHEsis在线软件进行Hardy-Weinberg平衡检验,并进行单倍型分析。结果 EPHX1基因His139Arg和Ile181Ser两个SNP位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。汉族及维吾尔族中Ile181Serw位点的TG基因型及汉族G等位基因可降低LBW发生的危险性;His139Arg和Ile181Ser位点多态性存在联合作用,与野生型AA/TT基因型组合比较,AA/TG基因型组合可降低LBW的危险性。汉族中携带A-G单体型的新生儿发生LBW的危险降低,而携带G-T单体型的新生儿发生LBW的风险增高。维吾尔族中单倍型分析结果无意义。结论 LBW的发生与His139Arg多态性无相关性,而与Ile181Ser多态性有关,但其机制尚待进一步研究。

微粒体环氧化物水解酶与肺疾病

微粒体环氧化物水解酶(mEH)是一种生物转化酶,催化范围广泛的各种外源性环氧化物水解,形成更易溶于水的反式二氢二醇,是参与化学去毒和/或活化过程的重要控制点。近来发现该酶与慢性阻塞性肺病和肺气肿关系密切,是可能的易感因素。本文就mEH的分子生物学研究进展及其在肺部疾病中的作用与机制作一介绍。

环氧化物水解酶基因多态与肝癌的遗传易感性

目的 探讨环氧化物水解酶基因 (EPHX1)多态与肝癌遗传易感性的关系。方法 应用PCR RFLP技术检测 88例肝癌患者和 10 4例人群对照的EPHX1基因型。结果 病例组和对照组EPHX1第 3外显子第 113密码子的Tyr/Tyr、Tyr/His和His/His基因型的频率分别为 0 .195、0 .4 0 2、0 .4 0 2和 0 .317、0 .4 2 3、0 .2 6 0 ,两组差异无显著性 ( χ2 =5 .17,P =0 .0 75 ) ;第 4外显子第 139密码子的His/His、His/Arg和Arg/Arg基因型的频率分别为 0 .85 2、0 .136、0 .0 12和 0 .6 83、0 .30 8、0 .0 0 9,两组差异有显著性 ( χ2 =7.92 ,P =0 .0 19)。具有 113His/His基因型者发生肝癌的危险性增加 ,OR值为 2 .38( 95 %CI :1.0 4～ 5 .4 9) ;具有 139His/Arg基因型者发生肝癌的危险性降低 ,OR值为 0 .36 ( 95 %CI:0 .16～ 0 .78)。将EPHX1第 3外显子基因型Tyr/His和His/His视为易感基因型 ,则吸烟与之在肝癌发生中存在交互作用 ,OR值为 3.90 ( 95 %CI :1.31～ 12 .0 2 ) ;将第 4外显子基因型His/His视为易感基因型 ,则吸烟和职业暴露与之在肝癌发生中均存在交互作用 ,其OR值分别为 4 .5 3( 95 %CI:1.5 6～ 13.6 1)和 8.4 4 ( 95 %CI :2 .36～ 31.90 )。结论 EPHX1可能为肝癌的易感基因之一。

贲门癌组织微粒体环氧化物羟化酶基因多态变化

目的 :探讨贲门癌组织微粒体环氧化物羟化酶 (mEH)基因多态性改变 ,进一步深入了解贲门癌高易感性分子基础。方法 :利用PCR和PCR SSCP方法对 19例贲门腺癌和 72例正常对照组织mEH基因多态性进行了检测。结果 :贲门腺癌和正常对照组织中 ,mEH的Arg/His和His/His基因型合并在一起分别占 16 %和 15 % ,His等位基因对贲门癌易感性并无明显影响 (OR =0 .72 ) ;mEH的His/Tyr和Tyr/Tyr基因型合并在一起分别占 5 8%和 5 7% ,Tyr等位基因并未影响个体对贲门癌的易感性 (OR =0 .92 )。结论 :mEH基因多态对贲门癌易感性无明显影响。

