亚砷酸钠对大鼠肝线粒体和微粒体酶的影响

研究了亚砷酸钠在体内、体外对大鼠肝线粒体丙酮酸脱氢酶（ＰＤＨ）、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和微粒体酶细胞色素Ｐ－４５０、ｂ５、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ－细胞色素Ｃ还原酶、谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴ）的影响；并通过观测亚砷酸钠与亚硒酸钠的作用及其对肝谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽含量和线粒体脂质过氧化的影响，探讨亚砷酸钠的作用机理。结果表明：连续７天腹腔注射２０ｍｇ／ｋｇ的亚砷酸钠，线粒体ＰＤＨ、ＳＤＨ被抑制，分别相当于对照组的５１％和５８％。而亚硒酸钠可有效拮抗砷对ＰＤＨ、ＳＤＨ的抑制作用。亚砷酸钠显著降低肝ＧＳＨ的含量，并增强线粒体膜脂质过氧化作用（Ｐ＜０．０５）。在体内试验中，亚砷酸钠对谷胱甘肽过氧化物酶和肝微粒体酶无明显影响。亚砷酸钠在体外实验中，浓度在１０－７～１０－３ｍｏｌ／Ｌ的范围内，抑制ＳＤＨ的活力，提高ＧＳＨ的含量，且呈剂量－效应关系。结果提示。

MN9202在Beagle犬肝微粒体酶中的代谢动力学

目的研究MN9202在Beagle犬肝微粒体酶中的代谢。方法差速离心法制备Beagle犬肝微粒体酶,0.4μmol.L-1的MN9202与1.0g.L-1的肝微粒体酶在37℃水浴中孵育30min,加入0.5mL碱化液终止反应,然后采用RP-HPLC法测定孵育液中MN9202原形药物的浓度。根据所测浓度与反应速度做Lineweave-Brurk双倒数曲线,推导出药物的米氏常数Km和最大反应速度Vmax,并计算机体内在清除率。同时观察不同浓度和不同种类的人肝微粒体酶(CYP450)抑制剂对MN9202代谢的影响。结果MN9202在Beagle犬肝微粒体酶中的Km为(22.6±8.0)μmol.L-1;Vmax为(0.54±0.17)μmol.g-1.min-1;CLint为(0.0242±0.0009)L.g-1.min-1。醋竹桃霉素(Tro)和酮康唑(Ket)能够显著抑制MN9202的代谢;反苯环丙胺(Tra)对MN9202的代谢也有一定的抑制作用,而其他CYP450抑制剂对MN9202的代谢无明显影响。结论CYP3A和CYP2C19参与了MN9202的代谢,人CYP3A和CYP2C19的抑制剂可能使MN9202的代谢受到抑制,造成药物的药效或毒性的增加。

溴氰菊酯对大鼠肝微粒体酶活性的影响

溴氰菊酯对大鼠肝微粒体酶活性的影响张秀莲，于丽华，夹访贤溴氰菊酯是Ⅱ型拟菊酯类农药［１］。具有杀虫谱广，效果强，低残留和在环境中分解较快的特点，被广泛应用于防洽农业害虫、仓储害虫和卫生害虫等方面，接触人群面广和量多，已构成对人群的危害。急性菊酯类农药...

大鼠和人胎、肝、肺微粒体酶对苯并(a)芘代谢的研究

苯并(a)芘[B(a)P]是一种致癌性多环芳烃,在环境中广泛存在。环境中的B(a)P是前致癌物,进入体内后需经代谢激活,才能转变为具有生物学活性的终致癌物。已有实验证明,B(a)P能诱发许多实验动物肿瘤。

硒多糖、亚砷酸钠对大鼠肝微粒体酶和GSH-Px等的影响

研究了硒多糖、亚砷酸钠在体内、外对大鼠肝微粒体酶细胞色素Ｐ－４５０、ｂ５、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ－细胞色素Ｃ还原酶、谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴ）的影响；并通过测定硒多糖、亚砷酸钠对肝谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和脂质过氧化（ＬＰＯ）的影响，探讨了硒、砷相互作用的机理。结果表明：连续７天腹腔注射０．２ｍｇ／ｋｇ硒多糖，细胞色素Ｐ－４５０、ｂ５的含量、ＧＳＴ的活性降低（Ｐ＜０．０５）；硒多糖明显诱导ＧＳＨ－Ｐｘ的活性，降低脂质过氧化，拮抗亚砷酸钠对ＬＰＯ的作用。亚砷酸钠显著增强肝细胞脂质过氧化（Ｐ＜０．０５）。

