微量淋巴细胞毒技术与核酸扩增荧光技术检测HLA-B27的对比

目的通过比较核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)和微量淋巴细胞毒技术在检测HLA-B27中的符合率,分析两种方法的优势与不足,探讨核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)在HLA-B27检测中的临床应用价值。方法随机选取197例来我科就诊的疑似强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者的样本,分别使用微量淋巴细胞毒法和PCR-染料法检测。并对两种方法检测结果不符的样本进行测序复核。结果 197例样本中,微量淋巴细胞毒法检出HLA-B27阳性150例,阴性47例;PCR-染料法检出阳性135例,阴性62例;两种方法检测结果有统计学差异(P<0.01)。15例差异样本,两种方法与测序法相比较的符合率,微量淋巴细胞毒法为13.3%,PCR-染料法为86.7%。结论核酸扩增荧光技术(PCR-染料法)和微量淋巴细胞毒法比较,前者具有更高的临床准确性。在样本处理上PCR-染料法也更具优势,操作简单方便,有很强的临床应用价值。

应用微量淋巴细胞毒抑制试验检测细胞转染液与血清人白细胞抗原方法的建立

应用微量淋巴细胞毒抑制试验对细胞转染液9个型（HLA－A2、A3、A（11）、A（26）、HLA－B5、B（13）、B（17）、B（27）、B（44）），血清19个型（HLA－A1、A2、A3、A9、A（11）、A（26）、A（30）、A（34）；HLA－B5、B7、B（13）、B（15）、B（16）、B（17）、B（22）、B（27）、B（35）、B（44）、B（46））可溶性HLA抗原进行检测，都获得成功，说明应用该法检测这些型的可溶性HLA抗原是可行的。

人类白细胞抗原(HLA)与骨髓移植

各种造血干细胞缺损或调控失常的疾病如急、慢性白血病,重症再生障碍性贫血等以及8Gy以上全身照射引起的极重度骨髓型和轻度肠型急性放射病,一般临床治疗效果不佳,特别是后者,常规综合对症治疗结合辐射防治药物的应用难以奏效。自Jacobson (1950)和Lorenz(1951)以致死剂量照射小白鼠后,可因输入骨髓或脾细胞获得保护以来,骨髓移植(BMT)的实验研究十分活跃,日益深入。Thomas于1957年和Mathe最先应用于临床。

MLCT和ELISA法检测HLA-B27的比较

目的比较微量淋巴细胞毒试验(MLCT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HLA-B27结果差异性。方法采用MLCT法和ELISA法同步检测483例患者的HLA-B27的表达。结果两种方法经配对χ2检验(χ2=80.378,P<0.01)。Kappa值评价(K=0.308),显示两种方法一致程度不够满意。MLCT法敏感度,阳性预测价值和阴性预测价值分别为0.801 1,0.980 3,0.888 2,均优于ELISA法。结论两种方法检测HLA-B27存在差异,ELISA法的敏感度较低,MLCT法的敏感度、阳性预测价值和阴性预测价值均优于ELISA法。

海南地区汉族人群HLA及其单倍型频率分析

目的 了解海南地区汉族人群HLA抗原及单倍型的频率。 方法 采用微量淋巴细胞毒试验 ,对海南地区 2 0 9例非血缘关系的汉族正常人进行HLA -A、B抗原分型。 结果 在 2 0 9例中检出前 9位HLA -A、HLA -B高频率抗原为A11,A2 ,A2 4、A3 3 ;B40 ,B46,B57,B13 ,B62 。通过家系抗原遗传分析获得 418条海南地区HLA -A/B单倍型 ,查出 6条海南地区高频率出现的单倍型为A3 3 /B57、A2 /B46、A11/B60 、A11/B13 、A2 4/B60 、A11/B62 。 结论 海南地区汉族人群的HLA -A、B抗原频率与广东地区相同 ,而单倍型频率有所不同。不同种族、不同地区的人群有着不同单倍型频率分布。

