细菌微菌落及其初步应用

作者用醋酸纤维素薄膜作载体,建立了一种新颖的、快速的、简单实用的微菌落技术,即将细菌接种于膜,培养3～6小时后,透明、固定、染色,观察微菌落形态或进行微菌落计数。使用该技术,对139株细菌的微菌落进行观察,积累了大量微菌落资料;借助微菌落特征,对72株葡萄球菌中的金黄色葡萄球菌进行鉴定,与常规法的符合率为90.28％;并首次将计数微菌落的方法用于临床尿液标本细菌的快速定量测定,与常规法比较,具有明显的优越性。

微菌落免疫技术实验研究

本文作者首次将微菌落技术和免疫荧光技术及免疫酶染色技术相结合,对其特异性,敏感性,重复性做了实验,并与常规培养法进行比较。分别用沙门氏菌和志贺氏菌多价诊断血清与6种细菌特异性染色,结果只有伤寒沙门氏菌和福氏志贺氏菌与其相应诊断血清有特异性反应,其他菌均为阴性,用巳知菌作最低检出极限试验,常规法为10个/ml菌,微菌落免疫荧光染色法为5个/ml菌,微菌落免疫酶染色法为1个/ml菌。重复20余次,阳性、阴性菌结果均一致。该试验能在5～6小时内出结果,证明本法具有敏感、特异、快速、重复性好等优点。

微菌落滤膜法快速定量检测饮料中酵母

本文介绍利用混合纤维素滤膜过滤饮料样品,培养后对其上生长的微菌落进行染色和计数,定量检测饮料中酵母。14份可乐样品在滤膜上的微菌落计数与相应平板培养法计数之间相关关系为(r=0.96,P<0.01),本法迅速,不到12小时报告结果,简便,适于检测污染酵母浓度高于10~3CFU/ml的饮料。

微菌落技术快速定量测定矿泉水中细菌总数的初步研究

目的 初步建立检测矿泉水中细菌总数的微菌落技术。 方法 以抽滤方式将待测水样 1ml接种于混合纤维素膜上 ,然后贴在琼脂平板上 37℃培养 12h ,取下膜透明处理、沙黄染色后显微镜记数。 结果 与常规平板计数法比较 ,差别无显著性。同时可测定细菌浓度低于 10 3cfu/ml的水样。结论 该法具有经济、快速。

应用微菌落技术对细菌进行快速定量测定

本文利用微菌落技术建立了一种对细菌进行快速定量测定的方法。其基本方法为将待测标本定量接种于醋酸纤维素薄膜上,经37℃5h培养,染色后对标本区的薇菌落作显微镜计数。用本法与平板计数法同时对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌悬液进行测定,得到很好的相关性;对72份尿液标本测定结果作统计学分析,二者差别无显著性。

微菌落观察法快速检测和鉴别结核杆菌培养物的研究

将取自肺结核患者的219例痰标本接种匡氏琼脂平板,共分离到112例结核菌生长物。其中培养法104例(92.8％)阳性,微菌落观察法108例(96.4％)阳性,微菌落法阳性率稍高。培养法和微菌落法阳性标本首次检出时间分别为18.6d和11d,微菌落检出时间更短(P<0.01)。常规菌型鉴别方法与微菌落法对结核杆菌菌型鉴别的符合率为99％。

微菌落法评价化学消毒剂杀菌效果

目的研究微菌落法在评价化学消毒剂杀菌效果方面的应用,建立评价消毒剂消毒效果新技术。方法采用悬液定量杀菌试验和显微镜观察计数方法,以碘伏和含酚消毒剂为对象进行了杀菌效果评价。结果以含对氯间二甲苯酚2400 mg/L的消毒液分别作用15 min和22.5 min,对悬液内大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭对数值均>5.00。以有效碘含量为1050 mg/L的聚维酮碘消毒液作用1min,对悬液内白色念珠菌杀灭对数值均>4.00。经对常规计数法与微菌落法所得结果进行统计学分析,两组数据无明显差异,所得结果完全一致。结论用微菌落法评价两种化学消毒剂杀菌效果,结果与常规计数法一致,说明在化学消毒剂杀菌效果评价中可以采用比较快速的微菌落法进行活菌计数。

微菌落快速药敏试验的研究

本文建立的微菌落快速药敏试验,能在4h后出结果,其基本原理和判断标准与K—B法相同。用本法与K—B法分别对药敏质控菌株以及69株沙门氏菌和47株志贺氏菌进行试验,两法结果差异无显著性。

微菌落噬菌体裂解试验初步研究

本文首次利用微菌落技术建立一种快速微量的噬菌体裂解试验。其简要步骤为:将被检菌纯培养物悬液涂于已贴在琼脂培养基表面的醋酸纤维素膜上,用接种环滴加相应诊断噬菌体,培养3h 后,将膜取下加热干燥、透明、固定、染色、镜检。通过对38株志贺氏菌、53株沙门氏菌的测定,本法取得与常规法完全一致的结果。为临床及卫生细菌学检验提供了一项新的、实用的方法。

荧光定量PCR在结核杆菌微菌落培养研究中的应用

目的研究结核杆菌微菌落培养中细菌繁殖的周期。方法利用荧光定量PCR对微菌落形成前后细菌DNA的拷贝数进行检测分析,在基因水平判定结核杆菌生长繁殖一代所需要的时间以及观察微菌落形成的最短时间。结果对培养前后的拷贝数进行t检验,t值分别为4.35和3.97,ν=4,培养前后细菌数变化比较有显著差异(P<0.05)。结论结核杆菌培养12 h可以生长一代。