中国内江猪与中国人肝微粒体酶的比较研究

目的比较中国内江猪与中国人肝微粒体酶的差异,以期从药物代谢角度评价内江猪作为异种移植供体的可能性。方法通过Ca2+沉淀法分离肝微粒体,测定4月龄中国内江猪和中国正常成人肝微粒体中细胞色素P450(CYP450)、b5(CYb5)的含量及氨基比林N-脱甲基酶(ADM)的活性。结果4月龄中国内江猪肝CYP450为(0.473±0.109)nmol/mg蛋白,CYb5为(0.403±0.107)nmol/mg蛋白,ADM的活性为(1.662±0.083)nmol/(mg蛋白.min);均与中国正常人〔分别为(0.349±0.089)nmol/mg蛋白,(0.275±0.083)nmol/mg蛋白,(1.269±0.215)nmol/(mg蛋白.min)〕存在差异(P<0.05),分别高出正常人35.5%、46.5%、31.0%。结论中国内江猪肝脏中CYP450、CYb5含量及ADM活性较中国正常人高,药物的代谢可能较正常成人快,因此,中国内江猪肝脏代替人的肝脏代谢药物是可行的。

肝微粒体酶对苯诱导的大鼠骨髓细胞凋亡的影响

目的 :观察苯 +S9和单独用苯处理两种方法对体外培养的大鼠骨髓细胞的凋亡效应。方法 :Pereira KI法检测骨髓细胞中髓过氧化物酶的含量 ;荧光染色法检测细胞形态 ;DNA凝胶电泳法观察DNA裂解片段 ;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 :DNA凝胶电泳 :苯 +S9组苯浓度为 7.5mmol·L-1,诱导时间 1h时即可见模糊的凋亡梯带 ;苯组当诱导浓度为 11.2 5mmol·L-1,诱导时间 3h时 ,电泳图谱呈现典型的DNA梯形条带。流式细胞仪检测各组的凋亡率也表明 ,两组诱导的凋亡呈剂量 效应和时间 效应关系 ,其中苯 +S9组各浓度分组及各时间分组与单独用苯组对应比较 ,凋亡率前者都比后者为高 ,与DNA凝胶电泳的结果相符合。结论 :在体外培养的大鼠骨髓细胞中 ,苯作为一种凋亡诱导剂在S9存在的情况下 ,以更低的剂量和时间点引起大鼠骨髓细胞的凋亡。

肝微粒体酶在集落形成试验中对环磷酰胺和甲基苄肼的激活作用

S-9 10μl/ml不减少肿瘤细胞集落形成。当其直接加入双层软琼脂系统上层,在环磷酰胺浓度为25,50,100和200μg/ml时,L_(1210)细胞的集落形成率分别为66,45,39和9％,HeLa细胞集落形成率为96,81,66和38％;甲基苄肼浓度为100,200和400μg/ml时,B_(16)细胞集落形成率为64,45和26％。不加S-9时,上述药物对各种细胞均不显示抑制作用。但人肝癌细胞株SMMC_(7721)虽不加S-9,在上述二药作用下集落形成率明显降低。

鸭肝微粒体酶代谢活化作用的观察

本文对1月龄麻鸭经过黄曲霉毒素诱导后在1月、1年及3年观察其肝微粒体酶(S9)的代谢活性并与各相应对照组进行比较。提示1月、1年及3年龄鸭肝S^6均有代谢活化前致癌物—黄曲霉毒素B^1的效能。经过AFB_1诱导后S_9活性比对照组高。但诱导后的第三年增加的活性已不复存在。也见到雏鸭S_9活性明显高于成年鸭。AFB_1诱导的雏鸭S_9代谢AFB_1的活性与经多氯联苯诱导的大鼠肝S_9无显著差别,但其代谢2氨基芴的活性却远高于后者。试验结果提示鸭肝S_9无论是否经过药物诱导皆有良好代谢活性可作为体外短期检测诱变剂活化体系的酶来源。