宇佐美曲霉环氧化物水解酶基因的克隆与生物信息学分析

环氧化物水解酶(Epoxide hydrolase,EH)是酶法拆分消旋体环氧化物,制备光学活性环氧化物和邻二醇的重要酶之一。通过RT-PCR和新构建的THSO-PCR侧翼未知DNA序列扩增技术,克隆了一种来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的EH基因,命名为Aueh2(GenBank No.KF061095),并对该基因进行了相关生物信息学分析。Aueh2的DNA序列长度为2 481 bp,其中包含了5′端和3′端侧翼调控序列,6个内含子序列和编码cDNA序列。开放阅读框序列长度为1 188 bp,编码395个氨基酸,对应的蛋白质命名为AuEH2;该蛋白质为无信号肽的亲水蛋白质,其理论相对分子质量44.6 kD;其三维结构包含EH典型的"α/β"核心催化结构域和"帽子"结构域,活性中心由催化三联体Asp191、His369和Glu343组成。本课题研究成果为深入研究AuEH2及其应用奠定了基础。

原发性肝癌人群中环氧化物水解酶基因多态性的研究

目的:探讨原发性肝癌人群中环氧化物水解酶基因多态性与肝癌发生发展的关系。方法:以广西壮族自治区人民医院2008年10月至2010年10月收治的肝癌患者与健康体检者各150名为研究对象,利用限制性片段长度多态性检测法检测研究对象该酶的基因多态性,进行对比分析。结果:环氧化物水解酶基因多态性型别在两组研究对象中出现的频率差异无显著性(P>0.05);变异等位基因出现频率与以往结果相一致。结论:环氧化物水解酶基因多态性与肝癌的发生发展无明确的相关关系。

可溶性环氧化物水解酶2基因与中国汉族人群非综合征型唇腭裂的关联研究

目的探究可溶性环氧化物水解酶2基因(EPHX2)的遗传变异位点与中国汉族人群非综合征型唇腭裂(NSCL/P)的相关性。方法本研究以159个中国汉族NSCL/P患者作为研究对象,对EPHX2基因区域开展了目标区域捕获测序,更全面地检测了EPHX2基因区域的遗传变异位点。以诺禾致源基因数据库的542名中国汉族健康人的全基因组测序数据作为对照,进行常见变异位点关联分析和针对罕见变异位点的负荷分析。结果在中国汉族人群NSCL/P的关联分析中发现,rs57699806的差异具有统计学意义(P=0.00013,OR=2.849,95%CI:1.691~4.800),其次为rs4732723(P=0.00650,OR=0.662,95%CI:0.491~0.892),rs7829267(P=0.00920,OR=1.496,95%CI:1.117~2.005),rs721619(P=0.01100,OR=1.474,95%CI:1.098~1.980)和rs7816586(P=0.04000,OR=1.310,95%CI:1.015~1.691)。其中rs4732723的C等位基因可能具有保护作用,而其他4个单核苷酸多态性位点的参考等位基因均可能增加NSCL/P的发生风险。罕见变异负荷分析2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究发现,EPHX2基因的5个单核苷酸多态性位rs57699806、rs4732723、rs7829267、rs721619和rs7816586与中国汉族人群NSCL/P的发生密切相关,其中rs57699806、rs4732723、rs7829267和rs7816586为新发现的易感位点。

绿豆环氧化物水解酶基因的克隆、分析及表达

环氧化物水解酶可催化制备高光学纯度的环氧化物及邻二醇等高价值手性药物中间体。本研究采用RT-PCR和THSO-PCR扩增侧翼未知DNA序列技术从绿豆(Vigna radiata)中克隆了一种新型环氧化物水解酶Vr EH3的基因Vreh3,Vreh3编码区DNA序列长度为1 178 bp,包含2个142 bp和79 bp的内含子,以及957 bp的开放阅读框,编码318个氨基酸。Vr EH3的理论相对分子质量和等电点分别为36.2×103和5.59;保守的催化三联体为Asp101-Asp262-His297。将Vreh3与表达载体p ET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组Vr EH3。该酶可对映归一性水解外消旋环氧苯乙烷((R,S)-SO)产生(R)-苯基乙二醇,得率高达79.4%,对映体过量值(e.e.值)为94.7%。