对微菌落既定公式计数偏差的修正及其应用

本文试用对大肠杆菌菌液的不同浓度,进行系列微菌落计数分析。发现采用既定公式:DMSCC/ml=FWF×计数的总细菌数,计数后偏差较大。若用该数据进行常规平板倾注法和微菌落-酶联免疫吸附法(MC-ELISA)相关性比较,得R^2=-0.056。而用修正公式:DMSCC/ml=FWF×计数的总细菌数×1/菌液稀释倍数,得两法相关系数r=0.99936,经相关系数检验,P<0.01,说明修正正确。

微菌落法评价含氯消毒剂杀菌效果研究

目的:建立评价含氯消毒剂杀菌效果的微菌落技术。方法:按卫生部2002年版消毒技术规范进行含氯消毒剂杀枯草杆菌黑色变种芽孢试验,用醋酸纤维素膜作为载体,直接用普通显微镜观察计数,评价杀菌效果。结果:微菌落法与常规平板计数法比较,所得含氯消毒剂杀枯草杆菌黑色变种芽孢有效剂量相同。结论:该法快速、结果准确、可靠,适用于含氯消毒剂杀菌效果评价。

细菌微菌落技术──一种细菌快速鉴定的方法

细菌微菌落技术──一种细菌快速鉴定的方法许欣，裴晓方综述叶梅君审校在微生物学中，细菌在固体培养基上形成的菌落的形态学指标一直是细菌鉴定的一个基本特征之一。菌落的形态、大小、颜色及其它特征与细菌的基本生物学特性如代谢类型、分裂方式、繁殖速度等有密切关系...

荧光微菌落法快速检测啤酒有害菌的研究与应用

本研究建立了一种快速检测啤酒有害菌的方法——荧光微菌落法，并将荧光微菌落法和优化后的培养基结合起来，以缩短啤酒有害菌的检测时间。研究结果表明使用荧光微菌落法检测啤酒有害菌可以将检测时间缩短至36h，并且其结果和常规平板计数法无显著差异。将优化后的培养基和荧光微菌落法结合起来又能将检测时间进一步缩短至30h，大大缩短了啤酒有害菌的检测时间。

蜡样芽胞杆菌微菌落计数公式的建立及其应用

本文通过运用微菌落—酶联免疫吸附（ＭＣ－ＥＬＩＳＡ）表面涂抹法，定量计数食品中蜡样芽胞杆菌的研究，建立了适合于食品中蜡样芽胞杆菌微菌落的计数公式：ＤＭＳＣＣ／ｍｌ＝ＦＷＦ×微菌落均值×稀释倍数。经实验验证和应用，由该公式推导的菌落预计值与经由国标法所测得的实测值相符。ｔ＝２．２５＜ｔ０．０５，９，Ｐ＞０．０５。数据结果可靠。

荧光微菌落技术快速检测啤酒有害菌的初步研究

建立了一种快速检测啤酒厌氧菌的方法,具体包括利用聚碳酸酯膜过滤啤酒样,厌氧培养36 h后对其上生长的微菌落采用二醋酸羧基荧光素(CFDA)避光染色10 min,采用荧光显微镜对微菌落进行计数,同时对该法进行重复性试验并和常规平板培养计数法相比对,二者的菌落数均无显著性差异(p>0.05),微菌落法的最低检测限为4 cfu/mL。荧光微菌落法检测啤酒有害菌具有快速、经济、准确,易于操作的特点。

微菌落技术的研究进展

微菌落技术是指利用微生物生长繁殖早期在固相载体上形成的,需借助显微镜进行观察的小集落进行研究的方法。Hadziva等研究发现,同一株菌其微菌落有共同的形态学特征,同种菌的所有菌株的微菌落相似,某些菌的微菌落非常具有特征,有可能根据其微菌落特点包括形态、结构、边缘和中央的特征、菌体排列方式等进行鉴别。

微菌落法快速定量检测食品中细菌总数

目的以微孔滤膜作载体,结合多媒体彩显显微放大计数系统,建立快速检测食品中细菌总数方法。方法将待测标本1mL接种于微孔滤膜上,以真空泵负压抽滤,取下滤膜将其贴于营养琼脂平板表面,37℃微菌落法培养3～5h,国标法培养48h,沙黄染色,通过显微摄像电脑放大系统进行计数。用微菌落法与国标法分别对6份不同浓度大肠杆菌悬液中大肠杆菌和36份食品中细菌总数进行平行检测。结果微菌落法对6个大肠杆菌菌液测得结果分别为205、100、117、105、160、184cfu.mL-1,国标法测得结果分别为200、110、120、100、150、180cfu.mL-1,两种方法测得的结果差异无显著性(P>0.05)。两种方法对36份食品中细菌总数测得的结果最大相差为20cfu.mL-1,差异无显著性(P>0.05)。结论该法具有快速、准确、简单易操作等优点,适用于现场对食品中的细菌总数进行快速检测。

微菌落定量测定技术方法探讨

细菌微菌落（ＢａｃｔｅｒｉａｌＭｉｃｒｏｃｏｌｏｎｙ）是指细菌在生长繁殖早期在固相载体上形成的只能借助于显微镜观察的细菌集落。它是一种快速检测细菌的方法。多年来，不少学者利用微菌落技术定性检测细菌取得了不少成绩，但在定量检测方面进展不大，故在实际应用...