草甘膦对大鼠肝微粒体酶活力的影响及其机理初探

运用体内试验和体外试验的方法，研究了草甘膦对大鼠肝微粒体酶活力的影响，并对其作用机理进行了初步探讨。结果表明，体内试验中，草甘膦能明显增加细胞色素Ｐ４５０含量，诱导氨基比林Ｎ－脱甲基酶（ＡＰＮＤ）和乙基吗啡Ｎ－脱甲基酶（ＥＭＮＤ）的活力；体外试验中，在３．３×１０－８～３．３×１０－４ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，未见草甘膦对Ｐ４５０含量有明显增加，而在２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ和２．５×１０－５～２×１０－４ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内可分别对ＡＰＮＤ和ＥＭＮＤ呈现诱导作用，在２×１０－８～２×１０－４ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，随草甘膦浓度增高，ＡＰＮＤ和ＥＭＮＤ活力均有上升趋势。初步观察结果，草甘膦在体内对肝微粒体酶诱导作用机理与其促进蛋白质合成作用有关。

杀螟松对鼠肝微粒体酶活性的影响

本文研究了杀螟松急、慢性染毒对鼠肝微粒体酶的影响,结果表明杀螟松急性染毒对肝微粒体蛋白、细胞色素P_(450)和氨基比林-N-脱甲基化酶活性有明显下降,其慢性染毒对肝微粒体酶活性没有受到抑制。因此,可从代谢角度探索杀螟松对机体的毒作用。

利福定和利福平对小鼠肝微粒体酶的影响比较

利福定和利福平具有相似的化学结构,为了比较二者对肝微粒体酶的影响,我们考察了它们对小鼠体内安替比林血浆水平、戊巴比妥钠睡眠时间和肝脏重量的影响,测定了肝微粒体蛋白和细胞色素P-450含量及两种酶活性的改变,用凝胶电泳法比较了微粒体多肽组份相对含量的变化。结果表明,利福平在这些方面均表现出显著的肝微粒体酶诱导作用,而利福定则否。这提示利福定可能在临床很少导致严重的药物相互作用发生。

去甲斑蝥新型衍生物N-14NCTDA大鼠肝微粒体酶代谢

目的初步阐明十四烷基去甲斑蝥素酰亚胺(tetradecyl derivative of norcantharidin,简称N-14NCTDA)肝微粒体酶代谢情况,鉴定该药物体外Ⅰ相代谢产物,并推测其主要代谢途径。方法以超速离心法制备大鼠肝微粒酶并以二辛可酸(butyleyanoacrylate,BCA)法测定微粒体蛋白浓度。药物与肝微粒体在一定条件下孵育,使用飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)进行分析。结果制备的大鼠肝微粒体酶蛋白质量浓度约为6.4 g·L^(-1)。代谢研究结果显示,孵育后反应液中主要检测到3个代谢产物,其分子离子峰相对分子质量分别为380.280 6、378.264 8和394.259 7,分别对应原型药羟基化、醛基化及羧化产物。结论 UPLC/Q-TOF MS方法适用于N-14NCTDA和其代谢产物的定性鉴别。体外初步代谢结果表明,N-14NCTDA的酰亚胺键难以在肝脏水解释放出NCTD,其主要以末端烷基氧化的方式进行Ⅰ相代谢。

不同诱导方法制备大鼠肝微粒体酶及其活性的比较

目的:通过比较4种方法诱导制备的大鼠肝微粒体酶(S9)的蛋白含量及活化效果,探讨有效的肝微粒体酶诱导方法。方法:分别采用多氯联苯、苯巴比妥联合β-萘黄酮、注射用苯巴比妥钠联合β-萘黄酮、苯巴比妥作为诱导剂制备大鼠肝S9。采用Lowry法测定S9蛋白含量,通过Ames试验和中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL细胞)体外染色体畸变试验对4种S9的活化效果进行比较。结果:上述4种方法制备的S9蛋白含量依次为30.29、34.15、33.31、28.02 mg/m L,均不超过40 mg/m L。Ames试验和染色体畸变试验中,与不加S9组比较,4种S9在阳性组中均显示出明显的活化作用(P<0.01)。前3种S9所得阳性结果无明显差异,以苯巴比妥作为单独诱导剂的活化作用较前三者弱,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:在本试验条件和范围下,以多氯联苯、苯巴比妥联合β-萘黄酮、注射用苯巴比妥钠联合β-萘黄酮作为诱导剂可以成功制备大鼠肝S9,并具有较好的活性,联合诱导法可替代多氯联苯诱导法。

采用冷冻真空干燥法保存肝微粒体酶（S_9）的探讨

本实验采用冷冻真空干燥法保存肝微粒体酶（Ｓ９），经过冻干前后，冻干后一年及冻干后二年零四个月各时间点测试，结果表明，冻干Ｓ９与新鲜制备的Ｓ９活性比较一致，冻干Ｓ９对间接诱变剂２ＡＦ具有活化作用。实验结果表明：采用冷冻真空干燥法保存肝微粒体酶Ｓ９是可取的。

