微量乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性的几个主要影响因素

对乳酸脱氢酶释放法测定小鼠脾脏 NK细胞活性中的酶促反应时间、效靶细胞比例、检测波长、细胞毒试验孵育时间、维持液中小牛血清 ( FCS)浓度等 5个重要的影响因素进行了探索。结果显示 ,酶促反应时间以 1 0 min最佳 ;效靶细胞比例以 1 5∶ 1为适宜 ;最适检测波长为 570 nm,其结果线性关系好 ;细胞毒试验孵育时间以 2 h为宜 ;维持液中小牛血清以低浓度为宜 ,其结果更接近自然杀伤百分率计算公式 ,并选用 2

水激光法与微创伢典法治疗对乳牙龋齿患儿临床疗效及金属蛋白酶、乳酸脱氢酶的影响

目的:比较水激光法与微创伢典法治疗对乳牙龋齿患儿临床疗效及金属蛋白酶、乳酸脱氢酶的影响。方法:选取2019年3月—2022年5月河南神火集团总医院治疗的90例患儿作为研究对象,按照随机数表法分为水激光组、微创伢典组及传统去腐组,每组各30例。分别采用水激光法、微创伢典法治疗及传统去腐方法治疗患儿乳牙龋齿。比较3组患者疼痛情况、操作时间、临床疗效、金属蛋白酶及乳酸脱氢酶水平。结果:水激光组、微创伢典组及传统去腐组患儿术中疼痛例数比较,差异有统计学意义(χ^(2)=20.170,P<0.001);水激光组、微创伢典组及传统去腐组患儿去龋时间比较,差异有统计学意义(t=15.885,P<0.001);水激光组、微创伢典组及传统去腐组患儿临床疗效比较,差异有统计学意义(χ^(2)=7.910,P=0.019);水激光组、微创伢典组及传统去腐组患儿金属蛋白酶-2、乳酸脱氢酶、金属蛋白酶-9水平比较,差异有统计学意义(χ^(2)=5.467、12.486、3.262,P<0.05)。结论:水激光法与微创伢典法治疗患儿乳牙龋齿均有良好的疗效,但水激光法具有较少的疼痛感及操作时间短等优点,可以减少患儿的不适感及疼痛感,更有利于被患儿接受。

微量乳酸脱氢酶毛细管电泳在线反应电化学检测方法的研究

以乳酸脱氢酶催化乳酸与 NAD+反应生成丙酮酸与 NADH和安培法检测 NADH为基础 ,利用电泳中介微分析 (EMMA)技术 ,研究了超微量乳酸脱氢酶的毛细管电泳在线反应的电化学检测方法 ,并从理论上对 EMMA电泳图中的平台宽度和高度作了初步探讨 .结果表明 ,在 EMMA的恒高压和零高压两种模式下 ,使用直径为 1 50 μm和束状碳纤维电极 ,在 +0 .8V检测电位下 ,对 LDH活性检测灵敏度分别为 1 .1 n U和 0 .6n U;所导出的平台高度。

乳酸脱氢酶释放法检测鸡自然杀伤细胞活性条件的优化

以肉仔鸡外周血自然杀伤(NK)细胞作为研究对象,探讨乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性中5个最为关键的影响因素,选用Yac-1淋巴瘤细胞作靶细胞.结果表明:效靶细胞比为15∶1,在含2%犊牛血清的RPMI 1640维持液中,效靶细胞于37℃、5%CO2条件下作用2 h,于37℃恒温条件下酶促反应10 min,检测波长为492 nm可获得满意结果;验证试验结果表明,优化的LDH释放法检测鸡外周血NK细胞活性的方法是可行的.

