家蚕微粒子检测技术研究进展

家蚕微粒子检测技术的研究,从最早的肉眼鉴定发展到有显微镜检查以及以血清学检测和分子生物学检测为主的检测技术,其技术越来越先进。

微粒子免疫检测技术在寄生虫学研究及诊断中的应用

医学实验方法的发展和应用是医学研究和疾病快速诊断的基础。微粒子免疫检测技术(MIA)主要用于定量检测特异性蛋白质,如细胞因子、病原体抗原以及核酸等大分子物质。该技术应用微粒子作为固相支持,能够对一个样品中多达100种不同的分析物进行同步检测,具有极高的灵敏度、特异性、稳定性,以及快速、多重的检测能力。近年来,作为一种检测手段,MIA越来越多地应用于寄生虫学的研究与诊断性检测中。本文就MIA的历史发展、优缺点、在寄生虫学研究及诊断中的应用和前景等做一综述。

HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及临床意义

目的探讨ELISA两步法、化学发光法、荧光定量PCR定量技术对HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及其临床意义,为提高临床检测准确率提供借鉴。方法收集医院门诊和住院受检者经ELISA一步法检测的乙肝两对半4种模式标本(模式1:仅HBeAb阳性;模式2:仅HBcAb阳性;模式3:HBcAb阳性和HBeAb阳性;模式4:HBsAg均为弱反应性的标本),用ELISA两步法及化学发光法检测,再对经化学发光法检测HBsAg结果为阳性的标本用FQ-PCR检测乙肝病毒DNA载量。结果仅HBeAb阳性的标本,共2例,ELISA两步法结果显示HBsAg均为弱反应性,化学发光法结果为阴性;仅HBcAb阳性的标本121例,ELISA两步法结果示HBsAg呈弱反应性者为26例(占21.5%),化学发光法结果阳性8例(占16.7%);HBcAb阳性和HBeAb阳性的标本55例,ELISA两步法HBsAg结果呈弱反应性的为25例(占45.4%),化学发光法结果阳性14例(占25.5%),其中7例用常规PCR方法检测结果拷贝数均小于5.0*102;HBsAg为弱反应性的标本59例,ELISA两步法弱反应性的结果均在临界值附近,化学发光法结果均为阳性。结论对于HBsAg阴性及弱反应性的临床标本,最好采用化学发光法检测或者进行确证试验。

三种方法检测HBsAg弱阳性样本的结果比较

目的:比较胶体金免疫层析试验(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及微粒子化学发光检测技术(MEIA)检测HBsAg弱阳性样本的结果符合率,以了解三种方法的特异性与灵敏度。方法:用三种方法平行检测收集的血清标本HBsAg,并相互比较。结果:三种方法检测HBsAg的结果符合率为74.3%,其中,ELISA与MEIA结果符合率为94.9%;GICA与MEIA结果符合率为76.9%。GICA检测HBsAg弱阳性样本的各项诊断指标都不甚理想。结论:①GICA的灵敏度和特异性分别为81.5%和81.5%,较ELISA和MEIA低,检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率和误诊率,只能起筛查作用。遇到HBsAg弱阳性的血清标本必须与ELISA法并用,实行双检。②ELISA较MEIA灵敏度和特异性略低,当测定标本的OD值在cutoff附近,即检测灰区时,建议用MEIA复检。

三种方法检测乙型肝炎病毒表面抗原阳性结果的分析

目的探讨微粒子化学发光检测技术(MEIA),酶联免疫吸附试验(ELISA)和胶体金免疫层析试验(GICA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag)的结果符合率。方法用MEIA、ELISA和GICA三种方法对200份标本进行乙型肝炎病毒表面抗原检测,比较三种方法的阳性率、敏感度和特异度。结果 ELISA法阳性率为43.5%,阴性率为56.5%;GICA法阳性率为41.0%,阴性率为59.0%;MEIA法阳性率为45.5%,阴性率为54.5%。ELISA与MEIA符合度较高,阳性率较高,GICA与MEIA符合度差,阳性率最低。三种方法中以MEIA法的敏感度和特异度最高,其次为ELISA法,GICA法最低。结论 GICA灵敏度较低,只能作为初筛;ELISA较MEIA灵敏度略低,遇到检测样本吸光度值(OD值)在对照样本临界值(cut off值)附近时,需要复检。

3种检测HBsAg弱阳性样本方法比较

目的了解酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析试验(GICA)与微粒子化学发光检测技术(MEIA)检测HB-sAg弱阳性样本的结果符合率,以了解3种方法的特异性与灵敏度。方法 用3种方法平行检测收集的血清标本HBsAg,并相互比较。结果 ELASA与MEIA结果符合率为94.9%;GICA与MEIA结果符合率为76.9%。结论 MEIA方法检测乙肝表面抗原的阳性率、灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法。

在中国心脏移植患者中高效液相色谱串联质谱法和化学发光微粒子免疫分析法测定他克莫司血药浓度的比较

目的比较高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)和化学发光微粒子免疫检测技术(CMIA)测定人全血他克莫司(FK506)浓度结果的相关性,以及2种方法在他克莫司浓度监测工作中的应用。方法收集253例心脏移植患者(n=581)术后服用他克莫司的全血样本,采用HPLC-MS/MS法测定人全血他克莫司血药浓度,通过专属性、标准曲线与定量下限、精密度、准确度、基质效应和提取回收率以及稳定性试验进行方法学验证;并与CMIA法的测定结果进行比较,观察、比较2种检测手段的测定结果及相关性。结果用HPLC-MS/MS测定人全血他克莫司浓度,线性范围2~30 ng·mL^(-1),定量下限为2ng·mL^(-1);日内及日间精密度(RSD%)均小于15%。按照Bland-Altman法计算,95.52%Lo A=(0.22,5.62),95.52%的差值都位于一致限内,两种方法测定值一致性良好。回归方程为FK506_(HPLC-MS/MS)=0.70×FK506_(CMIA)-0.17,Pearson相关系数为0.902 4(P<0.05),说明两种方法具有良好的相关性。结论HPLC-MS/MS法测定他克莫司血药浓度定量特异性强,灵敏度高。与CMIA法相比,HPLC-MS/MS测定值低,对他克莫司母药有高度的选择性。

乙型肝炎表面抗原弱阳性样本的三种测定方法比较

目的比较胶体金免疫层析试验(GICA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)与微粒子化学发光检测技术(MEIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性样本的结果符合率,以了解三种方法的特异性与灵敏度等诊断指标。方法用三种方法平行检测收集的血清标本HBsAg,并相互比较。结果 ELASA与MEIA结果符合率为94.9%;GICA与MEIA结果符合率为76.9%.GICA检测HBsAg弱阳性样本时的各项诊断指标都不甚理想。结论①GICA的灵敏度和特异性分别为81.3%和81.3%,较ELISA和MEIA低,检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率和误诊率,只能起筛查作用。遇到HBsAg弱阳性的血清标本必须与ELISA法并用,实行双检;②ELISA较MEIA灵敏度和特异性略低,当测定标本的OD值在临界值(cut-off)附近即检测灰区时建议用MEIA复检。