杀虫畏对雄性大鼠肝微粒体酶的诱导及动力学性质的研究

杀虫畏对肝微粒体酶呈现明显诱导作用。对诱导生成的酶的动力学性质进行研究证明,诱导生成组和对照组的苯胺羟化酶,其米氏常数(km)和抑制常数(ki)极相近似;微粒体酶抑制剂SKF525-A对两组酶均呈现非竞争性抑制作用。因此,可以认为两组酶具有相同的动力学性质。

鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验检测生命壹号口服液安全性

目的采用鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames)对生命壹号口服液进行安全性毒理学试验。方法实验选用鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100和TA102菌株,将生命壹号口服液配制成浓度为50000、10000、2000、400、80μg/mL的溶液,作为5个剂量组,同时设未处理对照组、溶剂对照组(二甲基亚砜)和阳性对照组(2-乙酰氨基芴、4-硝基喹啉-N-氧化物),观察各菌株的回变菌落数。结果生命壹号口服液Ames试验各剂量组的回变菌落数均未超过未处理对照组自发回变菌落数的2倍,Ames实验结果为阴性。结论在本实验条件和剂量范围内,未观察到生命壹号口服液对鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102的诱变作用。

鼠伤寒沙门氏菌/微粒体酶试验检测化学物质的致突变性

本文系统地介绍了鼠伤寒沙门氏菌/微粒体酶试验检测化学物质致突变性的原理、方法和应用范围。探讨了影响试验结果的可能因素以及对试验结果的正确评价。

微粒体谷胱甘肽S-转移酶1在恶性肿瘤中的研究进展

微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1,MGST1)是谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)超家族和花生四烯酸与谷胱甘肽代谢中的膜相关蛋白(membrane-associated proteins in eicosanoid and glutathione metabolism,MAPEG)超家族的共同成员,它通过催化外源性物质的II相解毒过程,从而保护细胞膜免受氧化应激的损伤。众多研究发现MGST1与恶性肿瘤的发生发展密切相关,有望成为癌症治疗的新型分子靶点。本文就MGST1在恶性肿瘤中的研究进展予以综述。

中国成人肝微粒体P450酶活性研究

目的观察中国成人肝微粒体细胞色素P450(CYP450)、细胞色素b5(CYb5)的含量及常见几种药物代谢酶活性水平及在性别、民族间的分布差异。方法肝组织匀浆10000×g离心去除沉淀,再以100000×g超速离心60min,取沉淀加PBS甘油缓冲液,充分溶解制成微粒体悬液,用Lowry法测定蛋白含量;用双光道紫外分光光度计测定CYP450和CYb5的含量及P450酶活性。结果48例成人肝微粒体CYP450和CYb5含量分别为(0.46±0.07)nmol/mg和(0.44±0.04)nmol/mg;男性组CYP450和CYb5含量分别为0.49±0.05)nmol/mg和(0.46±0.06)nmol/mg,均高于女性组的(0.41±0.08)nmol/mg、(0.42±0.05)nmol/mg,P<0.05;汉族、回族和壮族3个民族P450和CYb5含量作q检验进行两两比较,各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。药物代谢酶NADPH细胞色素C还原酶(NR)、乙基吗啡N-脱甲基酶(EDM)、氨基比林N-脱甲基酶(ADM)、苯并芘羟化酶(BPH)和戊巴比妥侧链羟化酶(PSCH)等酶活性水平分别为(0.71±0.13)nmol/(mg.min),(0.89±0.18)nmol/(mg.min),(0.99±0.17)nmol/(mg.min),(0.07±0.01)nmol/(mg.min),(4.15±0.65)μmol/(mg.min),其中EDM活性水平女性组高于男性组(P<0.05),PSCH活性水平男性组高于女性组(P<0.05),其他各种酶活性男女之间无显著性差异;上述5种酶活性水平经q检验,汉族、回族和壮族3个民族之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论测定了中国成人肝微粒体CYP450、CYb5含量及NR,EDM,ADM,BPH,PSCH等酶活性水平,男性组CYP450、CYb5含量及PSCH活性高于女性组,而EDM活性水平女性组高于男性组,上述7种指标在汉族、回族和壮族之间差异均无统计学意义。