微量连续检测法测定乳酸脱氢酶及同功酶

本文用岛津 UV—730分光光度计微量连续检测法测定乳酸脱氩酶(LDH)总活性;并利用2M 尿素对 LDH 中 M 亚基的抑制作用,设计了尿素抑制法测定 LDH 同功酶.对微量连续检测法的准确性作了探讨,其变异系数(CV%)为2.7%;通过比较,认为用血量以10μl 为宜;酶活性较高者可用血量5μl。本法较目前国内常用的两点法结果准确;尿素抑制试验较同功酶电泳法简单,且易于患者接受和推广。

恶性疟原虫乳酸脱氢酶的快速电泳法检测及影响因素

目的建立一种敏感、特异的恶性疟快速诊断方法。方法：应用快速电泳法检测恶性疟病人血样中恶性疟原虫乳酸脱氢酶（ＬＤＨ－Ｐ），并对可能影响检测结果的几种因素进行观察。结果：检测４０份恶性疟病人血样，３８份检测出ＬＤＨ－Ｐ，阳性率为９５％，假阴性率为５％；同时检测４０份间日疟病人血样和２０份正常人血样，均为阴性，无假阳性；血样反复冻融可使ＬＤＨ－Ｐ受到破坏，蛋白酶抑制剂对保存血样中的ＬＤＨ－Ｐ保护作用明显；新鲜血样中加否蛋白酶抑制剂，检测结果差异不明显。结论：快速电泳法检测ＬＤＨ－Ｐ诊断恶性疟，方法简便、敏感性和特异性高，具有很好的现场应用价值。检测新鲜血样中ＬＤＨ－Ｐ效果好。

示差脉冲伏安法测定乳酸脱氢酶活性及纳米微粒生物毒性检测新方法研究

采用示差脉冲伏安法,在乳酸脱氢酶(LDH)酶促体系“丙酮酸盐+NADH+H+乳酸盐+NAD+”中,通过检测NAD+还原峰电流的变化,测定了不同条件下(不同酶用量、缓冲液pH值以及温度)LDH的活性、酶促体系的米氏常数KmNADH以及最大反应速率vmax。并且在最佳实验条件下,通过检测LDH活性的改变,实验考察了3种纳米物质(ZnS,TiO2(R)和TiO2(A))对乳酸脱氢酶酶促体系的影响。

微分脉冲极谱法研究稀土离子对乳酸脱氢酶活性的影响

根据前文黄瓜根系伤流液（经Ｌａ３＋，Ｅｕ３＋处理）中微量Ｌａ３＋，Ｅｕ３＋明显影响氨基酸代谢的结果，用记时电流法研究了稀土对氮同化过程中硝酸还原酶（ＮＲ）和谷氨酸脱氢酶（ＧＤＨ）活性的影响，酶活性的变化以辅酶ＮＡＤＨ氧化电流在反应中的衰减速度来表示。用微分脉冲极谱法研究稀土离子对丙酮酸转化为乳酸反应中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的影响，以反应产物ＮＡＤ＋的还原电流的大小表示酶活性的变化。研究结果表明Ｌａ３＋在低浓度（＜５μｍｏｌ／Ｌ）下对酶活性有微弱的促进作用，其他稀土离子Ｃｅ３＋，Ｅｕ３＋，Ｄｙ３＋，Ｙｂ３＋在浓度稍高时（≥５μｍｏｌ／Ｌ）都显示抑制作用。对比光度法的结果以及反应动力学参数Ｖｍａｘ和Ｋｍ均证明稀土离子对此体系中ＬＤＨ活性有抑制作用。

纸芯片显色法同时检测乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶

本文建立了一种基于纸芯片的乳酸脱氢酶(LDH)检测方法。实验优化了黄递酶(DIA)/碘硝基四唑紫(INT)显色体系检测LDH的条件,考察了方法的选择性,获得了较好的线性关系,并成功用于血清样品中LDH含量的测定。同时,结合DIA/INT和BCIP/NBT显色体系,通过构建一维、三维纸芯片,实现了LDH和碱性磷酸酶(ALP)的同时检测。两者同时检测时,颜色区分明显,相互之间干扰较小。纸芯片显色法操作简单、结果直观可见、效果良好。

用电子束辐射法制备固定化乳酸脱氢酶

前言固定化酶的制备,近年来已有许多进展.固定化技术之一的凝胶格子包埋法,尤其受到重视,因为它与其它方法不同,酶分子本身在固定化过程中几乎完全不发生结合或偶联反应,而是被包埋在凝胶的微细格子里.这样,它可能对酶蛋白的构象。