肾移植病人群体反应性抗体的检测

以 36名健康成人外周血淋巴细胞作为群体淋巴细胞来源。采用补体依赖微量淋巴细胞毒方法 ,进行了 5 5例肾移植病人的群体反应性抗体 (panelreactiveantibody ,PRA)和随机淋巴细胞毒试验 (randompanellymphocytotoxicitytest,RPLT)的检测 ,结果显示 ,5 5例病人进行血清淋巴细胞毒交叉配合实验 (CDC)检测 ,只有 1例阳性 (1 82 % )。而PRA及RPLT检测发现有 8例病人血清为阳性 (6女 2男 )占 14 5 %。同时此群体中 35例病人曾经输血 ,其中PRA阳性有 6例 (17 2 % ) ,而未经输血病人 2 0例 ,其中有 2例PRA阳性 (10 % ) ,男女病人的PRA结果有显著性差异 (P <0 0 5 )。而输血与未输血病人PRA值无显著性差异 (P >0 0 5 )。与CDC实验对比 ,PRA的检测能更准确预测病人体内致敏状况和抗体水平 ,RPLT与PRA两者相关性好 (r=0 95 ,P <0 0 0 1)。

HLA-B27检测对强直性脊柱炎的诊断价值

为探讨强直性脊柱炎 (ankylosingspondylitis,AS)与HLA -B2 7抗原的关系 ,采用微量淋巴细胞毒实验检测 2 2 0例AS患者HLA -B2 7抗原。阳性检出率 85%。男女比例为 5 5∶1。其中HLA -B2 7抗原阳性病人 1 0例的一级亲属 1 0例 ,HLA-B2 7抗原阳性者 8例。显示 ,HLA -B2 7抗原与AS呈明显相关性。HLA -B2 7检测对AS的早期诊断 ,鉴别诊断和及时治疗有重要价值。

HLA-B27检测对强直性脊柱炎的诊断价值

目的探讨人类白细胞抗原B27(HLA-B27)在强直性脊柱炎诊断中的应用价值。方法对临床及影像学检查诊断为强直性脊柱炎的386例患者采用微量淋巴细胞毒试验,检测HLA-B27抗原,观察该抗原在强直性脊柱炎的检出情况。结果386例中阳性335例,阳性检出率86.8%,其中男287例,女48例,30岁以下患者224例,占66.8%。结论HLA-B27表达与强直性脊柱炎有明显关系,HLA-B27的检测对强直性脊柱炎的诊断具有重要价值。

反复自然流产患者封闭抗体检测及临床研究

反复自然流产(RSA)是指连续发生3次或3次以上的自然流产,排除血型不合、解剖、内分泌、感染等因素后,其中有40％-80％的患者原因不明,考虑与免疫因素有关,根据免疫学病因,RSA可分为母胎免疫识别低下型(BA缺乏)、母胎免疫识别过度型(自身抗体升高)、母胎免疫识别紊乱型(BA缺乏伴自身抗体升高),为探讨其确切的免疫学机制。

mPEG对免疫应答阻断作用的机理研究

目的研究mPEG阻断体液免疫、细胞免疫的机理。方法用浓度梯度法修饰淋巴细胞表面抗原,通过微量淋巴细胞毒试验及淋巴细胞转化试验检测mPEG对HLA的遮蔽效果;通过淋巴细胞表面CD分子及单向混合淋巴细胞培养检测对细胞免疫的阻断;体外保存淋巴细胞检测其寿命。结果修饰后淋巴细胞表面HLA-I类抗原与其相应抗体的微量淋巴细胞毒试验为阴性且淋巴细胞相对转化指数明显降低;修饰后淋巴细胞表面CD分子荧光强度及淋巴细胞转化率明显降低;修饰前后淋巴细胞寿命无明显改变。结论用mPEG对淋巴细胞表面抗原进行修饰后,可以阻断体液免疫及细胞免疫而不影响淋巴细胞的存活。

HLA—A抗原与白塞病的相关性分析

目的：探讨HLA－A抗原与白塞病之间的相关性。方法：应用微量淋巴细胞毒试验对20名符合国际白塞病委员会分类诊断标准的白塞病患者的HLA－A抗原进行了检测。同时以30例正常人作对照组。结果：在白塞病患者中，HLA－A2和A26表型频率与对照组相比无统计学意义（P值均＜0．05,相对危险度分别为1．8和2．7）。结论：HLA－A抗原与白塞病的易感性无相关。

