eDNA水平差异对表皮葡萄球菌临床株生物被膜形成能力的影响

目的检测表皮葡萄球菌（表葡菌）临床株生物被膜的形成能力，研究胞外DNA（eDNA）水平差异对表葡菌临床株生物被膜形成能力的影响。方法收集227株临床分离表葡菌，黏附试验检测其生物被膜的形成能力，PCR方法扩增icaA基因片段，黏附试验阳性和icaA基因扩增阳性的表葡菌为成膜组，黏附试验阴性和icaA基因扩增阴性的表葡菌为非成膜组，应用浮游培养法和微量板静置培养法检测eDNA水平，激光共聚焦显微镜（CLSM）观察生物被膜中eDNA的分布。结果227株表葡菌中黏附试验阳性26株，icaA基因阳性32株。选取黏附试验阳性和icaA基因扩增阳性的成膜组表葡菌20株，黏附试验阴性和icaA基因扩增阴性的非成膜组表葡菌19株，浮游培养2、4、6h后，成膜组菌株的eDNA水平分别为（32．2±10．1）μg／ml、（33．6±11．9）μg／ml、（34．3±10．0）μg／ml，非成膜组菌株的eDNA水平分别为（28．7±8．9）μg／ml、（31．5±11．7）μg／ml、（31．8±12．7）μg/ml，浮游培养成膜组菌株各时相eDNA水平分别高于非成膜组菌株，但差异尚无显著性（P〉0．05）。微量板静置培养法成膜组20株eDNA水平为（740．0±264．4）ng／A600，高于非成膜组19株eDNA水平（80．1±31．1）ng／A600两组之间比较差异具有显著性（P〈0．05）。通过AO-PI荧光染色于CLSM下观察静置培养的成膜株表葡菌Y36，其生物被膜中可见eDNA分布；非成膜株Y26没有生物被膜结构形成，未见eDNA分布。结论表葡菌临床株具有形成生物被膜的能力，eDNA是表葡菌形成生物被膜的重要基质成分，在判断表葡菌生物被膜形成能力方面微量板静置培养法检测eDNA水平优于浮游培养法。