仰头耸肩扩胸法治疗颈型颈椎病的临床疗效及血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶水平观察

目的探讨一种治疗颈型颈椎病的有效方法,观察血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,为其临床疗效评价提供实验室依据。方法选取2013年9月-2014年9月在我院康复科门诊就诊的60例颈型颈椎病患者,随机分成治疗组与对照组,各30例,治疗组采用仰头耸肩扩胸法治疗,对照组采用给予双氯芬酸钠双释放肠溶胶囊口服治疗,15 d为1疗程,比较两组在治疗5、10、15 d的临床疗效、VAS评分、CK及LDH水平差异。结果两组患者分别在治疗前和治疗5 d的VAS评分及CK水平比较,以及两组患者分别在治疗前、治疗5天、治疗10 d、治疗15 d的LDH水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者分别在治疗10 d和治疗15 d的VAS评分及CK水平比较差异有显著统计学意义(P<0.01),治疗组优于对照组。治疗组总有效率达96.7%,对照组总有效率达93.3%,治疗组优于对照组,但经Radit分析显示差异无统计学意义(P>0.05)。结论仰头耸肩扩胸法治疗颈型颈椎病疗效确切,可使该病患者损伤的骨骼肌得到恢复,LDH、CK水平情况可为临床疗效提供实验室指标。

薄层胶片法分离乳酸脱氢酶同工酶

乳酸脱氢酶(LD)同工酶分析的琼脂糖凝胶电泳法在国内已广泛应用,但由于加样时直接在凝胶上开槽,加样量大,导致在LD_4及LD_5附近有较大的干扰;为了获得色泽较深的区带,显色剂浓度偏大,

化学抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶LD_1和LD_2

本文应用１，６－已二醇为ＬＤ分子中Ｍ亚基的专一抑制剂，用自动生化分析仪直接测定血清中ＬＤ１和（ＬＤ１＋ＬＤ２）活性。加入１，６－己二醇的最终浓度分别为０．７５ｍｏｌ／Ｌ和０．５５ｍｏｌ／Ｌ。ＬＤ同工酶电泳图谱表明，此时血清中ＬＤ２～ＬＤ５和ＬＤ３～ＬＤ５的活性全部被抑制。用本法同常规电泳法平行检测７５例血清ＬＤ１和ＬＤ１＋ＬＤ２活性，ＬＤ１：ｙ＝０．８８７ｘ＋２．０１８，ｒ＝０．９９０；（ＬＤ１＋ＬＤ２）：ｙ＝１．００２ｘ＋４．５８７，ｒ＝０．９７８。ＬＤ１和ＬＤ１＋ＬＤ２的平均回收率分别为９８．０％和９７．５％；线性范围至少可分别达到８４Ｕ／Ｌ和２０５Ｕ／Ｌ；批内ＣＶ（％）分别为２．４～５．０和２．４～４．８。

免疫沉淀法测定血清乳酸脱氢酶同工酶1对急性心肌梗塞的诊断

用自行开发的免疫沉淀法和经典的电泳法测定乳酸脱氢酶（LDH）同工酶，比较它们对25例急性心肌梗塞（AMI）及24例心绞痛诊断价值，证实免疫沉淀法测得的LDH1和LDH的比值（LDH1／LDH）是所有指标中最好的一个，AMI阳性率为100％，假阳性率为4．1％，且100％阳性率持续16小时。与其它易引起总LDH增高的4种疾病共42例进行比较，也证实本法LDH1／LDH（％）优于电泳法的LDH1／LDH2指标。免疫法测定LDH1具有特异、灵敏、定量且操作简单，可适应急诊测定等特点，便于推广，有助于提高AMI诊断水平。

免疫沉淀法测定乳酸脱氢酶同工酶1的研究

应用免疫沉淀法测定了乳酸脱氢酶同工酶１（ＬＤ１）．血清与抗血清用量为１０：１，加入抗血清５ｍｉｎ后再加入与血清量相等的饱和硫酸铵溶液．离心后测定上清液中的ＬＤ．总酶活性在６１８Ｕ／Ｌ内线性关系良好．二份标本批内精度ＣＶ值分别为３．７６％和４．７０％，批间ＣＶ值为７．００％，免疫沉淀法与电泳法高度相关（ｎ＝２２，ｒ＝０．９７６）．７２例正常人ＬＤ参考值为１０２．３１±１６．４Ｕ／Ｌ，ＬＤ１为２３．６５±４．３９Ｕ／Ｌ，ＬＤ１／ＬＤ为２３．１２±３．８５％．免疫沉淀法的优点是特异性高，操作简单，可用于自动生化分析仪．精确度高，线性关系好，测定范围宽，是测定ＬＤ１的理想方法．