由HLA阳性引起非溶血性输血反应一例报告

HLA为人类白细胞抗原，器官移植时，必需对供受者的HIA进行配型鉴定。临床上常用方法是微量淋巴细胞毒试验，但用此法对输血反应的检测尚未见报道。笔者在临床工作中发现一例由于HLA阳性引起的非溶血性输血反应，先报告如下：1病人资料患者，男，50岁。因患胃癌伴消化道出血2008年8月10日人院，经查患者血型为A型，血色素57以，大便0B试验＋＋，患者自诉曾在外院先后三次急诊输血，量不详，均未发生不良反应，

HLA-B27 3种检测方法的比较

目的:比较3种HLA-B27检测方法的敏感度、特异性、适用性。方法:采用微量淋巴细胞毒试验、PCR-SSP和流式细胞仪方法同时检测128份待检标本HLA-B27。结果:淋巴细胞毒试验、PCR-SSP和流式细胞仪方法敏感度、特异性、阳性预测价值、阴性预测价值分别为0.468、0.975、0.917、0.759;1.000、0.988、0.979、1.000;0.978、1.000、1.000、0.988。PCR-SSP和流式细胞仪方法敏感度显著性高于淋巴细胞毒试验,两两比较P<0.01;阴性预测价值优于淋巴细胞毒试验,两两比较P<0.05。结论:PCR-SSP和流式细胞仪方法均优于淋巴细胞毒试验,具有较好的临床适用性。

潍坊地区HLA-A、B多态性研究

目的 确定潍坊地区HLA-A、B多态性。方法 采用国际标准微量淋巴细胞毒试验对潍坊地区105名汉族青壮年进行HLA-A、B分型。结果 HLA-A位点以A2基因频率最高,为0.2895,其次为A9,频率较高者排列顺序为A2>A9>A19>A10>A11。B位点以D13基因频率最高,为0.1719,频率较高者排列顺序为B13>B5=B18>B40>B46。具有显著连锁不平衡的单倍型共有14种。结论 确定了潍坊地区HLA多态性特点,为开展骨髓移植、成分输血提供供体,为亲子鉴定及疾病相关分析提供依据。

HLA-27在辅助临床诊断强直性脊柱炎中的应用

本站自1998年6月开展微量淋巴细胞毒试验检测HLA-B27以来，共完成27例临床可疑病例的实验检测，现结合临床报告如下。

粘膜疾病

993588 口腔扁平苔藓与HLA的相关性研究/唐国瑶（上海二医大附九院口腔内科）…//实用口腔医学杂志。-1999,15（3）。-175～176 应用国际通用的微量淋巴细胞毒试验,检测19例上海汉族人口腔扁平苔藓外周血的人类白细胞抗原（HLA-A、-B、-DR、-DQ）的抗原频率。结果:患者组HLA-DR1抗原频率（36.84%）较正常对照组（1.08%）显著增高（P【0.001）。因此,HLA-DR1与口腔扁平苔藓明显相关。故提示带有HLA-DR1相关基因的个体对口腔扁平苔藓具有遗传易感性。表2参9（蒋仲元）993589 口腔扁平苔藓患者红细胞免疫功能及发病机理的研究/曹立萍（西安医大附属口腔医学院）…//西安医科大学学报。-1999,20（2）。-232～233,247 采用酵母菌花环试验对31例口腔扁平苔藓（OLP）患者红细胞免疫粘附功能、循环免疫复合物、补体C3含量进行检测,并与正常组进行比较以研究患者红细胞免疫功能的改变与循环免疫复合物、补体C3含量的关系。结果表明:OLP患者红细胞C3

人血清中HLA-A、B抗原的分型

本文采用微量淋巴细胞毒抑制试验对20名已知HLA型别的健康人血清的HLA抗原进行了检测，其分型结果与HLA膜抗原测定结果完全一致．