可溶性环氧化物水解酶抑制剂对压力负荷增加所致小鼠心肌肥厚的影响

目的观察可溶性环氧化物水解酶抑制剂对心肌肥厚小鼠心脏及心肌肥厚标志基因的影响,并探讨该类药物影响心肌肥厚的可能机制。方法观察压力负荷增加及用可溶性环氧化物水解酶抑制剂干预后心脏的病理学改变,并用半定量逆转录聚合酶链反应法检测心肌肥厚基因(心房钠尿肽基因、α肌凝蛋白重链基因、β肌凝蛋白重链基因和骨骼肌α肌纤蛋白基因)表达的差异,用Western检测核因子κB的活化情况。结果可溶性环氧化物水解酶抑制剂可以明显使心脏重与体重的比值、左心室短轴缩短率和左心室收缩期末腔径明显改善,并减少压力负荷增加引起的小鼠心肌肥厚基因的表达,抑制核因子κB的表达。结论可溶性环氧化物水解酶抑制剂能抑制压力负荷增加所致的心肌肥厚,这一作用有可能通过抑制核因子κB途径来实现。

微生物环氧化物水解酶的研究进展

环氧化物水解酶(EH)是一类能催化外消旋环氧化物水解生成有光学活性的环氧化物和二醇的酶,应用前景广阔。自然界筛选到的微生物往往存在产酶活力低、对映体选择性不高等问题。近年来,基因工程技术的发展及其在微生物环氧化物水解酶中的应用,改善了酶的催化特性,为酶的工业化应用提供了条件。该文简单介绍了微生物环氧化物水解酶的催化反应机制和快速检测方法,详细介绍了环氧化物水解酶基因工程方面的研究进展。

可溶性环氧化物水解酶在疾病中的作用

花生四烯酸经过细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)表氧化酶途径生成环氧二十碳三烯酸(epoxy eicosatrienoic acid,EETs),具有扩张血管、降低血压、抗炎等多种生物学功能。在哺乳动物系统中的可溶性环氧化物水解酶(soluble epoxide hydrolase,s EH)具有α/β水解酶折叠结构,对环氧脂肪酸具有高度的选择性。s EH能够快速水解EETs,增加患心血管疾病的风险。目前,研究发现s EH抑制剂具有抑制s EH活性、提高EETs的含量的重要功能。在多种疾病动物模型中应用s EH抑制剂或s EH基因敲除,证实s EH在心肌肥厚、糖尿病、高血压和肾病等疾病中发挥重要的生理作用。因此,s EH已被作为疾病治疗的新靶点而进行研究。本文就s EH的分布、作用机制以及s EH与疾病的关系等方面进行了讨论。

微粒体环氧化物水化酶基因多态性对焦炉工尿中1-羟基芘水平的影响

目的 研究外源性化学物代谢酶基因多态性与焦炉工尿中 1 羟基芘水平的关系。方法 分别选取 14 8名焦炉工和 6 9名非职业多环芳烃 (PAHs)暴露人员作为研究对象 ,使用碱水解 -高效液相色谱法测定其尿中 1 羟基芘浓度 ;分析了CYP1A1基因第 7外显子I4 6 2V位点、GSTM1、GSTT1、GSTP1基因I10 5V位点、CYP2E1基因 5’非编码区的Pst1位点和第 6内含子的Dra1位点、NQO1基因P187S位点、NAT2基因Kpn1、BamH1和Taq1位点以及mEH基因H113Y和R139H位点的多态性 ;使用调查表收集个人职业暴露史、年龄、性别、吸烟和饮酒等信息。结果 焦炉工尿中 1 羟基芘水平[(5 .6 1± 1.0 4 ) μmol molCr]高于对照组 [(0 .74± 0 .32 ) μmol molCr],差异有显著性 (P <0 .0 5 )。调整了PAHs外暴露等级和吸烟因素后 ,焦炉工中具有mEH基因 113位点变异纯合子基因型个体尿中1 羟基芘水平高于杂合子和野生型纯合子 (6 .4 1± 1.0 9>6 .2 4± 1.0 9>4 .6 2± 0 .95 μmol molCr) ,且野生型纯合子与变异型纯合子基因型个体间尿中 1 羟基芘水平的差异有显著性 (P <0 .0 5 )。在焦炉工中还发现CYP1A1和mEH基因多态性存在交互作用。结论 mEH基因 113位点的基因多态性可明显影响焦炉工尿中 1 羟基芘水平。