精液乳酸脱氢酶C4同功酶的底物选择性测定法

目的 建立一种简便、准确测定精浆、精子中的 L DH- C4同功酶的检测方法。方法 采用特异底物的酶动力学分光光度法测定人精子、精浆中 L DH- C4同功酶活性。其结果与常规的丙稀酰胺凝胶电泳分离 ,活性染色 ,光密度扫描法进行比较。结果 两种方法间存在较好的相关 ( r=0 .93 2 ,n=12 8)。以 5 .0 mmol/ L的α-酮己酸底物浓度可以选择性的检测出精液样品的 L DH- C4活性。结论 本方法具有微量、快速的优点 ,适于在临床检验中推广应用。

硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶1的方法学评价

目的对硫氰酸胍抑制法检测乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)进行方法学评价及性能验证。方法对硫氰酸胍抑制法检测LDH1的不精密度、线性分析、回收实验以及正常参考范围等方面进行评价。结果高、中、低值样本批内不精密度分别为4.25%、1.57%和0.97%,批间不精密度分别为4.57%、2.55%和1.20%;线性分析的稀释健全性良好,R2=0.998;平均回收率为101.56%;LDH1水平在性别间差异无统计学意义;正常参考范围为33.11±5.76U/L。结果硫氰酸胍抑制法检测LDH1方法可靠、性能良好,符合实验室要求,可在临床广泛开展使用。

乳酸脱氢酶连续监测法的实验研究

使用国产仪器和试剂,一步法连续监测血清 LD 活力。NAD^+ 和 L-乳酸锂的 Km 分别为2.17×10^(-1)mmol/L 和 101.01×10^(-1)mmol/L,底物 NAD^+ 和 L-乳酸锂终浓度分别为4.30mmol/L 和 138.97mmol/L,反应速度为最大反应速度的89%,零级反应时间为6min,△A/min 在0.3以内具有良好的线性关系。同时,对连续监测的最适 pH 和标本的保存时间进行了实验探讨。100例健康献血员参考值为179±36.25u/L((?)±SD),与 Trace 试剂盒对比,两者显著相关(r=0.9792)。本法简便易行,具有临床实用价值。

乳酸脱氢酶对己糖激酶法测定血糖结果的影响

目的探讨乳酸脱氢酶对己糖激酶法(hexokinase,HK)检测血糖的影响。方法采用HK法和葡萄糖氨化酶法(GOD)法分别检测110例血清乳酸脱氢酶(LDH)及不同浓度梯度LDH含量的PBS溶液和血清溶液中血清葡萄糖(GLU)含量。结果 (1)HK法检测110例患者血清GLU的结果随LDH含量升高,GLU测定值逐渐下降的趋势,LDH含量与GLU结果呈明显负相关关系(t=5.34,P<0.01);(2)当LDH>500μmol/L时,HK法检测GLU-PBS溶液中的GLU结果均显著低于实际浓度。HK法检测溶液中GLU结果均呈现随LDH浓度升高,所检测GLU结果与实际GLU含量相比呈现逐渐下降的趋势。结论乳酸脱氢酶(LDH)可能对HK法检测GLU结果产生显著的负干扰影响。

走罐法对军事训练运动疲劳新兵血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶的影响

目的:观察走罐法对军事训练运动疲劳新兵血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的影响。方法:将60名男性新兵随机分为治疗组和对照组,治疗组选督脉和足太阳膀胱经背部第1侧线、第2侧线于训练后30min走罐治疗,皮肤潮红为度,3次/周,疗程1个月;对照组训练后常规休息,不做任何治疗。分别于入组时、第1次治疗后、末次治疗后,检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)值。结果:治疗组第1次以及末次治疗后与入组时比较,血清CK、LDH值水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组血清CK、LDH值与对照组相比降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:走罐法可促进新兵军事训练运动疲劳的恢复,其作用机制可能与降低血清CK、LDH值,提高其活性有关。